中华人民共和国国家标准：《海洋监测规范》第6部分生物体分析.pdf_大学文库

GB17378.6-1998 塑料板和尺子:用于长度测量塑料刀玻璃或陶瓷碟(供制备样品用); 镊子:塑料制品或其他合适材料的制品; 髙密度聚乙烯袋和塑料容器:供速冻保存样品用,装样前,须用合成洗涤剂清洗,并用蒸馏水洗高密度聚乙烯膜:供罩工作台用; 小张聚乙烯膜:供称重用; 分析天平:感量0.1mg; 塑料洗瓶; 一刮刀:供采集贻贝用; 塑料桶:20~50L; 大号金属刀:无锈斑,供切取鱼组织用; 匀浆器:不锈钢或其他适宜材料的制品; 塑料刷:毛刷坚硬,用以去除贻贝外壳的附着物; 称量瓶:50mL; 电热烘箱干燥箱; 冷冻干燥设备 1.4采样与运输 4.1.4.1准备工作用合成洗涤剂(4.1.2.2)清洗冷冻箱、高密度聚乙烯袋塑料板及尺、大号金属刀、刮刀,再用蒸馏水或表层海水(4.1.2.1)漂洗干净 4.1.4.2贻贝采集用清洁刮刀从其附着物上采集贻贝样。选取足够数量的完好贻贝存于冷冻箱中。若需长途运输(炎热天超过2h),应把贻贝样品盛于塑料桶中,将现场采集的清洁海水淋洒在贻贝上,样品保持润湿状但不能浸入水中。若样品处理须在采样24h后进行,可将贻贝样存于高密度塑料袋中,压出袋内空气,将袋口打结或热封,将此袋和样品标签一起放入聚乙烯袋中并封口,存于低温冰箱中。 4.1.4.3虾与中小型鱼样采集按一定要求选取足够数量的完好的生物样,放入干净的聚乙烯袋中,要防止剌破袋子。挤出袋内空气,将袋口打结或热封,将此袋和样品标签一起放入另一聚乙烯袋中,并封口,低温冷藏。只有在贮存期不太长时(热天不超过48h),方可使用冰箱或冷冻箱存放样品。 4.1.4.4大型鱼样采集测量并记下鱼样的叉长、体重和性别用清洁的金属刀切下至少100g肌肉组织,厚度至少5cm,以便在样品处理(41.5.5)时,切除沾污或内脏部分。存于清洁的聚乙烯袋中,挤出空气并封口,将此袋与样品标签一起放入另一聚乙烯袋中,封口,于低温冰箱中贮存。若保存时间不太长(热天不超过48h),可用冰箱或冷冻箱贮放样品。 4.1.5样品预处理 4.1.5.1准备工作若必要时将冷冻样在冰箱(-2~4C)中放置过夜,使部分解冻以便切片用合成洗涤剂(4.1.2.2)清洗塑料刀、碟、镊子、塑料板及尺和称重塑料膜,用蒸馏水或清洁海水 (4.1.2.1)漂洗干净。工作台用洗净的塑料膜罩上。用合成洗涤剂(41.2.2)仔细地洗手,后用蒸馏水或

GB 17378．6一 1998 — 塑料板和尺子：用于长度测量； — 塑料刀； — 玻璃或陶瓷碟（供制备样品用）； — 镊子：塑料制品或其他合适材料的制品； — 高密度聚乙烯袋和塑料容器：供速冻保存样品用，装样前，须用合成洗涤剂清洗，并用蒸馏水洗净； — 高密度聚乙烯膜：供罩工作台用； — 小张聚乙烯膜：供称重用； — 分析天平：感量0. 1 mg; — 塑料洗瓶； — 刮刀：供采集贻贝用； — 塑料桶：20一50 L； — 大号金属刀：无锈斑，供切取鱼组织用； — 匀浆器；不锈钢或其他适宜材料的制品； — 塑料刷：毛刷坚硬，用以去除贻贝外壳的附着物； — 称量瓶：50 mL; — 电热烘箱； — 干燥箱； — 冷冻干燥设备。 4.1.4 采样与运输 4.1-4.1 准备工作用合成洗涤剂（4.1.2.2)清洗冷冻箱、高密度聚乙烯袋、塑料板及尺、大号金属刀、刮刀，再用蒸馏水或表层海水（4.1.2.1)漂洗干净。 4.1.4.2 贻贝采集用清洁刮刀从其附着物上采集贻贝样。选取足够数量的完好贻贝存于冷冻箱中。若需长途运输（炎热天超过 2 h)，应把贻贝样品盛于塑料桶中，将现场采集的清洁海水淋洒在贻贝上，样品保持润湿状但不能浸入水中。若样品处理须在采样 24 h后进行，可将贻贝样存于高密度塑料袋中，压出袋内空气，将袋口打结或热封，将此袋和样品标签一起放入聚乙烯袋中并封口，存于低温冰箱中。 4.1.4.3 虾与中小型鱼样采集按一定要求选取足够数量的完好的生物样，放入干净的聚乙烯袋中，要防止刺破袋子。挤出袋内空气，将袋口打结或热封，将此袋和样品标签一起放入另一聚乙烯袋中，并封口，低温冷藏。只有在贮存期不太长时（热天不超过 48 h)，方可使用冰箱或冷冻箱存放样品。 4.14.4 大型鱼样采集测量并记下鱼样的叉长、体重和性别。用清洁的金属刀切下至少100 g肌肉组织，厚度至少 5 cm，以便在样品处理（4.1.5.5）时，切除沾污或内脏部分。存于清洁的聚乙烯袋中，挤出空气并封口，将此袋与样品标签一起放入另一聚乙烯袋中，封口，于低温冰箱中贮存。若保存时间不太长（热天不超过 48 h)，可用冰箱或冷冻箱贮放样品。 4门.5 样品预处理 4.1.5.1 准备工作若必要时将冷冻样在冰箱（-2-4 C）中放置过夜，使部分解冻以便切片。用合成洗涤剂（4.1.2.2)清洗塑料刀、碟、镊子、塑料板及尺和称重塑料膜，用蒸馏水或清洁海水 (4.1.2.1)漂洗干净。工作台用洗净的塑料膜罩上。用合成洗涤剂(4. 1. 2-2)仔细地洗手，后用蒸馏水或

GB17378.6-1998 清洁的海水(4.1.2.1)漂洗干净。 4.1.5.2贻贝样的制备用塑料刀或塑料刷除去贝壳外部所有的附着物用蒸馏水或清洁的海水(4.1.2.1)漂洗每一个贻贝,让其自然流干,拉出足丝。用天平称个体全重并记下重量用另一把塑料刀插入足丝伸出口,切开闭合肌,打开贻贝(见图1) 用蒸馏水或清洁的表层海水(4.1.2.1)洗贝壳内的软组织,用塑料刀和镊子取出软组织,让水流尽 1)单个体样品:将软组织放入已称重的塑料容器内,再称重,记下鲜重。盖紧,贴上标签。用尺子测量并记录贝壳长度(见图1) 2)多个体样品:按上述步骤将至少10个贻贝的软组织放于已知重量的塑料容器中,称重,记下鲜重。于匀浆器中匀化样品,将匀浆放回原塑料容器,再称重,并记录总重量,计算匀浆重。贴上样品标签。虾体长贝壳长腹部图1切断闭合肌图2虾体图 PF胸鳍;DF一脊鳍,虚线表示刀切位置图3鱼体简图各生物个体大小应相近,并在取出生物组织前分别测量其个体长度和总重量。 4.1.5.3虾样制备 4.1.5.31单个体样品用尺子量虾体长(见图2),将虾放在聚乙烯称样膜上,称重,记下长度和鲜重。用塑料刀将腹部与头胸部及尾部分开,小心将其内脏从腹部取出(图2)。腿全部切除。将腹部翻下用塑料刀沿腹部外甲边缘切开,用塑料镊子取下内侧外甲并弃去用另一把塑料刀松动腹部肌肉,并用镊子取出肌肉检查性腺,记录所鉴别的性别。用镊子将肌肉移入塑料容器中,称重并记录鲜重。盖紧容器,标上号码。将几个容器一起放入同塑料袋中,并附一张样品清单,结紧袋口,低温冰箱中保存。 4.1.5.3.2多个体样品:按上述方法制备样品,仔细地记录各个体长度、鲜重、腹部肌肉重和性别。每个样品须包括6个以上性别相同、大小相近的个体肌肉。将样品放入匀浆器中匀化腹部肌肉,转入已知重

GB 17378．6一 1998 清洁的海水（(4.1.2.1)漂洗干净。 4.15.2 贻贝样的制备用塑料刀或塑料刷除去贝壳外部所有的附着物。用蒸馏水或清洁的海水（(4.1.2.1)漂洗每一个贻贝，让其自然流干，拉出足丝。用天平称个体全重，并记下重量。用另一把塑料刀插入足丝伸出口，切开闭合肌，打开贻贝（见图 1)0 用蒸馏水或清洁的表层海水（4.1.2.1)洗贝壳内的软组织，用塑料刀和镊子取出软组织，让水流尽。 1)单个体样品：将软组织放入已称重的塑料容器内，再称重，记下鲜重。盖紧，贴上标签。用尺子测量并记录贝壳长度（见图1)a 2)多个体样品：按上述步骤将至少 10个贻贝的软组织放于已知重量的塑料容器中，称重，记下鲜重。于匀浆器中匀化样品，将匀浆放回原塑料容器，再称重，并记录总重量，计算匀浆重。贴上样品标签。虾体长腹部尾部图 1 切断闭合肌图 2 虾体图，鱼体又长 — I I PF一胸鳍；DF一脊鳍，虚线表示刀切位置图 3 鱼体简图各生物个体大小应相近，并在取出生物组织前分别测量其个体长度和总重量。 41.5.3 虾样制备 4.1.5.3.1 单个体样品用尺子量虾体长（见图2)，将虾放在聚乙烯称样膜上，称重，记下长度和鲜重。用塑料刀将腹部与头胸部及尾部分开，小心将其内脏从腹部取出（图 2)。腿全部切除。将腹部翻下，用塑料刀沿腹部外甲边缘切开，用塑料镊子取下内侧外甲并弃去。用另一把塑料刀松动腹部肌肉，并用镊子取出肌肉。检查性腺，记录所鉴别的性别。用镊子将肌肉移入塑料容器中，称重并记录鲜重。盖紧容器，标上号码。将几个容器一起放入同－塑料袋中，并附一张样品清单，结紧袋口，低温冰箱中保存。 4.1.5.3.2 多个体样品：按上述方法制备样品，仔细地记录各个体长度、鲜重、腹部肌肉重和性别。每个样品须包括 6个以上性别相同、大小相近的个体肌肉。将样品放入匀浆器中匀化腹部肌肉，转入已知重

GB17378.6-1998 量的塑料容器中盖紧,标上号码,称重,记下鲜重和其他数据将几个塑料容器放在同一塑料袋中,并附上样品清单,结紧袋口,在低温冰箱中保存。 41.5.4中小型鱼样制备 4.1.5.4.1单个体样品:测量鱼的叉长,并于聚乙烯称样膜上称重。记下叉长和体重。用蒸馏水或清洁表层海水(4,1.2.1)洗涤鱼样,将它放在工作台上,用塑料刀切除胸鳍并切开背鳍附近自头至尾部的鱼皮(图3) 在鳃附近和尾部,横过鱼体各切一刀;在腹部,鳃和尾部两侧各切一刀。四刀只切在鱼体一侧,且不得切太深,以免切开内脏,沾污肉片。最好在切片时,由另一人帮助按住鱼的头尾用镊子将鱼皮与肉片分离,谨防外表皮沾污肉片用另一把塑料刀将肌肉与脊椎分离,并用镊子取下肌肉。将组织盛于塑料容器中,称重并记录重量若一侧的肌肉量不能满足分析用量,取另一侧肌肉补充盖紧容器,贴上标签或记号,记录各所有数据,于低温冰箱中保存。鉴定性腺性别 4.1-5.42多个体试样:制备方法如下。仔细记下各个体体长、鲜重、肌肉重。鉴定性别。个体数不应少于6个,且性别应相同,大小相近用匀浆器匀化鱼组织,将匀浆转入已知重量的塑料容器中,盖紧,贴上标签并称重,记下匀浆重和其他数据。置于低温冰箱中存放。 4.1.5.5大型鱼样制备若必要,将现场采集的样品(41.44)放在一2~4C冰箱中过夜,使部分解冻以便于切片。用蒸馏水或清洁海水(4.1.2.1)洗涤鱼样,置于清洁的工作台上。剔除残存的皮和骨,用塑料刀切去表层,再用另一把塑料刀重复操作一次,留下不受污染的均匀的肌肉组织。将肌肉组织放入塑料容器中, 盖紧,贴上标签,称重将全部数据记入记录表,样品存于低温冰箱中 4.1.5.6千样制备将部分新鲜试样按4.1.6.1或4.1.6.2步骤烘千,计算干/湿比,以校正水分含量。干燥后的样品用玛脑研钵磨碎,全部筛过80~100目(尼龙筛),供痕量元素分析用 4.1.6千重测定 4.1.6.1烘干半开称量瓶的磨口盖,放入105℃烘箱中。2h后,取出称量瓶,置于干燥器中冷却30mn。盖好瓶盖,用分析天平称重,记下重量。取5~10g生物制备样(41.5)于称量瓶中,盖好瓶盖,再称重(±0.5mg)并记下重量。将盛样品的称量瓶半开盖放入105C烘箱中。24h后取出,置于干燥器中冷却30mn。盖好瓶盖后称重并记录所称重量。重复烘干操作,至前后两次烘干后的重量差小于总重量的0.5%。计算干重和干/湿比。 4.1.6.2冷冻干燥对类脂物含量高的生物样品,不能烘干至恒重,则须用冷冻干燥准确称取1~2g生物制备样(41.5)于干净的冷冻干燥的样品容器中,冷冻干燥24h,再称重次。再次冷冻干燥24h,再称重。两次称重的重量差应小于总重量的0.5%。否则,应继续干燥至符合要计算干重和干/湿比(F)。 4.1.7注意事项 4.-1·7·1在实验室附近采集贻贝,不存在特殊的运输和贮藏问题。运往实验室时,仅须使贻贝样通风并用海水保持润湿。采自潮间带的贻贝,在空气中可生存24h。浸在海水中的贻贝,会吸水并排泄废物。贻贝在空气中,贝壳闭合,代谢速度大大降低,故运输时,不应将贻贝放在水中

GB 17378．6一 1998 量的塑料容器中盖紧，标上号码，称重，记下鲜重和其他数据。将几个塑料容器放在同一塑料袋中，并附上样品清单，结紧袋口，在低温冰箱中保存。 4.1.5.4 中小型鱼样制备 4.1.5.4.1 单个体样品：测量鱼的叉长，并于聚乙烯称样膜上称重。记下叉长和体重。用蒸馏水或清洁表层海水（4.1.2.1)洗涤鱼样，将它放在工作台上，用塑料刀切除胸鳍并切开背鳍附近自头至尾部的鱼皮（图3), 在鳃附近和尾部，横过鱼体各切一刀；在腹部，鳃和尾部两侧各切一刀。四刀只切在鱼体一侧，且不得切太深，以免切开内脏，沾污肉片。最好在切片时，由另一人帮助按住鱼的头尾。用镊子将鱼皮与肉片分离，谨防外表皮沾污肉片。用另一把塑料刀将肌肉与脊椎分离，并用镊子取下肌肉。将组织盛于塑料容器中，称重并记录重量。若一侧的肌肉量不能满足分析用量，取另一侧肌肉补充。盖紧容器，贴上标签或记号，记录各所有数据，于低温冰箱中保存。鉴定性腺性别。 4.1.5.4.2 多个体试样：制备方法如下。仔细记下各个体体长、鲜重、肌肉重。鉴定性别。个体数不应少于 6个，且性别应相同，大小相近。用匀浆器匀化鱼组织，将匀浆转入已知重量的塑料容器中，盖紧，贴上标签并称重，记下匀浆重和其他数据。置于低温冰箱中存放。 4.1.5.5 大型鱼样制备若必要，将现场采集的样品（(4. 1.4. 4)放在一2-4'C冰箱中过夜，使部分解冻以便于切片。用蒸馏水或清洁海水（4.1.2.1)洗涤鱼样，置于清洁的工作台上。剔除残存的皮和骨，用塑料刀切去表层，再用另一把塑料刀重复操作一次，留下不受污染的均匀的肌肉组织。将肌肉组织放入塑料容器中，盖紧，贴上标签，称重，将全部数据记入记录表，样品存于低温冰箱中。 41.5.6 干样制备将部分新鲜试样按 4.1.6.1或 4.1.6.2步骤烘干，计算干／湿比，以校正水分含量。干燥后的样品用玛脑研钵磨碎，全部筛过 80-100目（尼龙筛），供痕量元素分析用。 4.1．6 干重测定 41.6.1 烘干半开称量瓶的磨口盖，放入 105℃烘箱中。2h后，取出称量瓶，置于干燥器中冷却 30 min. 盖好瓶盖，用分析天平称重，记下重量。取 5^10 g生物制备样（4.1.5)于称量瓶中，盖好瓶盖，再称重（士0. 5 mg）并记下重量。将盛样品的称量瓶半开盖放入 105℃烘箱中。24 h后取出，置于干燥器中冷却 30 min。盖好瓶盖后称重并记录所称重量。重复烘干操作，至前后两次烘干后的重量差小于总重量的。.5 00。计算干重和干／湿比。 4.1.6.2 冷冻干燥对类脂物含量高的生物样品，不能烘干至恒重，则须用冷冻干燥。准确称取 1^-2 g生物制备样（4.1.5)于干净的冷冻干燥的样品容器中，冷冻干燥 24 h，再称重一次。再次冷冻干燥 24 h，再称重。两次称重的重量差应小于总重量的0.5%。否则，应继续于燥至符合要求。计算干重和干／湿比（F)o 4.1．了注意事项 4.1-7.1 在实验室附近采集贻贝，不存在特殊的运输和贮藏问题。运往实验室时，仅须使贻贝样通风并用海水保持润湿。采自潮间带的贻贝，在空气中可生存 24 h。浸在海水中的贻贝，会吸水并排泄废物。贻贝在空气中，贝壳闭合，代谢速度大大降低，故运输时，不应将贻贝放在水中

GB17378.6-1998 4.1.7.2手洗净之后,不应接触解剖组织,最好带上手套;若条件许可,准备工作和样品制备均应在洁净条件下进行 4.1.7.3制备多个体样品时,应取性别相同、个体大小相近的生物。取出软组织之前,应分别测量各个体体长和重量 4.1.7.4样品消化前,将盛有样品的容器总重量与贮存时之重量进行比较,可发现贮存期间样品是否失重 4.1.7.5不同部位肌肉的痕量金属含量可能存在差别,故实际样品的有关资料应尽可能记录详细。 4.1.7.6用于有机氯农药和石油烃测定的生物样品,样品采集和预处理的设备和试剂作适当的相应改变,应避免采用塑料器皿和含有卤代烃或石油烃的试剂 4.1.7.7生物体中总汞及有害有机物的测定,不宜用干燥后的样品。该时,用湿样测定,结果仍以干样中被测物的含量来表示 4.2要求 4.2.1分析样品的烘干:未注明干燥温度及时间时,均指105C±1C,干燥2h 42.2标准溶液配制中,所有的移液管均应事先进行容量校正。量瓶均用一级品 4.2.3所有容器的净化除另有注明外,均先用(1+3)硝酸浸泡2~3d后,再用去离子水仔细淋洗干净,晾干后备用 4.2.4数据处理按GB17378.2-1998要求执行。 4.2.5文内pH值除注明测量方法外,均可用精密或广泛pH试纸测量表1从分析样中抽取检查样的比例分析样个数检查样抽取百分数 40 42.6为检查分析结果的质量,由业务主管部门从一批分析样中按表1任意抽取检查样,分别装袋并另编样号,将基本样与检查样交有关人员进行测定。 4.2.6.1抽查样的测项与基本样相同。 4.2.6.2当分析样数量较多时,基本样与检查样可不必安排在同批内进行测试。 4.2.6.3测试所得的结果由业务主管部门汇总,按表2所列双样相对偏差值控制分析质量。当某测项双样检查结果超差率大于30%时,此批基本样中该测项要全部重新称样进行测定。若仍出现上述超差情况,主管部门应与分析人员认真检查分析原因(如标准溶液的配制,环境质量,所有仪器设备有无不正常情况等)后,再进行这批分析样(基本样与检查样)的测定。当某测项双样检査结果超差率小于30% 时,超差的样品需重新称样进行测定,直至新测定结果合格为止。按平行双样的均值报出结果表2平行双样相对偏差表分析结果所在数量级 10-8 相对偏差容许限(%) 40计算A+B×10% 每批分析的样品(20个左右)由业务主管部门插入2~3个标准生物样品(另行编号),以检验有无系统误差 4.3说明 4.3.1各种酸碱的密度(p)是指20℃时的g/mL 4.3.2干燥剂在不指明具体名称时,均指变色硅胶 43.3所配制的元素的标准溶液的浓度均指该元素的浓度。 4.3.4没有指明溶剂的溶液都是水溶液

GB 17378．6一 1998 4.1.7.2 手洗净之后，不应接触解剖组织，最好带上手套；若条件许可，准备工作和样品制备均应在洁净条件下进行。 41.7.3 制备多个体样品时，应取性别相同、个体大小相近的生物。取出软组织之前，应分别测量各个体体长和重量。 4. 1.7.4 样品消化前，将盛有样品的容器总重量与贮存时之重量进行比较，可发现贮存期间样品是否失重。 4.1.7.5 不同部位肌肉的痕量金属含量可能存在差别，故实际样品的有关资料应尽可能记录详细。 41.7.6 用于有机氯农药和石油烃测定的生物样品，样品采集和预处理的设备和试剂作适当的相应改变，应避免采用塑料器皿和含有卤代烃或石油烃的试剂。 4. 1.7.7 生物体中总汞及有害有机物的测定，不宜用干燥后的样品。该时，用湿样测定，结果仍以干样中被测物的含量来表示。 4.2 要求 4.2.1 分析样品的烘干：未注明干燥温度及时间时，均指105'C士I 'C，干燥2 ho 4.2.2 标准溶液配制中，所有的移液管均应事先进行容量校正。量瓶均用一级品。 4.2.3 所有容器的净化除另有注明外，均先用（(1+3)硝酸浸泡 2-3 d后，再用去离子水仔细淋洗干净，晾干后备用。 4.2.4 数据处理按GB 17378.2-1998要求执行。 4.2.5 文内pH值除注明测量方法外，均可用精密或广泛 pH试纸测量。表 1 从分析样中抽取检查样的比例分析样个数检查样抽取百分数 30 4.2.6 为检查分析结果的质量，由业务主管部门从一批分析样中按表 1任意抽取检查样，分别装袋并另编样号，将基本样与检查样交有关人员进行测定。 4.2-6. 1 抽查样的测项与基本样相同。 4.2-6.2 当分析样数量较多时，基本样与检查样可不必安排在同批内进行测试。 4.2.6.3 测试所得的结果由业务主管部门汇总，按表 2所列双样相对偏差值控制分析质量。当某测项双样检查结果超差率大于 30％时，此批基本样中该测项要全部重新称样进行测定。若仍出现上述超差情况，主管部门应与分析人员认真检查分析原因（如标准溶液的配制，环境质量，所有仪器设备有无不正常情况等）后，再进行这批分析样（基本样与检查样）的测定。当某测项双样检查结果超差率小于 3000 时，超差的样品需重新称样进行测定，直至新测定结果合格为止。按平行双样的均值报出结果。表 2 平行双样相对偏差表 │分析结果所在数量级 │10-4│ 10一5 │ 10一6 │ 10一7 │ 10一8 │ 10-9│ │ │相对偏差容许限（％）│ 4 │ 8 │15 │ 20 │ 30 │40 │ 计算井A+B X100% │ 每批分析的样品（20个左右）由业务主管部门插入 2-3个标准生物样品（另行编号），以检验有无系统误差。 4.3 说明 4.3.1 各种酸碱的密度（(p）是指20'C时的g/mL o 4.3.2 干燥剂在不指明具体名称时，均指变色硅胶。 4.3.3 所配制的元素的标准溶液的浓度均指该元素的浓度。 4.3.4 没有指明溶剂的溶液都是水溶液

GB 17378．6一 1998 5 测定项目、方法及检出限测定项目方法及检出限见表 30 表 3 测定项目方法检出限铜分析方法冷原子吸收光度法双硫腺分光光度法无火焰原子吸收分光光度法阳极溶出伏安法火焰原子吸收分光光度法二乙基二硫代胺基甲酸按分光光度法无火焰原子吸收分光光度法阳极溶出伏安法火焰原子吸收分光光度法双硫踪分光光度法火焰原子吸收分光光度法阳极溶出伏安法双硫腺分光光度法荧光分光光度法检出限 WOO-1) 0.01 0.01 0.4 1 2 分析方法二苯碳酸二脐分光光度法无火焰原子吸收分光光度法砷铂酸一结晶紫分光光度法氢化物原子吸收分光光度法催化极谱法检出限W(l0‘） 0.40 0.04 2 0.4 0.04 0. 3 0. 6 0.5 0.4 无火焰原子吸收分光光度法阳极溶出伏安法火焰原子吸收分光光度法双硫踪分光光度法荧光分光光度法氨基联苯胺四盐酸盐分光光度法催化极谱法气相色谱法 0.005 0. 4 0.08 0.3 0. 2 石油烃多氧联苯气相色谱法 0.1 1(湿重） a-666 5 pg Y-666 7 pg 件666 3 pg a-666 9 pg pp'-DDE 5 pg op'-DDT 17 pg pp'-DDD 8 pg Pp'-DDT 40 ow 狄氏剂｝气相色谱法 3 pg 6 总汞 6.1 冷原子吸收光度法 6.1门适用范围和应用领域本方法适用于海洋生物体中总汞的测定。对含碘量高的生物样品，应添加适量硝酸银消除碘对测定的干扰。检出下限（W);0.01X10-6 6门．2 方法原理以五氧化二钒作催化剂，用硝酸一硫酸消化生物样品，将有机汞全部转化为无机汞，再用氯化亚锡将汞离子还原成金属汞，用气一液平衡开路吸气冷原子吸收测定系统于 253.7 nm波长测定总汞含量。 6.1.3 试剂及其配制除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为去离子水或等效纯水。 6.1.3.1 五氧化二钒（V,O, ) 6.1.3.2 无水氯化钙（CaCIZ )，用于装填干燥管。 6.1.3.3 硝酸（HNO3) : p= l. 42 g/ml. o 6.1.3.4 硫酸（HZSO,):p=1.84 g/mL，工艺超纯。 6.1.3.5 硫酸溶液:0. 5 mol/l

GB17378.6-1998 在不断搅拌下,将28mL硫酸(6.1.3.4)徐徐加入972mL水中 6.1.3.6盐酸溶液:1+1 将盐酸(HCl,p=1.19g/mL)与等体积水混合 6.1.3.7硝酸溶液:1+19 用1份硝酸(6.1.3.3)与19份水混合。 6.1.3.8氯化亚锡溶液:100g/L 称取10g氯化亚锡于烧杯中,加入100mL盐酸溶液(6.1.3.6),加热至溶解,冷却后装于棕色瓶内,使用时用等体积水稀释。若汞杂质含量高,可用鼓泡法去除,直至溶液中汞含量不能检出 6.1.3.9低汞海水:表层海水经滤纸过滤,向每升海水徐徐加入28mL硫酸(6.1.3.4)酸化,海水汞含量应低于0.005g/L 6.1.3.10汞标准贮备溶液:1.00mg/mL 称取0.1354g氯化汞(HgCl2)(预先在硫酸干燥器中干燥)于10mL烧杯中,用硝酸溶液 (6.1.3.7)溶解。全量转入100mL量瓶中,用硝酸溶液(6.1.3.7)稀释至标线,混匀。保存期一年。 6.1.3.11汞标准中间溶液:10.0g/mL 量取1.00mL汞标准贮备溶液(6.1.3.10)于100mL量瓶中,用硝酸溶液(61.3.7)稀释至标线, 混匀。保存期一星期。 6.1.3.12汞标准使用溶液:0.100g/mL 量取1.00mL汞标准中间溶液(6.1.3.11)于100mL量瓶中,用硫酸溶液(6.1.3.5)稀释至标线, 混匀。当天配制 6.1.4仪器及设备测汞装置(图4); 1抽气泵;2-空气流量调节阀;3-含汞废气吸收器;4测汞仪;5—光吸收池;6—干燥管; 7一三通阀;8—汞蒸气发生瓶;9—空气净化装置;10—气体流量计图4冷原子吸收测汞装置汞蒸气发生瓶:250mL锥形洗瓶改制,将洗瓶通气管下端截断,使管端刚离开待测溶液液面; 电热板:铺上约3cm厚细砂; 实验室常备仪器及设备 6.1.5分析步骤 6.1.5.1绘制标准曲线 6.1.5.1.1取6个250mL汞蒸气发生瓶,加100mL低汞海水(6.1.3.9),然后分别加入0,o.10 0.20,0.30,0.40,0.50mL汞标准使用溶液(6.1.3.12),混匀 6.1.5.1.2将测汞仪上的三通开关转至调零档,以1~1.5L/mn流速的空气流通过光吸收池 6.1.5.1.3将汞蒸气发生瓶依次连接于测汞仪上,加入2mL氯化亚锡溶液(6.1.3.8),迅速塞紧汞蒸气发生瓶的塞子,振摇1min 6.1.5.1.4调节测汞仪零点,将三通开关转到测定档测其吸光值A.及标准空白吸光值A。 6.1-5.1.5将数据填入表GB173784-1998附录表A5中。以吸光值A,-A为纵坐标,相应的汞含量(pg)为横坐标,绘制标准曲线。 6.1.5.2样品消化

Gs 17378．6一 1998 在不断搅拌下，将 28 mL硫酸（(6.1.3.4)徐徐加入 972 mL水中。 6.1.3.6 盐酸溶液：1+1 将盐酸（HCI,p=1. 19 g/mL）与等体积水混合。 6.1.3.7 硝酸溶液：1+19 用 1份硝酸（(6.1.3.3)与 19份水混合。 6.1.3.8 氯化亚锡溶液：100 g/L 称取 10g氯化亚锡于烧杯中，加入 100 mL盐酸溶液（(6.1.3.6)，加热至溶解，冷却后装于棕色瓶内，使用时用等体积水稀释。若汞杂质含量高，可用鼓泡法去除，直至溶液中汞含量不能检出。 6.1.3.9 低汞海水：表层海水经滤纸过滤，向每升海水徐徐加入 28 mL硫酸（(6.1.3.4)酸化，海水汞含量应低于 0. 005 Kg/L o 6.13.10 汞标准贮备溶液：1. 00 mg/mL 称取。.135 4 g氯化汞(HgCll )（预先在硫酸干燥器中干燥）于 10 mL烧杯中，用硝酸溶液 (6.1.3.7)溶解。全量转入 100 mL量瓶中，用硝酸溶液（(6.1.3.7)稀释至标线，混匀。保存期一年。 6.1-3. 11 汞标准中间溶液：10. 0 p.g/mL 量取 1. 00 mL汞标准贮备溶液（(6.1.3.10)于 100 mL量瓶中，用硝酸溶液（(6.1.3.7)稀释至标线，混匀。保存期一星期。 6.13.12 汞标准使用溶液：。．100 fig/mL 量取 1. 00 mL汞标准中间溶液（(6.1.3.11)于 100 mL量瓶中，用硫酸溶液（(6.1.3.5)稀释至标线，混匀。当天配制。 6.1.4 仪器及设备 — 测汞装置（图 4)； - 5 -----1 =州日 10 巴 3 8 9 1一抽气泵；2一空气流量调节阀;3一含汞废气吸收器；4-测汞仪；5一光吸收池；6一干燥管； 7一三通阀;8--汞蒸气发生瓶；9一空气净化装置；10一气体流量计图 4 冷原子吸收测汞装置 — 汞蒸气发生瓶：250 mL锥形洗瓶改制，将洗瓶通气管下端截断，使管端刚离开待测溶液液面； — 电热板：铺上约 3 cm厚细砂； — 实验室常备仪器及设备。 6.1.5 分析步骤 6.1.5.1 绘制标准曲线 6.1.5.1.1 取 6个 250 mL汞蒸气发生瓶，加 100 mL低汞海水（6.1.3.9)，然后分别加入。，0.10, 0.20,0. 30,0.40,0.50 mL汞标准使用溶液（6.1.3.12),混匀。 6.1.5.1.2 将测汞仪上的三通开关转至调零档，以 1-1. 5 L/min流速的空气流通过光吸收池。 6.1.5.1.3 将汞蒸气发生瓶依次连接于测汞仪上，加入 2 mL氯化亚锡溶液（(6.1.3.8)，迅速塞紧汞蒸气发生瓶的塞子，振摇 1 min. 6. 1.5-1.4 调节测汞仪零点，将三通开关转到测定档，测其吸光值 A，及标准空白吸光值 Ao 6.1.5.1.5 将数据填入表GB 17378.4-1998附录表 A5中。以吸光值 A, -A。为纵坐标，相应的汞含量（lug）为横坐标，绘制标准曲线。 6. 1.5.2 样品消化

GB17378.6-1998 准确称取2.5g(±0.001g)湿样,放入100mL高型烧杯中,加入40mg五氧化二钒(6.1.3.1) 8mL硝酸(6.1.3.3),盖上表面皿,置于140~160℃电热板上加热10mn。取下,稍冷后加入15mL硫酸(6.1.3.4),继续加热20min。取下,稍冷后加10mL水,再加热30min,取下,冷却后全量转入100 mL量瓶中,加水稀至标线,混匀,得样品消化液。同时制备分析空白试液。 6.1.5.3样品测定量取适量样品制备液于汞蒸气发生瓶中,加水至100mL。其余按6.1.5.1.2~6.1.5.1.4步骤测定吸光值(A,)及分析空白吸光值(A)。以(A,-A)的值从标准曲线上查出相应的汞的量(pg) 6.1.6记录与计算将样品测定数据填入表A1中,按式(1)计算样品干样中汞的含量 WHs=VMF 式中:WH生物干样中总汞的含量质量比,10-°; m—从标准曲线上查得的汞的量,gg 样品消化液的体积测定分样体积,mL M—样品的称取量,g; F—样品的干/湿比 6.1.7精密度和准确度平行测定6个样品,其汞含量(质量比)为0.25×10-6,相对标准偏差为4%,4个实验室测定同一牡蛎互校样,其结果相对标准偏差为9.1%。 6.1.8注意事项 6.1.8.1器皿均用(1+3)硝酸溶液浸泡3d以上,洗净,并检查是否合格。 6.1.8.2用过的汞蒸气发生瓶,须用酸性高锰酸钾溶液漂洗,用水洗净。 6.1.8.3绘制汞标准曲线时,也可用氯化钠溶液代替低汞海水 6.2双硫腙分光光度法 6.2.1适用范围和应用领域本法适用于海洋生物体中总汞的测定。碘有千扰,故海藻中总汞的测定不宜直接用此法。检出限:0.01×10-6。 6.2.2方法原理样品经硝酸过氧化氢-高锰酸钾消化,用氯化亚锡将汞离子还原为金属汞。用曝气法使汞蒸气吸收于高锰酸钾溶液中,汞离子与双硫腙反应后用四氯化碳萃取其生成的橙色螯合物,于485nm波长处进行分光光度测定 6.2.3试剂及其配制除非另作说明,所用试剂均为分析纯,水为无汞去离子水或等效纯水。 6.2.3.1硝酸(HNO3):P=1.42g/mL,优级纯 6.2.3.2过氧化氢(H2O2):30%,优级纯。 6.23.3硫酸溶液:1+1,1+40 在搅拌下,将1体积硫酸(H2SO4,P=1.84g/mL,优级纯)徐徐加到1及40体积水中 62.34氢氧化铵溶液:c(NHOH)=1mol/L 6.2.3.5高锰酸钾溶液:50g/L。(盛于棕色试剂瓶中,暗处保存)。 6.23.6氯化亚锡溶液:200g/ 称取100g氯化亚锡(SnCl2·2H2O)于500mL烧杯中,加入500mL(1+1)盐酸溶液,加热至氯化亚锡完全溶解冷却后,盛于棕色试剂瓶中若汞杂质含量高,可用鼓泡法去除之,直至溶液中汞检不出

GB 17378．6一 1998 准确称取2.5 g（士0. 001 g)湿样，放入100 mL高型烧杯中，加入40 mg五氧化二钒(6.1.3.1), 8 ml,硝酸（(6.1.3.3),盖上表面皿，置于 140^160℃电热板上加热 10 min。取下，稍冷后加入 15 ml. 硫酸（6.1.3.4)，继续加热 20 min。取下，稍冷后加 10 mL水，再加热 30 min，取下，冷却后全量转入 100 mL量瓶中，加水稀至标线，混匀，得样品消化液。同时制备分析空白试液。 6.1.5.3 样品测定量取适量样品制备液于汞蒸气发生瓶中，加水至100 mL。其余按6. 1. 5. 1. 2-6-1. 5. 1. 4步骤测定吸光值（A,）及分析空白吸光值（Ab)c以（A,-Ab）的值从标准曲线上查出相应的汞的量（1,g) o 6.1.6 记录与计算将样品测定数据填入表 Al中，按式（1)计算样品干样中汞的含量： W', mV i V〕F ，… 。．．．．············… … （1）式中：WHg— 生物干样中总汞的含量质量比，10-6; m— 从标准曲线上查得的汞的量919; V,— 样品消化液的体积，M1,; VZ- 测定分样体积，mL; M— 样品的称取量1g; F— 样品的干／湿比。 6.1.7 精密度和准确度平行测定6个样品，其汞含量（质量比）为。. 25 X 10-6，相对标准偏差为4％,4个实验室测定同一牡蝠互校样，其结果相对标准偏差为 9.1%0 6.1.8 注意事项 6.1.8.1 器皿均用（(1-1-3)硝酸溶液浸泡 3d以上，洗净，并检查是否合格。 6.1.8.2 用过的汞蒸气发生瓶，须用酸性高锰酸钾溶液漂洗，用水洗净。 6.1.8.3 绘制汞标准曲线时，也可用氯化钠溶液代替低汞海水。 6.2 双硫踪分光光度法 6.2.1 适用范围和应用领域本法适用于海洋生物体中总汞的测定。碘有干扰，故海藻中总汞的测定不宜直接用此法。检出限：0. o1 x 10-6 0 6.2.2 方法原理样品经硝酸一过氧化氢一高锰酸钾消化，用氯化亚锡将汞离子还原为金属汞。用曝气法使汞蒸气吸收于高锰酸钾溶液中，汞离子与双硫踪反应后用四氯化碳萃取其生成的橙色鳌合物，于 485 nm波长处进行分光光度测定。 6.2.3 试剂及其配制除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为无汞去离子水或等效纯水。 6.2.3.1 硝酸（HNO,):p=1. 42 g/mL，优级纯。 6.2-3.2 过氧化氢(H,O, )：30%，优级纯。 62.3.3 硫酸溶液：1+1,1+40 在搅拌下，将 1体积硫酸（H,SO p=1. 84 g/mL，优级纯）徐徐加到 1及 40体积水中。 6.2-3.4 氢氧化钱溶液:c(NH,OH）二1 mol/Lo 6.2.3.5 高锰酸钾溶液：50 g/L,（盛于棕色试剂瓶中，暗处保存）。 62.3.6 氯化亚锡溶液:200 g/L 称取100 g氯化亚锡（Sncl,·2H20）于500 mL烧杯中，加入500 mL(1+1）盐酸溶液，加热至氯化亚锡完全溶解，冷却后，盛于棕色试剂瓶中若汞杂质含量高，可用鼓泡法去除之，直至溶液中汞检不出

GB17378.6-1998 6-2.37高锰酸钾吸收液:5g/L 将10mL(1+1)硫酸溶液(6.2.3.3)加到10mL高锰酸钾溶液(6.2.3.5)中,加水至100mL,混匀, (盛于棕色试剂瓶中,暗处保存)。 6.2.3.8盐酸羟胺溶液:100g/L 称取10g盐酸羟胺(NHOH·HC1),用水溶解,加水至100mL。用5mL双硫腙使用溶液 (6.2.3.12)提取数次,至有机相呈绿色为止,弃去有机相,水相盛于试剂瓶中。 6.23.9乙二胺四乙酸二钠溶液:50g/L 称取5 g EDTA(二钠),用水溶解,加水至100mL。用5mL双硫腙使用溶液(6.2.3.12)提取数次, 至有机相呈绿色为止,弃去有机相,水相盛于滴瓶中 6.2.310四氯化碳(CCl4) 6.2.311双硫腙贮备溶液称取100mg双硫腙(CHN: NCSNHNHCSH)溶于100mL四氯化碳(6,2.3.10)中,盛于棕色试剂瓶中。置冰箱中保存。 6.2.3.12双硫腙使用溶液:透光率70% 按下列方法确定双硫腙贮备溶液(6.2.3.11)的吸光值量取1.00mL双硫腙贮备溶液(6.2.3.11)于10mL量瓶中,加四氯化碳(6.2.3.10)至标线,混匀以四氯化碳(62·310)调零,于500m处用1cm测定池测定其吸光值A1。根据稀释因子,得双硫腙贮备溶液(62.3.11)的吸光值为10A1。根据式(2)计算配制一定体积双硫腙使用溶液所需贮备溶液的体积: V,lg 式中:V2配制V1体积双硫腙使用溶液时,所需双硫腙贮备溶液的体积,mL; V1——欲配制的双硫腙使用溶液的体积,mL; A1——双硫腙贮备溶液稀释10倍后的吸光值; T—欲配制双硫腙使用溶液的透光率,%。本法采用70%透光率。量取v2体积双硫腙贮备溶液(6.23.11),加四氯化碳(6.2.3.10)至V1体积,混匀,得透光率为 70%的双硫腙使用溶液(使用时配制)。 62313汞标准贮备溶液:100g/mL 称取0.1354g氯化汞(HgCl2,优级纯)于100mL烧杯中,用5mL(1+1)硫酸溶液(6.2.3.3)溶解后,全量转入1000mL量瓶中,加水至标线,混匀。 6.2.3.14汞标准使用溶液:1.00gg/mL 量取1.00mL汞标准贮备溶液(6.23.13)于100mL量瓶中,用(1+40)硫酸溶液(6.2.3.3)稀释至标线,混匀,使用时配制 6.24仪器及设备分光光度计; 汞蒸气发生瓶:见6.1.4.2; 吸收管:10mL; 抽气泵气体流量计电热恒温水浴锅; 实验室常备仪器及设备 6.2.5分析步骤

GB 17378．6一 1998 6.2-3.7 高锰酸钾吸收液：5 g/L 将 10 mL(1+1）硫酸溶液（6.2.3.3）加到 10 mL高锰酸钾溶液（6.2.3. 5）中，加水至 100 mL，混匀，（盛于棕色试剂瓶中，暗处保存）。 6.2.38 盐酸经胺溶液：100 g/L 称取 10 g盐酸经胺（NH20H " HCl )，用水溶解，加水至 100 mL。用 5 mL双硫腺使用溶液 (6.2.3.12)提取数次，至有机相呈绿色为止，弃去有机相，水相盛于试剂瓶中。 6.2.3.9 乙二胺四乙酸二钠溶液：50 g/L 称取 5 g EDTA（二钠），用水溶解，加水至 100 mL。用5 mL双硫腺使用溶液（(6.2.3.12)提取数次，至有机相呈绿色为止，弃去有机相，水相盛于滴瓶中。 6.2.3.10 四氯化碳（CCI, ) 6.2-3-11 双硫腺贮备溶液称取 100 mg双硫踪(C,H5N,NCSNHNHC6H5）溶于 100 mL四氯化碳（6.2.3.10）中，盗于棕色试剂瓶中。置冰箱中保存。 6.2.3.12 双硫踪使用溶液：透光率 70% 按下列方法确定双硫踪贮备溶液（(6.2.3.11)的吸光值：量取 1. 00 mL双硫腺贮备溶液（(6.2.3.11)于 10 mL量瓶中，加四氯化碳（6.2.3.10)至标线，混匀。以四氯化碳（(6.2.3.10）调零，于 500 nm处用 1 cm测定池测定其吸光值A,。根据稀释因子，得双硫踪贮备溶液（6.2.3.11）的吸光值为 10A, 根据式（2)计算配制一定体积双硫腺使用溶液所需贮备溶液的体积： 1 Vllv19万 1 ； 10A, ························…… （2）式中：V,— 配制V，体积双硫腺使用溶液时，所需双硫腺贮备溶液的体积，mL ; V,— 欲配制的双硫踪使用溶液的体积，mL; A,— 双硫腺贮备溶液稀释 10倍后的吸光值； T— 欲配制双硫踪使用溶液的透光率，％。本法采用 70％透光率。量取 V：体积双硫腺贮备溶液（6.2.3.11)，加四氯化碳（6.2.3.10)至 V，体积，混匀，得透光率为 70％的双硫踪使用溶液（使用时配制）。 6.2-3-13 汞标准贮备溶液：100 j.g/mL 称取0. 135 4 g氯化汞（HgCl,，优级纯）于 100 mL烧杯中，用 5 mL(1+1）硫酸溶液（6.2-3.3）溶解后，全量转入 1 000 mL量瓶中，加水至标线，混匀。 6.2.3.14 汞标准使用溶液：1. 00 Kg/mL 量取 1. 00 mL汞标准贮备溶液（6.2.3.13)于 100 mL量瓶中，用（(1+40)硫酸溶液（(6-2.3-3)稀释至标线，混匀，使用时配制。 6.2.4 仪器及设备 — 分光光度计； — 汞蒸气发生瓶：见6.1.4.2; — 吸收管：10 mL; — 抽气泵； — 气体流量计； — 电热恒温水浴锅； — 实验室常备仪器及设备。 6.2.5 分析步骤

中华人民共和国国家标准：《海洋监测规范》第6部分 生物体分析

中华人民共和国国家标准：《海洋监测规范》第6部分生物体分析