莘南師乾大学教案2005~2006学年第二学期部)院（系、所、生命科学学院教室研生物工程系称课程名微生物学实验授课对象2004生物工程、理科综合授师课教李淑彬、张松、靖元孝务职称职副教授教材称微生物学实验指导名2006年3月1日1
1 教 案 2005~2006 学年第二学期 院（系、所、部） 生命科学学院 教 研 室 生物工程系 课 程 名 称 微生物学实验 授 课 对 象 2004 生物工程、理科综合 授 课 教 师 李淑彬、张松、靖元孝 职 称 职 务 副教授 教 材 名 称 微生物学实验指导. 2006 年 3 月 1 日
微生物学实验课程教案授课题目（教学章节或主题）：授课类型实验课实验一、显微镜油镜的使用和细菌形态的观察、细菌的授课时间第2周革兰氏染色教学目标或要求：巩固和掌握显微镜油镜的正确使用：学习细菌制片和单染色技术；观察细菌的三种基本形态：对人体微生物染色检查，初步建立无无菌操作的概念。学习细菌的革兰氏染色方法教学内容（包括基本内容、重点、难点）：一、实验材料1、链球菌、白色葡萄球菌和螺旋体形态（装片）。2、大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌斜面菌种。3、草酸铵结晶紫染色液、路哥氏碘液、95%乙醇、0.5%石炭酸复红色液、无菌水、石蜡油、擦镜纸、载玻片、吸水纸、擦镜纸、接种环、酒精灯、牙签。二、实验内容（一）细菌形态的观察1、用美蓝对苏云金芽孢杆菌进行单染色，在显微镜油镜下观察形态：2、观察链球菌、白色葡萄球菌和螺旋体形态（装片）：3、自选材料：用牙签挑取牙垢观察二、细菌的革兰氏染色用混合涂片的方法对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌进行革兰氏染色。教学手段与方法：示范：油镜使用方法、无菌挑菌方法。讲解：细菌制片染色、革兰氏染色、原理、意义、关键和注意事项实验过程中随时纠正学生错误动作思考题、讨论题、作业：记录观察结果并绘图思考题：1、油镜完毕后，镜头应如何处理？2、在制作涂片中，为什么要进行固定这一步？3、革兰氏染色中哪一步关键，为什么？参考资料（含参考书、文献等）：2
2 微生物学实验课程教案 授课题目（教学章节或主题）： 授课类型 实验课 实验一、显微镜油镜的使用和细菌形态的观察、细菌的 革兰氏染色 授课时间 第2周 教学目标或要求： 巩固和掌握显微镜油镜的正确使用；学习细菌制片和单染色技术；观察细菌的三种基本形态； 对人体微生物染色检查，初步建立无无菌操作的概念。学习细菌的革兰氏染色方法 教学内容（包括基本内容、重点、难点）： 一、实验材料 1、链球菌、白色葡萄球菌和螺旋体形态（装片）。 2、大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌斜面菌种。 3、草酸铵结晶紫染色液、路哥氏碘液、95%乙醇、0.5%石炭酸复红色液、无菌水、石蜡油、擦镜纸、 载玻片、吸水纸、擦镜纸、接种环、酒精灯、牙签。 二、实验内容 （一）细菌形态的观察 1、用美蓝对苏云金芽孢杆菌进行单染色，在显微镜油镜下观察形态； 2、观察链球菌、白色葡萄球菌和螺旋体形态（装片）； 3、自选材料：用牙签挑取牙垢观察 二、细菌的革兰氏染色 用混合涂片的方法对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌进行革兰氏染色。 教学手段与方法： 示范：油镜使用方法、无菌挑菌方法。 讲解：细菌制片染色、革兰氏染色、原理、意义、关键和注意事项 实验过程中随时纠正学生错误动作 思考题、讨论题、作业：记录观察结果并绘图 思考题：1、油镜完毕后，镜头应如何处理？ 2、在制作涂片中，为什么要进行固定这一步？ 3、革兰氏染色中哪一步关键，为什么？ 参考资料（含参考书、文献等）：
微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社..1、2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社。4、微生物学.沈萍．高等教育出版社注：1、每项页面大小可自行添减；2一次课为一个教案；3、“重点”、“难点”“教学手段与方法”部分要尽量具体；4、授课类型指：实验课、讨论课、实验或实习课、练习或习题课等。3
3 1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社. 2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社. 3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社. 4、微生物学.沈萍. 高等教育出版社. 注：1、每项页面大小可自行添减；2 一次课为一个教案；3、“重点”、“难点”、“教学手段与 方法”部分要尽量具体；4、授课类型指：实验课、讨论课、实验或实习课、练习或习题课等
微生物学实验课程教案授课题目（教学章节或主题）：授课类型实验课授课时间第3周实验二、放线菌、霉菌形态结构的观察教学目标或要求：学习丝状微生物制片和染色技术：观察和掌握典型放线菌和重要霉菌的形态结构特征教学内容（包括基本内容、重点、难点）：一、实验材料1、细黄链霉菌平板、插片培养材料。2、链霉菌黑根霉曲霉青霉装片3、黑根霉、黑曲霉、青霉、毛霉平板。4、乳酸石炭酸复红色液、无菌水、石蜡油、擦镜纸、载玻片、盖玻片、吸水纸、擦镜纸、接种环、酒精灯、镊子。二、实验内容1、用封片法观察细黄链霉菌营养菌丝、气生菌丝和孢子丝、孢子形态。2、用压片法观察细黄链霉菌营养菌丝、气生菌丝。3、用水浸片法观察黑根霉的形态结构（菌丝有无横隔、孢囊和孢囊孢子、假根、囊托和囊轴）4、用水浸片法观察毛霉的形态结构（菌丝有无横隔、孢囊和孢囊孢子、有无假根、囊托和囊轴）5、用水浸片法观察曲霉的形态结构（菌丝有无横隔、分生孢子梗着生位置、顶囊、分生孢子的位置、足细胞等）6、用水浸片法观察青霉的形态结构（菌丝有无横隔、分生孢子梗着生位置、分生孢子的位置、有无足细胞等）4
4 微生物学实验课程教案 授课题目（教学章节或主题）： 授课类型 实验课 实验二、放线菌、霉菌形态结构的观察 授课时间 第3周 教学目标或要求： 学习丝状微生物制片和染色技术；观察和掌握典型放线菌和重要霉菌的形态结构特征 教学内容（包括基本内容、重点、难点）： 一、实验材料 1、细黄链霉菌平板、插片培养材料。 2、链霉菌黑根霉曲霉青霉装片 3、黑根霉、黑曲霉、青霉、毛霉平板。 4、乳酸石炭酸复红色液、无菌水、石蜡油、擦镜纸、载玻片、盖玻片、吸水纸、擦镜纸、接种环、 酒精灯、镊子。 二、实验内容 1、用封片法观察细黄链霉菌营养菌丝、气生菌丝和孢子丝、孢子形态。 2、用压片法观察细黄链霉菌营养菌丝、气生菌丝。 3、用水浸片法观察黑根霉的形态结构（菌丝有无横隔、孢囊和孢囊孢子、假根、囊托和囊轴） 4、用水浸片法观察毛霉的形态结构（菌丝有无横隔、孢囊和孢囊孢子、有无假根、囊托和囊轴） 5、用水浸片法观察曲霉的形态结构（菌丝有无横隔、分生孢子梗着生位置、顶囊、分生孢子的位 置、足细胞等） 6、用水浸片法观察青霉的形态结构（菌丝有无横隔、分生孢子梗着生位置、分生孢子的位置、有 无足细胞等）
教学手段与方法：示范：从平板上挑取丝状微生物的方法。讲解：实验材料的基本形态和特性、研究意义、注意事项实验过程中随时纠正学生错误动作思考题、讨论题、作业：绘图记录观察结果、表明各部分名称。参考资料（含参考书、文献等）：1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社.2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社微生物学.黄秀梨.高等教育出版社。3、4、微生物学.沈萍．高等教育出版社5
5 教学手段与方法： 示范：从平板上挑取丝状微生物的方法。 讲解：实验材料的基本形态和特性、研究意义、注意事项 实验过程中随时纠正学生错误动作 思考题、讨论题、作业： 绘图记录观察结果、表明各部分名称。 参考资料（含参考书、文献等）： 1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社. 2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社. 3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社. 4、微生物学.沈萍. 高等教育出版社
微生物学实验课程教案授课题目（教学章节或主题）：授课类型实验课第4周授课时间实验三、微生物大小测定和微生物计数教学目标或要求：掌握微生物大小和数量测定的正确方法：观察酵母菌的形态结构和出芽生殖教学内容（包括基本内容、重点、难点）：一、实验材料1、菌种：酿酒酵母。2、仪器及其它：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸、美兰染色液。二、实验内容1、水浸片法（美兰染色法）观察酵母菌形态大小、出芽生殖并计算酵母细胞的存活率。2、用血球计数板计算酵母菌悬液中，每毫升原液的菌数。3、用测微尺测量酵母菌细胞的大小。教学手段与方法：示范：计数板加样方法。讲解：原理、注意事项实验过程中随时纠正学生错误动作思考题、讨论题、作业：绘图记录观察结果思考题：1、影响微生物计数准确性的主要因素有哪些？2、目镜测微尺在用前为什么要校正？参考资料（含参考书、文献等）：1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社.：2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社、3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社4、微生物学.沈萍．高等教育出版社6
6 微生物学实验课程教案 授课题目（教学章节或主题）： 授课类型 实验课 实验三、微生物大小测定和微生物计数 授课时间 第4周 教学目标或要求： 掌握微生物大小和数量测定的正确方法；观察酵母菌的形态结构和出芽生殖 教学内容（包括基本内容、重点、难点）： 一、实验材料 1、菌种：酿酒酵母。 2、仪器及其它：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、载玻片、盖玻片、滴管、吸水 纸、美兰染色液。 二、实验内容 1、水浸片法（美兰染色法）观察酵母菌形态大小、出芽生殖并计算酵母细胞的存活率。 2、用血球计数板计算酵母菌悬液中，每毫升原液的菌数。 3、用测微尺测量酵母菌细胞的大小。 教学手段与方法： 示范：计数板加样方法。 讲解：原理、注意事项 实验过程中随时纠正学生错误动作 思考题、讨论题、作业：绘图记录观察结果 思考题：1、影响微生物计数准确性的主要因素有哪些？ 2、目镜测微尺在用前为什么要校正？ 参考资料（含参考书、文献等）： 1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社. 2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社. 3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社. 4、微生物学.沈萍. 高等教育出版社
微生物学实验课程教案授课题目（教学章节或主题）：授课类型实验课第5周授课时间实验四培养基制备和消毒灭菌教学目标或要求：1、了解配制培养基的原理，并掌握配制培养基的一般方法和步骤2、了解加压蒸汽灭菌的原理，并掌握其具体操作方法。教学内容（包括基本内容、重点、难点）：一、实验材料1.药品及试剂：可溶性淀粉、KNO3、K2HPO4-3H2O、MgSO4-7H2O、FeSO4-7H2O、1mol/LNaOH、琼脂、葡萄糖2.仪器及其它试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、药匙、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸(5.5-9.0)、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、小倒管二、实验内容1、分组配制细菌水解淀粉实验、糖发酵实验、甲基红实验和VP实验培养基2、每组制备玻璃珠无菌水(50ml)三角瓶2个。3.每组制备无菌水试管(4.5ml/管)10支。4.每组包9cm培养皿6付。5.每组包装1ml吸管5支，玻璃刮铲4个。6、对上述物品进行灭菌处理。教学手段与方法：示范：试管口和三角瓶包扎方法、棉塞的制作、移液管的包扎等讲解：培养基配制的一般程序、高压灭菌器的使用方法、要求和注意事项实验过程中随时纠正学生错误动作7
7 微生物学实验课程教案 授课题目（教学章节或主题）： 授课类型 实验课 实验四 培养基制备和消毒灭菌 授课时间 第5周 教学目标或要求： 1、了解配制培养基的原理，并掌握配制培养基的一般方法和步骤 2、了解加压蒸汽灭菌的原理，并掌握其具体操作方法。 教学内容（包括基本内容、重点、难点）： 一、实验材料 1．药品及试剂： 可溶性淀粉、KNO3、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、1mol/L NaOH 、琼脂、葡萄糖 2．仪器及其它 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、药匙、高压蒸汽灭菌锅、pH 试纸(5.5-9.0)、棉花、牛皮 纸、记号笔、麻绳、纱布、小倒管 二、实验内容 1、分组配制细菌水解淀粉实验、糖发酵实验、甲基红实验和 VP 实验培养基 2、每组制备玻璃珠无菌水(50ml)三角瓶 2 个。 3．每组制备无菌水试管(4.5ml/管)10 支。 4．每组包 9cm 培养皿 6 付。 5．每组包装 1ml 吸管 5 支，玻璃刮铲 4 个。 6、对上述物品进行灭菌处理。 教学手段与方法： 示范：试管口和三角瓶包扎方法、棉塞的制作、移液管的包扎等 讲解：培养基配制的一般程序、高压灭菌器的使用方法、要求和注意事项 实验过程中随时纠正学生错误动作
思考题、讨论题、作业：1.培养基配好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养菌是无菌的？2．加压蒸汽灭菌的原理是什么？是否只要压力表上的指针指到所需的压力时就能达到所需灭菌温度？为什么？3.干热灭菌应该注意哪些事项？4.管口、瓶口为什么要用棉塞？能否用木塞或棉皮塞代替？为什么？参考资料（含参考书、文献等）：1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社.2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社4、微生物学.沈萍.高等教育出版社8
8 思考题、讨论题、作业： 1．培养基配好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养菌是无菌的？ 2．加压蒸汽灭菌的原理是什么？是否只要压力表上的指针指到所需的压力时就能达到所需灭菌温 度？为什么？ 3．干热灭菌应该注意哪些事项？ 4．管口、瓶口为什么要用棉塞？能否用木塞或棉皮塞代替？为什么？ 参考资料（含参考书、文献等）： 1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社. 2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社. 3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社. 4、微生物学.沈萍. 高等教育出版社
微生物学实验课程教案授课题目（教学章节或主题）：授课类型实验课授课时间第6周实验五、微生物无菌接种技术、微生物分离和纯化技术教学目标或要求：学习和掌握微生物无菌接种技术；学习和掌握超净工作台的使用方法：学习和掌握涂布分离和划线分离等微生物分离纯化技术。教学内容（包括基本内容、重点、难点）：一、实验材料1、苏云金芽孢杆菌斜面菌种2、超净工作台、75%酒精、酒精棉球、接种环、酒精灯、标签。3、牛肉膏蛋白陈琼脂培养基（斜面、液体试管）4、4.5ml/支无菌水、玻璃珠、无菌移液管、涂布棒。5、牛肉膏蛋白陈琼脂培养基平板、PDA平板6、腐烂水果样品、土样样品二、实验内容1、苏云金芽孢杆菌进行斜面接种2、稀释涂布法分离土壤微生物。3、划线分离法从腐烂水果中分离酵母和霉菌。教学手段与方法：示范：无菌接种操作、涂布法、划线法。讲解：注意事项实验过程中随时纠正学生错误动作思考题、讨论题、作业：绘图记录观察结果9
9 微生物学实验课程教案 授课题目（教学章节或主题）： 授课类型 实验课 实验五、微生物无菌接种技术、微生物分离和纯化技术 授课时间 第6周 教学目标或要求： 学习和掌握微生物无菌接种技术；学习和掌握超净工作台的使用方法；学习和掌握涂布分离和 划线分离等微生物分离纯化技术。 教学内容（包括基本内容、重点、难点）： 一、实验材料 1、苏云金芽孢杆菌斜面菌种 2、超净工作台、75%酒精、酒精棉球、接种环、酒精灯、标签。 3、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（斜面、液体试管） 4、4.5ml/支无菌水、玻璃珠、无菌移液管、涂布棒。 5、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板、PDA 平板 6、腐烂水果样品、土样样品 二、实验内容 1、苏云金芽孢杆菌进行斜面接种 2、稀释涂布法分离土壤微生物。 3、划线分离法从腐烂水果中分离酵母和霉菌。 教学手段与方法： 示范：无菌接种操作、涂布法、划线法。 讲解：注意事项 实验过程中随时纠正学生错误动作 思考题、讨论题、作业： 绘图记录观察结果
思考题：如何确保无菌接种能够成功？划线分离时应该怎样操作才正确？参考资料（含参考书、文献等）：1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社.2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社4、微生物学.沈萍。高等教育出版社.10
10 思考题：如何确保无菌接种能够成功？划线分离时应该怎样操作才正确？ 参考资料（含参考书、文献等）： 1、微生物实验指导.黄秀梨.高等教育出版社. 2、微生物学教程.周德庆著.高等教育出版社. 3、微生物学.黄秀梨.高等教育出版社. 4、微生物学.沈萍. 高等教育出版社