紫外吸收光谱法测定APC片剂中乙酰水杨酸的含量一、实验目的1、了解7500型紫外一可见分光光度计的性能、结构及其使用方法。2、掌握紫外一可见分光光度法定量分析的基本原理和实验技术。二、方法原理APC药片，研磨成粉末，用稀NaOH水溶液溶解提取，乙酰水杨酸水解成水杨酸钠进入水溶液，该提取液在295nm左右有一个吸收峰，测出稀释成一定浓度的提取液的吸光度值，并用已知浓度的水杨酸的NaOH水溶液做出一条标准曲线，则可从标准曲线上求出相当于乙酰水杨酸的含量。根据两者的分子量，即可求得APC中乙酰水杨酸的含量。溶剂和其他成分不干扰测定。COOCOOHO"+CH3COO'+2H0OCCH, +30HO乙酰水杨酸浓度=[水杨酸浓度]×180.15138.12三、仪器和试剂仪器天美7500或岛津240紫外一可见分光光度计；3G玻璃砂芯漏斗1个；抽滤瓶250mL1个：容量瓶250mL1支：50mL7支：胖肚吸量管20mL1只：刻度吸量管5mL2只。试剂0.5000mgmL-水杨酸贮备液：称取0.5000g水杨酸先溶于少量0.10moL·LNa0H溶液中，然后用蒸馏水定容于1000mL容量瓶中：0.10moL·L-lNaOH溶液。四、实验内容1、将七个50mL容量瓶按0-6依次编号。分别移取水杨酸储备液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL于相应编号容量瓶中，各加入1.0mL0.10moL·LNa0H溶液，先用蒸馏水稀释至30mL左右，80℃水浴加热10分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。2、放一片APC药片在清洁的50mL烧杯中，加2.OmL0.10moL·LNaOH先溶胀，再用玻棒搅拌溶解。在玻璃砂芯漏斗中先放入一张滤纸，用玻璃砂芯漏斗定量地转移烧杯中的内含物，用10mL的0.1MNa0H淋洗烧杯和玻璃砂芯漏斗2次（共20mL），20mL蒸馅水淋洗漏斗4次（共80mL），并将滤液收集于同一个250mL容量瓶中，最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。3、从250mL容量瓶中取20.0mLAPC溶液至一个50mL容量瓶中，蒸馏水稀释至30mL左右，80℃水浴加热10分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。4、在紫外分光光度计上对标样3进行扫描，波长范围是320一280nm，找出最大吸收波长，并在该波长下由低浓度到高浓度测定标准溶液的吸光度，最后测定未知液的吸光度
紫外吸收光谱法测定 APC 片剂中乙酰水杨酸的含量 一、实验目的 1、了解 7500 型紫外－可见分光光度计的性能、结构及其使用方法。 2、掌握紫外－可见分光光度法定量分析的基本原理和实验技术。 二、方法原理 APC 药片，研磨成粉末，用稀 NaOH 水溶液溶解提取，乙酰水杨酸水解成水杨酸钠进入 水溶液，该提取液在 295nm 左右有一个吸收峰，测出稀释成一定浓度的提取液的吸光度值， 并用已知浓度的水杨酸的 NaOH 水溶液做出一条标准曲线，则可从标准曲线上求出相当于 乙酰水杨酸的含量。根据两者的分子量，即可求得 APC 中乙酰水杨酸的含量。溶剂和其他 成分不干扰测定。 COOH OC O + COO CH3 3OH O + CH3COO +2H2O 乙酰水杨酸浓度=[水杨酸浓度]× 138.12 180.15 三、仪器和试剂 仪器 天美 7500 或岛津 240 紫外—可见分光光度计；3G 玻璃砂芯漏斗 1 个；抽滤瓶 250mL 1 个；容量瓶 250mL 1 支；50mL 7 支；胖肚吸量管 20mL 1 只；刻度吸量管 5mL 2 只。 试剂 0.5000mg·mL-1 水杨酸贮备液：称取 0.5000g 水杨酸先溶于少量 0.10moL·L -1 NaOH 溶液中，然后用蒸馏水定容于 1000mL 容量瓶中；0.10moL·L -1 NaOH 溶液。 四、实验内容 1、将七个 50mL 容量瓶按 0-6 依次编号。分别移取水杨酸储备液 0.00、1.00、2.00、 3.00、4.00、5.00mL 于相应编号容量瓶中，各加入 1.0mL 0.10moL·L -1 NaOH 溶液，先用蒸 馏水稀释至 30mL 左右，80℃水浴加热 10 分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。 2、放一片 APC 药片在清洁的 50mL 烧杯中，加 2.0mL0.10moL·L -1 NaOH 先溶胀,再用玻 棒搅拌溶解。在玻璃砂芯漏斗中先放入一张滤纸，用玻璃砂芯漏斗定量地转移烧杯中的内含 物，用 10mL 的 0.1MNaOH 淋洗烧杯和玻璃砂芯漏斗 2 次(共 20mL)，20mL 蒸馏水淋洗漏斗 4 次(共 80mL)，并将滤液收集于同一个 250mL 容量瓶中，最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 3、从 250mL 容量瓶中取 20.0mLAPC 溶液至一个 50mL 容量瓶中，蒸馏水稀释至 30mL 左 右，80℃水浴加热 10 分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。 4、在紫外分光光度计上对标样 3 进行扫描，波长范围是 320—280nm，找出最大吸收波 长，并在该波长下由低浓度到高浓度测定标准溶液的吸光度，最后测定未知液的吸光度
五、数据处理1、以吸光度A为纵坐标，水杨酸浓度C为横坐标作标准曲线。2、根据APC溶液的吸光度值，在标准曲线上求出相应的浓度（mg/mL），并换算成乙酰水杨酸的浓度。3、稀释关系，求出1片APC中乙酰水杨酸的含量，与制造药厂所标明的含量（25mg）进行比较，计算误差。六、注意事项1、配制样品前要将所使用的玻璃仪器用自来水冲洗，再用少量蒸馏水润洗。2、取标准溶液时，应先倒少量标准溶液于小烧杯中移取，不要直接将移液管伸入标准液试剂瓶中。移取标准溶液之前要润洗移液管。3、药片需充分溶胀后，再碾碎。4、水浴加热时容量瓶塞子要松松塞住，防止加热气体膨胀，塞子冲出。5、测量前用待测液润洗比色血，测量由低浓度到高浓度依次进行。6、从实验步骤可知，试样是两次稀释后，用很稀的浓度进行吸光度测试的，因此提取和各步转移必须严格定量，制作标准曲线的标样浓度也必须很准确，不然就会使求得的试样浓度产生较大的误差，而乘上稀释体积后，所求的药片含量误差会更大。思考题1、实验中为什么要加热？2、引起误差的因素有哪些？如何减少误差？
五、数据处理 1、以吸光度 A 为纵坐标，水杨酸浓度 C 为横坐标作标准曲线。 2、根据 APC 溶液的吸光度值，在标准曲线上求出相应的浓度（mg/mL），并换算成乙酰 水杨酸的浓度。 3、 稀释关系，求出 1 片 APC 中乙酰水杨酸的含量，与制造药厂所标明的含量（25mg） 进行比较，计算误差。 六、注意事项 1、配制样品前要将所使用的玻璃仪器用自来水冲洗，再用少量蒸馏水润洗。 2、取标准溶液时，应先倒少量标准溶液于小烧杯中移取，不要直接将移液管伸入标准 液试剂瓶中。移取标准溶液之前要润洗移液管。 3、药片需充分溶胀后，再碾碎。 4、水浴加热时容量瓶塞子要松松塞住，防止加热气体膨胀，塞子冲出。 5、测量前用待测液润洗比色皿，测量由低浓度到高浓度依次进行。 6、从实验步骤可知，试样是两次稀释后，用很稀的浓度进行吸光度测试的，因此提取 和各步转移必须严格定量，制作标准曲线的标样浓度也必须很准确，不然就会使求得的 试样浓度产生较大的误差，而乘上稀释体积后，所求的药片含量误差会更大。 思考题 1、 实验中为什么要加热？ 2、 引起误差的因素有哪些？如何减少误差？