四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 第六章免疫沉淀试验 华西医院临床免疫室 武永康 2018.3.7
第六章 免疫沉淀试验 华西医院临床免疫室 武永康 2018.3.7
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 主要内容 沉淀反应的原理以及特点 液体內沉淀试验原理;抗原抗体稀释法、免 疫浊度测定原理及影响因素 凝胶内沉淀试验,包括单向、双向扩散试验 的原理、结果判断、结果测定以及影响因素 沉淀反应的应用
主要内容 • 沉淀反应的原理以及特点 • 液体内沉淀试验原理;抗原抗体稀释法、免 疫浊度测定原理及影响因素 • 凝胶内沉淀试验,包括单向、双向扩散试验 的原理、结果判断、结果测定以及影响因素 • 沉淀反应的应用
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 免疫沉淀试验 定义: 可溶性抗原与相应的抗体在适当条件 下发生特异性结合所出现的沉淀现象,称 为沉淀反应( precipitation)
免疫沉淀试验 定义: 可溶性抗原与相应的抗体在适当条件 下发生特异性结合所出现的沉淀现象,称 为沉淀反应(precipitation)
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 网格状结构 Antigen Antibod
网格状结构 Antigen Antibody
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 沉淀反应的特点 第一阶段 抗原抗体特异性结合,快速形成小的可溶性免疫复合 物,肉眼不可见。 可采用免疫比浊法测定(速率比浊)。 第二阶段 形成大的可见的免疫复合物,约需几十分钟至数小时 或数天,通常可见沉淀线、沉淀环。 采用终点比浊法进行测定
沉淀反应的特点 第一阶段 • 抗原抗体特异性结合,快速形成小的可溶性免疫复合 物,肉眼不可见。 • 可采用免疫比浊法测定(速率比浊)。 第二阶段 • 形成大的可见的免疫复合物,约需几十分钟至数小时 或数天,通常可见沉淀线、沉淀环。 • 采用终点比浊法进行测定
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY (一)液体内的沉淀试验 ·絮状沉淀试验 免疫浊度测定 (二)凝胶内的沉淀试验 ·单向扩散试验(试管法、平板法) 双向扩散试验(试管法、平板法)
(一) 液体内的沉淀试验 • 絮状沉淀试验 • 免疫浊度测定 (二) 凝胶内的沉淀试验 • 单向扩散试验(试管法、平板法) • 双向扩散试验(试管法、平板法)
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 、液体内的沉淀试验 (一).环状沉淀试验( Ring precipitation) 原理:是将已知抗血清和待检抗原反应,在 液面交界处特异结合形成白色环状沉淀物
(一). 环状沉淀试验(Ring precipitation) • 原理:是将已知抗血清和待检抗原反应,在 液面交界处特异结合形成白色环状沉淀物。 一、液体内的沉淀试验
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY (二).絮状沉淀试验( flocculation) 原理:是将抗原抗体溶液混合在一起,在电 解质存在下,抗原与抗体结合形成絮状沉淀 物。 该法受抗原抗体比例的直接影响
(二). 絮状沉淀试验(flocculation) • 原理:是将抗原抗体溶液混合在一起,在电 解质存在下,抗原与抗体结合形成絮状沉淀 物。 • 该法受抗原抗体比例的直接影响
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 抗原抗体最适比例测定 (1)抗原稀释法 (2)抗体稀释法 (3)方阵滴定法
抗原抗体最适比例测定 (1)抗原稀释法 (2)抗体稀释法 (3)方阵滴定法
四川大华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY (三).免疫浊度测定 (immunoturbidimetry) 可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生 特异性结合,形成抗原抗体复合物,使反应液 出现浊度,将现代化光学测量仪器与自动化分 析检测系统相结合,对液体介质中的各种微量 抗原、抗体、药物及其他小分子半抗原物质进 行定量测定
(三). 免疫浊度测定 (immunoturbidimetry) 可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生 特异性结合,形成抗原抗体复合物,使反应液 出现浊度,将现代化光学测量仪器与自动化分 析检测系统相结合,对液体介质中的各种微量 抗原、抗体、药物及其他小分子半抗原物质进 行定量测定