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遵义医科大学:《医学免疫学》课程教学资源(PPT实验专题课件)高级免疫学流式细胞术 FLOW CYTOMETER,FCM(授课老师:马锐)

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• 流式细胞技术原理 • 样本处理 • 荧光抗体选择 • 结果数据分析
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·流式细胞技术原理 ·样本处理 。 荧光抗体选择 ·结果数据分析

• 流式细胞技术原理 • 样本处理 • 荧光抗体选择 • 结果数据分析

流式细胞术 ·流式细胞术是利用流式细胞仪对处于快速直线流 动状态中的微粒(细胞或亚细胞结构)进行多参 数快速的定量分析和分选的技术。 ·流式细胞技术是针对单细胞水平上的细胞/微粒的 物理和化学特性的分析。 。1 研究的对象是生物颗粒,如各种细胞、微生物、 染色体及人工合成微球等

流式细胞术 • 流式细胞术是利用流式细胞仪对处于快速直线流 动状态中的微粒(细胞或亚细胞结构)进行多参 数快速的定量分析和分选的技术。 • 流式细胞技术是针对单细胞水平上的细胞/微粒的 物理和化学特性的分析。 • 研究的对象是生物颗粒,如各种细胞、微生物、 染色体及人工合成微球等

流式细胞仪 ·流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、 光电测量技术、计算机技术、细胞荧光化 学技术和单克隆抗体技术为一体的高科技 细胞分析仪 ·主要组成部分: 光路系统、液流系统、信号转换及放大系 统、数据收集处理系统

流式细胞仪 • 流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、 光电测量技术、计算机技术、细胞荧光化 学技术和单克隆抗体技术为一体的高科技 细胞分析仪 • 主要组成部分: 光路系统、液流系统、信号转换及放大系 统、数据收集处理系统

Injector Tip Fluorescence signals Focused laser beam

Injector Tip Fluorescence signals Focused laser beam Sheath fluid

侧向散射光及荧光 (SS)(FL1—FL4) 前向散射光 Laser (FS) Beam Flow Cell

流式细胞术的特点 ·针对单个细胞或微粒 ·同时多参数分析 ·分析反应速度快:10000个/秒 ·提供细胞群体的均值和分布情况

流式细胞术的特点 • 针对单个细胞或微粒 • 同时多参数分析 • 分析反应速度快:10000个/秒 • 提供细胞群体的均值和分布情况

检测范围 细胞功能 细胞结构 。细胞表面/胞浆/核 。细胞大小 的特异性抗原 ●细胞活性 细胞粒度 细胞表面面积 。细胞内细胞因子 核浆比例 ●酶活性 DNA含量与细胞周期 ●激素结合位点 ● RNA含量 细胞受体 ● ●蛋白质含量

检测范围 细胞功能 =细胞表面/胞浆/核 的特异性抗原 =细胞活性 =细胞内细胞因子 =酶活性 =激素结合位点 =细胞受体 细胞结构 =细胞大小 =细胞粒度 =细胞表面面积 =核浆比例 =DNA含量与细胞周期 =RNA含量 =蛋白质含量

流式细胞术临床应用 血液 免疫 白血病的免疫分型 淋巴细胞亚群分析 微小残留检测 HIV免疫分型,CD4绝对计数 网织红细胞计数 骨髓移植的免疫状态监测 阵发性血红蛋白尿(PNH) 造血干细胞计数 血小板功能及相关疾病 HLA-B27检测 肿瘤 CD64检测与感染 肿瘤的细胞周期和倍体分析 肿瘤相关基因表达的研究

流式细胞术临床应用 • 淋巴细胞亚群分析 • HIV免疫分型,CD4绝对计数 • 骨髓移植的免疫状态监测 • 造血干细胞计数 • HLA-B27检测 • CD64检测与感染 白血病的免疫分型 微小残留检测 网织红细胞计数 阵发性血红蛋白尿(PNH) 血小板功能及相关疾病 肿瘤的细胞周期和倍体分析 肿瘤相关基因表达的研究

科研应用 ·免疫功能研究(淋巴细胞亚群分析、细胞活化、细胞因子) ·磷酸化蛋白的检测 ·干细胞研究/树突细胞研究 ●细胞功能研究(细胞内PH值、细胞内钙离子流、细胞膜电位、线粒体 膜电位、活性氧等) ·血小板分析(心脑血管疾病) ·肿瘤相关基因表达的研究 ●抗肿瘤药物作用机制以及多药耐药性的研究 ·细胞周期和倍体分析 ·细胞调亡及凋亡相关蛋白 ●转染&基因沉默效率检测 ·细胞分选、分选后培养及相关生物学研究 ●

科研应用 = 免疫功能研究(淋巴细胞亚群分析、细胞活化、细胞因子) = 磷酸化蛋白的检测 = 干细胞研究/树突细胞研究 = 细胞功能研究(细胞内PH值、细胞内钙离子流、细胞膜电位、线粒体 膜电位、活性氧等) = 血小板分析(心脑血管疾病) = 肿瘤相关基因表达的研究 = 抗肿瘤药物作用机制以及多药耐药性的研究 = 细胞周期和倍体分析 = 细胞凋亡及凋亡相关蛋白 = 转染&基因沉默效率检测 = 细胞分选、分选后培养及相关生物学研究 = ……

样品 血液或骨髓 ·体液和各种灌洗液 各种组织细胞 ·培养细胞

样品 • 血液或骨髓 • 体液和各种灌洗液 • 各种组织细胞 • 培养细胞

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