第三章免疫原和抗血清的制备
第三章 免疫原和抗血清的制备
第一节免疫原的制备 一、 颗粒性抗原的制备 可溶性抗原的制备和纯化 三、半抗原性免疫原的制备 第二节免疫佐剂 三 佐剂的种类 佐剂的作用机制 第三节抗血清的制备 一、免疫动物的选择 三 免疫程序 动物采血法
第一节 免疫原的制备 一、颗粒性抗原的制备 二、可溶性抗原的制备和纯化 三、半抗原性免疫原的制备 第二节 免疫佐剂 一、佐剂的种类 二、佐剂的作用机制 第三节 抗血清的制备 一、免疫动物的选择 二、免疫程序 三、动物采血法
第四节抗血清的鉴定和保存 抗血清的鉴定 抗血清的保存 第五节抗血清的纯化 特异性IgG抗体 单价特异性抗血清 思考题 小结
第四节 抗血清的鉴定和保存 一、抗血清的鉴定 二、抗血清的保存 第五节 抗血清的纯化 一、特异性IgG抗体 二、单价特异性抗血清 思考题 小结
第一节免疫原的制备 免疫原(immunogen)是能诱导机体产生抗体 并能与抗体发生反应的物质 颗粒性抗原-细胞、细菌、寄生虫 可溶性抗原-蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、核酸
第一节 免疫原的制备 免疫原(immunogen)是能诱导机体产生抗体 并能与抗体发生反应的物质 颗粒性抗原－细胞、细菌、寄生虫 可溶性抗原－蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、核酸
颗粒性抗原的制备 细胞抗原：绵羊红细胞 细菌抗原：菌体抗原、鞭毛抗原 寄生虫体抗原：虫卵
细胞抗原：绵羊红细胞 细菌抗原：菌体抗原、鞭毛抗原 寄生虫体抗原：虫卵 一、颗粒性抗原的制备
二、 可溶性抗原的制备和纯化 (一)可溶性抗原的制备 组织细胞抗原的制备： 高速捣碎法-组织捣碎机捣碎 研磨法·用玻璃匀浆器或乳钵研磨
组织细胞抗原的制备： 高速捣碎法－组织捣碎机捣碎 研磨法－用玻璃匀浆器或乳钵研磨 （一）可溶性抗原的制备 二、可溶性抗原的制备和纯化
组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备： 反复冻融法-20℃冻结，然后室温融化 超声破碎法-超声波(1~20kHz) 自溶法·自身酶系 酶处理法-溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶 表面活性剂处理法-SDS、去氧胆酸钠、 二乙基十六烷基溴
组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备： 反复冻融法－-20℃冻结，然后室温融化 超声破碎法－超声波（1～20kHz） 自溶法－自身酶系 酶处理法－溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶 表面活性剂处理法－SDS、去氧胆酸钠、 二乙基十六烷基溴
免疫球蛋白片段的制备： 非共价键解离法-改变pH、利用强变 性剂 共价键解离法-氧化法和还原法 溴化氰裂解法 酶解法-木瓜酶、胃蛋白酶
免疫球蛋白片段的制备： 非共价键解离法－改变pH 、利用强变 性剂 共价键解离法－氧化法和还原法 溴化氰裂解法 酶解法－木瓜酶 、胃蛋白酶
(二)可溶性抗原的纯化 超速离心法： 差速离心法-低速和高速离心交替进行 密度梯度离心法·区带离心法
超速离心法： 差速离心法－低速和高速离心交替进行 密度梯度离心法－区带离心法 （二）可溶性抗原的纯化
选择性沉淀法： 核酸去除法-氯化锰、 硫酸鱼精蛋、链 霉素 盐析法-硫酸铵、硫酸钠 有机溶剂沉淀法·乙醇、丙酮 聚合物沉淀法-聚乙二醇
选择性沉淀法： 核酸去除法－氯化锰、硫酸鱼精蛋、链 霉素 盐析法－硫酸铵、硫酸钠 有机溶剂沉淀法－乙醇、丙酮 聚合物沉淀法－聚乙二醇