红随房养技术和箱 知识扩充 页→第十章细胞培养技术和培养箱 细胞培养枝木应用 一、细胞培养技术细胞生物学应用 生物体是一个高度统一的整体，而的主要对象是生物体内的各种细胞，很显然， 在整体条件下研究单个细胞或某一细胞群在体内(nvv0)的功能活动是非常困难的。 细胞培养的意义主要在于两点，其一是人工培养条件易于改变并能严格控制，便于研究 各种因素对细胞的结构、功能和各种生命活动规律的影响：其二是细胞在体外培养环境 中可以长期存活和传代，可以比较经济地、大量地提供在同一时期、条件相同、性状相 似的细胞作为实验样本。因此，大量生物医学研究工作依赖于细胞培养，许多重要的发 现都基于培养细胞的工作。 细胞培养技术也存在着一定局限性，主要是细胞离体以后失去与体内环境的密切取 系，失去了神经体液的调节和不同细胞间的相互作用，特定分化基因的表达减弱或停止， 而进化中保守的细胞生长和增殖活动却可维持，遂使体内外细胞出现了差异，这是应用 细胞培养技术应该注意的问题。 细胞培养技术除经典地用于细胞形态结构、功能和细胞活动研究以外，还成为近年 发展起来的细胞工程技术的基础，也就是说细胞培养技术重要应用就是各种细胞工程技 术。 一般地，细胞工程指应用各种手段对细胞不同结构层次（整体、细胞器、核、基因 等)进行改造，如进行细胞融合、核移植、基因转移等，以获得具有特定生物学特性的 细胞。 (一)细胞融合 在细胞自然生长情况下，或在其他人为添加因素存在下，使同种细胞之间或不同种
首页 → 第十章 细胞培养技术和培养箱 细胞培养技术应用 一、细胞培养技术细胞生物学应用 生物体是一个高度统一的整体，而的主要对象是生物体内的各种细胞，很显然， 在整体条件下研究单个细胞或某一细胞群在体内（in vivo）的功能活动是非常困难的。 细胞培养的意义主要在于两点，其一是人工培养条件易于改变并能严格控制，便于研究 各种因素对细胞的结构、功能和各种生命活动规律的影响；其二是细胞在体外培养环境 中可以长期存活和传代，可以比较经济地、大量地提供在同一时期、条件相同、性状相 似的细胞作为实验样本。因此，大量生物医学研究工作依赖于细胞培养，许多重要的发 现都基于培养细胞的工作。 细胞培养技术也存在着一定局限性，主要是细胞离体以后失去与体内环境的密切联 系，失去了神经体液的调节和不同细胞间的相互作用，特定分化基因的表达减弱或停止， 而进化中保守的细胞生长和增殖活动却可维持，遂使体内外细胞出现了差异，这是应用 细胞培养技术应该注意的问题。 细胞培养技术除经典地用于细胞形态结构、功能和细胞活动研究以外，还成为近年 发展起来的细胞工程技术的基础，也就是说细胞培养技术重要应用就是各种细胞工程技 术。 一般地，细胞工程指应用各种手段对细胞不同结构层次(整体、细胞器、核、基因 等)进行改造，如进行细胞融合、核移植、基因转移等，以获得具有特定生物学特性的 细胞。 （一）细胞融合 在细胞自然生长情况下，或在其他人为添加因素存在下，使同种细胞之间或不同种
类细胞之间相互融合的过程，即为细胞融合(cell fusion)。通过细胞融合，可将来源于 不同细胞核的染色体结合到同一个核内，结果形成一个合核体的杂种细胞。在实际工作 中常采用各种促融合手段，包括病毒类融合剂如仙台病毒、化学融合剂如聚乙二醇 (PEG)及电激融合法等。在进行细胞融合反应和适当时间的培养后，需要通过一定方 法对两种亲本细胞融合产生的具有增殖能力的杂种细胞进行筛选。筛选方法主要包括药 物抗性筛选、营养缺陷筛选和温度敏感性筛选等。 细胞融合最典型的应用是单克隆抗体技术。1975年Koehler和Milstein将用绵羊红 细胞免疫的小鼠脾细胞和体外培养能长期繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合，获得了具有两种 亲本细胞特性的杂交细胞，即既能在培养条件下长期生长增殖，又能分泌特异的抗绵羊 红细胞的抗体的B淋巴细胞杂交瘤。细胞融合技术的发展和骨髓瘤细胞株的建成促成 了B细胞杂交瘤技术的建立和单克隆抗体技术的成功。 (二)核移植 细胞核移植(ucear transfer)是指将一个双倍体的细胞核（可来自胚胎细胞或体 细胞)移植到去核的成热卵母细胞或受精卵中。重组的卵细胞可以植入母体，并能发育 为与供核细胞基因型相同的后代，因此又称为动物克隆技术。1997年诞生的克隆羊“多 利”就是体细胞核移植技术的产物。 核移植技术首先是选取合适的受体去核卵细胞和供体核。目前均以发有至减数分裂中期 Ⅱ的成熟卵母细胞为受体，供体核则可以采用胚胎细胞、未分化的原始生殖细胞、胎儿 细胞乃至高度分化的成年动物细胞。核质融合一般是将获得的核转移到已经人工去核的 成熟卵母细胞卵周隙后，施加微电流脉冲，使核质融合，形成一个重组卵。重组卵需经 一定时间的体外培养，或放入中间受体动物输卵管内孵有，经过一段时间的培养，有的 动物需形成桑椹胚或囊胚，再植入受体子宫里。 (三)基因转移(gene transfer) 基因转移指向受体细胞中导入外源基因，是改造细胞遗传性状的常用手段。一般情 况下，能稳定接纳外源基因的细胞也只有受体细胞总数的干分之几。因此为了快速有效 地筛选转化细胞，一般在转入基因中携带有特定的选择标记，目前应用较多的为细胞抗 药性筛选，如根据新霉素抗性基因进行筛选。基因转移又常称为基因转染(ge transfection)。基因转移的方法可分为物理学、化学和生物学三类
类细胞之间相互融合的过程，即为细胞融合（cell fusion）。通过细胞融合，可将来源于 不同细胞核的染色体结合到同一个核内，结果形成一个合核体的杂种细胞。在实际工作 中常采用各种促融合手段，包括病毒类融合剂如仙台病毒、化学融合剂如聚乙二醇 （PEG）及电激融合法等。在进行细胞融合反应和适当时间的培养后，需要通过一定方 法对两种亲本细胞融合产生的具有增殖能力的杂种细胞进行筛选。筛选方法主要包括药 物抗性筛选、营养缺陷筛选和温度敏感性筛选等。 细胞融合最典型的应用是单克隆抗体技术。1975 年 Koehler 和 Milstein 将用绵羊红 细胞免疫的小鼠脾细胞和体外培养能长期繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合，获得了具有两种 亲本细胞特性的杂交细胞，即既能在培养条件下长期生长增殖，又能分泌特异的抗绵羊 红细胞的抗体的 B 淋巴细胞杂交瘤。细胞融合技术的发展和骨髓瘤细胞株的建成促成 了 B 细胞杂交瘤技术的建立和单克隆抗体技术的成功。 （二）核移植 细胞核移植（nuclear transfer）是指将一个双倍体的细胞核（可来自胚胎细胞或体 细胞）移植到去核的成熟卵母细胞或受精卵中。重组的卵细胞可以植入母体，并能发育 为与供核细胞基因型相同的后代，因此又称为动物克隆技术。1997 年诞生的克隆羊“多 利”就是体细胞核移植技术的产物。 核移植技术首先是选取合适的受体去核卵细胞和供体核。目前均以发育至减数分裂中期 II 的成熟卵母细胞为受体，供体核则可以采用胚胎细胞、未分化的原始生殖细胞、胎儿 细胞乃至高度分化的成年动物细胞。核质融合一般是将获得的核转移到已经人工去核的 成熟卵母细胞卵周隙后，施加微电流脉冲，使核质融合，形成一个重组卵。重组卵需经 一定时间的体外培养，或放入中间受体动物输卵管内孵育，经过一段时间的培养，有的 动物需形成桑椹胚或囊胚，再植入受体子宫里。 （三） 基因转移（gene transfer） 基因转移指向受体细胞中导入外源基因，是改造细胞遗传性状的常用手段。一般情 况下，能稳定接纳外源基因的细胞也只有受体细胞总数的千分之几。因此为了快速有效 地筛选转化细胞，一般在转入基因中携带有特定的选择标记，目前应用较多的为细胞抗 药性筛选，如根据新霉素抗性基因进行筛选。基因转移又常称为基因转染（gene transfection）。基因转移的方法可分为物理学、化学和生物学三类
1,物理学方法包括电穿孔、显微注射、裸露DNA直接注射。 2.化学方法包括DEAE一葡聚糖、磷酸钙沉淀、脂质体法等，其原理是通过改变 细胞膜的通透性或者增加DNA与细胞的吸附而实现基因转移的。这些方法多用于培养 细胞的基因转移。 3.生物学方法主要指病毒介导的基因转移。目前常用的病毒载体包括DNA病毒 载体（腺病毒载体、猴肿瘤病毒载体、牛痘病毒载体）、反转录病毒载体等。用作基因 转导的病毒载体都是缺陷型的病毒，感染细胞后仅能将基因组转入细胞，无法产生包装 的病毒颗粒。 (四)细胞治疗与组织工程 细胞治疗是指用体外培养的正常细胞，或者是导入外源基因的细胞，或者是利用由 干细胞诱导分化而来的特定细胞，植入志者病变部位以代偿病变细胞丧失的功能。例如 血液系统恶性肿瘤治疗时，通过放疗彻底杀灭肿瘤细胞，同时摧毁患者的造血系统，然 后移植健康供者的骨随，即人们常说的骨髓移植，就是最常见的细胞治疗。 人胚胎干细胞的建系为细胞治疗提供了更大的可能性在利用胚胎干细胞作细胞治 疗时，首先要考虑克服异体移植中的免疫排斥反应，其方法是将人胚胎干细胞进行MHC 基因操作，建立可供移植对象配对选择的各种MC组合的胚胎干细胞库。在这基础上， 根据不同的移植对象和要求，或直接定向诱导分化为功能性细胞（如神经细胞、神经胶 质细胞、软骨细胞等)：或定向诱导分化为组织干细胞（如造血干细胞、神经干细胞等）， 这类组织干细胞也可直接取材于成体组织或器官，最终植入患者病变部位。另一种途径 是将患者的体细胞核导入去核卵细胞或去核胚胎干细胞，体外发有至一定阶段后，从中 分离培养出供核患者专用的胚胎干细胞，再经诱导产生所需的分化类型的细胞，回输至 供核患者，同样也避免了免疫排斥问题。 组织工程(tissue engineering)与细胞工程、细胞治疗密切相关。组织工程的目的是 在体外重建组织，以修复患者的缺损组织。组织工程的一般思路是：选择与人体细胞相 容性较好的生物材料，按缺损组织或器官的要求设计并制成模型或支架放在体外培养系 统中，使种子细胞（多用具有分化功能的组织特异型干细胞）沿着模型或支架不断地生 长扩增，构建成新的组织或器官，随着细胞的不断生长、扩增，生物材料会逐渐降解而 被细胞吸收，然后将初具雏形的组织或器官植入患者缺损部位。因此，胚胎干细胞和组
1． 物理学方法包括电穿孔、显微注射、裸露 DNA 直接注射。 2．化学方法包括 DEAE－葡聚糖、磷酸钙沉淀、脂质体法等，其原理是通过改变 细胞膜的通透性或者增加 DNA 与细胞的吸附而实现基因转移的。这些方法多用于培养 细胞的基因转移。 3．生物学方法主要指病毒介导的基因转移。目前常用的病毒载体包括 DNA 病毒 载体（腺病毒载体、猴肿瘤病毒载体、牛痘病毒载体）、反转录病毒载体等。用作基因 转导的病毒载体都是缺陷型的病毒，感染细胞后仅能将基因组转入细胞，无法产生包装 的病毒颗粒。 （四）细胞治疗与组织工程 细胞治疗是指用体外培养的正常细胞，或者是导入外源基因的细胞，或者是利用由 干细胞诱导分化而来的特定细胞，植入患者病变部位以代偿病变细胞丧失的功能。例如 血液系统恶性肿瘤治疗时，通过放疗彻底杀灭肿瘤细胞，同时摧毁患者的造血系统，然 后移植健康供者的骨髓，即人们常说的骨髓移植，就是最常见的细胞治疗。 人胚胎干细胞的建系为细胞治疗提供了更大的可能性。在利用胚胎干细胞作细胞治 疗时，首先要考虑克服异体移植中的免疫排斥反应，其方法是将人胚胎干细胞进行 MHC 基因操作，建立可供移植对象配对选择的各种 MHC 组合的胚胎干细胞库。在这基础上， 根据不同的移植对象和要求，或直接定向诱导分化为功能性细胞（如神经细胞、神经胶 质细胞、软骨细胞等）；或定向诱导分化为组织干细胞（如造血干细胞、神经干细胞等）， 这类组织干细胞也可直接取材于成体组织或器官，最终植入患者病变部位。另一种途径 是将患者的体细胞核导入去核卵细胞或去核胚胎干细胞，体外发育至一定阶段后，从中 分离培养出供核患者专用的胚胎干细胞，再经诱导产生所需的分化类型的细胞，回输至 供核患者，同样也避免了免疫排斥问题。 组织工程（tissue engineering）与细胞工程、细胞治疗密切相关。组织工程的目的是 在体外重建组织，以修复患者的缺损组织。组织工程的一般思路是：选择与人体细胞相 容性较好的生物材料，按缺损组织或器官的要求设计并制成模型或支架放在体外培养系 统中，使种子细胞（多用具有分化功能的组织特异型干细胞）沿着模型或支架不断地生 长扩增，构建成新的组织或器官，随着细胞的不断生长、扩增，生物材料会逐渐降解而 被细胞吸收，然后将初具雏形的组织或器官植入患者缺损部位。因此，胚胎干细胞和组
织工程的结合，在治疗先天性器官畸形和器官移植等方面有若不可估量的应用前景 二、临床实验诊断的应用 (一)细胞培养在临床病原学诊断中应用 临床上多种病原生物如病毒、立克次体、衣原体、胞内寄生的细菌、原虫等的分离 培养和药物敏感试验是通过细胞培养技术完成的，如人免疫缺陷病毒HV)和新近出现的 严重急性呼吸综合征(SARS)病毒等就是通过细胞培养发现的。临床应用微量全血培养技 术诊断HV的感染，已用于儿童HV垂直感染的早期诊断及可疑感染者的确认。 1.病毒的分离的常用细胞 对病毒性疾病的病原学诊断，最可靠的方法是从标本中分离并鉴定出致病性病毒。由 于病毒具有严格的细胞内寄生性，对病毒的分离培养必须选用敏感的细胞，包括动物、鸡 胚和细胞培养。目前最被广泛采用的方法就是细胞培养技术。用于病毒分离的细胞种类很 多，由于不同种类病毒对细胞的敏感性不同，因此首先应根据病毒的种类选择敏感细胞进 行分离培养。细胞的种类按其来源、染色体特征及传代次数等可分为原代细胞、二倍体细 胞及传代细胞3种类型。但由于原代细胞只能传1一3代，器官来源、操作繁锁等问题使 该方法应用受限，而二倍体细胞和传代细胞，由于可以长期传代、培养方便，故较为常用。 2,体外抗病毒药效试验 抗病毒药效测定试验分为体内试验和体外试验。体外试验是采用组织细胞培养法来观 察药物的抗病毒作用。在实验中要根据药物的特性来选择病毒；根据病毒对细胞易感性选 择所用细胞：观察药效指标常采用病毒致细胞病变(CPE)情况来判定药物的抗病毒效果 下面以抗呼吸道病毒药物为例采用微量细胞培养法介绍药物体外抑病毒试验方法。 细胞培养在临床肿痛诊断中的应用 1,肿瘤细胞端粒与端粒酶活性检测 真核细胞染色体末端含有串连重复的DNA序列，称为特殊的DM一蛋白质端粒结构。 当正常体细胞分裂时，端粒的末端均会随每次的复制被逐渐缩短，端粒的定长可能与正常 细胞的有限分裂代数（约50代左右）有关，待端粒结构缩短至最后时，细胞即不再能分 裂，这从整体上也限制了机体寿命的长短。原核细胞、真核细胞中的某些种系，很多肿癌 细胞等获得了不死性，说明它们具有延长端粒的性能，能将新生的重复序列加到染色体的 末端，这就是端粒酶(telomerase)的作用。人的正常体细胞无端粒酶活性，这些酶的重 新活化可能使细胞获得了无限分裂的能力，故端粒酶的活性检测，可被作为恶性肿瘤细胞 增殖、转移的潜在标记。 2.肿瘤细胞与细胞凋亡 细胞调亡是细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序去结束生命的过程。这 是保证多细胞生物个体正常发育、成热和维持生理过程所必需的。现己知，细胞调亡作为 一种细胞内源性基因调控下的生理性死亡方式，此过程如发生障碍，不仅能成为肿瘤发生
织工程的结合，在治疗先天性器官畸形和器官移植等方面有着不可估量的应用前景。 二、临床实验诊断的应用 （一）细胞培养在临床病原学诊断中应用 临床上多种病原生物如病毒、立克次体、衣原体、胞内寄生的细菌、原虫等的分离 培养和药物敏感试验是通过细胞培养技术完成的，如人免疫缺陷病毒(HIV)和新近出现的 严重急性呼吸综合征(SARS)病毒等就是通过细胞培养发现的。临床应用微量全血培养技 术诊断 HIV 的感染，已用于儿童 HIV 垂直感染的早期诊断及可疑感染者的确认。 1．病毒的分离的常用细胞 对病毒性疾病的病原学诊断，最可靠的方法是从标本中分离并鉴定出致病性病毒。由 于病毒具有严格的细胞内寄生性，对病毒的分离培养必须选用敏感的细胞，包括动物、鸡 胚和细胞培养。目前最被广泛采用的方法就是细胞培养技术。用于病毒分离的细胞种类很 多，由于不同种类病毒对细胞的敏感性不同，因此首先应根据病毒的种类选择敏感细胞进 行分离培养。细胞的种类按其来源、染色体特征及传代次数等可分为原代细胞、二倍体细 胞及传代细胞 3 种类型。但由于原代细胞只能传 1～3 代，器官来源、操作繁锁等问题使 该方法应用受限，而二倍体细胞和传代细胞，由于可以长期传代、培养方便，故较为常用。 2． 体外抗病毒药效试验 抗病毒药效测定试验分为体内试验和体外试验。体外试验是采用组织细胞培养法来观 察药物的抗病毒作用。在实验中要根据药物的特性来选择病毒；根据病毒对细胞易感性选 择所用细胞；观察药效指标常采用病毒致细胞病变（CPE）情况来判定药物的抗病毒效果。 下面以抗呼吸道病毒药物为例采用微量细胞培养法介绍药物体外抑病毒试验方法。 （二） 细胞培养在临床肿瘤诊断中的应用 1．肿瘤细胞端粒与端粒酶活性检测 真核细胞染色体末端含有串连重复的 DNA 序列，称为特殊的 DNA 一蛋白质端粒结构。 当正常体细胞分裂时，端粒的末端均会随每次的复制被逐渐缩短，端粒的定长可能与正常 细胞的有限分裂代数（约 50 代左右）有关，待端粒结构缩短至最后时，细胞即不再能分 裂，这从整体上也限制了机体寿命的长短。原核细胞、真核细胞中的某些种系，很多肿瘤 细胞等获得了不死性，说明它们具有延长端粒的性能，能将新生的重复序列加到染色体的 末端，这就是端粒酶（telomerase）的作用。人的正常体细胞无端粒酶活性，这些酶的重 新活化可能使细胞获得了无限分裂的能力，故端粒酶的活性检测，可被作为恶性肿瘤细胞 增殖、转移的潜在标记。 2．肿瘤细胞与细胞凋亡 细胞凋亡是细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序去结束生命的过程。这 是保证多细胞生物个体正常发育、成熟和维持生理过程所必需的。现已知，细胞凋亡作为 一种细胞内源性基因调控下的生理性死亡方式，此过程如发生障碍，不仅能成为肿瘤发生
的主要机制之一，而且也与肿瘤的治疗和耐药性的形成密切相关。目前认为多种化学结构 不同、作用机制各异的抗肿瘤药物，均可诱导肿瘤细胞逆转出现调亡。因此，掌握细胞调 亡的检测方法，不仅可筛选抗肿瘤药物，而且可用以研究肿瘤的发生及消亡机制。 3.肿瘤细胞体外药物敏感性检测 化学疗法是治疗恶性肿瘤的主要手段之一，但临床医师普遍存在者言目用抗癌药的情 况。为提供合理用药的科学依据，利用来源于手术切除或活检组织中分离的肿瘤细胞， 进行抗癌药物敏感性测定，可为临床医生合理选择有效药物提供参考，现介绍几种常用 的方法。 (三)细胞培养在临床病因诊断中的应用 由于对造血干细胞的研究取得成功，故临床上利用造血细跑培养作为造血干细胞克 隆性疾病的诊断和疗效分析的常用方法。造血干细胞约占细胞总数的0.4%，可向多种定 向祖细胞分化增殖，所以不同类型的造血干细胞克隆性疾病，如骨髓增生异常综合征 (MDS)、急、慢性白血病(AML、CML)、再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生性疾病等 其造血细胞的集落分析均有一定特点，如重症再生障碍性贫血患者的骨随、外周血培养 几乎都无集落形成，可能与混合集落形成细胞(c-MX)培养阶段发生障碍有关。另- 项专门技术是用来诊断与染色体变化相关的疾病，如判定和发现染色体结构和数目异常 的综合征。取自骨髓、外周血、绒毛膜、羊水中胎儿脱落细胞和脐血、皮肤等各种组织， 使这些细胞在一定条件下培养，使之大部分细胞处于有丝分裂并停止在分裂中期相，进 步使细胞核体积胀大，以利于进行染色体分析。染色体分析是产前诊断的主要内容之 ,此外临床上更多的是用于细胞遗传学诊断并成为临床诊断白血病、判断预后和观察 治疗效果的重要方法学。（见产前诊断、遗传病实验诊断等相关章节）。 (四)在临床实验诊断中对细胞培养技术应用的评价 1。培养技术繁杂，需具备一定的实验条件才能开展。 2.细胞培养技术在某些方面的应用是不可替代的。如分离培养病毒等细胞内寄生的 病原体。 3.细胞在体外培养，由于环境及条件的局限性，应避免将体外培养细胞的实验结果 机械地看作体内同种细胞性状的必然反映。如体外筛选的抗病毒药物或抗肿瘤药物，在 体外有效不等于在体内就一定有效。 4.细胞培养技术的临床应用方兴未艾，地、市级以上的医院里应积极创造条件建立 细胞培养实验室，开展对病毒、肿瘤等实验诊断工作，以体外实验结果辅助体内的各项 检查 5.细胞培养技术与分子生物学技术、信息学和计算机技术等结合，在细胞水平与分 子水平之间互动，在研究生命活动规律和诊断疾病方面将发挥更大的作用
的主要机制之一，而且也与肿瘤的治疗和耐药性的形成密切相关。目前认为多种化学结构 不同、作用机制各异的抗肿瘤药物，均可诱导肿瘤细胞逆转出现凋亡。因此，掌握细胞凋 亡的检测方法，不仅可筛选抗肿瘤药物，而且可用以研究肿瘤的发生及消亡机制。 3．肿瘤细胞体外药物敏感性检测 化学疗法是治疗恶性肿瘤的主要手段之一，但临床医师普遍存在着盲目用抗癌药的情 况。为提供合理用药的科学依据，利用来源于手术切除或活检组织中分离的肿瘤细胞， 进行抗癌药物敏感性测定，可为临床医生合理选择有效药物提供参考，现介绍几种常用 的方法。 （三）细胞培养在临床病因诊断中的应用 由于对造血干细胞的研究取得成功，故临床上利用造血细胞培养作为造血干细胞克 隆性疾病的诊断和疗效分析的常用方法。造血干细胞约占细胞总数的 0.4%，可向多种定 向祖细胞分化增殖，所以不同类型的造血干细胞克隆性疾病，如骨髓增生异常综合征 （MDS）、急、慢性白血病（AML、CML）、再生障碍性贫血（AA）、骨髓增生性疾病等， 其造血细胞的集落分析均有一定特点，如重症再生障碍性贫血患者的骨髓、外周血培养 几乎都无集落形成，可能与混合集落形成细胞（cfu-MIX）培养阶段发生障碍有关。另一 项专门技术是用来诊断与染色体变化相关的疾病，如判定和发现染色体结构和数目异常 的综合征。取自骨髓、外周血、绒毛膜、羊水中胎儿脱落细胞和脐血、皮肤等各种组织， 使这些细胞在一定条件下培养，使之大部分细胞处于有丝分裂并停止在分裂中期相，进 一步使细胞核体积胀大，以利于进行染色体分析。染色体分析是产前诊断的主要内容之 一，此外临床上更多的是用于细胞遗传学诊断并成为临床诊断白血病、判断预后和观察 治疗效果的重要方法学。（见产前诊断、遗传病实验诊断等相关章节）。 （四）在临床实验诊断中对细胞培养技术应用的评价 1．培养技术繁杂，需具备一定的实验条件才能开展。 2．细胞培养技术在某些方面的应用是不可替代的。如分离培养病毒等细胞内寄生的 病原体。 3．细胞在体外培养，由于环境及条件的局限性，应避免将体外培养细胞的实验结果 机械地看作体内同种细胞性状的必然反映。如体外筛选的抗病毒药物或抗肿瘤药物，在 体外有效不等于在体内就一定有效。 4．细胞培养技术的临床应用方兴未艾，地、市级以上的医院里应积极创造条件建立 细胞培养实验室，开展对病毒、肿瘤等实验诊断工作，以体外实验结果辅助体内的各项 检查。 5．细胞培养技术与分子生物学技术、信息学和计算机技术等结合，在细胞水平与分 子水平之间互动，在研究生命活动规律和诊断疾病方面将发挥更大的作用
练习题 细胞培养技术在研究生命活动规律和诊断疾病方面将如何发挥更大的作用？
练习题 细胞培养技术在研究生命活动规律和诊断疾病方面将如何发挥更大的作用？