第二章细胞生物学技术
第二章 细胞生物学技术
第一节显微镜技术
第一节 显微镜技术
一节显微镜技无不 二、光学显微镜技术 ·光学显微镜是应用最早和最广的研究细胞显微结构的重要工具和手段。 ·目前光学显微镜已发展成多种类型，适用于各种不同的研究目的
二、光学显微镜技术 • 光学显微镜是应用最早和最广的研究细胞显微结构的重要工具和手段。 • 目前光学显微镜已发展成多种类型，适用于各种不同的研究目的。 第一节 显微镜技术
、第一节显微镜不 (一)普通光学显微镜技术 ·主要结构由三部分组成：机械部分、照明部分和光学部分。 ·总放大倍数为物镜和目镜放大倍数的乘积，一般约1000倍。受光波衍 射效应的限制，光镜的分辨率为0.2微米。 Mercury Light source Exciter Filter Objective Specimen CELESTROn
（一）普通光学显微镜技术 • 主要结构由三部分组成:机械部分、照明部分和光学部分。 • 总放大倍数为物镜和目镜放大倍数的乘积，一般约1000倍。受光波衍 射效应的限制，光镜的分辨率为 0.2微米。 第一节 显微镜技术
一节显微镜技无不 ·生物样品一般不能直接在光镜下观察，必须经 过固定、包埋、切片和染色处理以后才能观察 到其显微结构
• 生物样品一般不能直接在光镜下观察，必须经 过固定、包埋、切片和染色处理以后才能观察 到其显微结构。 第一节 显微镜技术
(二)荧光显微镜技术 、第一节显微镜不 Fluorescence Microscope 以紫外线为光源，激发生物标本中的荧光物质，产生能观察到的各 种颜色荧光的一种光学显微镜 主要用于研究荧光物质在组织和细胞内的分布
（二）荧光显微镜技术 Fluorescence Microscope • 以紫外线为光源，激发生物标本中的荧光物质，产生能观察到的各 种颜色荧光的一种光学显微镜 • 主要用于研究荧光物质在组织和细胞内的分布。 第一节 显微镜技术
OPTICAL PATHWAY IN A FLUORESCENCE MICROSCOPE Line of vision Eyepiece Incident light source Barrier filters Dichroic mirror Objective lens Excitation filter Specimen
、第一节显微不 ·细胞内的天然物质如叶绿素，经紫外线照射后能发出可见荧光-一一自 发荧光。 ·细胞内某些成分用荧光染料进行染色，在荧光显微镜下也能观察到荧 光-一诱发荧光
• 细胞内的天然物质如叶绿素，经紫外线照射后能发出可见荧光-自 发荧光。 • 细胞内某些成分用荧光染料进行染色，在荧光显微镜下也能观察到荧 光-诱发荧光。 第一节 显微镜技术
第一节显微镜技无不不 (三)相差显微镜技术 Phase Contrast Microscope
（三）相差显微镜技术 Phase Contrast Microscope • 光线通过染色标本时其波长和振幅发生变化，人 的眼晴才能观察到。 • 活细胞和末经染色的生物标本，光线通过时，波 长和振幅变化不大，用普通光学显微镜无法观察 到。 第一节 显微镜技术
第一节显微镜不 ·光线在通过生物标本时除 了波长和振的变化外，还 有相位的差异。 。} 将相位差转变成振幅差时， 人眼可分辨出来。 ·利用倒置的相差显微镜可 清楚地观察到贴附在培养 瓶底壁上的活细胞
• 光线在通过生物标本时除 了波长和振的变化外，还 有相位的差异。 • 将相位差转变成振幅差时， 人眼可分辨出来。 • 利用倒置的相差显微镜可 清楚地观察到贴附在培养 瓶底壁上的活细胞 第 一 节 显微镜技术