免疫自动化 仪器分析 医学检验系 刘利东
免疫自动化 仪器分析 医学检验系 刘利东
概论 •早期免疫分析通过观察沉淀物形成，凝集及溶血现象发 生来分析，如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合 等 ·上世纪50年代末60年代初，利用AG-AB复合物形成使浊 度改变，再用比浊计来比浊，但因其敏感性差未被接受 ·70年代初，开始有自动检测系统，但因其用的是激光为 光源，固定波长，灵敏度较低，而且时间一般要2一3小时
概论 •早期免疫分析通过观察沉淀物形成，凝集及溶血现象发 生来分析，如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合 等 •上世纪50年代末60年代初，利用AG-AB复合物形成使浊 度改变，再用比浊计来比浊，但因其敏感性差未被接受 •70年代初，开始有自动检测系统，但因其用的是激光为 光源，固定波长，灵敏度较低，而且时间一般要2—3小时
概论 ·70年代未，速率比浊计的出现，使抗原抗体结合的 反应在几十秒内出结果，可以说是免疫化学测定的 革命的发展 随着标记技术的发展，免疫化学可以纳入临床化学 检验范畴 ·如今，自动化免疫分析系统更加飞速发展 ·自动化免疫分析的基础是抗原抗体的结合，具有高 特异性；手段多是利用标记技术而将检测信号放大， 具有高灵敏度
概论 ❖ 70年代未，速率比浊计的出现，使抗原抗体结合的 反应在几十秒内出结果，可以说是免疫化学测定的 革命的发展 ❖ 随着标记技术的发展，免疫化学可以纳入临床化学 检验范畴 ❖ 如今，自动化免疫分析系统更加飞速发展 ❖ 自动化免疫分析的基础是抗原抗体的结合，具有高 特异性；手段多是利用标记技术而将检测信号放大， 具有高灵敏度
自动化免疫仪器种类（应用技术） 免疫比浊分析技术 ÷化学发光、电发光分析技术 ÷荧光免疫分析技术 。放射免疫分析技术 冬酶免疫分析技术 冬流式细胞术
自动化免疫仪器种类（应用技术） ❖免疫比浊分析技术 ❖ 化学发光、电发光分析技术 ❖ 荧光免疫分析技术 ❖ 放射免疫分析技术 ❖ 酶免疫分析技术 ❖ 流式细胞术
免疫比浊 ·利用抗原抗体结合后溶液的浊度变化而检测 的一种方法 ·此法准确快速，已成为免疫诊断技术中重要 的检测手段 冬比浊法与比色法
免疫比浊 ❖ 利用抗原抗体结合后溶液的浊度变化而检测 的一种方法 ❖ 此法准确快速，已成为免疫诊断技术中重要 的检测手段 ❖ 比浊法与比色法
散射免疫比浊分法 ·基本原理：抗原抗体复合物对一定波长的 光产生折射、偏转，偏转角度及散射光强度 与复合物粒子的大小和量有关（图） Rayleighi散射（图） ·Mile散射 Heidelberger曲线
散射免疫比浊分析法 • 基本原理：抗原抗体复合物对一定波长的 光产生折射、偏转，偏转角度及散射光强度 与复合物粒子的大小和量有关（图） •Rayleigh散射（图） • Mile散射 •Heidelberger曲线
定时散射比浊分析 ·基本原理：免疫沉淀反应和散射比浊分析结 合之技术，反应分两个阶段，预反应阶段和 反应阶段（图） ~保证抗原不过量的方法： 确保反应体系抗体过量 对抗原过量进行阈值限定
定时散射比浊分析 ❖ 基本原理：免疫沉淀反应和散射比浊分析结 合之技术，反应分两个阶段，预反应阶段和 反应阶段（图） ❖ 保证抗原不过量的方法： 确保反应体系抗体过量 对抗原过量进行阈值限定
速率散射比浊分析 。基本原理：抗原抗体结合反应的一种动态测 定法，适时检测抗原抗体复合物形成的散射 光信号 ·最快反应时间（图） ÷抗原过量检测（图）
速率散射比浊分析 ❖ 基本原理：抗原抗体结合反应的一种动态测 定法，适时检测抗原抗体复合物形成的散射 光信号 ❖ 最快反应时间（图） ❖ 抗原过量检测（图）
免疫透射比浊 基本原理：检测信号是通过溶液的光，测量 角度与正前方夹角为0℃（图），保持抗体过 量，形成可溶性AG-AB复合物，使介质浊度 发生改变。 实验要求： 选择亲和力高的抗体，抗原抗体复合物要大、 数量要多，反应时间充分
免疫透射比浊 ❖ 基本原理：检测信号是通过溶液的光，测量 角度与正前方夹角为0℃（图），保持抗体过 量，形成可溶性AG-AB复合物，使介质浊度 发生改变。 ❖ 实验要求： 选择亲和力高的抗体，抗原抗体复合物要大、 数量要多，反应时间充分
胶乳浊度测定法 ÷基本原理是：将抗体吸附在大小适中、均匀 一 致的胶乳颗粒上，当遇到相应抗原时，则 使胶乳颗粒发生凝集。单个胶乳颗粒在入射 光波之内不阻碍光线透过，两个或两个以上 胶乳颗粒凝聚时则使透过光减少，这种减少 的程度与胶乳颗粒凝聚的程度呈正比，当然 也与待测抗原量呈正比（图）
胶乳浊度测定法 ❖ 基本原理是：将抗体吸附在大小适中、均匀 一致的胶乳颗粒上，当遇到相应抗原时，则 使胶乳颗粒发生凝集。单个胶乳颗粒在入射 光波之内不阻碍光线透过，两个或两个以上 胶乳颗粒凝聚时则使透过光减少，这种减少 的程度与胶乳颗粒凝聚的程度呈正比，当然 也与待测抗原量呈正比（图）