第四节细胞培养技术
第四节 细胞培养技术
体外细胞培养技术 细胞培养(cel! culture):是指从活体中取 出小块组织分离出细胞,在一定条件下进行培养 使之能继续生存、生长、增殖的一种方法。 优点:离体条件下观察细胞生命活动规律,不 受体内环境影响可人为改变条件,进一步观察生理 功能的改变
一、体外细胞培养技术 细胞培养（cell culture）：是指从活体中取 出小块组织分离出细胞，在一定条件下进行培养， 使之能继续生存、生长、增殖的一种方法。 优点：离体条件下观察细胞生命活动规律，不 受体内环境影响可人为改变条件，进一步观察生理 功能的改变
INⅥITRO:(离体的,即在玻璃容器中)用培养细 胞进行的实验 IN VIVO:(在体内的)完整机体内进行的实验 生化学家把在活细胞外进行的生化反应叫|N VITR0,在活细胞内发生的生化反应叫NVv0
IN VITRO:（离体的，即在玻璃容器中）用培养细 胞进行的实验 IN VIVO:（在体内的）完整机体内进行的实验 生化学家把在活细胞外进行的生化反应叫IN VITRO，在活细胞内发生的生化反应叫IN VIVO
原代培养( pr i mary culture): 直接取材于有机体组织的细胞进行培养 传代培养( secondary culture): 把原代培养的细胞从培养瓶中取出进行培养 细胞体外培养所需的一般条件 适宜的培养皿血清成分37c5%02 95~100%湿度抗生素
原代培养（primary culture）： 直接取材于有机体组织的细胞进行培养 传代培养（secondary culture）： 把原代培养的细胞从培养瓶中取出进行培养 细胞体外培养所需的一般条件： 适宜的培养皿 血清成分 37℃ 5％CO2 95～100％湿度 抗生素
切割 胰蛋白酶消化 (4℃) 消化(37℃) 消化(37℃) 分离表皮和真皮 培养(真皮) 培养(表皮) 真皮细胞 2A真k细 Q(皮) (纤维细胞)
细胞系( seine) 在细胞培养中产生了具有无限增殖能力的 变种细胞,这种细胞可被无限的传代。 常见的细胞系: N|H3T3细胞系:1963年取自小鼠胚胎细胞建立 He|a细胞系:1952年取自人宫颈癌细胞建立
细胞系（cell line）： 在细胞培养中产生了具有无限增殖能力的 变种细胞，这种细胞可被无限的传代。 常见的细胞系： NIH3T3细胞系：1963年取自小鼠胚胎细胞建立 Hela细胞系：1952年取自人宫颈癌细胞建立
10m
二、细胞融合技术
二、细 胞 融 合 技 术
(一)、细胞融合( ce fusion):是指 将两个或两个以上的细胞合并形成一个细 胞的过程。 three clones of hybrid cells, each of which retains a small number of different human chromosomes SUSPENSION OF TWO CELL together with the full complement TYPES CENTRIFUGED AND of mouse chromosomes A FUSING AGENT ADDED SELECTIVE MEDIUM CELL FUSION AND ALLOWS ONLY FORMATION OF HETEROCARYONS TO HETEROCARYONS PROLIFERATE. THESE NHICH ARE BECOME HYBRID THEN PUT CELLS WHICH ARE THEN CLONED (● ( human mouse heterocaryon hybrid cel fibroblast tumor cell
（一）、细胞融合（cell fusion）：是指 将两个或两个以上的细胞合并形成一个细 胞的过程
异核体: 将两个不同类型的细胞融合 可使两个不同来源的细胞核在同 细胞中表达功能,这种细胞叫异核 体。常用灭活的仙台病毒或聚乙 醇(PEG)人工促使融合。异核体进 行有丝分裂则可产生杂种细胞
异核体： 将两个不同类型的细胞融合， 可使两个不同来源的细胞核在同一 细胞中表达功能，这种细胞叫异核 体。常用灭活的仙台病毒或聚乙二 醇（PEG）人工促使融合。异核体进 行有丝分裂则可产生杂种细胞