土壤重金属污染的微生物修复 金云皓 农业与生物学院资源环境科学5121509147 【摘要】介绍了重金属污染土壤微生物修复的主要原理，及微生物修复技术的现状和进展， 分析了目前微生物修复存在的问题，指出了今后的研究方向与发展趋势，为重金属污染土壤 微生物修复技术的理论研究和应用提供了参考。 【关键词】重金属污染：土壤：微生物：修复原理：修复技术 土壤重金属污染的治理是当今世界的一大难题，由于土壤中重金属污染是一个不可逆的 过程，且土壤中的重金属具有非降解性并难以用物理化学方法清除。采用传统方法修复土壤 重金属污染是非常困难和昂贵的。而微生物修复作为土壤环境生物修复技术的重要组成部 分，可利用生物削减土壤中重金属含量或降低重金属毒性，是最具发展和应用前景的生物学 环保新技术。 1微生物修复机理 重金属对人的毒性作用常与它的存在状态有密切的关系。一般地说，金属存在形式不同， 其毒性作用也不同。微生物不能降解和破坏重金属，但可以对土壤中的重金属进行固定、移 动或转化，改变它们在土壤中的环境化学行为，可促进有毒、有害物质解毒或降低毒性，从 而达到生物修复的目的。 1.1微生物的转化作用 微生物对重金属的转化作用包括氧化还原作用、甲基化与去甲基化作用以及重金属的溶 解和有机络合配位降解。土壤中的一些重金属元素可以多种价态和形态存在，不同价态和形 态的溶解性和毒性不同，可通过微生物的氧化还原作用和去甲基化作用改变其价态和形态， 从而改变其毒性和移动性。 1.1.1氧化还原作用 微生物可通过改变重金属的氧化还原状态，使重金属化合价发生变化，改变重金属的稳 定性。Si1ver等提出，在细菌作用下氧化还原是最有希望的有毒废物生物修复系统。微生 物能氧化土壤中多种重金属元素，某些自养细菌如硫-铁杆菌类(Thiobacillus ferrobacillus)能氧化As、Cu、Mo和Fe等，假单孢杆菌属(Pseudomonas)能使As、Fe 和M等发生生物氧化，降低这些重金属元素的活性。微生物对重金属的转化作用常见的有 对铬、汞、硒和砷等的转化。如假单胞菌(Pseudomonadsp.)可以把六价铬还原为三价铬， 从而降低其毒性。 1.1.2甲基化与去甲基化作用 微生物可通过改变重金属的甲基化和去甲基化作用改变重金属的环境效应。Fwukowa从 土壤中得到假单胞杆菌K-62,它能分解无机汞和有机汞而形成元素汞，元素汞的生物毒性 比无机汞和有机汞低得多。Frankenber等通过耕作、优化管理、施加添加剂等来加速硒的 原位生物甲基化，使其挥发而降低硒的毒性，此生物技术已在美国西部灌溉农业中用于清除 硒污染。有些真菌和细菌能使无机As转化为挥发性有机As,从而降低其毒性
土壤重金属污染的微生物修复 金云皓 农业与生物学院 资源环境科学 5121509147 【摘 要】介绍了重金属污染土壤微生物修复的主要原理，及微生物修复技术的现状和进展， 分析了目前微生物修复存在的问题，指出了今后的研究方向与发展趋势，为重金属污染土壤 微生物修复技术的理论研究和应用提供了参考。 【关键词】重金属污染；土壤；微生物；修复原理；修复技术 土壤重金属污染的治理是当今世界的一大难题，由于土壤中重金属污染是一个不可逆的 过程，且土壤中的重金属具有非降解性并难以用物理化学方法清除。采用传统方法修复土壤 重金属污染是非常困难和昂贵的。而微生物修复作为土壤环境生物修复技术的重要组成部 分，可利用生物削减土壤中重金属含量或降低重金属毒性，是最具发展和应用前景的生物学 环保新技术。 1 微生物修复机理 重金属对人的毒性作用常与它的存在状态有密切的关系。一般地说，金属存在形式不同， 其毒性作用也不同。微生物不能降解和破坏重金属，但可以对土壤中的重金属进行固定、移 动或转化，改变它们在土壤中的环境化学行为，可促进有毒、有害物质解毒或降低毒性，从 而达到生物修复的目的。 1.1 微生物的转化作用 微生物对重金属的转化作用包括氧化还原作用、甲基化与去甲基化作用以及重金属的溶 解和有机络合配位降解。土壤中的一些重金属元素可以多种价态和形态存在，不同价态和形 态的溶解性和毒性不同，可通过微生物的氧化还原作用和去甲基化作用改变其价态和形态， 从而改变其毒性和移动性。 1.1.1 氧化还原作用 微生物可通过改变重金属的氧化还原状态，使重金属化合价发生变化，改变重金属的稳 定性。Silver 等提出，在细菌作用下氧化还原是最有希望的有毒废物生物修复系统。微生 物能氧化土壤中多种重金属元素，某些自养细菌如硫-铁杆菌类 （Thiobacillus ferrobacillus）能氧化 As、Cu、Mo 和 Fe 等，假单孢杆菌属 （Pseudomonas）能使 As、Fe 和 Mn 等发生生物氧化，降低这些重金属元素的活性。微生物对重金属的转化作用常见的有 对铬、汞、硒和砷等的转化。如假单胞菌（ Pseudomonadsp.） 可以把六价铬还原为三价铬， 从而降低其毒性。 1.1.2 甲基化与去甲基化作用 微生物可通过改变重金属的甲基化和去甲基化作用改变重金属的环境效应。Fwukowa 从 土壤中得到假单胞杆菌 K-62，它能分解无机汞和有机汞而形成元素汞，元素汞的生物毒性 比无机汞和有机汞低得多。Frankenber 等通过耕作、优化管理、施加添加剂等来加速硒的 原位生物甲基化，使其挥发而降低硒的毒性，此生物技术已在美国西部灌溉农业中用于清除 硒污染。有些真菌和细菌能使无机 As 转化为挥发性有机 As，从而降低其毒性
1.1.3重金属溶解或配位络合作用 一些微生物，如动胶菌、蓝细菌、硫酸盐还原菌以及某些藻类，能够产生胞外聚合物如 多糖、糖蛋白等具有大量的阴离子基团，与重金属离子形成络合物。如Bargagli在Hg矿附 近土壤中分离得到很多高级真菌，一些菌根种和所有腐殖质分解菌都能积累Hg达到100 mg/kg土壤干重。 1.2微生物的积累和吸着作用 土壤中重金属离子有5种形态：可交换态、碳酸盐结合态、铁锰氧化物结合态、有机结 合态、残渣态。前3种形态稳定性差，后2种形态稳定性强。重金属污染物的危害主要来自 前3种不稳定的重金属形态。微生物固定作用可将重金属离子转化为后两种形态或积累在微 生物体内，从而使土壤中重金属的浓度降低或毒性减小。微生物固定作用有胞外吸附作用、 胞外沉淀作用和胞内积累作用3种形式。其作用方式有以下几种：①金属磷酸盐、金属硫化 物沉淀：②细菌胞外多聚体：③金属硫蛋白、植物螯合肽和其他金属结合蛋白：④铁载体： ⑤真菌来源物质及其分泌物对重金属的去除。 1.2.1胞外吸附作用 胞外吸附作用主要是指重金属离子与微生物的产物或细胞壁表面的一些基团通过络合、 螯合、离子交换、静电吸附、共价吸附等作用中的一种或几种相结合的过程。许多研究表明 细菌及其代谢产物对溶解态的金属离子有很强的络合能力，这主要因为细菌表面有独特的化 学组成。细胞壁带有负电荷而使整个细菌表面带负电荷，而细菌的产物或细胞壁表面的一些 基团如-C0OH、-N2、-SH、-OH等阴离子可以增加金属离子的络合作用。研究表明，许多微 生物，包括细菌、真菌和藻类可以生物积累(bioaccumulation)和生物吸着(biosorption) 环境中多种重金属和核素。一些微生物如动胶菌、蓝细菌、硫酸盐还原菌以及某些藻类，能 够产生胞外聚合物如多糖、糖蛋白等具有大量的阴离子基团，与重金属离子形成络合物。 1.2.2胞外沉淀作用 胞外沉淀作用指微生物产生的某些代谢产物与重金属结合形成沉淀的过程。在厌氧条件 下，疏酸盐还原菌中的脱硫弧菌属(Desulfovibrio)和肠状菌属(Desulfotomaculum)可 还原硫酸盐生成硫化氢，硫化氢与Hg2+形成HgS沉淀，抑制了Hg2+的活性。某些微生物产 生的草酸与重金属形成不溶性草酸盐沉淀。 1.2.3胞内积累作用 胞内积累作用是指重金属被微生物吸收到细胞内而富集的过程。重金属进入细胞后，通 过区域化作用分布在细胞内的不同部位，微生物可将有毒金属离子封闭或转变成为低毒的形 式。微生物细胞内可合成金属硫蛋白，金属硫蛋白与Hg、Zn、Cd、Cu、Ag等重金属有强烈 的亲合性，结合形成无毒或低毒络合物。如真菌木霉、小刺青霉和深黄被包霉通过区域化作 用对Cd、Hg都有很强的胞内积累作用。研究表明，微生物的重金属抗性与MT积累呈正相关， 这使细菌质粒可能有抗重金属的基因，如丁香假单胞菌和大肠杆菌均含抗C基因，芽孢杆 菌和葡萄球菌含有抗Cd和抗Zn基因，产碱菌含抗Cd、抗Ni及抗Co基因，革兰氏阳性和 革兰氏阴性菌中含抗As和抗Sb基因。Hiroki发现在重金属污染土壤中加入抗重金属产碱 菌可使得土壤水悬浮液得以净化。可见，微生物生物技术在净化污染土壤环境方面具有广泛 的应用前景。 2重金属污染土壤微生物修复技术及其研究进展 微生物修复重金属污染的技术主要为原位修复和异位修复。微生物原位修复技术是指不 需要将污染土壤搬离现场，直接向污染土壤投放N、P等营养物质和供氧，促进土壤中土著 微物或特异功能微生物的代谢活性，降解污染物主要包括：生物通风法(bioventing)、生 物强化法(enhanced-bioremediation)、土地耕作法(land farming)和化学活性栅修复
1.1.3 重金属溶解或配位络合作用 一些微生物，如动胶菌、蓝细菌、硫酸盐还原菌以及某些藻类，能够产生胞外聚合物如 多糖、糖蛋白等具有大量的阴离子基团，与重金属离子形成络合物。如 Bargagli 在 Hg 矿附 近土壤中分离得到很多高级真菌，一些菌根种和所有腐殖质分解菌都能积累 Hg 达到 100 mg/kg 土壤干重。 1.2 微生物的积累和吸着作用 土壤中重金属离子有 5 种形态：可交换态、碳酸盐结合态、铁锰氧化物结合态、有机结 合态、残渣态。前 3 种形态稳定性差，后 2 种形态稳定性强。重金属污染物的危害主要来自 前 3 种不稳定的重金属形态。微生物固定作用可将重金属离子转化为后两种形态或积累在微 生物体内，从而使土壤中重金属的浓度降低或毒性减小。微生物固定作用有胞外吸附作用、 胞外沉淀作用和胞内积累作用 3 种形式。其作用方式有以下几种：①金属磷酸盐、金属硫化 物沉淀；②细菌胞外多聚体；③金属硫蛋白、植物螯合肽和其他金属结合蛋白；④铁载体； ⑤真菌来源物质及其分泌物对重金属的去除。 1.2.1 胞外吸附作用 胞外吸附作用主要是指重金属离子与微生物的产物或细胞壁表面的一些基团通过络合、 螯合、离子交换、静电吸附、共价吸附等作用中的一种或几种相结合的过程。许多研究表明 细菌及其代谢产物对溶解态的金属离子有很强的络合能力，这主要因为细菌表面有独特的化 学组成。细胞壁带有负电荷而使整个细菌表面带负电荷，而细菌的产物或细胞壁表面的一些 基团如-COOH、-NH2、-SH、-OH 等阴离子可以增加金属离子的络合作用。研究表明，许多微 生物，包括细菌、真菌和藻类可以生物积累（bioaccumulation）和生物吸着 （biosorption） 环境中多种重金属和核素。一些微生物如动胶菌、蓝细菌、硫酸盐还原菌以及某些藻类，能 够产生胞外聚合物如多糖、糖蛋白等具有大量的阴离子基团，与重金属离子形成络合物。 1.2.2 胞外沉淀作用 胞外沉淀作用指微生物产生的某些代谢产物与重金属结合形成沉淀的过程。在厌氧条件 下，硫酸盐还原菌中的脱硫弧菌属（Desulfovibrio）和肠状菌属（Desulfotomaculum）可 还原硫酸盐生成硫化氢，硫化氢与 Hg2+形成 HgS 沉淀，抑制了 Hg2+的活性。某些微生物产 生的草酸与重金属形成不溶性草酸盐沉淀。 1.2.3 胞内积累作用 胞内积累作用是指重金属被微生物吸收到细胞内而富集的过程。重金属进入细胞后，通 过区域化作用分布在细胞内的不同部位，微生物可将有毒金属离子封闭或转变成为低毒的形 式。微生物细胞内可合成金属硫蛋白，金属硫蛋白与 Hg、Zn、Cd、Cu、Ag 等重金属有强烈 的亲合性，结合形成无毒或低毒络合物。如真菌木霉、小刺青霉和深黄被包霉通过区域化作 用对 Cd、Hg 都有很强的胞内积累作用。研究表明，微生物的重金属抗性与 MT 积累呈正相关， 这使细菌质粒可能有抗重金属的基因，如丁香假单胞菌和大肠杆菌均含抗 Cu 基因，芽孢杆 菌和葡萄球菌含有抗 Cd 和抗 Zn 基因，产碱菌含抗 Cd、抗 Ni 及抗 Co 基因，革兰氏阳性和 革兰氏阴性菌中含抗 As 和抗 Sb 基因。Hiroki 发现在重金属污染土壤中加入抗重金属产碱 菌可使得土壤水悬浮液得以净化。可见，微生物生物技术在净化污染土壤环境方面具有广泛 的应用前景。 2 重金属污染土壤微生物修复技术及其研究进展 微生物修复重金属污染的技术主要为原位修复和异位修复。微生物原位修复技术是指不 需要将污染土壤搬离现场，直接向污染土壤投放 N、P 等营养物质和供氧，促进土壤中土著 微物或特异功能微生物的代谢活性，降解污染物主要包括：生物通风法（bioventing）、生 物强化法（enhanced-bioremediation）、土地耕作法（1and farming）和化学活性栅修复
法(chemical activated bar)等几种。异位微生物修复是把污染土壤挖出，进行集中生物 降解的方法。主要包括预制床法(preparedbed)、堆制法(composting biorernediation) 及泥浆生物反应器法(bioslutrybioreactor)。 2.1生物刺激技术 生物刺激即向污染的士壤中添加微生物生长所需的氮、磷等营养元素以及电子受体，刺 激土著微生物的生长来增加土壤中微生物的数量和活性。关于这方面的研究国外文献己有报 道。Reddy KR,Cutright T J对铬污染土壤的微生物修复进行的研究表明，限制铬污染场 地修复进程的一个共同因素是污染场地通常缺乏足够的营养以供引进的外来微生物或土著 微生物生长，以至这些微生物自身具备的还原C6+的潜力得不到充分发挥：为使其潜力得 到充分发挥，需向其生活的环境中投加营养物质来刺激铬还原菌的新陈代谢和繁殖，促进铬 污染土壤的修复。HigginsT E将堆肥、鲜肥、牛粪、泥炭加入铬污染土壤进行原位修复， 提高了修复效果。 2.2生物强化技术 生物强化技术即向重金属污染土壤中加入一种高效修复菌株或由几种菌株组成的高效 微生物组群来增强土壤修复能力的技术。所加入的高效菌株可通过筛选培育或通过基因工程 构建，也可以通过微生物表面展示技术表达重金属高效结合肽，从而得到高效菌株。 2.2.1高效菌株筛选 高效菌株有2个来源：一是从重金属污染土壤中筛选：二是从其他重金属污染环境中筛 选。从重金属污染土壤中筛选分离出土著微生物，将其富集培养后再投入到原污染的土壤， 这是本土生物强化技术（本土生物强化技术是由日本科学家Ueno A等人于2007年首次提出 的)。筛选、富集的土著微生物更能适应土壤的生态条件，进而更好地发挥其修复功能。目 前已从Cr(VI)、Zn、Pb污染土壤中筛选分离出菌种Pseudo-monasmesophillca和 maltophiliaP,Barton等对这2种菌株去除Se、Pb毒性的可能性进行了研究，发现上述菌 种均能将硒酸盐、亚硒酸盐和二价铅转化为不具毒性且结构稳定的胶态硒与胶态铅。 Robinson等研究了从土壤中筛选的4种荧光假单胞菌对Cd的富集与吸收效果，发现这4种 细菌对Cd的富集达到环境中的100倍以上。 2.2.2基因工程菌构建 基因工程可以打破种属的界限，把重金属抗性基因或编码重金属结合肽的基因转移到对 污染土壤适应性强的微生物体内，构建高效菌株。由于大多数微生物对重金属的抗性系统主 要由质粒上的基因编码，且抗性基因亦可在质粒与染色体间相互转移，许多研究工作开始采 用质粒来提高细菌对重金属的累积作用，并取得了良好的应用效果。 2.2.3微生物表面展示技术 微生物表面展示技术是将编码目的肽的DNA片段通过基因重组的方法构建和表达在噬 菌体表面、细菌表面（如外膜蛋白、菌毛及鞭毛）或酵母菌表面（如糖蛋白），从而使每个 颗粒或细胞只展示一种多肽。微生物表面展示技术可以把编码重金属离子高效结合肽的基因 通过基因重组的方法与编码细菌表面蛋白的基因相连，重金属离子高效结合肽以融合蛋白的 形式表达在细菌表面，可以明显增强微生物的重金属结合能力，这为重金属污染的防治提供 了一条崭新的途径。 LamB、冰晶蛋白、凝集素、a-凝集素和葡萄球菌蛋白A都是表面蛋白，在微生物表面展 示技术中用来定位、锚定外源多肽。Sousa C等将六聚组氨酸多肽展示在E.coliLamB蛋白 表面，可以吸附大量的金属离子，重组菌株对Cd2+的吸附和富集比E.coli大11倍：XuZ、 Lee SY将多聚组氨酸(162个氨基酸)与OmpC融合，重组菌株吸附Cd的能力达32mol/ g干菌；Schembri MA等将随机肽库构建于E.coli的表面菌毛蛋白FimH粘附素上，经数 轮筛选和富集，获得对PbO2、Co0、Mn02、Cr2O3具有高亲和力的多肽：KurodaK、UedM将
法（chemical activated bar）等几种。异位微生物修复是把污染土壤挖出，进行集中生物 降解的方法。主要包括预制床法（preparedbed）、堆制法（composting biorernediation） 及泥浆生物反应器法（bioslutrybioreactor）。 2.1 生物刺激技术 生物刺激即向污染的土壤中添加微生物生长所需的氮、磷等营养元素以及电子受体，刺 激土著微生物的生长来增加土壤中微生物的数量和活性。关于这方面的研究国外文献已有报 道。Reddy KR，Cutright T J 对铬污染土壤的微生物修复进行的研究表明，限制铬污染场 地修复进程的一个共同因素是污染场地通常缺乏足够的营养以供引进的外来微生物或土著 微生物生长，以至这些微生物自身具备的还原 Cr6+的潜力得不到充分发挥；为使其潜力得 到充分发挥，需向其生活的环境中投加营养物质来刺激铬还原菌的新陈代谢和繁殖，促进铬 污染土壤的修复。HigginsT E 将堆肥、鲜肥、牛粪、泥炭加入铬污染土壤进行原位修复， 提高了修复效果。 2.2 生物强化技术 生物强化技术即向重金属污染土壤中加入一种高效修复菌株或由几种菌株组成的高效 微生物组群来增强土壤修复能力的技术。所加入的高效菌株可通过筛选培育或通过基因工程 构建，也可以通过微生物表面展示技术表达重金属高效结合肽，从而得到高效菌株。 2.2.1 高效菌株筛选 高效菌株有 2 个来源：一是从重金属污染土壤中筛选；二是从其他重金属污染环境中筛 选。从重金属污染土壤中筛选分离出土著微生物，将其富集培养后再投入到原污染的土壤， 这是本土生物强化技术（本土生物强化技术是由日本科学家 Ueno A 等人于 2007 年首次提出 的）。筛选、富集的土著微生物更能适应土壤的生态条件，进而更好地发挥其修复功能。目 前已从 Cr（VI）、Zn、Pb 污染土壤中筛选分离出菌种 Pseudo-monasmesophillca 和 maltophiliaP，Barton 等对这 2 种菌株去除 Se、Pb 毒性的可能性进行了研究，发现上述菌 种均能将硒酸盐、亚硒酸盐和二价铅转化为不具毒性且结构稳定的胶态硒与胶态铅。 Robinson 等研究了从土壤中筛选的 4 种荧光假单胞菌对 Cd 的富集与吸收效果，发现这 4 种 细菌对 Cd 的富集达到环境中的 100 倍以上。 2.2.2 基因工程菌构建 基因工程可以打破种属的界限，把重金属抗性基因或编码重金属结合肽的基因转移到对 污染土壤适应性强的微生物体内，构建高效菌株。由于大多数微生物对重金属的抗性系统主 要由质粒上的基因编码，且抗性基因亦可在质粒与染色体间相互转移，许多研究工作开始采 用质粒来提高细菌对重金属的累积作用，并取得了良好的应用效果。 2.2.3 微生物表面展示技术 微生物表面展示技术是将编码目的肽的 DNA 片段通过基因重组的方法构建和表达在噬 菌体表面、细菌表面（如外膜蛋白、菌毛及鞭毛）或酵母菌表面（如糖蛋白），从而使每个 颗粒或细胞只展示一种多肽。微生物表面展示技术可以把编码重金属离子高效结合肽的基因 通过基因重组的方法与编码细菌表面蛋白的基因相连，重金属离子高效结合肽以融合蛋白的 形式表达在细菌表面，可以明显增强微生物的重金属结合能力，这为重金属污染的防治提供 了一条崭新的途径。 LamB、冰晶蛋白、凝集素、a-凝集素和葡萄球菌蛋白 A 都是表面蛋白，在微生物表面展 示技术中用来定位、锚定外源多肽。Sousa C 等将六聚组氨酸多肽展示在 E.coliLamB 蛋白 表面，可以吸附大量的金属离子，重组菌株对 Cd2+的吸附和富集比 E.coli 大 11 倍；Xu Z、 Lee S Y 将多聚组氨酸（162 个氨基酸） 与 Omp C 融合，重组菌株吸附 Cd 的能力达 32 mol/ g 干菌；Schembri M A 等将随机肽库构建于 E.coli 的表面菌毛蛋白 FimH 粘附素上，经数 轮筛选和富集，获得对 PbO2、CoO、MnO2、Cr2O3 具有高亲和力的多肽；KurodaK、UedM 将
酵母金属硫蛋白(YMT)串联体在酵母表面展示表达后，四聚体对重金属吸附能力提高5.9 倍，八聚体提高8.7倍。表面展示技术用于重金属污染土壤原位修复的研究虽然取得了许多 成果，但离实际应用尚有一段距离。其主要原因是用于展示金属结合肽的受体 3结论 从目前来看，微生物修复是最具发展和应用前景的生物修复技术，人们在微生物材料、 降解途径以及修复技术研发等方面取得了一定的研究进展，并展示了一些成功的修复案例。 但重金属污染土壤原位微生物修复技术目前还存在以下几个方面的问题：(1)修复效率低， 不能修复重污染土壤。(2)加入到修复现场中的微生物会与土著菌株竞争，可能因其竞争 不过土著微生物，而导致目标微生物数量减少或其代谢活性丧失。(3)重金属污染土壤原 位微生物修复技术大多还处于研究阶段和田间试验与示范阶段，还存在大规模实际应用的问 题。(4)微生物个体微小，难以从土壤中分离：重金属回收困难。 通过以上分析，今后可以从以下几个方面加强研究和应用： (1)应加强具有高效修复能力的微生物的研究。分子生物学和基因工程技术的应用有助 于构建具有高效转化和固定重金属能力的菌株，尤其是微生物表面展示技术的不断成熟与完 善将会极大地提高微生物对重金属的固定能力，在重金属修复中发挥重要作用。 (2)加强微生物修复技术与其他环境修复技术有效的集成。可以采用植物一微生物联合 修复技术，充分发挥植物与微生物修复技术各自的优势，弥补它们的不足：研究土壤环境条 件变化对重金属微生物转化的影响，通过应用化学试剂（络合剂、螯合剂）或土壤改良剂、酸 碱调节剂等加速微生物修复作用：结合生物刺激技术添加修复微生物所需的营养物质，以增 加其竞争力和修复效果。 (3)做大量的野外试验以获得准确的试验参数与室内试验结果相比较，以期微生物修复 技术的推广。 (4)研究固定化微生物用于重金属污染土壤修复，以克服微生物颗粒小、机械强度低、 难以分离微生物和回收重金属的缺点。虽然金属重污染土壤的原位微生物修复技术还存在一 定的问题，目前的应用和市场还很有限，但是这种方法具有物理和化学方法所不及的经济上 和生态上的双重优势，潜力巨大。微生物修复将成为一种广泛应用、环境良好和经济有效的 重金属污染土壤修复方法，为重金属污染土壤的治理开辟了一条新途径。 【参考文献】 [1]钱春香：王明明：许燕波土壤重金属污染现状及微生物修复技术研究进展东南大学学报 (自然科学版)1001-05052013 [2]李宏：江澜土壤重金属污染的微生物修复研究进展贵州农业科学1001-36012009 [3]王锐：关肠：林海龙土壤重金属污染的微生物修复机理研究进展哈尔滨师范大学自然科 学学报1000-56172014 [4]李燕重金属污染土壤微生物修复技术研究进展科学时代1005-250X2014 [5]黄春晓重金属污染土壤原位微生物修复技术及其研究进展中原工学院学报1671-6906 2011 [6]王金晶土壤中重金属污染及其微生物修复中国科技成果1009-56592005 [7]丁耀光土壤重金属污染及微生物修复世界华商经济年鉴（高校教育研究）2008 [8]许燕波：钱春香；：陆兆文微生物矿化修复重金属污染土壤环境工程学1673-91082013 [9]张艳：邓扬悟：罗仙平：周朦土壤重金属污染以及微生物修复技术探讨有色金属科学与 工程2012 [10]王敏：徐甜甜：李强：尹俊华重金属污染土壤的微生物修复机理与技术唐山学院学报 1672-349X2011
酵母金属硫蛋白（YMT） 串联体在酵母表面展示表达后，四聚体对重金属吸附能力提高 5.9 倍，八聚体提高 8.7 倍。表面展示技术用于重金属污染土壤原位修复的研究虽然取得了许多 成果，但离实际应用尚有一段距离。其主要原因是用于展示金属结合肽的受体 3 结论 从目前来看，微生物修复是最具发展和应用前景的生物修复技术，人们在微生物材料、 降解途径以及修复技术研发等方面取得了一定的研究进展，并展示了一些成功的修复案例。 但重金属污染土壤原位微生物修复技术目前还存在以下几个方面的问题：（1）修复效率低， 不能修复重污染土壤。（2）加入到修复现场中的微生物会与土著菌株竞争，可能因其竞争 不过土著微生物，而导致目标微生物数量减少或其代谢活性丧失。（3）重金属污染土壤原 位微生物修复技术大多还处于研究阶段和田间试验与示范阶段，还存在大规模实际应用的问 题。（4）微生物个体微小，难以从土壤中分离；重金属回收困难。 通过以上分析，今后可以从以下几个方面加强研究和应用： (1)应加强具有高效修复能力的微生物的研究。分子生物学和基因工程技术的应用有助 于构建具有高效转化和固定重金属能力的菌株，尤其是微生物表面展示技术的不断成熟与完 善将会极大地提高微生物对重金属的固定能力，在重金属修复中发挥重要作用。 (2)加强微生物修复技术与其他环境修复技术有效的集成。可以采用植物一微生物联合 修复技术，充分发挥植物与微生物修复技术各自的优势，弥补它们的不足；研究土壤环境条 件变化对重金属微生物转化的影响，通过应用化学试剂(络合剂、螯合剂)或土壤改良剂、酸 碱调节剂等加速微生物修复作用；结合生物刺激技术添加修复微生物所需的营养物质，以增 加其竞争力和修复效果。 (3)做大量的野外试验以获得准确的试验参数与室内试验结果相比较，以期微生物修复 技术的推广。 (4)研究固定化微生物用于重金属污染土壤修复，以克服微生物颗粒小、机械强度低、 难以分离微生物和回收重金属的缺点。虽然金属重污染土壤的原位微生物修复技术还存在一 定的问题，目前的应用和市场还很有限，但是这种方法具有物理和化学方法所不及的经济上 和生态上的双重优势，潜力巨大。微生物修复将成为一种广泛应用、环境良好和经济有效的 重金属污染土壤修复方法，为重金属污染土壤的治理开辟了一条新途径。 【参考文献】 [1]钱春香;王明明;许燕波 土壤重金属污染现状及微生物修复技术研究进展 东南大学学报 (自然科学版) 1001-0505 2013 [2]李宏;江澜 土壤重金属污染的微生物修复研究进展 贵州农业科学 1001-3601 2009 [3]王锐;关旸;林海龙 土壤重金属污染的微生物修复机理研究进展 哈尔滨师范大学自然科 学学报 1000-5617 2014 [4]李燕 重金属污染土壤微生物修复技术研究进展 科学时代 1005-250X 2014 [5]黃春晓 重金属污染土壤原位微生物修复技术及其研究进展 中原工学院学报 1671-6906 2011 [6]王金晶 土壤中重金属污染及其微生物修复 中国科技成果 1009-5659 2005 [7]丁耀光 土壤重金属污染及微生物修复 世界华商经济年鉴(高校教育研究) 2008 [8]许燕波;钱春香;陆兆文 微生物矿化修复重金属污染土壤 环境工程学 1673-9108 2013 [9]张艳;邓扬悟;罗仙平;周朦 土壤重金属污染以及微生物修复技术探讨 有色金属科学与 工程 2012 [10]王敏;徐甜甜;李强;尹俊华 重金属污染土壤的微生物修复机理与技术 唐山学院学报 1672-349X 2011