第六次课堂讨论问题整理2016/10/25 1、体内免疫是三级结构,为什么朊粒无法引起免疫反应? 答:可能原因是朊蛋白的一级结构与体内正常蛋白一样,而机体免疫系统对正常蛋 白在胚胎发育时期己经形成免疫耐受,所以不会识别为异体蛋白。 为什么朊病毒专性感染神经? 答:朊病毒可感染多个器官,已知的主要为脑髓,但在潜伏期内除中枢神经系统外, 各种组织器官均有感染,且感染多途径,除消化道外,神经系统、血液均可感染,预防 难度大,人畜一旦发病,6个月至1年全部死亡,100%的死亡率。 因为在其他组织或器官没有引起可以检测的症状,直到造成大脑皮层的神经元细胞 退化、丢失,空泡变性、死亡、消失,最终被空泡和星状细胞取代,因而造成海绵状态 -大脑皮层(灰质)变薄而白质相对明显,即海绵脑病。其病理学的特点是淀粉样斑沉 朊病毒病大部分都是神经系统和肌肉组织的损坏造成的。可以推测,正是由于神经 系统的脆弱性,其某一蛋白质组织的变性就可以造成整个系统很大的损坏,从而导致疾 病的发生 而且感染朊病毒后有超长的潜伏期,平均20年,最长可达到50年,发病前无法检 测和诊断。 为什么拟病毒、卫星病毒、卫星RNA为迫使辅助病毒帮助之复制? 答:是说需要辅助病毒吧。因为辅助病毒是正常的病毒,可以提供缺陷病毒所需要 的酶等。 第二组 1、为什么病毒对称性体制大多都是三种类型,且复合对称是二十面体和螺旋体结合 的结果? 答:目前还没有发现更复杂或奇特的构型,且基本构型就只有二十面体和螺旋形 朊病毒诱导蛋白质转化成致病蛋白算增殖么? 答:从数量增多来看,可以算是增殖。 3、病毒与宿主特异性如何实现? 答:依靠病毒表面的配体和宿主细胞表面的特异性受体 1、不同动物之间朊病毒的传染是与氨基酸差别程度有关的,那么朊病毒在没有遗传 因子的情况下发生变异的? 答:朊病毒蛋白是人和动物正常细胞基因的编码产物(人的该基因位于第20号染 色体短臂)。人的朊病毒病已发现有4种:库鲁病(Ku-rm)、克一一雅氏综合症 (CJD)、格斯特曼综合症(GSS)及致死性家庭性失眠症(FFI)。现已证明GSS和 讧确定是由于编码该蛋白的基因发生了突变,致使所编码的蛋白质结构不稳定,易于 转变为朊病毒,因此具有遗传性。 朊病毒的致病机制? 1/5
1 / 5 第六次 课堂讨论问题整理 2016/10/25 第一组： 1、 体内免疫是三级结构，为什么朊粒无法引起免疫反应？ 答：可能原因是朊蛋白的一级结构与体内正常蛋白一样，而机体免疫系统对正常蛋 白在胚胎发育时期已经形成免疫耐受，所以不会识别为异体蛋白。 2、 为什么朊病毒专性感染神经？ 答：朊病毒可感染多个器官，已知的主要为脑髓，但在潜伏期内除中枢神经系统外， 各种组织器官均有感染，且感染多途径，除消化道外，神经系统、血液均可感染，预防 难度大，人畜一旦发病，6 个月至 1 年全部死亡，100%的死亡率。 因为在其他组织或器官没有引起可以检测的症状，直到造成大脑皮层的神经元细胞 退化、丢失，空泡变性、死亡、消失，最终被空泡和星状细胞取代，因而造成海绵状态 ——大脑皮层(灰质)变薄而白质相对明显，即海绵脑病。其病理学的特点是淀粉样斑沉 积。 朊病毒病大部分都是神经系统和肌肉组织的损坏造成的。可以推测，正是由于神经 系统的脆弱性，其某一蛋白质组织的变性就可以造成整个系统很大的损坏，从而导致疾 病的发生。 而且感染朊病毒后有超长的潜伏期，平均 20 年，最长可达到 50 年，发病前无法检 测和诊断。 3、 为什么拟病毒、卫星病毒、卫星 RNA 为迫使辅助病毒帮助之复制？ 答：是说需要辅助病毒吧。因为辅助病毒是正常的病毒，可以提供缺陷病毒所需要 的酶等。 第二组： 1、 为什么病毒对称性体制大多都是三种类型，且复合对称是二十面体和螺旋体结合 的结果？ 答：目前还没有发现更复杂或奇特的构型，且基本构型就只有二十面体和螺旋形。 2、 朊病毒诱导蛋白质转化成致病蛋白算增殖么？ 答：从数量增多来看，可以算是增殖。 3、 病毒与宿主特异性如何实现？ 答：依靠病毒表面的配体和宿主细胞表面的特异性受体。 第三组： 1、 不同动物之间朊病毒的传染是与氨基酸差别程度有关的，那么朊病毒在没有遗传 因子的情况下发生变异的？ 答：朊病毒蛋白是人和动物正常细胞基因的编码产物（人的该基因位于第 20 号染 色体短臂）。人的朊病毒病已发现有 4 种：库鲁病（Ku-rmm）、克——雅氏综合症 （CJD）、格斯特曼综合症（GSS）及致死性家庭性失眠症（FFI）。现已证明 GSS 和 FFI 确定是由于编码该蛋白的基因发生了突变，致使所编码的蛋白质结构不稳定，易于 转变为朊病毒，因此具有遗传性。 朊病毒的致病机制？
目前主要采纳的是,1982年普鲁宰纳提出的朊病毒致病的“蛋白质构象致病假 说”,以后魏斯曼等人对其逐步完善。其要点如下:①朊病毒蛋白有两种构象:细胞型 (正常型PrPc)和瘙痒型(致病型 PrPsc)。两者的主要区别在于其空间构象上的差异。 PrPc仅存在a螺旋,而 PrPsc有多个β折叠存在,后者溶解度低,且抗蛋白酶解; ② Prpsc可胁迫PrPc转化为 Prpsc,实现自我复制,并产生病理效应:③基因突变可导 致细胞型PrPc中的α螺旋结构不稳定,至一定量时产生自发性转化,β片层增加, 最终变为 Prpsc型,并通过多米诺效应倍增致病。 2、人如何在吃了高温加热后的染疯牛病的牛肉后致病(朊病毒蛋白的高级结构如何 在高温下保持不变?) 答:朊病毒是蛋白质,它对蛋白质强变性剂如苯酚、尿素等的处理无耐受性,但却 有不同于一般蛋白质的特征,即耐高温性和抗蛋白酶性。 这一物质较一般病毒蛋白质稳定,用低于400度的加热方式无法将其完全灭活, 普通的理化消毒、灭菌方法都难以做到灭活,冷冻和干燥也无法将其消灭(可用5% 次氯酸钙或1mo/ NAoh溶液浸泡60min处理)。 现在仍未解决的问题还很多,包括PrPc和 PrPsc的精确结构及其在转变中产生 的结构变化 乙肝病毒中,抗HBS为何认为是保护性抗体? 答:因为该抗体可以和病毒结合,抑制病毒与细胞额特异性结合。 第四组 1、治疗病毒性疾病除了干扰素还有哪些?有无针对病毒的药物? 答:有,比如抗病毒复制的药物。针对DNA或RNA病毒的都有。 2、可以用朊病毒的机制来侵袭消灭细菌么? 答:怎么用呢? 1、其它灵长类动物的免疫力强于人类,为什么会有这样的差距? 答:有这样的说法吗?病原物有种属特异性的尤其是病毒 2、卫星病毒与辅助病毒的关系? 答:后者帮助前者完成正常的生活周期。 3、有没有人制造出新的朊病毒? 答:不知道。为啥要打造新病毒? 、对抗病毒的方法 答:免疫系统处理它。使用抗病毒药物。避免传染源。 第六组 如何区分拟病毒和衣壳病毒的整体结构和真病毒? 答:拟病毒只是一段RNA,所以要从分子水平上去分析,并结合其在完整病毒 或疹病毒中的作用,进而说明其是独立于病毒基因组之外,还是病毒基因组。可 参阅拟病毒的发现过程 2/5
2 / 5 目前主要采纳的是，1982 年普鲁宰纳提出的朊病毒致病的“蛋白质构象致病假 说”，以后魏斯曼等人对其逐步完善。其要点如下：①朊病毒蛋白有两种构象：细胞型 （正常型 PrPc）和瘙痒型（致病型 PrPsc）。两者的主要区别在于其空间构象上的差异。 PrPc 仅存在 a 螺旋，而 PrPsc 有多个 β 折叠存在，后者溶解度低，且抗蛋白酶解； ②Prpsc 可胁迫 PrPc 转化为 Prpsc，实现自我复制，并产生病理效应；③基因突变可导 致细胞型 PrPc 中的 α 螺旋结构不稳定，至一定量时产生自发性转化，β 片层增加， 最终变为 Prpsc 型，并通过多米诺效应倍增致病。 2、 人如何在吃了高温加热后的染疯牛病的牛肉后致病（朊病毒蛋白的高级结构如何 在高温下保持不变？） 答：朊病毒是蛋白质，它对蛋白质强变性剂如苯酚、尿素等的处理无耐受性，但却 有不同于一般蛋白质的特征，即耐高温性和抗蛋白酶性。 这一物质较一般病毒蛋白质稳定，用低于 400 度的加热方式无法将其完全灭活， 普通的理化消毒、灭菌方法都难以做到灭活，冷冻和干燥也无法将其消灭（可用 5% 次氯酸钙或 1mol/LNaOH 溶液浸泡 60min 处理）。 现在仍未解决的问题还很多，包括 PrPc 和 PrPsc 的精确结构及其在转变中产生 的结构变化。 3、 乙肝病毒中，抗 HBS 为何认为是保护性抗体？ 答：因为该抗体可以和病毒结合，抑制病毒与细胞额特异性结合。 第四组： 1、 治疗病毒性疾病除了干扰素还有哪些？有无针对病毒的药物？ 答：有，比如抗病毒复制的药物。针对ＤＮＡ或 RNA 病毒的都有。 2、 可以用朊病毒的机制来侵袭消灭细菌么？ 答：怎么用呢？ 第五组： 1、 其它灵长类动物的免疫力强于人类，为什么会有这样的差距？ 答：有这样的说法吗？病原物有种属特异性的尤其是病毒。 2、 卫星病毒与辅助病毒的关系？ 答：后者帮助前者完成正常的生活周期。 3、 有没有人制造出新的朊病毒？ 答：不知道。为啥要打造新病毒？ 4、 对抗病毒的方法？ 答：免疫系统处理它。使用抗病毒药物。避免传染源。 第六组： 1、 如何区分拟病毒和衣壳病毒的整体结构和真病毒？ 答：拟病毒只是一段ＲＮＡ，所以要从分子水平上去分析，并结合其在完整病毒 或疹病毒中的作用，进而说明其是独立于病毒基因组之外，还是病毒基因组。可 参阅拟病毒的发现过程
卫星病毒的衣壳和卫星RNA的结合能否成为一种新的病毒? 答:人工组装吗?可以,还要看功能怎样,是否需要辅助病毒。 朊病毒如何产生? 答:一说是基因突变;一说是蛋白质结构发生改变。 因此可以把“朊病毒”定义为动物(包括人类)细胞在正常的蛋白质的生成过程中, 或正常的蛋白质生成后,由于某一异常因素,而导致了蛋白质空间结构变异所形 成的! 拟病毒与其真病毒的相互依存关系如何?卫星病毒依赖辅助病毒复制的机 制如何? 答:前者还不是特别清楚。后者,不同的卫星病毒依赖辅助病毒的机制也不同。 AAV一2本身只能完成吸附、进入细胞核和脱壳,后续的复制、转录和翻译都 需要依赖辅助病毒。 2 病毒是否有能力选择入侵哪个器官,不同器官引起肿瘤发病率不同? 答:根据病毒表面抗原和细胞的受体特异性,病毒有器官或组织特异性 朊病毒在进入体内一般通过食用方式,为什么在食道中不能被降解 答:抗一些蛋白酶。详见前面的回答 HⅣV母婴阻断的原理,为什么怀孕期间不会传染 答:可以传染。HⅣ传播主要有三种途径,包括性接触、血液以及母婴传播。其中,母婴传 染也称围产期传播,主要是指感染HⅣ病毒的孕产妇在孕期、分娩以及哺乳期将HⅣ传染给 胎儿或婴儿,这种传播主要通过胎盘、产道、母乳途径实现 如果母亲是一个HⅣ阳性或艾滋病的病人,其感染给胎儿的概率是25%,但是如果母 亲经过AZT的抗病毒治疗,其胎儿的感染概率下降到8%;经过联合疗法(鸡尾酒疗法)治疗 胎儿的感染概率可能下降为2%。 艾滋病感染母亲在哺乳期能够通过服用三合一抗逆转录病毒药物,有效阻断HⅣ病毒通 过母乳传递给婴儿。 第八组: 朊病毒如何通过血脑屏障? 答:因为它比已知的最小的常规病毒还小得多(约30-50nm)。 2、流感病毒为何具有季节性(突发时间正好;动物迁移;环境适宜?) 答:因为病毒的活动期有季节性 第九组: 朊病毒“带坏〃正常蛋白的具体过程是?朊病毒为什么没被消化? 答:具体机制尚在研究中。因为朊病毒抗一些蛋白酶 合成过量的生长因子对细菌本身有何作用?
3 / 5 2、 卫星病毒的衣壳和卫星 RNA 的结合能否成为一种新的病毒？ 答：人工组装吗？可以，还要看功能怎样，是否需要辅助病毒。 3、 朊病毒如何产生？ 答：一说是基因突变；一说是蛋白质结构发生改变。 因此可以把“朊病毒”定义为动物（包括人类）细胞在正常的蛋白质的生成过程中， 或正常的蛋白质生成后，由于某一异常因素，而导致了蛋白质空间结构变异所形 成的！ 第七组： 1、 拟病毒与其真病毒的相互依存关系如何？卫星病毒依赖辅助病毒复制的机 制如何？ 答：前者还不是特别清楚。后者，不同的卫星病毒依赖辅助病毒的机制也不同。 ＡＡＶ－２本身只能完成吸附、进入细胞核和脱壳，后续的复制、转录和翻译都 需要依赖辅助病毒。 2、 病毒是否有能力选择入侵哪个器官，不同器官引起肿瘤发病率不同？ 答：根据病毒表面抗原和细胞的受体特异性，病毒有器官或组织特异性。 3、 朊病毒在进入体内一般通过食用方式，为什么在食道中不能被降解？ 答：抗一些蛋白酶。详见前面的回答。 4、 HIV 母婴阻断的原理，为什么怀孕期间不会传染？ 答：可以传染。HIV 传播主要有三种途径，包括性接触、血液以及母婴传播。其中，母婴传 染也称围产期传播，主要是指感染 HIV 病毒的孕产妇在孕期、分娩以及哺乳期将 HIV 传染给 胎儿或婴儿，这种传播主要通过胎盘、产道、母乳途径实现。 如果母亲是一个 HIV 阳性或艾滋病的病人，其感染给胎儿的概率是 25％，但是如果母 亲经过 AZT 的抗病毒治疗，其胎儿的感染概率下降到 8％；经过联合疗法(鸡尾酒疗法)治疗 胎儿的感染概率可能下降为 2％。 艾滋病感染母亲在哺乳期能够通过服用三合一抗逆转录病毒药物，有效阻断 HIV 病毒通 过母乳传递给婴儿。 第八组： 1、 朊病毒如何通过血脑屏障？ 答：因为它比已知的最小的常规病毒还小得多(约 30~50nm)。 2、 流感病毒为何具有季节性（突发时间正好；动物迁移；环境适宜？） 答：因为病毒的活动期有季节性。 第九组： 1、 朊病毒“带坏”正常蛋白的具体过程是？朊病毒为什么没被消化？ 答：具体机制尚在研究中。因为朊病毒抗一些蛋白酶。 2、 合成过量的生长因子对细菌本身有何作用？
答:可能是一种积累,因为环境中底物充足。或者是失控,但是多合成对本身没 有大的危害。 第十组: 病毒侵染性的强弱是通过什么鉴定出来的? 答:一定剂量下导致宿主病变的程度 亚病毒因子缺乏衣壳是如何维持其稳定性的? 答:它们或在细胞内(类病毒),或在真病毒(拟病毒、卫星RNA)内,或有外壳 (卫星病毒),所以能够稳定。 3、朊病毒相关病症的治疗方式是什么?根源是使其正确折叠? 答:没有有效治疗手段 4、亚病毒颗粒区别与一般环状核酸(表达载体)的必要而唯一的特质是否就是主动 侵袭入细胞? 答:不确切,因为有的亚病毒不能不具有主动侵入细胞的能力。应该是亚病毒颗粒 具有依赖的或自有的蛋白外壳,而且有些亚病毒核酸还不具有毒力的复制功能,必 须依赖辅助病毒 5、作为凝固剂的明胶不耐高压,那么包被玻片的培养细胞时用的1%的明胶是否在 高压灭菌融化时失去了正常的构型? 答:包被玻片不能又高压灭菌吧,用紫外线或射线杀菌 6、有些细菌既需要各种有机物,又需要CO2为C源之一,如沙门氏菌,为什么他 们需要Co2?如果pH值不变,不提供CO2会怎么样?CO2参与了这些细菌什么代 谢活动? 答:用co2也是作为碳源,使其生长更好。 7、病毒的遗传因子为 DNA or rNA,为什么亚病毒不把DNA当做遗传物质? 答:有的,卫星病毒腺联病毒AAV2的核酸就是DNA 第十一组 1、卫星病毒有可能(能否)与卫星RNA结合? 答:卫星病毒与卫星RNA都需要专一的辅助病毒,除非人工组合。 2、吸附力很强的温和病毒能否进入到卵细胞中,受精后成体的基因组有病毒基因? 答:真不知道。那就是先天性疾病了 为什么流感具有周期性,季节性? 答:病毒繁殖存在周期、人体抵抗力增强,秋冬季节是高发季节,免疫力相对较 弱,新陈代谢能力低 1、亚病毒仅为生物大分子,不具备应激性等生物应具备的特征,为何被称为分子 生物?
4 / 5 答：可能是一种积累，因为环境中底物充足。或者是失控，但是多合成对本身没 有大的危害。 第十组： 1、 病毒侵染性的强弱是通过什么鉴定出来的？ 答：一定剂量下导致宿主病变的程度。 2、 亚病毒因子缺乏衣壳是如何维持其稳定性的？ 答：它们或在细胞内（类病毒），或在真病毒（拟病毒、卫星 RNA）内，或有外壳 （卫星病毒），所以能够稳定。 3、 朊病毒相关病症的治疗方式是什么？根源是使其正确折叠？ 答：没有有效治疗手段。 4、 亚病毒颗粒区别与一般环状核酸（表达载体）的必要而唯一的特质是否就是主动 侵袭入细胞？ 答：不确切，因为有的亚病毒不能不具有主动侵入细胞的能力。应该是亚病毒颗粒 具有依赖的或自有的蛋白外壳，而且有些亚病毒核酸还不具有毒力的复制功能，必 须依赖辅助病毒。 5、 作为凝固剂的明胶不耐高压，那么包被玻片的培养细胞时用的 1%的明胶是否在 高压灭菌融化时失去了正常的构型？ 答：包被玻片不能又高压灭菌吧，用紫外线或射线杀菌。 6、 有些细菌既需要各种有机物，又需要 CO2 为 C 源之一，如沙门氏菌，为什么他 们需要 CO2？如果 pH 值不变，不提供 CO2 会怎么样？CO2 参与了这些细菌什么代 谢活动？ 答：用 CO2 也是作为碳源，使其生长更好。 7、 病毒的遗传因子为 DNA or RNA，为什么亚病毒不把 DNA 当做遗传物质？ 答：有的，卫星病毒腺联病毒 AAV-2 的核酸就是 DNA。 第十一组： 1、 卫星病毒有可能（能否）与卫星 RNA 结合？ 答：卫星病毒与卫星 RNA 都需要专一的辅助病毒，除非人工组合。 2、 吸附力很强的温和病毒能否进入到卵细胞中，受精后成体的基因组有病毒基因？ 答：真不知道。那就是先天性疾病了。 3、 为什么流感具有周期性，季节性？ 答：病毒繁殖存在周期、人体抵抗力增强，秋冬季节是高发季节，免疫力相对较 弱，新陈代谢能力低。 第十二组： 1、 亚病毒仅为生物大分子，不具备应激性等生物应具备的特征，为何被称为分子 生物？
答:因为其在一定条件下会表现出生物活性,所以被成为分子生物。应激性只 是生物的特征之 2、作为真核细胞细胞基因工程载体的多选昆虫,为什么? 答:受体系统选昆虫是因为昆虫是真核生物,基因工程的载体很多是病毒。 3、拟病毒等对辅助病毒是否特异性?特异性产生的机制? 答:还不知道。 1、朊病毒如何复制,如何引起神经元细胞的病变,为什么不影响其它细胞? 答:朊病毒是一种具有感染性和自我复制能力的蛋白因子。虽然它们在细胞内具体 的活动和复制机制还不是很清楚,但是它们通常被认为是引起一系列传染性海绵状脑病 的根源。这些疾病对脑组织结构的影响都是致命的 也影响其他细胞,只是神经系统的脆弱性,其某一蛋白质组织的变性就可以造成整 个系统很大的损坏,从而导致疾病的发生。 类病毒的RNA不需要辅助病毒,卫星RNA需要辅助病毒是有什么结构上的差异 么? 答:类病毒仅有RNA,活性依赖与寄住活细胞。卫星病毒有自己的外壳,但是完 成生活史依赖于辅助病毒。 3、卫星RNA和病毒无同源性,是如何致病的? 答:是寄生于辅助病毒,干扰辅助病毒的复制和致病性。可以理解为病毒的病毒
5 / 5 答：因为其在一定条件下会表现出生物活性，所以被成为分子生物。应激性只 是生物的特征之一。 2、 作为真核细胞细胞基因工程载体的多选昆虫，为什么？ 答：受体系统选昆虫是因为昆虫是真核生物，基因工程的载体很多是病毒。 3、 拟病毒等对辅助病毒是否特异性？特异性产生的机制？ 答：还不知道。 第十三组： 1、 朊病毒如何复制，如何引起神经元细胞的病变，为什么不影响其它细胞？ 答：朊病毒是一种具有感染性和自我复制能力的蛋白因子。虽然它们在细胞内具体 的活动和复制机制还不是很清楚，但是它们通常被认为是引起一系列传染性海绵状脑病 的根源。这些疾病对脑组织结构的影响都是致命的。 也影响其他细胞，只是神经系统的脆弱性，其某一蛋白质组织的变性就可以造成整 个系统很大的损坏，从而导致疾病的发生。 2、 类病毒的 RNA 不需要辅助病毒，卫星 RNA 需要辅助病毒是有什么结构上的差异 么？ 答：类病毒仅有ＲＮＡ，活性依赖与寄住活细胞。卫星病毒有自己的外壳，但是完 成生活史依赖于辅助病毒。 3、 卫星 RNA 和病毒无同源性，是如何致病的？ 答：是寄生于辅助病毒，干扰辅助病毒的复制和致病性。可以理解为病毒的病毒
