普通高等教育课程电子教案系列 naab DUT §9.1吸光光度法基本原理 第九章 吸光光度法§92光度计及其基本部件 甲m3显色反应与条件的选择 §9.4吸光度测量条件的选择 §9.5吸光光度法的应用 §9.6紫外吸收光谱法简介
2021年1月27日8时3 分 第九章 吸光光度法 §9.1 吸光光度法基本原理 §9.2 光度计及其基本部件 §9.3 显色反应与条件的选择 §9.4 吸光度测量条件的选择 §9.5 吸光光度法的应用 §9.6 紫外吸收光谱法简介 spectrophotometry
大连理大学 Anal Cheme 岛津紫外可见分光光度计 UV-2501PC 2021年1月27日8时3 分 页
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大连理大学 Anal Cheme 吸光光度法概述 吸光光度法:基于物质对光的选择性吸收的分析方法 比色法 可见分光光度法( visible spectrophotometry 紫外分光光度法( ultraviolet spectrophotometry) 其他 画画『 Fe(2+)+邻菲罗啉 2021年1月27日8时3 分 页
2021年1月27日8时3 分 吸光光度法概述 吸光光度法：基于物质对光的选择性吸收的分析方法 比色法 可见分光光度法（visible spectrophotometry） 紫外分光光度法（ultraviolet spectrophotometry） 其他
大连理大学 Anal Cheme 特点: (1)具有较高的灵敏度,适用于微量组分的测定。 (2)通常所测试液的浓度下限达105106molL。 (3)吸光光度法测定的相对误差约为2%~5% 4)测定迅速,仪器操作简单,价格便宜,应用广泛 (5)几乎所有的无机物质和许多有机物质的微量成分都 能用此法进行测定。 (6)还常用于化学平衡等的研究。 2021年1月27日8时3 分 页
2021年1月27日8时3 分 特点： (1) 具有较高的灵敏度，适用于微量组分的测定。 (2) 通常所测试液的浓度下限达10-5~10-6 mol·L-1 。 (3) 吸光光度法测定的相对误差约为2%~5%。 (4) 测定迅速，仪器操作简单，价格便宜，应用广泛 (5) 几乎所有的无机物质和许多有机物质的微量成分都 能用此法进行测定。 (6) 还常用于化学平衡等的研究
大连理大学 Anal Cheme §9吸光光度法基本原理 911物质对光的选择性吸收 M+热 M+hv→M* 基态 激发态 M+荧光或磷光 E1(△E)E2 △E=E 2 E=h 量子化;选择性吸收; 分子结构的复杂性使其对不 同波长光的吸收程度不同; 光的互补:蓝父>黄 2021年1月27日8时3 分 页
2021年1月27日8时3 分 §9.1 吸光光度法基本原理 9.1.1物质对光的选择性吸收 M + 热 M + 荧光或磷光 M + h ➔ M * 基态 激发态 E1 （△E） E2 E = E2 - E1 = h 量子化 ；选择性吸收; 分子结构的复杂性使其对不 同波长光的吸收程度不同； 光的互补：蓝➢ 黄
大连理大学 Anal Cheme 表9-1物质颜色与吸收光颜色的互补关系 吸收光 物质颜色 颜色 波长mm 黄绿 紫蓝 400~450 黄橙红 450~480 绿蓝 480~490 蓝绿 490~500 紫红 绿 500~560 紫蓝 黄绿 560~580 580~600 绿 黄橙红 600~650 蓝绿 650~780 2021年1月27日8时3 分 页
2021年1月27日8时3 分 表9-1 物质颜色与吸收光颜色的互补关系 吸收光 物质颜色 颜色 波长/nm 黄绿 紫 400~450 黄 蓝 450~480 橙 绿 蓝 480~490 红 蓝 绿 490~500 紫 红 绿 500~560 紫 黄绿 560~580 蓝 黄 580~600 绿 蓝 橙 600~650 蓝 绿 红 650~780
大连理大学 Anal Cheme 电子能级间跃迁 电子能级间跃迁的同 时总伴随有振动和转 V"=0 B 动能级间的跃迁。即 4 电子光谱中总包含有 二 纯电子 振动能级和转动能级 2跃迁 间跃迁产生的若干谱 =6420 纯转动纯振动 跃迁跃迁 线而呈现宽谱带。 V=0 双原子分子的三种能级跃迁示意图 2021年1月27日8时3 分 页
2021年1月27日8时3 分 电子能级间跃迁 电子能级间跃迁的同 时总伴随有振动和转 动能级间的跃迁。即 电子光谱中总包含有 振动能级和转动能级 间跃迁产生的若干谱 线而呈现宽谱带
大连理大学 Anal Cheme 吸收曲线与最大吸收波长 分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度 不同,用不同波长的单色光照射,测吸光度一吸收曲 线与最大吸收波长九max MnO, 545 (动画) 400420440460480500520540560580600 入 2021年1月27日8时3 分 页
2021年1月27日8时3 分 吸收曲线与最大吸收波长 分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度 不同，用不同波长的单色光照射，测吸光度— 吸收曲 线与最大吸收波长 max； （动画）
大连理大学 Anal chem 吸收曲线的讨论:(动画) (1)同一种物质对不同A Mr 波长光的吸光度不同。吸 光度最大处对应的波长称 为最大吸收波长Ama A (2)不同浓度的同一种 400920440604805005205405605806002 物质,其吸收曲线形状相(3)吸收曲线可以提供物 似A不变。而对于不同质的结构信息,并作为物质 物质,它们的吸收曲线形定性分析的依据之 状和A、则不同。 2021年1月27日8时3 分 页
2021年1月27日8时3 分 吸收曲线的讨论： （1）同一种物质对不同 波长光的吸光度不同。吸 光度最大处对应的波长称 为最大吸收波长λmax （2）不同浓度的同一种 物质，其吸收曲线形状相 似λmax不变。而对于不同 物质，它们的吸收曲线形 状和λmax则不同。 （动画） （3）吸收曲线可以提供物 质的结构信息，并作为物质 定性分析的依据之一
大连理大学 Anal Cheme 吸收曲线的讨论:(动画) MnOa (4)不同浓度的同一种A 物质,在某一定波长下吸 光度A有差异,在An处 吸光度A的差异最大。此 A!AA 特性可作为物质定量分析 400420440460480500520540560580600 的依据 (5)在λn处吸光度随浓度变化的幅度最大,所以测 定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的 重要依据。 2021年1月27日8时3 分 页
2021年1月27日8时3 分 吸收曲线的讨论：（动画） （4）不同浓度的同一种 物质，在某一定波长下吸 光度 A 有差异，在λmax处 吸光度A 的差异最大。此 特性可作为物质定量分析 的依据。 （5）在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测 定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的 重要依据