石河子大学：《卫生学》课程教学资源（教案讲义）卫生学实习指导

卫生学 实习指导 石河子大学医学院预防医学系

卫生学 实习指导 石河子大学医学院预防医学系

实习一大气中二氧化硫的测定 (甲醛溶液吸收盐酸副玫瑰苯胺分光光度法)》 【目的要求】了解大气中二氧化硫的测定原理和方法。 【原理】大气中的二氧化硫被甲醛溶液吸收后，生成稳定的羟基甲基磺酸，加碱 后，与盐酸副玫瑰苯胺（简称PRA)作用，生成紫红色化合物，根据颜色深浅进行比色 定量。本法检出下限为0.3μg10ml(按与吸光度0.01相对应的浓度计)：测定范围为 10ml样品溶液中含0.3μg一20μg二氧化硫：若采样体积为20L,可测浓度范围是0.01 mg/m3-lmgm3。 【器材】空气采样器：流量范围0.1min~1Umin:普通型多孔玻板吸收管：25ml 具塞比色管：分光光度计。 【试剂】本法所用试剂纯度除特别注明外均为分析纯，水为重蒸馏水或去离子水 亦可用石英蒸馏器蒸馏的一次水。 1、吸收贮备液（甲醛邻苯二甲酸氢钾缓冲液）：称量2.04g邻苯二甲酸氢钾和 0.364g乙二胺四乙酸二钠（简称EDTA-2Na)溶于水中，移入1L容量瓶中，再加入5.30ml 37%甲醛溶液，用水稀释至刻度。贮于冰箱，可保存一年。 2、吸收应用液：临用时，将上述吸收贮备液用水稀释10倍。 3、2molL氢氧化钠溶液：称取8.0g氢氧化钠溶于100ml水中。 4、0.3%氨磺酸钠溶液：称取0.3g氨磺酸，加入3.0ml2mol/L氢氧化钠溶液，用 水稀释至100ml. 5、1mol/L盐酸溶液：量取浓盐酸（优级纯，p20=1.19gml)86ml,用水稀 至1000ml。 6、0.25%PRA溶液贮备液：称取0.125gPRA(C1H1NCI·3HC),用1molL盐 酸溶解并稀释至50ml。 7、4.5molL磷酸溶液：量取浓磷酸307ml,用水稀释至1L。 8、0.025%PRA工作液：吸取0.25%的贮备液25ml,移入250ml容量瓶中，用 4.5molL磷酸溶液稀释至刻度，放置24h后使用。此溶液避光密封保存，可使用9个 月 9、二氧化硫标准溶液贮备液：称取0.2g亚硫酸钠(NSO)及0.01g乙二胺四乙酸 二钠盐(EDTA-2Na)溶于200ml新煮沸并冷却的水中。此溶液每毫升含有相当于32(

1 实习一 大气中二氧化硫的测定 （甲醛溶液吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法） 【目的要求】了解大气中二氧化硫的测定原理和方法。 【原理】大气中的二氧化硫被甲醛溶液吸收后，生成稳定的羟基甲基磺酸，加碱 后，与盐酸副玫瑰苯胺(简称 PRA)作用，生成紫红色化合物，根据颜色深浅进行比色 定量。本法检出下限为 0.3μg/10ml(按与吸光度 0.01 相对应的浓度计)；测定范围为 10ml 样品溶液中含 0.3μg~20μg 二氧化硫；若采样体积为 20L，可测浓度范围是 0.015 mg/m3~1mg/m3。 【器材】空气采样器：流量范围 0.1 L/min～1L/min；普通型多孔玻板吸收管；25ml 具塞比色管；分光光度计。 【试剂】本法所用试剂纯度除特别注明外均为分析纯，水为重蒸馏水或去离子水； 亦可用石英蒸馏器蒸馏的一次水。 1、吸收贮备液（甲醛-邻苯二甲酸氢钾缓冲液）：称量 2.04g 邻苯二甲酸氢钾和 0.364g 乙二胺四乙酸二钠(简称 EDTA-2Na)溶于水中，移入 1L 容量瓶中，再加入 5.30ml 37％甲醛溶液，用水稀释至刻度。贮于冰箱，可保存一年。 2、吸收应用液：临用时，将上述吸收贮备液用水稀释 10 倍。 3、2mol/L 氢氧化钠溶液：称取 8.0g 氢氧化钠溶于 100ml 水中。 4、0.3％氨磺酸钠溶液：称取 0.3g 氨磺酸，加入 3.0ml 2mol/L 氢氧化钠溶液，用 水稀释至 100ml。 5、1mol/L 盐酸溶液：量取浓盐酸（优级纯，ρ20＝1.19g/ml） 86ml，用水稀释 至 1000 ml。 6、0.25％PRA 溶液贮备液：称取 0.125g PRA (C19H18N3Cl·3HCl)，用 1mol/L 盐 酸溶解并稀释至 50ml。 7、4.5mol/L 磷酸溶液：量取浓磷酸 307ml，用水稀释至 1L。 8、 0.025％PRA 工作液：吸取 0.25％的贮备液 25ml，移入 250ml 容量瓶中，用 4.5mol/L 磷酸溶液稀释至刻度，放置 24h 后使用。此溶液避光密封保存，可使用 9 个 月。 9、二氧化硫标准溶液贮备液：称取 0.2g 亚硫酸钠(Na2SO3)及 0.01g 乙二胺四乙酸 二钠盐(EDTA-2Na) 溶于 200ml 新煮沸并冷却的水中。此溶液每毫升含有相当于 320

μg~400μg二氧化硫。溶液需放置2h-3劲后标定其准确浓度（标定方法见附注）。按 标定计算的结果，立即用吸收液稀释成每毫升含25μg二氧化硫的标准贮备液，于冰 箱贮存可保存三个月。 10、二氧化硫标准工作溶液：用吸收液将标准贮备液稀释成每毫升含5μg二氧化 疏的标准工作液，贮于冰箱可保存一个月。25℃以下室温条件可保存3d。 【操作步骤： 1、采样：用一只内装有8ml吸收液的普通型多孔玻板吸收管安装于空气采样器 上，以0.5/min流量，采样30min~60min。将采样体积换算成标准状况下的采样体 积Va 2、分析： (1)标准曲线的绘制：用6支25ml比色管，按表1制备标准系列 实习表11二氧化硫标准系列 管号 012345 标准工作液(ml)00.201.002.003.004.00 吸收液(ml） 10.09.89.08.07.06.0 二氧化硫含量(4g)015101520 各管中分别加入1.0ml0.3%氨磺酸钠溶液、0.5ml2.0mol/L氢氧化钠溶液和1m 水，充分混匀后，再加入2.5ml0.025%PRA溶液快速射入混合液中，立即盖塞颠倒 混匀，放置5min-20min显色。于波长570nm处，用10mm比色皿，以水为参比，测 定各管吸光度。以吸光度值为纵坐标，二氧化硫含量(“g)为横坐标，绘制标准曲线， 并计算回归直线的斜率b。以b的倒数作为样品测定的计算因子Bs(μg吸光度)。 (2)样品测定：采样后，将吸收管中的吸收液移入25ml比色管，用少量吸收液 分两次洗涤吸收管，合并洗液于比色管中，使总体积为10ml。将该管与上述各标准系 列管同时操作，测得吸光度为A。 【计算】 C-(A-A)xB V。 式中：C一空气中二氧化硫的浓度，mgm3: A一—样品的吸光度： 2

2 μg～400μg 二氧化硫。 溶液需放置 2h~3h 后标定其准确浓度(标定方法见附注)。按 标定计算的结果， 立即用吸收液稀释成每毫升含 25μg 二氧化硫的标准贮备液，于冰 箱贮存可保存三个月。 10、二氧化硫标准工作溶液：用吸收液将标准贮备液稀释成每毫升含 5μg 二氧化 硫的标准工作液，贮于冰箱可保存一个月。25℃以下室温条件可保存 3d。 【操作步骤】： 1、采样：用一只内装有 8ml 吸收液的普通型多孔玻板吸收管安装于空气采样器 上，以 0.5L/min 流量，采样 30min～60min。将采样体积换算成标准状况下的采样体 积 V0。 2、分析： （1） 标准曲线的绘制：用 6 支 25ml 比色管，按表 1 制备标准系列。 实习表 1-1 二氧化硫标准系列 管 号 0 1 2 3 4 5 标准工作液(ml) 0 0.20 1.00 2.00 3.00 4.00 吸收液(ml) 10.0 9.8 9.0 8.0 7.0 6.0 二氧化硫含量(μg) 0 1 5 10 15 20 各管中分别加入 1.0ml 0.3％氨磺酸钠溶液、0.5ml 2.0mol/L 氢氧化钠溶液和 1ml 水， 充分混匀后，再加入 2.5ml 0.025％ PRA 溶液快速射入混合液中，立即盖塞颠倒 混匀，放置 5min~20min 显色。于波长 570nm 处，用 10mm 比色皿，以水为参比，测 定各管吸光度。以吸光度值为纵坐标，二氧化硫含量（μg）为横坐标，绘制标准曲线， 并计算回归直线的斜率 b。以 b 的倒数作为样品测定的计算因子 Bs（μg/吸光度）。 （2）样品测定：采样后，将吸收管中的吸收液移入 25ml 比色管，用少量吸收液 分两次洗涤吸收管，合并洗液于比色管中，使总体积为 10ml。将该管与上述各标准系 列管同时操作，测得吸光度为 A。 【计算】 0 0 ( ) V A A Bs C −  = 式中：C──空气中二氧化硫的浓度，mg/m3； A──样品的吸光度；

A。一试剂空白吸光度： Bs—计算因子，μg吸光度。 附注： 二氧化硫标准溶液标定方法：吸取20.00ml二氧化硫标准溶液，置于250ml碘量 瓶中，加入50ml新煮沸但己冷却的水，20.00ml碘溶液(0.1mol/L)及lml冰醋酸。 盖塞，摇匀。于暗处放置5min后，用0.1000mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至浅黄色， 加入2ml5gL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为终点。记录滴定所用硫代硫酸钠 的体积，平行3次，消耗硫代硫酸钠体积之差不应大于0.04ml,取其平均值：另吸取 3份含EDTA-2Na的空白水溶液20.00ml,用同法进行空白实验。记录空白滴定硫代硫 酸钠溶液的体积，平行滴定所消耗硫代硫酸钠体积之差不应大于0.04ml,取其平均值 二氧化硫标准溶液浓度计算 c=W1-V2C1x32.02x1000 20.00 式中：C一一二氧化硫标准溶液浓度，μgml: V,一一空白滴定所耗硫代硫酸钠标准容溶液的体积，ml: V2一一二氧化疏滴定所耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，ml: C1一一硫代硫酸钠标准溶液的浓度，moL: 32.02一一二氧化硫标准溶液摩尔质量的1/2

3 A0──试剂空白吸光度； Bs──计算因子，μg/吸光度。 附注： 二氧化硫标准溶液标定方法：吸取 20.00ml 二氧化硫标准溶液，置于 250ml 碘量 瓶中，加入 50ml 新煮沸但已冷却的水，20.00ml 碘溶液（0.1mol/L）及 1ml 冰醋酸， 盖塞，摇匀。于暗处放置 5min 后，用 0.1000mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至浅黄色， 加入 2ml 5g/L 淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为终点。记录滴定所用硫代硫酸钠 的体积，平行 3 次，消耗硫代硫酸钠体积之差不应大于 0.04ml，取其平均值；另吸取 3 份含 EDTA-2Na 的空白水溶液 20.00ml，用同法进行空白实验。记录空白滴定硫代硫 酸钠溶液的体积，平行滴定所消耗硫代硫酸钠体积之差不应大于 0.04ml，取其平均值。 二氧化硫标准溶液浓度计算： 1000 20.00 C 32.02 1 V ) V1 2 ( C  −  = 式中：C——二氧化硫标准溶液浓度，μg/ml； V1——空白滴定所耗硫代硫酸钠标准容溶液的体积，ml； V2——二氧化硫滴定所耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，ml； C1——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L； 32.02——二氧化硫标准溶液摩尔质量的 1/2

实习二室内空气中甲醛的测定 酚试剂分光光度法) 【目的要求】了解室内空气中甲醛测定原理与方法。 【原理】空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧 化形成蓝绿色化合物。根据颜色深浅，比色定量。 【器材】大气采样器：流量范围01L/mn,流量稳定可调，具有定时装置 分光光度计：在630nm测定吸光度：10ml大型气泡吸收管：10l具塞比色管： 吸管若干支：空盒气压计： 【试剂】本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水；所用的试剂纯度为 分析纯。 1.吸收液原液：称量O.10g酚试剂[CHSN(CH)C:NWH·HC1,简称MBT),加 水溶解，倾于100ml具塞量筒中，加水到刻度。放冰箱中保存，可稳定3d。 2.吸收液：量取吸收原液5ml,加95l水。临用前现配。 3.1%硫酸铁铵溶液：称量1.0g硫酸铁铵[NHFe(S0)212L0]用0.1mol几 盐酸溶解，并稀释至100l。 4.0.1000mo1/L碘溶液：称量30g碘化钾，溶于25m1水中，加入12.7g 碘。待碘完全溶解后，用水定容至1000ml。移入棕色瓶中，暗处贮存。 5.1o1/L氢氧化钠溶液：称量40g氢氧化钠，溶于水中，并稀释至1000ml。 6.0.5m01/L硫酸溶液：取28ml浓疏酸缓慢加入水中，冷却后，稀释至1000 ml。 7.0.1000mol/L碘酸钾标准溶液：准确称量3.5667g经105℃烘干2h的碘 酸钾（优级纯），溶解于水，移入1L容量瓶中，再用水定溶至1000■l。 8.0.1olL盐酸溶液：量取82l浓盐酸加水稀释至1000l。 9.1%淀粉溶液：将1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，再加入100ml沸 水，并煮沸23min至溶液透明。冷却后，加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌保存。 10.硫代硫酸钠标准溶液：称量25g硫代硫酸钠(NaS05L0),溶于1000ml 新煮沸并己放冷的水中，此溶液浓度约为0.1mol/儿。加入0.2g无水碳酸钠，贮 存于棕色瓶内，放置一周后，再标定其准确浓度。 4

4 实习二 室内空气中甲醛的测定 (酚试剂分光光度法) 【目的要求】 了解室内空气中甲醛测定原理与方法。 【原理】 空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧 化形成蓝绿色化合物。根据颜色深浅，比色定量。 【器材】 大气采样器：流量范围 0~1 L/min，流量稳定可调，具有定时装置； 分光光度计：在 630 nm 测定吸光度；10 ml 大型气泡吸收管；10 ml 具塞比色管； 吸管若干支；空盒气压计； 【试剂】 本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水；所用的试剂纯度为 分析纯。 1. 吸收液原液：称量 0.10 g 酚试剂[C6 H4SN(CH3)C:NNH2•HCl，简称 MBTH]，加 水溶解，倾于 100 ml 具塞量筒中，加水到刻度。放冰箱中保存，可稳定 3 d。 2. 吸收液：量取吸收原液 5 ml，加 95 ml 水。临用前现配。 3. 1%硫酸铁铵溶液：称量 1.0 g 硫酸铁铵[NH4Fe (SO4)2 •12 H2 O]用 0.1 mol/L 盐酸溶解，并稀释至 100 ml。 4. 0.1000 mol/L 碘溶液：称量 30 g 碘化钾，溶于 25 ml 水中，加入 12.7 g 碘。待碘完全溶解后，用水定容至 1000 ml。移入棕色瓶中，暗处贮存。 5. 1 mol/L 氢氧化钠溶液：称量 40 g 氢氧化钠，溶于水中，并稀释至 1000 ml。 6. 0.5 mol/L 硫酸溶液：取 28 ml 浓硫酸缓慢加入水中，冷却后，稀释至 1000 ml。 7. 0.1000 mol/L 碘酸钾标准溶液：准确称量 3.5667 g 经 105℃烘干 2 h 的碘 酸钾(优级纯)，溶解于水，移入 1 L 容量瓶中，再用水定溶至 1000 ml。 8. 0.1 mol/L 盐酸溶液：量取 82 ml 浓盐酸加水稀释至 1000 ml。 9. 1%淀粉溶液：将 1 g 可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，再加入 100 ml 沸 水，并煮沸 2~3 min 至溶液透明。冷却后，加入 0.1 g 水杨酸或 0.4 g 氯化锌保存。 10. 硫代硫酸钠标准溶液：称量 25 g 硫代硫酸钠(Na2 S2O3 •5H2 O)，溶于 1000 ml 新煮沸并已放冷的水中，此溶液浓度约为 0.1 mol/L。加入 0.2 g 无水碳酸钠，贮 存于棕色瓶内，放置一周后，再标定其准确浓度

硫代硫酸钠溶液的标定：精确量取25.00m10.1000mo1九碘酸钾标准溶液， 于250ml碘量瓶中，加入75l新煮沸后冷却的水，加3g碘化钾及10m10.1mol/L 盐酸溶液，摇匀后放入暗处静置3m。用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘，至 淡黄色，加入1ml新配制的1%淀粉溶液呈蓝色。再继续滴定至蓝色刚刚褐去，即 为终点，记录所用硫代硫酸钠溶液体积V(m),其准确浓度用下式计算： 硫代硫酸钠标准溶液浓度)=010x250 平行滴定两次，所用硫代硫酸钠溶液相差不能超过0.05m1,否则应重新做平 行测定。 11.甲醛标准贮备溶液：取2.8ml含量为36%38%甲醛溶液，放入1L容量 瓶中，加水稀释至刻度。此溶液1m1约相当于1g甲醛。其准确浓度用下述碘量 法标定。 甲醛标准贮备溶液的标定：精确量取20.00m1待标定的甲醛标准贮备溶液， 置于250m1碘量瓶中。加入20.00ml0.1000o1/L碘溶液和15ml1mo1/L氢 氧化钠溶液，放置15min,加入20ml0.5mol/L硫酸溶液，再放置15min,用 标定后的硫代硫酸钠标准溶液滴定，至溶液呈现淡黄色时，加入1ml新配制的1% 淀粉溶液，此时呈蓝色，继续滴定至蓝色刚刚褪去为止。记录所用硫代硫酸钠溶液 体积V:(伽1)。同时用水作试剂空白滴定，操作步骤完全同上，记录空白滴定所用 硫代硫酸钠溶液的体积V,()。甲醛溶液的浓度用公式下述公式计算： 甲整溶液浓度(g1m=-)xNx15 2000 式中：V一一试剂空白消耗标定后的硫代硫酸钠溶液的体积，m1: V:一一甲醛标准贮备溶液消耗标定后的硫代硫酸钠溶液的体积，■1： N一一硫代硫酸钠溶液的准确当量浓度： 15-一甲醛的当量： 20一一所取甲醛标准贮备溶液的体积(1)。 二次平行滴定，误差应小于0.05ml,否则重新标定。 12.甲醛标准溶液：临用时，将甲醛标准贮备溶液用水稀释成1.00m1含10g 甲醛，立即再取此溶液10.00ml,加入100m1容量瓶中，加入5l吸收原液， 用水定容至100ml,此液1.00ml含L.00g甲醛，放置30min后，用于配制标 准色列管。此标准溶液可稳定24h。 【操作步骤】

5 硫代硫酸钠溶液的标定：精确量取 25.00 ml 0.1000 mol/L 碘酸钾标准溶液， 于 250 ml 碘量瓶中，加入 75 ml 新煮沸后冷却的水，加 3 g 碘化钾及 10 ml 0.1mol/L 盐酸溶液，摇匀后放入暗处静置 3 min。用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘，至 淡黄色，加入 1 ml 新配制的 1%淀粉溶液呈蓝色。再继续滴定至蓝色刚刚褪去，即 为终点，记录所用硫代硫酸钠溶液体积 V (ml)，其准确浓度用下式计算： V N 0.10 25.00 ( )  硫代硫酸钠标准溶液浓度 = 平行滴定两次，所用硫代硫酸钠溶液相差不能超过 0.05 ml，否则应重新做平 行测定。 11. 甲醛标准贮备溶液：取 2.8 ml 含量为 36%~38%甲醛溶液，放入 1 L 容量 瓶中，加水稀释至刻度。此溶液 1 ml 约相当于 1 mg 甲醛。其准确浓度用下述碘量 法标定。 甲醛标准贮备溶液的标定：精确量取 20.00 ml 待标定的甲醛标准贮备溶液， 置于 250 ml 碘量瓶中。加入 20.00 ml 0.1000 mol/L 碘溶液和 15 ml 1 mol/L 氢 氧化钠溶液，放置 15 min，加入 20 ml 0.5 mol/L 硫酸溶液，再放置 15 min，用 标定后的硫代硫酸钠标准溶液滴定，至溶液呈现淡黄色时，加入 1 ml 新配制的 1% 淀粉溶液，此时呈蓝色，继续滴定至蓝色刚刚褪去为止。记录所用硫代硫酸钠溶液 体积 V2 (ml)。同时用水作试剂空白滴定，操作步骤完全同上，记录空白滴定所用 硫代硫酸钠溶液的体积 V1 (ml)。甲醛溶液的浓度用公式下述公式计算： 20.00 ( ) 15 ( / ) 1 − 2   = V V N 甲醛溶液浓度 mg ml 式中：V1——试剂空白消耗标定后的硫代硫酸钠溶液的体积，ml； V2——甲醛标准贮备溶液消耗标定后的硫代硫酸钠溶液的体积，ml； N——硫代硫酸钠溶液的准确当量浓度； 15——甲醛的当量； 20——所取甲醛标准贮备溶液的体积(ml)。 二次平行滴定，误差应小于 0.05 ml，否则重新标定。 12. 甲醛标准溶液：临用时，将甲醛标准贮备溶液用水稀释成 1.00 ml 含 10 g 甲醛，立即再取此溶液 10.00 ml，加入 100 ml 容量瓶中，加入 5 ml 吸收原液， 用水定容至 100 ml，此液 1.00 ml 含 1.00 g 甲醛，放置 30 min 后，用于配制标 准色列管。此标准溶液可稳定 24h。 【操作步骤】

1.用一个内装5ml吸收液的大型气泡吸收管，以0.5L/min流量，采气10L。 并记录采样点的温度和大气压力。采样后样品在室温下应在24h内分析。 2。采样后，将样品溶液全部转入比色管中，用少量吸收液洗吸收管，合并使 总体积为5m1,混匀。按下表配制标准管系列。 实习表2-1甲醛溶液标准系列 管号01234567 标准溶液(m） 00.100.200.400.600.801.001.50 吸收液(l) 5.04.94.84.64.44.24.03.5 甲醛含量(8)00.10.20.40.60.81.01.5 向样品管及标准管中各加入0.4ml1%硫酸铁胺溶液，摇匀。放置15min。用 1cm比色皿，在波长630m下，测定各管溶液的光密度，与标准系列比较定量。 【计算】 1.将采样体积换算成标准状态下采样体积 o=h×273+0x70 273×P 式中：一一采样体积L): P一一采样点的大气压力(mHg) t一一采样点的气温（℃）。 2.空气中甲醛浓度计算 空气中甲醛浓度(mg/M)=。 式中：C一一相当标准系列甲醛的含量（μg): Vo- 一换算成标准状态下的采样体积(L)

6 1. 用一个内装 5 ml 吸收液的大型气泡吸收管，以 0.5 L/min 流量，采气 10 L。 并记录采样点的温度和大气压力。采样后样品在室温下应在 24 h 内分析。 2. 采样后，将样品溶液全部转入比色管中，用少量吸收液洗吸收管，合并使 总体积为 5 ml，混匀。按下表配制标准管系列。 实习表 2-1 甲醛溶液标准系列 管 号 0 1 2 3 4 5 6 7 标准溶液(ml) 0 0.10 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.50 吸收液(ml) 5.0 4.9 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 3.5 甲醛含量(g) 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.5 向样品管及标准管中各加入 0.4 ml 1%硫酸铁胺溶液，摇匀。放置 15 min。用 1 cm 比色皿，在波长 630 nm 下，测定各管溶液的光密度，与标准系列比较定量。 【计算】 1. 将采样体积换算成标准状态下采样体积 (273 ) 760 273 0 +   =  t P V Vt 式中： Vt ——采样体积(L)； P——采样点的大气压力(mmHg)； t——采样点的气温(℃)。 2. 空气中甲醛浓度计算 0 3 ( / ) V C 空气中甲醛浓度 mg M = 式中：C——相当标准系列甲醛的含量(g)； V 0 ——换算成标准状态下的采样体积(L)

实习三饮水消毒 【目的要求】熟悉漂白粉中有效氯含量、水的余氯量及漂白粉加入量测定的方 法。 一、漂白粉中有效氯含量的测定 (碘量法) 【原理】漂白粉中的有效氯在酸性溶液中可氧化碘化钾而析出碘，用硫代硫酸钠 标准溶液滴定析出的碘，根据硫代硫酸钠的消耗量即可计算出漂白粉中有效氯的含量。 2KI+2CHCOOH -2CH3COOK +2HI 【器材】250ml碘量瓶：100ml容量瓶：研体：150ml烧杯：25ml移液管：碱性 滴定管。 【试剂】0.025molL硫代硫酸钠标准溶液：0.5%淀粉溶液：碘化钾、冰醋酸。 配制0.025mol/L硫代硫酸钠标准溶液： (1)称取25g疏代硫酸钠(NaS0·5H:0),溶于1L蒸馏水中，加入0.4g氢 氧化钠以防分解，贮存于棕色瓶中，放置一周后进行标定。 (2)标定方法：准确称取经105℃干燥2h的分析纯碘酸钾两份，每份约0.1500g: 分别放入250ml碘量瓶中：于每瓶中加入100ml蒸馏水，加热使碘酸钾溶解：再加入 碘化钾3g和冰醋酸10ml,置于暗处5min,用待标定的疏代硫酸钠滴定至溶液呈淡黄 色时，加入0.5%淀粉溶液1ml继续滴定至蓝色刚褪去即为终点，记录用量：用下式计 算硫代硫酸钠溶液的浓度，以两份的平均值表示结果。 m(K0,)×1000 式中：m一一碘酸钾的质量，35.667一一碘酸钾的摩尔质量/6。 将经过标定的0.1000mo/LNaS,O溶液用煮沸冷却后的蒸馏水稀释成 0.025mol/L。 【操作步骤】

7 实习三 饮水消毒 【目的要求】 熟悉漂白粉中有效氯含量、水的余氯量及漂白粉加入量测定的方 法。 一、漂白粉中有效氯含量的测定 （碘量法） 【原理】 漂白粉中的有效氯在酸性溶液中可氧化碘化钾而析出碘，用硫代硫酸钠 标准溶液滴定析出的碘，根据硫代硫酸钠的消耗量即可计算出漂白粉中有效氯的含量。 2KI + 2CH3COOH → 2CH3COOK + 2HI 2HI + Ca(OCl)Cl → CaCl2 + 2H2O+ I2 I2 + 2Na2S2O3→ Na2S4O6 + 2NaI 【器材】250ml 碘量瓶；100ml 容量瓶；研钵；150ml 烧杯；25ml 移液管；碱性 滴定管。 【试剂】0.025mol/L 硫代硫酸钠标准溶液；0.5%淀粉溶液；碘化钾、冰醋酸。 配制 0.025mol/L 硫代硫酸钠标准溶液： （1）称取 25g 硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O），溶于 1L 蒸馏水中，加入 0.4g 氢 氧化钠以防分解，贮存于棕色瓶中，放置一周后进行标定。 （2）标定方法：准确称取经 105℃干燥 2h 的分析纯碘酸钾两份，每份约 0.1500g， 分别放入 250ml 碘量瓶中；于每瓶中加入 100ml 蒸馏水，加热使碘酸钾溶解；再加入 碘化钾 3g 和冰醋酸 10ml，置于暗处 5min，用待标定的硫代硫酸钠滴定至溶液呈淡黄 色时，加入 0.5%淀粉溶液 1ml 继续滴定至蓝色刚褪去即为终点，记录用量；用下式计 算硫代硫酸钠溶液的浓度，以两份的平均值表示结果。 式中：m——碘酸钾的质量，35.667——碘酸钾的摩尔质量/6。 将经过标定的 0.1000mol/L Na2S2O3 溶液用煮沸冷却后的蒸馏水稀释成 0.025mol/L。 【操作步骤】 Na S O ml 35.667 m KIO 1000 Na S O mol / L 2 2 3 3 2 2 3   = 用量（ ） （ ） 溶液的浓度（ ）

1、配制0.71%漂白粉样品悬液：称取有代表性的漂白粉样品0.71g,置于150ml 烧杯内，加入少许蒸馏水，用玻棒搅拌使成悬液，倾入100ml容量瓶内。用少许蒸馏 水冲洗烧杯3次，将全部洗液移入容量瓶内，加蒸馏水至刻度线，盖上瓶塞颠倒混匀 2、在250ml碘量瓶中加入0.75g(或10%K溶液7.5ml)碘化钾及80ml蒸馏水， 使之溶解，再加入2ml冰醋酸。然后用移液管吸取25ml样品悬液，加入碘量瓶中。 此时立即产生棕色，振荡混匀，静置5min。 3、自滴定管中加入0.025mo/L硫代硫酸钠标准溶液，不断振摇，直至变成淡黄 色，然后加入1ml淀粉溶液，溶液即呈蓝色，继续滴定至蓝色刚消失，记录用量V。 【计算】 式中：V-一0.025molL硫代硫酸钠标准溶液用量，ml。 滴定时用去的0.025molL硫代硫酸钠的ml数即代表该种漂白粉的百分数。 二、余氯的测定 (邻联甲苯胺比色法) 【原理】在pH小于1.8的酸性溶液中，水中余氯与邻联甲苯胺（甲土立丁作用 产生黄色的联苯醒化合物，根据其颜色的深浅进行比色定量。 【器材】余氣比色测定器1个：10ml比色管。 【试剂】甲土立丁溶液：称取甲土立丁1.35g,溶于500ml纯水中，在不停搅拌 下加至150ml浓盐酸与350ml蒸馏水的混合液中，存于棕色试剂瓶中，在室温下保存 可使用半年。 【操作步骤】 加0.5ml(或10滴)甲土立丁溶液于10m比色管中，加水样至10ml刻度处，混匀。 如立即进行比色，所得结果为游离性余氯：如放置10min使其产生最高色度再比色， 所得结果为总余氯。总余氯减去游离性余氯等于化合性余氯。余氯的浓度为mgL。 注意事项： 1、水样温度在15℃~20℃时显色最好，如水温较低时，可适当加温再进行比色。 8

8 1、配制 0.71%漂白粉样品悬液：称取有代表性的漂白粉样品 0.71g，置于 150ml 烧杯内，加入少许蒸馏水，用玻棒搅拌使成悬液，倾入 100ml 容量瓶内。用少许蒸馏 水冲洗烧杯 3 次，将全部洗液移入容量瓶内，加蒸馏水至刻度线，盖上瓶塞颠倒混匀。 2、在 250ml 碘量瓶中加入 0.75g（或 10%KI 溶液 7.5ml）碘化钾及 80ml 蒸馏水， 使之溶解，再加入 2ml 冰醋酸。然后用移液管吸取 25ml 样品悬液，加入碘量瓶中。 此时立即产生棕色，振荡混匀，静置 5min。 3、自滴定管中加入 0.025mol/L 硫代硫酸钠标准溶液，不断振摇，直至变成淡黄 色，然后加入 1ml 淀粉溶液，溶液即呈蓝色，继续滴定至蓝色刚消失，记录用量 V。 【计算】 式中：V——0.025mol/L 硫代硫酸钠标准溶液用量，ml。 滴定时用去的 0.025mol/L 硫代硫酸钠的 ml 数即代表该种漂白粉的百分数。 二、余氯的测定 （邻联甲苯胺比色法） 【原理】 在 pH 小于 1.8 的酸性溶液中，水中余氯与邻联甲苯胺(甲土立丁)作用 产生黄色的联苯醌化合物，根据其颜色的深浅进行比色定量。 【器材】余氯比色测定器 1 个；10ml 比色管。 【试剂】 甲土立丁溶液：称取甲土立丁 1.35g，溶于 500ml 纯水中，在不停搅拌 下加至 150ml 浓盐酸与 350ml 蒸馏水的混合液中，存于棕色试剂瓶中，在室温下保存 可使用半年。 【操作步骤】 加 0.5ml(或 10 滴)甲土立丁溶液于 10m 比色管中，加水样至 10ml 刻度处，混匀。 如立即进行比色，所得结果为游离性余氯；如放置 10min 使其产生最高色度再比色， 所得结果为总余氯。总余氯减去游离性余氯等于化合性余氯。余氯的浓度为 mg/L。 注意事项： 1、水样温度在 15℃~20℃时显色最好，如水温较低时，可适当加温再进行比色。 V 0.71 100 25 10 2000 70.91 V 0.025 Cl2% =     有效氯（ ）=

2、如产生淡蓝绿色，可能由于水样碱度过高所致，可加入1：2的稀盐酸1ml 再进行比色。 3、如无余氯比色测定器，可根据下表估计水样中余氯的含量 实习表3-1余氯含量估计表 估计余氯量 是色 氯嗅程度 (mg/L) 0.3 淡黄色 刚能嗅出 0.5 黄色 容易嗅出 0.7-1.0 深黄色 明显啤出 2.0以上 棕黄色 有强烈刺激味 三、漂白粉加入量测定 【原理】取一定体积的水样数份，分别加入不同量的已知浓度的漂白粉稀释液 半小时后，用邻联甲苯胺比色法测定余氯，根据需氯量曲线求出合适的加氯量。 【器材】250ml碘量瓶：10ml具塞比色管。 【试剂】 L.甲土立丁溶液：见余氯的测定。 2.0.10%有效氯标准液：称取已知有效氯含量的漂白粉适量，用少量蒸馏水调成 糊状，加蒸馏水至200ml,迅速过滤一次，然后测定有效氯含量。根据测定结果吸取 适量该漂白粉溶液，用需氯量为零的蒸馏水稀释至100ml,配成标准的0.10%有效氯 标准溶液，因此液易分解须临用前配制。 需氯量为零的蒸馏水用不含氨及亚硝酸盐的蒸馏水煮沸5m,放冷后即可。 【操作步骤】 1、将5个250ml碘量瓶依次排好，编好号，每瓶加入100ml水样。然后于各瓶 中依次加入0.25、0.5、0.75、1.0、1.5ml(或根据水样情况前定)0.10%有效氯标准 液，盖好瓶塞，摇匀，静置半小时。加标准液时，每瓶相隔2min-3min,以便有充分 的时间测定余氯。 2、半小时后，用邻联甲苯胺比色法测定各杯中余氯含量（见余氯的测定）

9 2、如产生淡蓝绿色，可能由于水样碱度过高所致，可加入 1：2 的稀盐酸 1ml 再进行比色。 3、如无余氯比色测定器，可根据下表.估计水样中余氯的含量。 实习表 3-1 余氯含量估计表 估计余氯量 (mg/L) 呈色 氯嗅程度 0.3 0.5 0.7-1.0 2.0 以上 淡黄色 黄色 深黄色 棕黄色 刚能嗅出 容易嗅出 明显嗅出 有强烈刺激味 三、漂白粉加入量测定 【原理】 取一定体积的水样数份，分别加入不同量的已知浓度的漂白粉稀释液， 半小时后，用邻联甲苯胺比色法测定余氯，根据需氯量曲线求出合适的加氯量。 【器材】250ml 碘量瓶；10ml 具塞比色管。 【试剂】 1. 甲土立丁溶液：见余氯的测定。 2. 0.10%有效氯标准液：称取已知有效氯含量的漂白粉适量，用少量蒸馏水调成 糊状，加蒸馏水至 200ml，迅速过滤一次，然后测定有效氯含量。根据测定结果吸取 适量该漂白粉溶液，用需氯量为零的蒸馏水稀释至 100ml，配成标准的 0.10%有效氯 标准溶液，因此液易分解须临用前配制。 需氯量为零的蒸馏水用不含氨及亚硝酸盐的蒸馏水煮沸 5min，放冷后即可。 【操作步骤】 1、将 5 个 250ml 碘量瓶依次排好，编好号，每瓶加入 100ml 水样。然后于各瓶 中依次加入 0.25、0.5、0.75、1.0、1.5ml（或根据水样情况酌定） 0.10%有效氯标准 液，盖好瓶塞，摇匀，静置半小时。加标准液时，每瓶相隔 2min-3min，以便有充分 的时间测定余氯。 2、半小时后，用邻联甲苯胺比色法测定各杯中余氯含量(见余氯的测定)