五.离子对色谱法 on pair chromatography, IPC 分正相和反相离子对色谱法。 反相离子对色谱法 ■将离子对试剂加入到含水流动相中,被分析组分的 离子在流动相中与离子对试剂的反离子(或对离子, counter ion)生成不荷电的中性离子对,增加溶质 与非极性固定相间的疏水性缔合作用,使分配系数 增加,改善分离效果。 RP-PC用于分离可离子化(有机酸、碱、盐)或离 子型化合物
五. 离子对色谱法ion pair chromatography, IPC 分正相和反相离子对色谱法。 反相离子对色谱法 将离子对试剂加入到含水流动相中，被分析组分的 离子在流动相中与离子对试剂的反离子（或对离子， counter ion）生成不荷电的中性离子对，增加溶质 与非极性固定相间的疏水性缔合作用，使分配系数 增加，改善分离效果。 RP-IPC用于分离可离子化（有机酸、碱、盐）或离 子型化合物
1.离子对模型 ■以有机碱(B)为例。调节流动相pH,使碱 转变为正离子BH+形式,则BH+与流动相中 离子对试剂(烷基磺酸盐)的反离子RSO3- 生成不荷电的中性离子对,此中性离子对在 固定相和流动相间达到分配平衡。 B+H+、BH+ RSO3Na、RsO3+Na BH++RSo3+(BH+. RSO3- )me/3 (BH+. RSO3-)s
1．离子对模型 以有机碱（B）为例。调节流动相pH，使碱 转变为正离子BH+形式，则BH+与流动相中 离子对试剂（烷基磺酸盐）的反离子RSO3- 生成不荷电的中性离子对，此中性离子对在 固定相和流动相间达到分配平衡。 B + H+ ⇌ BH+ RSO3Na ⇌ RSO3- + Na+ BH+ + RSO3- ⇌ (BH+ ∙ RSO3- )m ⇌ (BH+ ∙ RSO3- )s
以通式表示: (B*)m+(Am(B*. A)me(B+. A)s B+:溶质离子,A:离子对试剂反离子,m:表 示流动相,S:表示固定相 溶质离子B在固定相和流动相间的分配系数: B+·As=IBt]n[AJ [B·A B [B+ [A]m=EBA[AIm EA为萃取常数。溶质的分配系数决定于离子 对试剂的浓度和萃取常数。萃取常数又与固定 相、离子对试剂和溶质的性质、温度有关
以通式表示： (B+ )m + (A- )m ⇌ (B+ ∙ A- )m ⇌ (B+ ∙ A- )s B+ : 溶质离子，A- :离子对试剂反离子，m: 表 示流动相，s:表示固定相 溶质离子B在固定相和流动相间的分配系数： KB = = ∙ [A- ]m = EBA [A- ]m EBA为萃取常数。溶质的分配系数决定于离子 对试剂的浓度和萃取常数。萃取常数又与固定 相、离子对试剂和溶质的性质、温度有关。 m s B B A [ ] [ ] + + − m m s B A B A [ ] [ ] [ ] + − + −
2影响容量因子的因素 1)离子对试剂的种类: 离子对试剂的碳链长度增加,溶质的k增大; 分析酸类或带负电荷的物质时,一般用季铵盐作 离子对试剂,如四丁基铵磷酸盐,溴化十六烷基 三甲基铵等; 分析碱类或带正电荷的物质时,一般用烷基磺酸 盐作离子对试剂,如正戊烷基、正己烷基、正庚 烷基磺酸钠等
2.影响容量因子的因素 1) 离子对试剂的种类： 离子对试剂的碳链长度增加，溶质的k增大； 分析酸类或带负电荷的物质时，一般用季铵盐作 离子对试剂，如四丁基铵磷酸盐，溴化十六烷基 三甲基铵等； 分析碱类或带正电荷的物质时，一般用烷基磺酸 盐作离子对试剂，如正戊烷基、正己烷基、正庚 烷基磺酸钠等
2)离子对试剂的浓度: 低浓度范围内,溶质的k随离子对试剂的 浓度升高而增大,最后趋于恒定 对长链离子对试剂(如正癸烷磺酸盐) 当离子对试剂的浓度超过一定值时,k反 而减少,溶质的k出现极大值现象。这是 离子对试剂形成胶束的结果 3)流动相pH: 对弱酸、弱碱的k影响较大
2) 离子对试剂的浓度： 低浓度范围内，溶质的k随离子对试剂的 浓度升高而增大，最后趋于恒定。 对长链离子对试剂（如正癸烷磺酸盐）， 当离子对试剂的浓度超过一定值时，k 反 而减少，溶质的k出现极大值现象。这是 离子对试剂形成胶束的结果。 3) 流动相pH: 对弱酸、弱碱的k影响较大
六.手性色谱法 chira chromatography 药物对映体具有不同的药动学、药效学和毒 理学 DL-合霉素的疗效为D-氯霉素的一半; ■普萘洛尔( propranolol)L-异构体的药物活 性比D-异构体大100倍;
六．手性色谱法chiral chromatography 药物对映体具有不同的药动学、药效学和毒 理学。 DL-合霉素的疗效为D-氯霉素的一半； 普萘洛尔（propranolol）L-异构体的药物活 性比D-异构体大100倍；
1.手性药物分离(拆分)分析的作用 ■对某些手性药物进行对映体的纯度检查; 探索血药浓度与临床疗效的关系--生物体 液中药物对映体的分离分析; 在研制手性药物过程中,分别评价单个对 映体的效价、毒性、不良反应及药物动力 学性质
1．手性药物分离(拆分)分析的作用 对某些手性药物进行对映体的纯度检查； 探索血药浓度与临床疗效的关系----生物体 液中药物对映体的分离分析； 在研制手性药物过程中，分别评价单个对 映体的效价、毒性、不良反应及药物动力 学性质
2.手性HPLc拆分法分类 包括柱前手性衍生试剂法( chiral derivatization reagent,CDR),手性流动相法( chiral mobile phase,CMP)和手性固定相法( chiral stationary phase, CSP) 1)CDR法 对映异构体与光学纯手性试剂反应,生成相应的非 对映异构体。采用普通固定相分离。 (R)-SA→(R)SE-(R)-SA (R)-SE+ (S)-SA-(R)-SE-(S)-SA
2．手性HPLC拆分法分类 包括柱前手性衍生试剂法（chiral derivatization reagent, CDR）, 手性流动相法（chiral mobile phase, CMP）和手性固定相法（chiral stationary phase, CSP）. 1）CDR法 对映异构体与光学纯手性试剂反应，生成相应的非 对映异构体。采用普通固定相分离。 (R) —SA → (R)—SE—(R) —SA （R）—SE + (S) —SA → (R)—SE—(S) —SA
2)CMP法 常用手性添加剂: (1)配基交换型手性添加剂: ■常用手性配基为光学活性氦基酸及其衍生 物的二价金属离子螯合物。它们和手性 药物消旋体形成非对映异构配位络合物对。 例如,分离DL-色氨酸手性异构体,可在 流动相中加入L-苯丙氨酸-Cu2+作为手性 添加剂
2）CMP法 常用手性添加剂： （1）配基交换型手性添加剂： 常用手性配基为光学活性氨基酸及其衍生 物的二价金属离子螯合物。它们 和手性 药物消旋体形成非对映异构配位络合物对。 例如，分离DL-色氨酸手性异构体，可在 流动相中加入L-苯丙氨酸-Cu2+作为手性 添加剂
(2)环糊精类添加剂( cyclodextrins,CD) 结构特点 环状低聚糖,外部边缘有许多羟基,内部为相对疏 水的空腔,每个葡萄糖单元有5个手性碳原子。 常用:β-CD,y-CD以及它们的各种改性CD (3)手性离子对络合剂 带电手性药物与手性离子对络合成电中性非对映 体络合物对。 常用手性离子对络合剂: (+)-10-樟脑磺酸,奎宁,奎尼丁等
（2）环糊精类添加剂（cyclodextrins, CD） 结构特点： 环状低聚糖，外部边缘有许多羟基，内部为相对疏 水的空腔，每个葡萄糖单元有5个手性碳原子。 常用：β-CD, γ-CD以及它们的各种改性CD。 （3）手性离子对络合剂 带电手性药物与手性离子对络合成电中性非对映 体络合物对。 常用手性离子对络合剂： （+）-10-樟脑磺酸，奎宁，奎尼丁等