实验五 细胞膜的通透性 College of Life Science and Technology,XINJIANG Univercity
实验 五 细胞膜的通透性 College of Life Science and Technology, XINJIANG Univercity
一、 实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞 的难易程度和速度
一、实验目的 ▪ 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞 的难易程度和速度
02 02 二、实验原理 疏水分子 N2 benzene 将红细胞放置在各种等渗溶液中， H20 根据红细胞质膜对各种溶质的渗透 不带电荷的极性 urea 性不同，有的溶质可渗入，有的溶 小分子 glycero 质不能渗入。即使能渗入，速度也 有差异。可通过观察红细胞溶血现 不带电荷的极 glucose 象时间的不同来记录渗入速度。血 性大分子 sucrose 红蛋白从红细胞中逸出的现象称为 H',Na" 溶血现象。渗入红细胞的溶质能提 HCO3,K 离子 高红细胞渗透压，使水进入红细胞， Ca2,CI Mg2+ 引起溶血及细胞膜破裂。此时光线 较容易通过溶液，使溶液呈现透明 即为溶血。由于溶质透入速度不同， 脂双分 溶血时间也不同。因此，可通过溶 子层 血现象来测量各种物质通透性的差 溶质通过简单扩散的跨膜运输 别
溶质通过简单扩散的跨膜运输 将红细胞放置在各种等渗溶液中， 根据红细胞质膜对各种溶质的渗透 性不同，有的溶质可渗入，有的溶 质不能渗入。即使能渗入，速度也 有差异。可通过观察红细胞溶血现 象时间的不同来记录渗入速度。血 红蛋白从红细胞中逸出的现象称为 溶血现象。渗入红细胞的溶质能提 高红细胞渗透压，使水进入红细胞， 引起溶血及细胞膜破裂。此时光线 较容易通过溶液，使溶液呈现透明 即为溶血。由于溶质透入速度不同， 溶血时间也不同。因此，可 通过溶 血现象来测量各种物质通透性的差 别。 二、实验原理
·等渗溶液：又称等张溶液。渗透量相当于血浆渗透量的溶液。 等张溶液是张力相等，等渗溶液是渗透压相等。 ·等渗：与血浆渗透压相等的溶液，属于物理化学概念。 ·等张：渗透压与红细胞膜张力相等的溶液，属生物学概念。 如果分子不能透过细胞膜时，等渗和等张相等。 ·低渗还是高渗还是等渗是根据溶液与血浆的浓度比较而方的， 与血浆渗透压相等的溶液称等渗溶液。如5%的葡萄糖溶液或 0.9%的氯化钠溶液。比血浆渗透压低的溶液称低渗溶液。如蒸 馏水等，血浆在低渗溶液中可发生水肿，甚至破裂。比血浆渗透 压高的溶液称高渗溶液，如10%的葡萄糖液或50%葡萄糖液等， 细胞在高渗溶液可发生脱水而皱缩
• 等渗溶液：又称等张溶液。渗透量相当于血浆渗透量的溶液。 等张溶液是张力相等,等渗溶液是渗透压相等。 • 等渗：与血浆渗透压相等的溶液，属于物理化学概念。 • 等张：渗透压与红细胞膜张力相等的溶液，属生物学概念。 如果分子不能透过细胞膜时，等渗和等张相等。 • 低渗还是高渗还是等渗是根据溶液与血浆的浓度比较而方的， 与血浆渗透压相等的溶液称等渗溶液。如5%的葡萄糖溶液或 0.9%的氯化钠溶液。比血浆渗透压低的溶液称低渗溶液。如蒸 馏水等，血浆在低渗溶液中可发生水肿,甚至破裂。比血浆渗透 压高的溶液称高渗溶液，如10%的葡萄糖液或50%葡萄糖液等， 细胞在高渗溶液可发生脱水而皱缩
三、实验用品 1、器材 50mlL小烧杯，10mL移液管，试管(1~10 cm),试管架。 2、试剂 0.17mol/L氯化钠；0.17mol/L氯化铵； 福 0.17mo1/L醋酸铵；0.17mol/L硝酸钠；0.12 mo/L草酸铵；0.12mo1/L硫酸钠；0.32mol/ L葡萄糖；0.32mol/L甘油；0.32mol/L乙醇； 0.32mo1/L丙酮。 3、材料：羊血
三、实验用品 ▪ 1、器材 50 mL 小烧杯，10 mL 移液管，试管（1～10 cm），试管架。 ▪ 2、试剂 0.17 mol / L氯化钠；0.17 mol / L氯化铵； 0.17 mol / L醋酸铵；0.17 mol / L硝酸钠；0.12 mol / L草酸铵；0.12 mol / L硫酸钠；0.32 mol / L葡萄糖；0.32 mol / L甘油；0.32 mol / L乙醇； 0.32 mol / L丙酮。 ▪ 3、材料：羊血
四、实验方法 (一)羊血细胞悬液 取50mL小烧杯一只，加一份羊血和10份0.17 mol/儿氯化钠溶液，形成一种不透明的红色液体， 此即稀释的羊血。 (二)溶血现象 取试管一支，加入5mL蒸馏水，再加入3滴稀释 的羊血，注意观察溶液颜色的变化，由不透明的 晶红色逐渐澄清，说明红细胞发生破裂造成100% 红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液
四、实验方法 ▪ （一）羊血细胞悬液 取50 mL 小烧杯一只，加一份羊血和10份0.17 mol/L氯化钠溶液，形成一种不透明的红色液体， 此即稀释的羊血。 ▪ （二）溶血现象 取试管一支，加入5mL蒸馏水，再加入3滴稀释 的羊血，注意观察溶液颜色的变化，由不透明的 红色逐渐澄清，说明红细胞发生破裂造成100％ 红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液
(三)羊红细胞的渗透性 1.取试管一支，加入0.17mo1/L氯化钠溶液5 mL，再加入3滴稀释的羊血，轻轻摇动，注意颜 色有无变化？有无溶血现象？ 2.取试管一支，加入0.17mol/L氯化铵溶液5 mL,再加入3滴稀释的羊血，轻轻摇动，注意颜 色有无变化？有无溶血现象？若发生溶血，记下 时间（自加入稀释羊血到溶液变成红色透明澄清 所需时间)。 3.分别在另外8种溶液中进行同样实验。步骤同 2
（三）羊红细胞的渗透性 ▪ 1. 取试管一支，加入0.17 mol / L氯化钠溶液5 mL，再加入3滴稀释的羊血，轻轻摇动，注意颜 色有无变化？有无溶血现象？ ▪ 2. 取试管一支，加入0.17 mol / L氯化铵溶液5 mL，再加入3滴稀释的羊血，轻轻摇动，注意颜 色有无变化？有无溶血现象？若发生溶血，记下 时间（自加入稀释羊血到溶液变成红色透明澄清 所需时间）。 ▪ 3. 分别在另外8种溶液中进行同样实验。步骤同 2
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五、实验结果 将观察到的现象列入下表，对实验结果进行比较和分析 试管编号 是否溶血 时间 结果分析 1.10ml氯化钠+1ml稀释鸡血 2.10ml氯化铵+1ml稀释鸡血 3.10ml醋酸铵+1ml稀释鸡血 4.10ml硝酸钠+1ml稀释鸡血 5.10ml草酸铵+1ml稀释鸡血 6.10ml硫酸钠+1ml稀释鸡血 7.10ml葡萄糖+1ml稀释鸡血 8.10ml甘油+1ml稀释鸡血 9.10ml乙醇+1ml稀释鸡血 10.10ml丙酮+1ml稀释鸡血
试管编号 是否溶血 时间 结果分析 1. 10ml氯化钠+1ml稀释鸡血 2. 10ml氯化铵+1ml稀释鸡血 3. 10ml醋酸铵+1ml稀释鸡血 4. 10ml硝酸钠+1ml稀释鸡血 5. 10ml草酸铵+1ml稀释鸡血 6. 10ml硫酸钠+1ml稀释鸡血 7. 10ml葡萄糖+1ml稀释鸡血 8. 10ml甘油+1ml稀释鸡血 9. 10ml乙醇+1ml稀释鸡血 10. 10ml丙酮+1ml稀释鸡血 五、实验结果 将观察到的现象列入下表，对实验结果进行比较和分析
六、注意事项 1、各管中加入的试剂量要一致，加入的血量也 要一致。 2、加入的血量可以少些，但不能多，否则影响 观察。 3、 试管按编号的顺序加入血，应有一定的时间 间隔，加好一管，计时，混匀后，观察完， 思 再加下一管，再计时，再混匀后观察。 虚
六、注意事项 ▪ 1、各管中加入的试剂量要一致，加入的血量也 要一致。 ▪ 2、加入的血量可以少些，但不能多，否则影响 观察。 ▪ 3、试管按编号的顺序加入血，应有一定的时间 间隔，加好一管，计时，混匀后，观察完， 再加下一管，再计时，再混匀后观察