实验一母种培养基配制及棉塞制作 实验目的 1、掌握食用菌固化培养基的配制。2、学会棉塞 的制作方法。 、基本原理 食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须 要制作相应的培养基,以备食用菌的培养、分离 和保存之用。 培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对 营养物质需求制成的,它可供给食用菌的C源、N 源、水分、各种无机盐及生长物质等 培养基的种类很多,本实验学习斜面培养基 (PDA)制作
实验一母种培养基配制及棉塞制作 一.实验目的 1、 掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞 的制作方法。 二、基本原理 食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须 要制作相应的培养基,以备食用菌的培养、分离 和保存之用。 培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对 营养物质需求制成的,它可供给食用菌的C源、N 源、水分、各种无机盐及生长物质等。 培养基的种类很多,本实验学习斜面培养基 (PDA)制作
三实验准备 1.器具:天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、 量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗 架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉 花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、 菜板、小铝锅等。 2.材料:马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。 四、实验内容 过程:制马铃薯滤液→融化琼脂→培养基的分装 →棉塞的制作 方法步骤:
三.实验准备 1.器具: 天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、 量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗 架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉 花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、 菜板、小铝锅等。 2.材料: 马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。 四、实验内容 过程:制马铃薯滤液→融化琼脂→培养基的分装 →棉塞的制作 方法步骤:
1.配方(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20 琼脂15-20g,自来水100mn,pH自然 2.制作方法 (1)制滤液:马铃薯刮去粗皮,去芽眼, 切成碎块,称量后放锅中,加水 1200~1300m,将其煮沸20min。用双层 纱布过滤,取1000m滤液
1.配方(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g, 琼脂15~20g,自来水1000ml,pH自然。 2.制作方法 (1)制滤液: 马铃薯刮去粗皮,去芽眼, 切成碎块,称量后放锅中,加水 1200~1300ml,将其煮沸20min。用双层 纱布过滤,取1000ml滤液
(2)化琼脂:将滤液加热至将沸腾时加入 琼脂,不断搅拌,注意控制火力不要使培 养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入 剩余原料,并使其溶解(用热水补足水 量) (3分装:通过漏斗装置,趁热将培养基分装于试 中,装量约占试管高度的14(分装三角瓶,其
(2)化琼脂: 将滤液加热至将沸腾时加入 琼脂,不断搅拌,注意控制火力不要使培 养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入 剩余原料,并使其溶解(用热水补足水 量). (3分装 :通过漏斗装置,趁热将培养基分装于试管 中,装量约占试管高度的1/4(分装三角瓶,其
装量以不超过其容积的一半为宜)。注意 管口或瓶口不要沾染培养基。 (4)制棉塞棉花以白色长绒脱脂棉为宜。 根据试管口大小取棉,将其卷成棉塞,最 好外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉 塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑, 外包的纱不能折、松紧适宜等
装量以不超过其容积的一半为宜)。注意 管口或瓶口不要沾染培养基。 (4)制棉塞 棉花以白色长绒脱脂棉为宜。 根据试管口大小取棉,将其卷成棉塞,最 好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉 塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑, 外包的纱不能折、松紧适宜等
(5)包扎:管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆,棉塞部分 用生皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称,制备组别和 姓名、日期等。 (6)、灭菌 (7)、摆斜面 (8)、存放冰箱(4-6C 六、作业 1、简述高压灭菌锅的使用 2、何谓灭菌?简述热力灭菌的类型和原理。 3何时加入琼脂?融化时注意什么问题?分装的技术要求有 哪些? 4.棉塞的作用有哪些和技术要求?菌种培养时管口堵胶塞 或软木塞行吗?为什么?
(5) 包扎: 管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆,棉塞部分 用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称,制备组别和 姓名、日期等。 (6)、灭菌 (7)、摆斜面 (8)、存放冰箱(4-6C) 六、作业 1、简述高压灭菌锅的使用。 2、何谓灭菌?简述热力灭菌的类型和原理。 3.何时加入琼脂?融化时注意什么问题?分装的技术要求有 哪些? 4. 棉塞的作用有哪些和技术要求?菌种培养时管口堵胶塞 或软木塞行吗?为什么?
实验二、食用菌接种环境的消毒、灭菌与斜面接种 一.目的及要求: 1.掌握食用菌斜面接种方法及无菌操作技术。 2、能正确分析自己的接种效果。 基本原理:食用菌斜面接种是食用菌栽培过程 中最基本的方法之一,也是食用菌制种工作最 重要的一个环节。因为在食用菌栽培过程中, 旦斜面接种污染,后面的工作将无法进行, 故斜面菌种的接种、分离和移接非常重要,必 须在严格无菌操作条件下进行,才能获得纯菌 丝体(纯菌)
实验二、食用菌接种环境的消毒、灭菌与斜面接种 一.目的及要求: 1.掌握食用菌斜面接种方法及无菌操作技术。 2、能正确分析自己的接种效果。 二、基本原理:食用菌斜面接种是食用菌栽培过程 中最基本的方法之一,也是食用菌制种工作最 重要的一个环节。因为在食用菌栽培过程中, 一旦斜面接种污染,后面的工作将无法进行, 故斜面菌种的接种、分离和移接非常重要,必 须在严格无菌操作条件下进行,才能获得纯菌 丝体(纯菌)