第九章！ 吸光光度法 第一节吸光光度法基本原理 第二节光度计及其基本部件 第三节显色反应及其显色条件的选择 第四节吸光度测量条件的选择 第五节吸光光度法的应用 返回
第九章 吸光光度法 ➢ 第一节 吸光光度法基本原理 ➢ 第二节 光度计及其基本部件 ➢ 第三节 显色反应及其显色条件的选择 ➢ 第四节 吸光度测量条件的选择 ◼ 第五节 吸光光度法的应用
第一节吸光光度法基本原理 9-1一1吸光光度法的特点 9-1-2光吸收的基本定律 9-1-3比色法和吸光光度法及 其仪器 返回
第一节 吸光光度法基本原理 ➢ 9-1-1 吸光光度法的特点 ➢ 9-1-2 光吸收的基本定律 ➢ 9-1-3 比色法和吸光光度法及 其仪器
9.1.1吸光光度法的特点 1光的基本性质 光是一种电磁波，根据波长或频率排列。 波长范围：101~10nm10~400nm400~750nm0.75~ 1000um0.1≈100cm1≈1000m 光谱区域：X射线 紫外光 可见光 红外 光谱 微波 无线电波
9.1.1 吸光光度法的特点 波长范围 ： 10-1 ～10nm 10～400nm 400～750nm 0.75～ 1000μm 0.1～100cm 1～1000m 光谱区域 ： X射线 紫外光 可见光 红外 光谱 微波 无线电波 光是一种电磁波，根据波长或频率排列。 1.光的基本性质
2.吸收光谱产生的原理 吸收光谱有原子吸收光谱和分子吸收光谱 单色 单一波长的光 光 复光 由不同波长的光组合而成的光 光的互补 两种不同颜色的单色光按二定的强度比 例混合得到白光，那么就称这两种单色 光为互补色光 光的互补示意图 黄 胱 红
2.吸收光谱产生的原理 吸收光谱有原子吸收光谱和分子吸收光谱 光 单色 光 复合光 光的互补 单一波长的光 由不同波长的光组合而成的光 两种不同颜色的单色光按一定的强度比 例混合得到白光，那么就称这两种单色 光为互补色光 光的互补示意图
表6-1物质颜色与吸收光颜色的互补关系 物质颜色 吸收光 颜色 波长hm 黄绿 紫 400-450 黄 蓝 45[-480 红 绿蓝 480-490 蓝绿 490-500 紫 红 绿 500-560 紫蓝 黄绿 560-580 黄 580-600 绿蓝 蓝绿 橙 600-650 红 650-780
1.6 1.2 KMno溶液的 0.8 吸收曲线 (CKMno4:a<b<c 0.4 <d) 400 480560640 720 /nm
KMnO4溶液的 吸收曲线 (cKMnO4:a<b<c <d)
分子、原子、离子具有不连续的量子化能级，仅 能吸收当照射光子的能量hv与被照射粒子的E激 E基=(hv)n因为不同物质微粒的结构不同， 共有不同的量子化能级，其能量差也不相同，因此 对光的吸收具有选择性。若固定某一溶液的浓度 C和液层厚度b,测量不同入下的A,以吸光 度A对吸收波长入作图，就得到一吸收曲线， 即吸收光谱。 初步定性分析：不同物质吸收曲线的形状与最大 吸收波长不同。 定量分析：不同C的同一物质在吸收峰附近的A 随C↑而增大，吸收曲线是吸光光度法中选择测 定波长的主要依据。 返回
✓ 分子、原子、离子具有不连续的量子化能级，仅 能吸收当照射光子的能量hv与被照射粒子的 E激 － E基 ＝（hv）n因为不同物质微粒的结构不同， 共有不同的量子化能级，其能量差也不相同,因此 对光的吸收具有选择性。若固定某一溶液的浓度 C 和液层厚度 b ，测量不同 λ下的 A ，以吸光 度 A 对吸收波长λ 作图，就得到－吸收曲线， 即吸收光谱。 ✓ 初步定性分析：不同物质吸收曲线的形状与最大 吸收波长不同。 ✓ 定量分析：不同 C 的同一物质在吸收峰附近的 A 随 C ↑而增大，吸收曲线是吸光光度法中选择测 定波长的主要依据
3.目视比色法和吸光光度法的特 点 主要用于微量组分 特点： (1)灵敏度高：测定含量为1%~10-3%的微 量组分及测定含量为10-4%%10-5%的 痕量组分。 (2)准确度较高： 比色法相对误差5%%10%； 分光光度法相对误差2%~5%。 (3)应用广泛，操作简便、快速
3.目视比色法和吸光光度法的特 点 主要用于微量组分 特点: (1)灵敏度高：测定含量为 1% ~ 10-3 %的微 量组分及测定含量为10-4 % ~ 10-5 %的 痕量组分。 (2)准确度较高： 比色法 相对误差 5 % ~ 10 % ； 分光光度法 相对误差 2 % ~ 5 % 。 (3)应用广泛，操作简便、快速
9.1.2光吸收的基本定律 1、朗伯一比尔(Lambert-Beer)定律 ①光通过溶液的情况： Ia为吸收光强度 t为透过光强度 Ir为反射光强度 1。表示入射光强度 lo la It Ir 因为]在测定试样和空白溶液时其影响可调 互抵消，故可简化为：I。=Ia+It 液层厚度b ②透射比T(Transmittance)的定义 图6-3光通过溶液的情况 T =It/lo
9.1.2 光吸收的基本定律 1、朗伯—比尔(Lambert—Beer)定律 ①光通过溶液的情况: Ia为吸收光强度 It为透过光强度 Ir为反射光强度 Io 表示入射光强度 Io = Ia + It + Ir 因为 Ir在测定试样和空白溶液时其影响可相 互抵消，故可简化为:Io = Ia + It ②透射比T（Transmittance）的定义 T =It/Io
③吸光度A(Absorbance) 的定义： A Iglo/It 因为T=1t/10 所以A=IgIo/1t=Ig1/T ④Lambert-Beer定律的数学表达式： A=K b c K为比例常数， b为液层厚度，c为溶液浓度 2.摩尔吸收系数 当A=Kbc式中的b用cm为单位，c用moIL-1 为单位时，K用E表示；得A=Ebc E称为摩尔吸收系数mol-1.cm1 飞与吸光物质的性质、入射光波长及温度等因素有关
③吸光度A（Absorbance）的定义： A = lgIo/It 因为T = It/10 所以 A = lg I0/It = lg1/T ④ Lambert—Beer 定律的数学表达式： A = K b c 2.摩尔吸收系数 当 A = K b c 式中的 b 用 cm 为单位,c 用 mol·L -1 为单位时，K 用 ε 表示；得 A = ε b c ε称为摩尔吸收系数mol-1·cm-1 ε与吸光物质的性质、入射光波长及温度等因素有关。 K为比例常数， b为液层厚度，c为溶液浓度