知识扩充 首页一第六章电泳技术和常用电泳仪 一、电泳技术概述 电泳(electrophoresis)是指带电荷的溶质或粒子在电场中向者与其本身所带电荷相 反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。可以实 现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪(electrophoresister)。电泳技术是由瑞典科学家 A.Tiselius在1937年首先利用U形管建立了移界电泳法(moving boundary EP),即区带 电泳(zoneelectrophoresis),他成功地将血清蛋白质分成5个主要成分（清蛋白，a,、 a,、B、y球蛋白)，开创了电泳技术的新纪元。由于他的突出贡献，1948年荣获诺贝尔 化学奖。20世纪50年代后纸上电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳在生物学研究中普遍使用，80 年代后，许多自动化电泳仪器相继为临床实验室所采用，电泳技术己成为基础医学和临床医 学研究的重要工具之一。 二、电泳技术的发展 自从1946年瑞典物理化学家Tiselius教授研制的第一台商品化移界电 泳系统问世以来，在近半个多世纪的时间里，电泳分析所用仪器发展极其迅 速。特别是电冰所用支持介质由流动相改为固相支持物后，各种各样的电泳 分析装置不断推出以适应不同教学、临床和科研工作的需要。20世纪80年 代以来，越来越多的电泳分析仪器与设备，尤其是一些自动化的电泳分析仪 相继被引入临床实验室，发挥越来越重要的作用。特别一提的是电泳技术与 质谱技术联用在后基因组学研究中正发挥若巨大的作用。 (一)电泳设备 通常所说的电泳设备可分为主要设备（分离系统）和辅助设备（检测系 统)。主要设备指电泳仪电源和电泳槽及其附件，辅助设备指与电泳有关的设 备。 日前临床常规使用的自动化电泳仪一般分为两个部分：电泳可控制单元 (这个单元包括了电泳槽，电源和冷却装置)以及染色单元。有的仪器电泳过
首页 → 第六章 电泳技术和常用电泳仪 一、电泳技术概述 电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相 反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。可以实 现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪（electrophoresister）。电泳技术是由瑞典科学家 A．Tiselius 在 1937 年首先利用 U 形管建立了移界电泳法（moving boundary EP），即区带 电泳（ zone electrophoresis ），他成功地将血清蛋白质分成 5 个主要成分（清蛋白，α1 、 α2 、β、 球蛋白），开创了电泳技术的新纪元。由于他的突出贡献，1948 年荣获诺贝尔 化学奖。20 世纪 50 年代后纸上电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳在生物学研究中普遍使用，80 年代后，许多自动化电泳仪器相继为临床实验室所采用，电泳技术已成为基础医学和临床医 学研究的重要工具之一。 二、电泳技术的发展 自从 1 946 年瑞 典 物 理化 学家 Tis eli us 教 授 研制 的 第一 台 商品 化 移界 电 泳系 统 问 世以 来 ， 在近 半 个 多世 纪 的 时间 里 ， 电泳 分 析 所用 仪 器 发展 极 其迅 速。 特 别 是电 泳 所 用支 持 介 质由 流 动 相改 为 固 相支 持 物 后， 各 种 各样 的 电泳 分析 装 置不 断 推出 以 适应 不 同教 学 、临 床 和科 研 工 作的 需 要。 20 世 纪 8 0 年 代以 来 ， 越来 越 多 的电 泳 分 析仪 器 与 设备 ， 尤 其是 一 些 自动 化 的 电泳 分 析仪 相继 被 引 入临 床 实 验室 ， 发 挥越 来 越 重要 的 作 用。 特 别 一提 的 是 电泳 技 术与 质谱技术联用在后基因组学研究中正发挥 着巨 大 的 作用 。 （一）电泳设备 通常 所 说 的电 泳 设 备可 分 为 主要 设 备 （分 离 系 统） 和 辅 助设 备 （ 检测 系 统）。主 要 设备 指 电泳 仪 电源 和 电泳 槽 及其 附 件，辅 助设 备 指与 电 泳有 关 的设 备。 目前 临 床 常规 使 用 的自 动 化 电泳 仪 一 般分 为 两 个部 分 ： 电泳 可 控 制单 元 (这 个 单元 包 括 了电 泳 槽 ，电 源 和 冷却 装 置)以 及染 色 单 元。 有 的 仪器 电 泳过
程，包括点样、电泳、染色和脱色全部由微机自动化控制，操作简便和快速， 并保证了检测结果的准确性和可重复性。 恒温系统主要用于冷却凝胶温度，它有两种形式：一种是在电泳槽中有 冷却管或冷却板与外恒温循环系统相连，另一种是凝胶板下有半导体冷却装 置。临床自动化电泳仪多采用后者。 扫描或检测设备分为可见光源、紫外、荧光和激光光源等。可见光源和 激光光源对染色的凝胶进行扫描，紫外光源可以扫描不经染色的凝胶，并且 荧光测量的灵敏度最高。目前，一些电泳仪器可自动对不同条带的光吸收度 进行分析，综合计算后得出报告结果，此方法方便快捷、准确可靠。 (二)电泳仪进展 1,1960年以前：多采用醋酸纤维素薄膜作为电泳支持介质，且没有专 用的电泳扫描仪作为分析工具，条带的分析通常使用脱色比色法。即只能在 电泳分离、染色后，用人工方法将各种电泳条带分别剪下，放入不同试管中， 再用适当溶液将染料溶解脱色，最后放入比色计中比色测定各种成份的吸光 度，然后计算出各种成份所占百分比及浓度。这一方法操作比较复杂，干扰 因素多，重复性差。 2,1960年至1980年：随若琼脂糖凝胶作为电泳支持介质的广泛应用， 以往用醋酸纤维素薄膜电泳无法分离开的成份或无法检测出的成份能够被分 离或检测，分离效果大为改善及灵敏度提高。同时，国外多家设各厂家相继 生产出电泳扫描仪。这类设备的应用，解决以往为浓度计算所花费大量人力 及时间，并大幅提高电泳分析浓度计算的准确度，但此时期的电泳扫描仪均 为可见光系统。主要用于蛋白质如血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白等项目分析 3.1981年至1990年：这一时期电泳分析仪的标志为各生产厂家均推出 可见光/荧光双系统自动电泳扫描仪。荧光扫描仪的推出及与电脑的结合均对 临床电泳分析有相当大的帮助，大大提高了分析的准确度与精密度。电泳分 析的原理也由单一可见光，增加为荧光及可见光，而荧光试剂的应用也使分 析的灵敏度大为提高。以往无法检出或检出效果不佳的项目（如各种同工醇）， 由于荧光试剂与荧光扫描仪的推出，极大地方便了临床如乳酸脱氢酶和肌酸 激酶(CK)同工酶的测定
程 ，包 括 点 样 、电泳、染色 和 脱 色全 部 由微 机 自动 化 控制 ，操 作简 便 和快 速， 并保证了检测结果的准确性和可重复性。 恒温 系 统 主要 用 于 冷却 凝 胶 温度 ， 它 有两 种 形 式： 一 种 是在 电 泳 槽中 有 冷却 管 或 冷却 板 与 外恒 温 循 环系 统 相 连， 另 一 种是 凝 胶 板下 有 半 导体 冷 却装 置。临床自动化电泳仪多采用后者。 扫描 或 检 测设 备 分 为可 见 光 源、 紫 外 、荧 光 和 激光 光 源 等。 可 见 光源 和 激光 光 源 对染 色 的 凝胶 进 行 扫描 ， 紫 外光 源 可 以扫 描 不 经染 色 的 凝胶 ， 并且 荧光 测 量 的灵 敏 度 最高 。 目 前， 一 些 电泳 仪 器 可自 动 对 不同 条 带 的光 吸 收度 进行分析，综合计算后得出报告结果，此方法方便快捷、准确可靠。 （二）电泳仪 进 展 1． 196 0 年以 前 ： 多采 用 醋 酸纤 维 素 薄膜 作 为 电泳 支 持 介质 ， 且 没有 专 用的 电 泳 扫描 仪 作 为分 析 工 具， 条 带 的分 析 通 常使 用 脱 色比 色 法 。即 只 能在 电泳 分 离、染 色后 ，用人 工 方法 将 各种 电 泳条 带 分别 剪 下，放 入不 同 试管 中， 再用 适 当 溶液 将 染 料溶 解 脱 色， 最 后 放入 比 色 计中 比 色 测定 各 种 成份 的 吸光 度， 然 后 计算 出 各 种成 份 所 占百 分 比 及浓 度 。 这一 方 法 操作 比 较 复杂 ， 干扰 因素多，重复性差 。 2．1 96 0 年 至 1 98 0 年 ： 随着 琼 脂糖 凝 胶作 为 电泳 支 持介 质 的广 泛 应用 ， 以往 用 醋 酸纤 维 素 薄膜 电 泳 无法 分 离 开的 成 份 或无 法 检 测出 的 成 份能 够 被分 离或 检 测 ，分 离 效 果大为改善及灵敏度提 高 。 同时 ， 国 外多 家 设 备厂 家 相继 生产 出 电 泳扫 描 仪 。这 类 设 备的 应 用 ，解 决 以 往为 浓 度 计算 所 花 费大 量 人力 及时 间 ， 并大 幅 提 高电 泳 分 析浓 度 计 算的 准 确 度， 但 此 时期 的 电 泳扫 描 仪均 为可 见 光系 统 。主 要 用于 蛋 白质 如 血清 蛋 白、脂 蛋白 、血红 蛋 白等 项 目分 析。 3．1 98 1 年 至 1 99 0 年 ：这一 时 期电 泳 分析 仪 的标 志 为各 生 产厂 家 均推 出 可见 光/荧 光双 系 统自 动 电泳 扫 描仪 。荧光 扫 描仪 的 推出 及 与电 脑 的结 合 均对 临床 电 泳 分析 有 相 当大 的 帮 助， 大 大 提高 了 分 析的 准 确 度与 精 密 度。 电 泳分 析的 原 理 也由 单 一 可见 光 ， 增加 为 荧 光及 可 见 光， 而 荧 光试 剂 的 应用 也 使分 析的 灵 敏度 大 为提 高 。以 往 无法 检 出或 检 出效 果 不佳 的 项目 (如 各 种同 工 酶)， 由于 荧 光 试剂 与 荧 光扫 描 仪 的推 出 ， 极大 地 方 便了 临 床 如乳 酸 脱 氢酶 和 肌酸 激酶(CK)同工酶的 测 定
4.1991年至今：这一时期电泳分析仪的最大变化特点为自动化程度日益 提高，基本可将其分为两大类。第一类为临床实验室常规使用的分析仪，如： 全自动荧光/可见光双系统电泳仪、全自动醋纤膜电泳仪和全自动琼脂糖电泳 仪。第二类为以科研为主，兼做临床样本的仪器，如：双向电泳及双向电泳 液相色谱一质谱联用、高效毛细管电泳及高效毛细管电泳一质谱联用、高效毛 细管芯片电泳、DNA测序系统。 三、电泳技术新进展 一、电泳技术与免疫技术相结合，大大扩大了其临床应用的范围 让电流来加速抗原与抗体的扩散并规定其运行方向、从而加快了沉淀反应速度。免疫电 泳技术的种类很多，如：对流免疫电泳(CIEP)、火箭免疫电泳(RIE)、电免疫扩散(EID)。 该技术的最大优势是敏感性达50-150mg/1,操作周期短，分辨率高，结果易于分析。现最 常用于M蛋白的分型与鉴定，已列入临床实验室的常规检测工。 二、电泳技术进行同工酶谱分析，提高诊断率 1.血清乳酸脱氢酶同工酶(IS0-LDH)：测定LD同工酶有电泳法、离子交换柱层析 法、免疫法、抑制剂法和酶切法，但迄今用得取多的仍是琼脂糖凝胶电泳法。经电泳分离后 要分离出五种同工酶区带，急性心肌梗塞发病后平均6hLDH即开始升高，LDH/LD用≥1为 心肌损伤的阳性决定性水平，肝癌时可见DH明显升高，各区带含量的确定，将经电泳分 离后的同工酶谱采用扫描予以定量，其精确度明显高于用肉眼判断！ 2.血清肌酸激酶同工酶(1S0-CK):测定CK和CK-B仍是目前用于证实急性心肌梗塞 的首选指标。近年来国内一些单位用免疫抑制法测CK-B,使用电泳方法分离CK-B,是根 据CK同工酶分子结构不同，在电泳缓冲液中，所带电荷各异，可以从阴极到阳极将CK不 同组份子以分离，其分别为CR-M,CK-B和CK-B。电泳特点是当出现异常同工酶如巨CX I、巨CXⅡ等，从电泳图谱上很容易发现，由扫描仪对各条酶进行扫描，报告各条区带所 占百分比，结合总活力，求得区带的酶活力定值结果。Macro-CK在CK-MWM和CK-B中间， 而CKNT位置靠近阴极端，在CKW后面。这样不会将CKBB和各种异常同工酶误认为是 CK-B而误诊，也可解决CX-B假性增高的错误原因所在。为此，CX同工酶电泳是项非常实 用的检验技术，具有十分重要的临床意义。 3.CK亚型同工酶：此外，CXB和CK-亚型测定常采用琼脂糖凝胶等电聚焦电泳或 高压电泳，由于操作比一般电冰麻烦，故常规常测定尚无法普及。目前引进的自动电泳仪
4．1 991 年 至今 ：这一 时 期电 泳 分析 仪 的最 大 变化 特 点为 自 动化 程 度日 益 提高 ，基 本 可将 其 分为 两 大类 。第 一 类为 临 床实 验 室常 规 使用 的 分析 仪，如： 全自 动 荧光 /可 见 光双 系 统电 泳 仪、全 自动 醋 纤膜 电 泳仪 和 全自 动 琼脂 糖 电泳 仪。第 二类 为 以科 研 为主 ，兼做 临 床样 本 的仪 器 ，如 ：双向 电 泳及 双 向电 泳- 液相色谱-质谱联 用、 高 效毛 细 管电 泳 及高 效 毛 细管 电 泳-质谱 联 用、 高 效毛 细管芯片电泳、DN A 测序 系 统。 三、电泳技术新进展 一、电泳技术与免疫技术相结合，大大扩大了其临床应用的范围 让电流来加速抗原与抗体的扩散并规定其运行方向、从而加快了沉淀反应速度。免疫电 泳技术的种类很多，如：对流免疫电泳（CIEP）、火箭免疫电泳（RIE）、电免疫扩散（EID）。 该技术的最大优势是敏感性达 50-150mg/dl，操作周期短，分辨率高，结果易于分析。现最 常用于 M 蛋白的分型与鉴定，已列入临床实验室的常规检测工。 二、电泳技术进行同工酶谱分析，提高诊断率 1．血清乳酸脱氢酶同工酶（ISO -LDH）：测定 LDH 同工酶有电泳法、离子交换柱层析 法、免疫法、抑制剂法和酶切法，但迄今用得取多的仍是琼脂糖凝胶电泳法。经电泳分离后 要分离出五种同工酶区带，急性心肌梗塞发病后平均 6h LDH1 即开始升高，LDH1/LDH2≥1 为 心肌损伤的阳性决定性水平，肝癌时可见 LDH5 明显升高，各区带含量的确定，将经电泳分 离后的同工酶谱采用扫描予以定量，其精确度明显高于用肉眼判断。 2．血清肌酸激酶同工酶（ISO-CK）；测定 CK 和 CK-MB 仍是目前用于证实急性心肌梗塞 的首选指标。近年来国内一些单位用免疫抑制法测 CK-MB，使用电泳方法分离 CK-MB，是根 据 CK-同工酶分子结构不同，在电泳缓冲液中，所带电荷各异，可以从阴极到阳极将 CK 不 同组份予以分离，其分别为 CK-MM，CK-MB 和 CK-BB。电泳特点是当出现异常同工酶如巨 CK Ⅰ、巨 CKⅡ等，从电泳图谱上很容易发现，由扫描仪对各条酶进行扫描，报告各条区带所 占百分比，结合总酶活力，求得区带的酶活力定值结果。Macro-CK 在 CK-MM 和 CK-MB 中间， 而 CK-MT 位置靠近阴极端，在 CK-MM 后面。这样不会将 CK-BB 和各种异常同工酶误认为是 CK-MB 而误诊，也可解决 CK-MB 假性增高的错误原因所在。为此，CK 同工酶电泳是项非常实 用的检验技术，具有十分重要的临床意义。 3．CK 亚型同工酶：此外，CK-MB 和 CK-MM 亚型测定常采用琼脂糖凝胶等电聚焦电泳或 高压电泳，由于操作比一般电泳麻烦，故常规常测定尚无法普及。目前引进的自动电泳仪
有试剂盒提供，可作CK亚型分析，参考值：CK-M,(57.7±4.7)第：CK-M,为 (26.5±5.3)：CK-为(15.8±2.5)%：CK-/CK-M比值为0.28±0.05（范围0.15-0.39）， 阳性决定性水平>0.5。AMI第一天血中以MM为主，但第二天以后则以MM为主。采用电泳法 分离CKB,CKB,和CKB,在正常人血中CK-B,极微，一般比值近似L,在急性心肌梗塞后 4-6hCKB亚型即在血循环中可被检测到，故B,/MB:的比例明显升高，并早于总CK-MB片 段的增高。当心肌梗塞缓解后此比值也逐渐下降。也可用于溶栓治疗后的病情观察。 三、结合酶免疫标记抗体技术，检测脑脊液内寡克隆区带 曾有作者报道采用二维电泳和银染进行CSF蛋白质的分离与鉴定，方法繁复，耗时，现 采用高分辨率琼脂糖凝胶电泳分离CSF中的蛋白质，并经抗原和辣根过氧化物酶标记的特异 性1gG抗体进行反应来鉴定“寡克隆区带”(0CB),经此酶免疫标记放大技术和显色步骤， 蛋白质浓度达31-1251/L即可予以检测，可使检测灵敏度提高了100倍，这样脑脊液无须 浓缩，避免了在浓缩过程中蛋白质的丢失。可用于证实和分辨0©B免疫球蛋白及其型别。若 在脑脊液标本中检出OCB,而其相应标本中未能检出区带，则为阳性，真实地反映是由中枢 神经系统本身合成的免疫球蛋白，具有重要临床意义。它是一种定性检测，在多发性硬化症 时，0CB是一个十分重要的标志物。但须将患者血清和CSF在同一天同步进行分析，以认证 不同来源的免疫球蛋白。中枢合成免疫球蛋白是中枢神经系统疾患的一个重要信号，主要用 于诊断和鉴别诊断中枢神经系统疾患如：多发性硬化症、痴呆、脊髓炎、神经性梅素等。 四、利用圆相内抗原、抗体反应分高脂蛋白()，用于心、脑血管独立的危险因子的检测 该该技术是利用抗原、抗体反应将电泳分离的脂蛋白予以鉴别。血清经琼脂糖凝胶电泳， 再经染色后可出现不同脂蛋白的条带。由于凝胶中脂蛋白等电点不同，不仅可区分、前B 和B区带，又因介质中含有抗脂蛋白(a)[LP(a)]抗体及阳离子存在，抗P(a)与患 者血清中LP(a)结合形成复合物，阳离子则抑制其他脂蛋白的泳动速度，LP(a)便与其 他脂蛋白分离开米，使分辨十分清晰的LP()条带呈现在前B与Y区域之间，将阳性条 带扫描后，可获得区带的面积及其百分含量，该方法使电泳技术趋于完美，大大减少了手工 操作的弊端，既可予以半定量，又能将胶片保存，便于比较。提高对心、脑血管独立的危险 因子-一P(a)检测的敏感性和特异性。 五、按分子量大小进行非浓缩尿蛋白电泳，区分尿蛋白类型 尿蛋白电泳可将尿液中各种蛋白质分离用于区分尿蛋白类型，可在无损伤的情况下，协 助临床判断肾脏损伤的部位。国内部分实验室采用SDS-PAGE盘状电泳进行尿蛋白分离，该 法具有局限性，耗时，操作繁琐，标本要求高，尿液需预浓缩，不适于临床实验室广泛开展
有试剂盒提供，可作 CK 亚型分析，参考值：CK-MM1（57.7±4.7）%;CK-MM2 为 (26.5±5.3);CK-MM3 为(15.8±2.5)%;CK-MM3/CK-MM1 比值为 0.28±0.05(范围 0.15-0.39), 阳性决定性水平>0.5。AMI 第一天血中以 MM3 为主，但第二天以后则以 MM1 为主。采用电泳法 分离 CKMB，CKMB1 和 CKMB2 在正常人血中 CK-MB2 极微，一般比值近似 1，在急性心肌梗塞后 4-6h CKMB2 亚型即在血循环中可被检测到，故 MB2/MB1 的比例明显升高，并早于总 CK-MB 片 段的增高。当心肌梗塞缓解后此比值也逐渐下降。也可用于溶栓治疗后的病情观察。 三、结合酶免疫标记抗体技术，检测脑脊液内寡克隆区带 曾有作者报道采用二维电泳和银染进行 CSF 蛋白质的分离与鉴定，方法繁复，耗时，现 采用高分辨率琼脂糖凝胶电泳分离 CSF 中的蛋白质，并经抗原和辣根过氧化物酶标记的特异 性 IgG 抗体进行反应来鉴定“寡克隆区带”（OCB），经此酶免疫标记放大技术和显色步骤， 蛋白质浓度达 31-125ul/L 即可予以检测，可使检测灵敏度提高了 100 倍，这样脑脊液无须 浓缩，避免了在浓缩过程中蛋白质的丢失。可用于证实和分辨 OCB 免疫球蛋白及其型别。若 在脑脊液标本中检出 OCB，而其相应标本中未能检出区带，则为阳性，真实地反映是由中枢 神经系统本身合成的免疫球蛋白，具有重要临床意义。它是一种定性检测，在多发性硬化症 时，OCB 是一个十分重要的标志物。但须将患者血清和 CSF 在同一天同步进行分析，以认证 不同来源的免疫球蛋白。中枢合成免疫球蛋白是中枢神经系统疾患的一个重要信号，主要用 于诊断和鉴别诊断中枢神经系统疾患如：多发性硬化症、痴呆、脊髓炎、神经性梅素等。 四、利用固相内抗原、抗体反应分离脂蛋白（a），用于心、脑血管独立的危险因子的检测 该该技术是利用抗原、抗体反应将电泳分离的脂蛋白予以鉴别。血清经琼脂糖凝胶电泳， 再经染色后可出现不同脂蛋白的条带。由于凝胶中脂蛋白等电点不同，不仅可区分 a、前 β 和 β 区带，又因介质中含有抗脂蛋白（a）[LP（a）]抗体及阳离子存在，抗 LP（a）与患 者血清中 LP（a）结合形成复合物，阳离子则抑制其他脂蛋白的泳动速度，LP（a）便与其 他脂蛋白分离开来，使分辨十分清晰的 LP（a）条带呈现在前 β 与 γ 区域之间，将阳性条 带扫描后，可获得区带的面积及其百分含量，该方法使电泳技术趋于完美，大大减少了手工 操作的弊端，既可予以半定量，又能将胶片保存，便于比较。提高对心、脑血管独立的危险 因子-LP（a）检测的敏感性和特异性。 五、按分子量大小进行非浓缩尿蛋白电泳，区分尿蛋白类型 尿蛋白电泳可将尿液中各种蛋白质分离用于区分尿蛋白类型，可在无损伤的情况下，协 助临床判断肾脏损伤的部位。国内部分实验室采用 SDS-PAGE 盘状电泳进行尿蛋白分离，该 法具有局限性，耗时，操作繁琐，标本要求高，尿液需预浓缩，不适于临床实验室广泛开展
SDS-AGE电泳不需预浓缩，尿蛋白电泳后呈现出中、高分子量蛋白区，带主要反应肾小球病 变：呈现出低分子量蛋白区带，可见于肾小管病变及溢出性蛋白尿：混合性蛋白尿则可见到 大、中、小各种分子量区带，示肾小球及肾小管均受累及。扫描仪可对电泳后尿液中蛋白质 剖象进行扫描，求出百分比，以显示肾小球或肾小管损伤程度，其电泳图谱及扫描图形可作 为资料永载，利于分析比较。该技术的最大进步是尿液不需预浓缩，操作简便，结果清晰， 仅需三小时即可完成试验，还备有完整的定性标准，易于量化，便于分析，对肾脏疾的诊断， 鉴别诊断，指导治疗和判断愈合领有价值。 四、电泳技术的展望 中国在电泳技术临床应用上与国外相比，存在一定的差距。若按照国外 实验室标准，国内三级甲等、三级乙等医院均需配备自动电泳仪，但目前国 内不少三级甲等医院仍没有使用这类设备。电泳项目国内一般也只以血清蛋 白为主，而国外所做项目包括血清蛋白、尿蛋白、CK、LD、ALP、GGT同功酶 各种脂蛋白的胆固醇/甘油三酯等。对于分析用的电泳试剂，欧美这几年均以 琼脂糖凝胶电泳片占95%以上，国内仍有40%市场采用醋酸纤维素薄膜电泳片， 这也是与国外差距较大的地方。但是，近年来一些在大专院校、科研院所使 用的科研类电泳技术，如高效毛细管电泳、毛细管电泳芯片、电泳一色谱-质 谱联用等，己开始在临床实验室使用。如果能有公司厂家开发像生化分析仪 上的试剂一样，生产出质量稳定、相关参数明确的专门配套试剂，将加快其 推广应用的进程。 从目前临床实验室的要求来看电泳仪必须具有下列功能： (①)全自动化：必须达到人员离机作业，由点样到出报告机器全能完成。 (2)速度快：所有项目应在60min内完成同时具备急诊项目如CR、LD等 同工酶及亚型项目。为临床提供及时、准确的诊断信总。 (3)项目齐全：除了血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白、CK、LD同工酶等传统 项目外必须还能完成尿蛋白、脑脊液蛋白、免疫固定（单克隆抗体）、碱性磷 酸酶(ALP)和(y-谷氨酰转肽酶(GGT)同工酶、胆固醇（高密度/极低密度/低密 度脂蛋白)、脂蛋白(a)等最新检验项目。 (④)敏感度高：必须采用敏感度高的电泳片。如琼脂糖凝胶系统，才能得 到准确度高，分辨率高的电泳结果
SDS-AGE 电泳不需预浓缩，尿蛋白电泳后呈现出中、高分子量蛋白区，带主要反应肾小球病 变；呈现出低分子量蛋白区带，可见于肾小管病变及溢出性蛋白尿；混合性蛋白尿则可见到 大、中、小各种分子量区带，示肾小球及肾小管均受累及。扫描仪可对电泳后尿液中蛋白质 剖象进行扫描，求出百分比，以显示肾小球或肾小管损伤程度，其电泳图谱及扫描图形可作 为资料永载，利于分析比较。该技术的最大进步是尿液不需预浓缩，操作简便，结果清晰， 仅需三小时即可完成试验，还备有完整的定性标准，易于量化，便于分析，对肾脏疾的诊断， 鉴别诊断，指导治疗和判断愈合颇有价值。 四、电泳技术的展望 中国在电泳技术临 床 应用 上 与国 外 相比 ， 存在 一 定 的差 距 。若 按 照国 外 实验室标准，国内 三 级甲 等 、三 级 乙等 医 院均 需 配 备自 动 电泳 仪 ，但 目 前国 内不少三级甲等医 院 仍没 有 使用 这 类设 备 。电 泳 项 目国 内 一般 也 只以 血 清蛋 白为 主，而 国外 所 做项 目 包括 血 清蛋 白、尿 蛋白 、CK、LD、AL P、G GT 同功 酶、 各种 脂 蛋白 的 胆固 醇/甘 油三 酯 等。对 于分 析 用的 电 泳试 剂 ，欧 美 这几 年 均以 琼脂 糖 凝胶 电 泳片 占 95%以 上， 国 内仍 有 4 0%市 场采 用醋酸纤维素薄膜电泳 片， 这也是与国外差距较大的地方。 但 是， 近 年来 一 些 在大 专 院校 、 科研 院 所使 用的科研类电泳技术，如高效毛细管电泳、毛细管电泳芯片、电泳-色谱 -质 谱联用等，已开始在临床实验室使用。 如 果能 有 公 司厂 家 开发 像 生化 分 析仪 上的试剂一样，生产出质量稳定、相关参数明确的专门配套试剂，将加快其 推广应用的进程。 从目前临床实验室的要求来看电泳仪必须具有下列功能： (1)全自 动 化： 必 须达 到 人员 离 机作 业 ，由 点 样 到出 报 告机 器 全能 完 成。 (2)速度快：所有 项目 应 在 6 0mi n 内 完 成同 时 具 备急 诊 项目 如 C K、 LD 等 同工酶及亚型项目 。 为临 床 提供 及 时、 准 确的 诊 断 信息 。 (3)项目 齐 全 ：除 了 血清 蛋 白、脂 蛋白 、血 红蛋 白 、CK、LD 同工 酶 等传 统 项目外必须还能完成尿蛋白、脑脊液蛋白、免疫固定(单克 隆 抗体 )、 碱 性磷 酸酶(ALP)和(-谷 氨 酰转 肽 酶(G GT)同 工酶 、 胆固 醇(高 密度 /极 低 密度 /低 密 度脂蛋白)、脂蛋 白(a )等 最 新检 验 项目 。 (4)敏感 度 高： 必 须采 用 敏感 度 高的 电 泳片 。 如琼 脂 糖凝 胶 系统 ， 才能 得 到准确度高，分辨率高的电泳结果
现己有较新研究报道蛋白电泳用于泪液、唾液和头发蛋白质分析。而且电泳技术方面 的临床进展也日新月异，上个世纪90年代中期，测序仪重大改进，集束化的毛细 管电泳代替凝胶电泳。2001年完成人类基因组框架图提前完成得益于多通道、 集束化的毛细管凝胶电泳技术的出现。近期发展起来的毛细管电泳是一种新型的区 带电泳，又称毛细管带电泳，它能检测尿样、血浆、血清、脑脊液、红细胞、其他体液或组 织，以及实验动物活体等样品。能对蛋白质、多肽、氨基酸、糖、酶、DWA、寡核苷酸、病 毒、小和生物活性分子、离子、药物及其代谢产物等物质分离。广泛用于临床疾病诊断、临 床蛋白质分析、临床药物分析、代谢研究、病理研究、同工酶分析、PCR产物分析、DNA片 段及序列分析等。由于它具有高效、快速、灵敏、应用范围广、所需样品少和可自动化等特 点，正逐渐被广大临床实验室所接受。随着国际、国内科技发展的日新月异和检验医学发展 的突飞猛进，电泳技术也在不断发展和更新，相信随着电泳技术的不断发展，其在临床医学 和分子生物学领域将有广阔应用前景
现已有较新研究报道蛋白电泳用于泪液、唾液和头发蛋白质分析。而且电泳技术方面 的临床进展也日新月异，上 个世 纪 9 0 年代 中 期，测 序仪 重 大改 进，集 束化 的 毛细 管电 泳 代替 凝 胶电 泳。200 1 年完 成 人类 基 因组 框 架图 提 前完 成 得益 于 多通 道、 集 束化 的 毛 细 管 凝胶 电 泳 技 术的 出 现 。近期发展起来的毛细管电泳是一种新型的区 带电泳，又称毛细管带电泳，它能检测尿样、血浆、血清、脑脊液、红细胞、其他体液或组 织，以及实验动物活体等样品。能对蛋白质、多肽、氨基酸、糖、酶、DNA、寡核苷酸、病 毒、小和生物活性分子、离子、药物及其代谢产物等物质分离。广泛用于临床疾病诊断、临 床蛋白质分析、临床药物分析、代谢研究、病理研究、同工酶分析、PCR 产物分析、DNA 片 段及序列分析等。由于它具有高效、快速、灵敏、应用范围广、所需样品少和可自动化等特 点，正逐渐被广大临床实验室所接受。随着国际、国内科技发展的日新月异和检验医学发展 的突飞猛进，电泳技术也在不断发展和更新，相信随着电泳技术的不断发展，其在临床医学 和分子生物学领域将有广阔应用前景