第三章 常见食品添加剂的测定 食品添加剂的种类繁多。(22类)同一添加 剂又有不同的分析方法,就具体的分析方法 (食品不同,含量不同)甚多。但归纳起来主 要有:滴定法、比色法、紫外分光光度法、荧 光法、离子选择性电极法、色谱法(气相、液 相、薄层) 食品中添加剂的测定与食品添加剂的测定的 方法又有区别,一个需要进行(前处理)分离, 一个则不需要,加之含量差异,分析方法有的 采用不同的分析方法
第三章 常见食品添加剂的测定 食品添加剂的种类繁多。(22类)同一添加 剂又有不同的分析方法,就具体的分析方法 (食品不同,含量不同)甚多。但归纳起来主 要有:滴定法、比色法、紫外分光光度法、荧 光法、离子选择性电极法、色谱法(气相、液 相、薄层) 食品中添加剂的测定与食品添加剂的测定的 方法又有区别,一个需要进行(前处理)分离, 一个则不需要,加之含量差异,分析方法有的 采用不同的分析方法
• 一、防腐剂的测定 • (一)碱滴定法测定苯甲酸 • 1、原理 • 样品加入饱和NaCI,在酸性条件下,用乙醚提取, 去乙醚溶于中性乙醇,用碱滴定。 • 2、方法 • (1)取样75g + 7.5g NaCI →300ml烧杯溶解 • (2)加入70ml饱和NaCI,用10%NaOH滴至碱性 • (3)定溶250ml,摇、置2h • (4)过滤,取滤液100ml,置分液漏斗中,用1:1 HCI滴至酸性。用190ml乙醚分三次抽提,静置。 • (5)放出乙醚层,用水洗至中性。放入锥形瓶中,回 收乙醚,加入50ml中性乙醇,10ml水,3滴酚酞,用 0.05mol/LNaOH滴至终点。 •
• 一、防腐剂的测定 • (一)碱滴定法测定苯甲酸 • 1、原理 • 样品加入饱和NaCI,在酸性条件下,用乙醚提取, 去乙醚溶于中性乙醇,用碱滴定。 • 2、方法 • (1)取样75g + 7.5g NaCI →300ml烧杯溶解 • (2)加入70ml饱和NaCI,用10%NaOH滴至碱性 • (3)定溶250ml,摇、置2h • (4)过滤,取滤液100ml,置分液漏斗中,用1:1 HCI滴至酸性。用190ml乙醚分三次抽提,静置。 • (5)放出乙醚层,用水洗至中性。放入锥形瓶中,回 收乙醚,加入50ml中性乙醇,10ml水,3滴酚酞,用 0.05mol/LNaOH滴至终点。 •
• (二)苯甲酸(钠)添加剂的测定 • ①要求:含量(%)≥99.5 (苯甲酸钠≥99)(铅计)重金属% ≤0.001. • ②鉴别:1g样+20ml 40g/LNaOH,加1滴100g/L FeCl3生成赭色↓ • 加HCl(1:3)白色↓(黄色火焰钠) • ③测定 • A. 苯甲酸 • 称样0.25g加入中性50%乙醇溶液25ml,2滴酚酞,用NaOH滴 至粉红色 • b苯甲酸钠 • 提要:HCl+苯甲酸钠苯甲酸;不溶于水,易溶于乙醚,用乙醚 萃取生成的苯甲酸,排除干扰。据用HCl的量计算苯甲酸钠含 量称样1.5g+25ml水+50ml乙醚,10滴溴酚蓝;用0.5M HCl滴定,当 水层显淡绿色为终点(黄—紫蓝,pH=3.0-4.6) • (三)气相色谱法测定苯甲酸、山梨酸、及其盐类 (P147,151,152) • 液相色谱法测定苯甲酸、山梨酸、糖精(P152-154)
• (二)苯甲酸(钠)添加剂的测定 • ①要求:含量(%)≥99.5 (苯甲酸钠≥99)(铅计)重金属% ≤0.001. • ②鉴别:1g样+20ml 40g/LNaOH,加1滴100g/L FeCl3生成赭色↓ • 加HCl(1:3)白色↓(黄色火焰钠) • ③测定 • A. 苯甲酸 • 称样0.25g加入中性50%乙醇溶液25ml,2滴酚酞,用NaOH滴 至粉红色 • b苯甲酸钠 • 提要:HCl+苯甲酸钠苯甲酸;不溶于水,易溶于乙醚,用乙醚 萃取生成的苯甲酸,排除干扰。据用HCl的量计算苯甲酸钠含 量称样1.5g+25ml水+50ml乙醚,10滴溴酚蓝;用0.5M HCl滴定,当 水层显淡绿色为终点(黄—紫蓝,pH=3.0-4.6) • (三)气相色谱法测定苯甲酸、山梨酸、及其盐类 (P147,151,152) • 液相色谱法测定苯甲酸、山梨酸、糖精(P152-154)
• 二、抗氧化剂的测定 • 1、 BHA(叔丁基对羟基茴香醚)的测定 • 样品经石油醚萃取加入72%乙醇,使BHA转 入乙醇相中,再与2.6—二氯醌氯亚胺—硼砂 (缓冲)溶液的显色剂反应生成蓝色化合物。在 λ=620nm处测吸光度A • 2、 BHT(2.6—二叔丁基对甲酚)的测定 • 用水蒸气法将BHT分离出来,溶解于甲醇中 (甲醇液接收)加入邻联二茴香胺(另加亚硝酸 钠溶液)生成橙红色化合物,用氯仿萃取,在 λ=520nm处测吸光度A • 3、可用气相色谱法测BHA、BHT
• 二、抗氧化剂的测定 • 1、 BHA(叔丁基对羟基茴香醚)的测定 • 样品经石油醚萃取加入72%乙醇,使BHA转 入乙醇相中,再与2.6—二氯醌氯亚胺—硼砂 (缓冲)溶液的显色剂反应生成蓝色化合物。在 λ=620nm处测吸光度A • 2、 BHT(2.6—二叔丁基对甲酚)的测定 • 用水蒸气法将BHT分离出来,溶解于甲醇中 (甲醇液接收)加入邻联二茴香胺(另加亚硝酸 钠溶液)生成橙红色化合物,用氯仿萃取,在 λ=520nm处测吸光度A • 3、可用气相色谱法测BHA、BHT
• 三、发色剂—亚硝酸盐、硝酸盐的测定 • 1、亚硝酸盐的测定(P177) • 样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后在弱酸性条件下 (HCl)亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化。 • 与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色染料。 • λ=550nm处测吸光度A • 2、硝酸盐的测定(镉柱法)(P179-180) • 样品经用蛋白质沉淀剂(亚铁氰化钾+乙酸锑)沉淀蛋 白质,除去上层脂肪。过滤后(用饱和硼砂溶液作提取 剂)得提取液。通过镉柱在氯化胺缓冲液中 • NO3 - +Cd = CdO+NO2 - 用盐酸奈乙二胺法(比色)测 NO2 -总量 • 减去未经镉柱还原前的NO2 -,则得由NO3 -还原产生的 NO2-量,乘以换算系数1.232得硝酸钠(NaNO3)含量
• 三、发色剂—亚硝酸盐、硝酸盐的测定 • 1、亚硝酸盐的测定(P177) • 样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后在弱酸性条件下 (HCl)亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化。 • 与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色染料。 • λ=550nm处测吸光度A • 2、硝酸盐的测定(镉柱法)(P179-180) • 样品经用蛋白质沉淀剂(亚铁氰化钾+乙酸锑)沉淀蛋 白质,除去上层脂肪。过滤后(用饱和硼砂溶液作提取 剂)得提取液。通过镉柱在氯化胺缓冲液中 • NO3 - +Cd = CdO+NO2 - 用盐酸奈乙二胺法(比色)测 NO2 -总量 • 减去未经镉柱还原前的NO2 -,则得由NO3 -还原产生的 NO2-量,乘以换算系数1.232得硝酸钠(NaNO3)含量
四、漂白剂二氧化硫及亚硫酸盐的测定 • 测定方法有比色法、滴定法、色谱法 • 盐酸副玫瑰苯胺比色法(P170) A.亚硫酸盐与四氯汞钠反应生成络合物 [HgCl2SO3] 2- • Na2HgCl4+SO2+H2O→[HgCl2SO3] 2- • B.与甲醛、对品红作用生成紫红色络合物- • 聚玫瑰红甲基磺酸 • C. λ=550nm处测A
四、漂白剂二氧化硫及亚硫酸盐的测定 • 测定方法有比色法、滴定法、色谱法 • 盐酸副玫瑰苯胺比色法(P170) A.亚硫酸盐与四氯汞钠反应生成络合物 [HgCl2SO3] 2- • Na2HgCl4+SO2+H2O→[HgCl2SO3] 2- • B.与甲醛、对品红作用生成紫红色络合物- • 聚玫瑰红甲基磺酸 • C. λ=550nm处测A
• 五、食品合成色素的测定 • 测定方法主要有:薄层层析法、高效液相 色谱法 • 薄层层析法 • 在酸性条件下,用聚酰胺吸附水溶性合成 色素,而与天然色素蛋白质、脂肪、淀粉 等分离。 • 在碱性条件下,用适当溶液(如乙醇—氨) 将其解吸。 • 用薄层层析法分离鉴别,与标准比较定性, 测A定量
• 五、食品合成色素的测定 • 测定方法主要有:薄层层析法、高效液相 色谱法 • 薄层层析法 • 在酸性条件下,用聚酰胺吸附水溶性合成 色素,而与天然色素蛋白质、脂肪、淀粉 等分离。 • 在碱性条件下,用适当溶液(如乙醇—氨) 将其解吸。 • 用薄层层析法分离鉴别,与标准比较定性, 测A定量
• 薄层层析分离及定性 • a薄层板:1.6g聚酰胺+0.4g可溶性淀粉+2g硅胶 G+15ml水研匀、铺在玻璃板上(0.3mm厚)凉干, 80℃1h干燥器中 • b点样:用微量注射器或毛细管将样液点于薄层板上 (离底2cm左右2cm线宽<2mm)成一条底边的线 • c展开:层析缸内放入展开剂(如苋菜红、胭脂红用 甲醇:乙二胺:氨水=10:3:4) • 将薄层板下端浸入溶剂0.5-1cm左右,放约1h(色素 明显分开),取出晾干 • d比移值Rf的测定:可用纸层析(层析纸)测定方法 基本同上a、b、c • Rf= • Rf=与标准样液Rf比较定性为何种色素 溶剂前沿距离 斑点移动距离
• 薄层层析分离及定性 • a薄层板:1.6g聚酰胺+0.4g可溶性淀粉+2g硅胶 G+15ml水研匀、铺在玻璃板上(0.3mm厚)凉干, 80℃1h干燥器中 • b点样:用微量注射器或毛细管将样液点于薄层板上 (离底2cm左右2cm线宽<2mm)成一条底边的线 • c展开:层析缸内放入展开剂(如苋菜红、胭脂红用 甲醇:乙二胺:氨水=10:3:4) • 将薄层板下端浸入溶剂0.5-1cm左右,放约1h(色素 明显分开),取出晾干 • d比移值Rf的测定:可用纸层析(层析纸)测定方法 基本同上a、b、c • Rf= • Rf=与标准样液Rf比较定性为何种色素 溶剂前沿距离 斑点移动距离
• 定量测定 • A 刮下色斑(各条状) • 移入漏斗(G3砂芯)用丙酮—氨水液解析抽 滤 • B 用柠檬酸(20%)调pH=6 • C 定容 • D 在各色素λmax处测A,如柠檬黄428nm,胭 脂红508nm • E 作标准曲线 • F 计算 色素(mg/Kg,L)= CV/W • c-从标准曲线上查出色素含量μg/ml,v—提取液 总体积,w—样品质量(g)
• 定量测定 • A 刮下色斑(各条状) • 移入漏斗(G3砂芯)用丙酮—氨水液解析抽 滤 • B 用柠檬酸(20%)调pH=6 • C 定容 • D 在各色素λmax处测A,如柠檬黄428nm,胭 脂红508nm • E 作标准曲线 • F 计算 色素(mg/Kg,L)= CV/W • c-从标准曲线上查出色素含量μg/ml,v—提取液 总体积,w—样品质量(g)
作业 1、食品添加剂的测定方法有哪些? 2、防腐剂苯甲酸(钠)的测定方法有哪些? 3、简述抗氧化剂BHA(叔丁基对羟基茴香醚)、 BHT(2.6—二叔丁基对甲酚)的测定方法。 4、简述发色剂—亚硝酸盐、硝酸盐的测定方法。 5、简述漂白剂二氧化硫及亚硫酸盐的测定方法。 6、简述食品合成色素的测定方法
作业 1、食品添加剂的测定方法有哪些? 2、防腐剂苯甲酸(钠)的测定方法有哪些? 3、简述抗氧化剂BHA(叔丁基对羟基茴香醚)、 BHT(2.6—二叔丁基对甲酚)的测定方法。 4、简述发色剂—亚硝酸盐、硝酸盐的测定方法。 5、简述漂白剂二氧化硫及亚硫酸盐的测定方法。 6、简述食品合成色素的测定方法