第六章微生物的生长及其控制 、名词解释(每题0.5分,共9分) 1、同步生长 2、高密度培养 3、同步培养 4、细菌生长曲线 5、世代时间 厨 8、兼性厌氧菌 9、专性好氧菌 10、厌氧微生物 11、灭菌 12、消毒 13、所腐 14、化 15、最低抑制浓度 16、最低致死量 17、热死温度 18、热死时间 填空题(每空0.5分,共37.5分) 1.测微生物生长量的方法,直接法有 和 ,间接法有 和 2.计微生物繁殖数有直接法和间接法。直接法有 ,间接法有 3微生物同步生长有 法和 法。第一种方法有 和 :第二种方法有 4.单细胞微生物生长可分为四个阶段,分别为 延滞期的五个特征分别为 和 6影响延滞期的因素分别为 ,和 7.影响代时的主要因素有 ,和 8.进行高密度培养的方法主要有很多,需要运用的规律有 和 9影响微生物生长的主要因素有三类,分别为 和 10.实验室进行厌氧菌的固体培养的方法 有 和 五 1高温灭菌时致死温度是指能在 分钟内杀死微生物的温度 12.湿热灭菌法分为 。第一类分 为 ,和 :第二类分为 和 13.影响加压蒸气灭菌效果的因素有
和 五种 14.灭菌的物理方法有 , 6 15.灭菌的化学方法中化学治疗剂主要有 和 16.如培养细菌的目的在于获得大量菌体,应在培养的 期进行收获。 17.室温型微生物的最低生长温度为 ,最适生长温度为 最高生长温府为 18专性嗜冷型微生物最低生长温度为 ,最适生长温度为 , 最高生长温度为 ,主要分布在 19.低、中、高温型微生物的最适生长温度分别为 20.连续培养的方法按控制方式主要有 和 两种。 三、判断感(每题1分,共10分。对的打T',错的打F',错的要说明理由) 1细菌分裂繁殖一代所需时间为倍增时间。( 理由: 2.在群体生长的细菌数量增加一倍所需时间为代时。() 理由: 3.凡是能响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制因子。() 4.分子氧对专性厌氧微生物的抑制和制死作用是因为这些微生物内缺乏过氧化 氢酶。()》 理由: 5.一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶。() 6.在最适生长温度下,微生物生长繁殖速度最快,因此生产单细胞蛋白的发酵 温度应选择最适生长温度。() 理由: 7.分批培养时,细菌首先经历一个适应期,此期间细胞处于代谢活动的低潮, 所以细胞数目并不增加。() 用d山 8.最适的生长繁殖温度就是微生物代谢的最适温度。() 理由: 9.最低温度是指微生物能生长的温度下限。最高温度是指微生物能生长的温度 上限。() 用由, 10.抗代谢药物磺胺的作用机制在于它的结构与细菌的一种生长因子对氨基苯甲 酸相似,故是它的代谢类似物 四、选择题(每题1分,共13分) 1、高温对微生物的致死是因为:() A.高温使菌体蛋白变性B.高温使核酸变性C.高温破坏细胞膜的 透性D.A 2、光波杀菌最强的波长范围是:() A.0.06-13.6nmB.250-280nmC.300-400nm 3、消毒效果最好的乙醇浓度为:() A.50%。B.70%。C.90%D.25%
4、巴氏灭菌的工艺条件是:() 62-63C30min B.71-72℃30minC.60-70'℃30mim 5、杀死所有微生物的方法称为:( A消毒 B灭菌 C.防腐 6、测微生物活菌数通常采用:( A稀骚平板法 B滤膜培养法 C稀释培养法 7、各种中温型微生物生长的最适温度为:() A20-40℃ B25-370 35-400 8、好氧微生物生长的最适氧化还原电位通常为: A.0.3-0.4V B.+0.1V以上 C.-0.1V以上 9、黑曲霉在pH2-3的环境下发酵蔗糖:() A.主要积累草酸 B主要积累柠檬酸 C.主要积累乙酸 10、升汞用于实验室非金属器皿表面消青的浓度通常为:() 00010 B.0.1% C.1%。 11、防腐的盐浓度通常为:( A.5-10% B.10-15%C.15-20% 12.链霉素抑菌机制是:() A破坏隙的结构 B阳碍细胞壁的合成 C阳碍70S核糖体对蛋白 质的合成 13.磺胺的作用机制在于它结构的相似物是( A.对氨基苯甲酸 B.三甲基卡二氨嘧啶 C,二氢蝶酸D.抗生素 五、问答题(第一题4分,2-14题每题2分,共30分) 1.什么叫典型生长曲线?它可分为几期?划分的依据是什么? 2细菌的纯培养生长曲线分为几个村期.每个时期名有什久持占? 3 消凌 防腐和化疗之间的区别 4.试述平板菌落计数法的基本方法 5试述温度对微生物的影响? 6.如何用比浊法测微生物的数量? 7试术影向征识期长短的因素 8试述影响指数期微生物代时长短的因素 9.PH对微生物生长的作用 10.影响高压蒸气灭菌效果的因素有娜些 11,为了防止微生物在培养过程中会因本身的代谢作用改变环境的pH值,在配制 培养基时应采取什么样的措施? 12稳定为何到来?右何特占 13.抗生素对微 年用机制分几类?试各举 14.试以磺胺及其增效剂TMF为例,说明化学治疗机的作用机制。 答案 一、名词解释 1、同步生长:通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的 生长状态 2、高密度培养:微生物在液体培养中国细胞群体密度超过常规培养10倍以上的 生长状态或培养技术。 3、同步培养:设法使某一群体中的所有个体细胞尽可能都处于同样细胞生长和
分裂周期中,然后通过分析此群体在各阶段的生物化学特性改变,来间接了解单 个细胞的相应变化规律。 4 细 生长曲线 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线 5、微生物原生质增加一倍所需的增倍时间。 6、分批培养:在一个封闭系统中投入有限数量的营养物质后,接入少量微生物 菌种进行培养,使做生物生长繁殖,在特定条件下完成一个生长周期的微生物培 > 当微生物以单批培养到指数器的后期时, 一方面以一定速度连续流入新鲜培 养基和通入无菌空气,并立即搅拌均匀,另一方面,利用溢流的方式,以同样的 流速流出培养物,这样的培养方法叫做连续培养。 8.以在有氧条件下得生长为主也可在厌氧条件下生长的微生物。 9.专性好氧菌:必须在较高浓度分子氧的条件下下能生长,有完整的呼吸链的微 生物 10.在无氧的条件下才能生长的微生物 11.灭菌:用物理或化学方法杀死物体上包括芽孢在内的所有微生物的方法 12消毒:利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有病原菌微生物的措施。 13.防腐:在某些化学或物理因子的作用下,能阻止微生物生长的一种措施。 14化疗:利用具有选择毒性的化学物质对生物内部被微生物感染的组织,病原 细胞 5最低抑制浓度:指在一定条件下,某化学药剂抑制特定微生物的最低浓 16最低致死量:指在一定条件下,某化学药物能引起实验动物群体100%死亡 率的最低剂量 17.执死温度:指在一定村间内,杀死某微生物的水是浮液群体所需的最低温度 18热死时间:指在某一温度下,杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最短时间 填 1、测体积法 称干重法比浊法生理指标法 2、血球计数板 平板菌落计数法厌氧菌落计数法 3、诱导法浴洗法最活温法营茶周整法 离心法 过滤分离法 消盼纤维藏览法 4 延制期 指数期 稳定期 衰亡期 上长速率常数为零 细胞形态变大 细胞内DNA、RNA含量增高 合成 代谢十分活跃对外界条件敏感 6、接种龄接种量 培养成分 7、南种营养成分 营养物浓度 8、优化培养基 溶解氧的浓度 防止有害代谢产物的生成 9、温度 氧气 PH 10、高层琼脂法 厌氧培养皿亨盖特滚管技术厌氧罐厌氧手套箱 11、10min 12、常压法加压法巴氏消毒法煮沸消毒法间歇消毒法加压蒸气 灭菌法 连续加压蒸气灭菌法 13、灭菌物体含菌量 灭菌锅内空气排除程度灭菌对象的PH灭菌对象的 体积加热和散热速度 14、高温灭南低温抑菌辐射干燥和渗透压过滤出菌超声波 15、磺胺抗生素
16、稳定期 17、50 25.37C45.50℃ 18、30℃ 45-55℃ 60-75℃ 1910-15℃ 25-370 45-50℃。 20、恒速器 恒化器 一、新美 IT 2F(理由:代时是指细胞每分裂一次所需的时间,不是细菌数量增加一倍所需 的时间)》 3.F(理由:生长限制因子是指处于较低浓度范围内可能影响生长速率和茵体 量的某营养物) 4T 5.F(理由:不是所有好氧微生物都含有SOD,所有具有细胞色素系统的好氧微 生物具有SOD) 6.F(理由:在最适生长温度下,微生物生长繁殖速度最快,但是发酵时不一定 要选择最适温度) 7.T 8F(理由:最适生长温度是指分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度) 9.T 10.1 四、选择题 LD 2.B 4.D 5.B 6.A 7A 9.B 10.E 11.B 12.B 13.A 五、问答题 :定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线。它2可分为 四个时期。划分是依据微生物的生长速率常数,即每小时分裂次数的不同。 2答:细菌的纯培养生长曲线分为四个时期,分别为延滞期、指数期、稳定 期、衰亡期。延滞期的特点为:1、生长速率常数为零2、细胞形态变大或增长3、 细胞内的RNA、DNA含量增高4、合成代谢十分活跃5、对外界条件敏感。指 数期的特点是:1、生长速率常数最大 、代时最短3、对环境变化敏感。 稳定期 1、生长速率为零2、生长限制因子耗尽3、有害代谢产物积紫4、各种理化条件 不适宜。衰亡期:生长速率常数为负值。 3答:灭菌是杀死所有微生物:消毒是杀死或消除所有病原微生物,达到防
止病原菌传播的目的:防腐是利用理化因子使微生物暂不生长:化疗是有效地消 除宿主体内的微生物 4. 答: 把稀释后的 一定量菌样通过浇注或涂布的方法,让其内的微生物单 细 一分散在琼脂平板上,待培养后,每一活细胞就形成 一个单菌落,根据每 皿上形式的菌落形成单位数乘上稀释度就可以推算出菌样的含菌数。 5.答:适宜的温度有益于微生物的生长:高温可使菌体蛋白质变性,导致微生 物死亡,常用高温进行消毒灭菌:低温对微生物具有抑制或杀伤作用,故低温用 于保藏食品 6答:用比浊法测定微生物的数量首先必须绘制出浊度与数量的相关曲线 浊度用光电比色计测定,均属靠用稀释平板法测定或用计数板法测定。曲线绘制 好后,在生产中,只要用比色计测出菌液的任一浊度后就可以从曲线中查出相应 的菌数。 7,答:菌种:繁殖速度较快的菌种的延迟期一般较短 接种物菌龄:用于对数生长期的菌种接种时,其延滞期较短,甚至检测不 到。 接种量:一般来说,接种量增大可缩短甚至消除延滞期: 培养基成分:在营养成分丰富的天然培养基上生长的延滞期比在合成培养 基上生长时短:接种后培养基成分有较大变化时,会使延滞期加长,所以发酵工 业上尽量使发酵培养基的成分与种子培养基趁 8.答:1菌种:不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同 2营养成分:在营养丰富的培养基中生长代时短 3.营养物浓度:在一定范围内,生长速率与营养物浓度呈正比 4.温度:在一定范围内,生长速率与培养温度呈正比 9.答:1.细胞膜电荷,控制物质进出。2.影响酶的活性。3.调节养料可给性利 有害物质毒性 10.答:1.菌种2.菌体数量3.灭菌锅内空气排放程度4.灭菌物体的PH值5. 灭菌对象的体积6.加热与散热的速度 11.答:为了防止微生物在培养过程中因自身的代谢作用产酸或产碱改变环 境的PH值,通常在配制培养基时预先加入缓冲物质如磷酸盐或碳酸钙 12.答 在指数期后期生长限制因子耗尽 有害代谢 物积崇 各种理化条 件不适宜导致稳定期到来。稳定期的特点是生长速率常数为零,菌体产量达到最 高值,有害代谢产物积茶,各种理化条件不适宜。 13.答:抗生察等抗菌剂的印菊或杀菊作用,主要是针对细菌有而人(或其 它高等动植物)没有"的机制进行杀伤,有4大类作用机理: 阻碍细菌细胞壁的 合成,导致细菌在低渗透压环境下膨胀破裂死亡,以这种方式作用的 抗生素主要 是阝内酰胺类抗生素。哺乳动物的细胞没有细胞壁,不受这类药物的影响。 与细菌细胞膜相互作用,增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道, 让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。以这种方式作用的抗生 素有多粘菌素和短杆菌肽等。 与细菌核糖体或其反应底物(如tRNA mRNA)相互所用,抑制蛋白质的 合成 意味着细胞存活所必需的结构蛋白和酶不能被合成。以这种方式作月 的抗生素包括四环素类抗生素、大环内酯类抗生素、氨基糖苷类抗生素、氯霉索 。 阻碍细菌DNA的复制和转录,阻碍DNA复制将导致细菌细胞分裂繁殖受
阻,阻碍DNA转录成mRNA则导致后续的mRNA翻译合成蛋白的过程受阻。 以这种方式作用的主要是人工合成的抗菌剂喹诺时类(如氧氟沙星)。 14.答:磺胺会抑制2-氨-4-羟-7,8-二氢蝶啶酰焦磷酸与PABA的缩合反应。 这是由于磺胺是PABA的结构类似物,可与它发生竞争性拮抗作用,使某些磺胺 分子与2-氨-4-羟-7,8-二氢蝶啶酰焦磷酸缩合,形成一个2-氨-4-羟-7,8-二氢蝶 酸的类似物。这样就使那些能利用二氢蝶啶和PABA合成叶酸的细菌无法合成叶 酸,于是生长受到抑制。另外,TMP能抑制二氢叶酸还原酶,使二氢叶酸无法 还原成四氢叶酸。这样,TMP就增强了磺胺的抑制效果。在细菌合成四氢叶酸 过程中,磺胺与TMP的双重阻断在防治有关细菌性传染病中,起一个“双重保险” 的作用