附录2.怎样作徒手切片 附录2.怎样作徒手切片 用光学显微镜观察的样品必须是透明的薄片,因此待观察的植物材料只有被切成很薄的 切片后,才能在显微镜下观察。显微镜的制片分永久制片和临时制片,永久制片的制作方法 和步骤比较复杂,有兴趣者可查阅有关植物制片技术的书籍,在植物学实验教学过程中,指 导教师已预先准备了所需用的永久制片。在教学过程中,要求同学做的主要是临时制片。 临时制片种类很多,包括涂片、压片等等,这里主要介绍用新鲜材料制作切片的徒手切 片法。作徒手切片不需要复杂的设备,只需要一把锋利的剃刀或一片刀片就可以进行,方法 简单,而且易于保持细胞的生活状态。徒手切片法所作的切片通常不经染色或经简易染色后 封藏于水中即可观察。 用剃刀切片,材料不能太大,一般以表面不超过3-5mm2为宜。切片最要紧的是平而薄 无需很完整,比如茎的横切面,无需切片整圆形,只需一角就够了。所有切片前的准备工作, 如截取材料、削平切面,都应使用解剖刀或用过的刀片,不可用剃刀,以保持剃刀的锋利。 为了成功地切片,应掌握正确的用刀方法。一般用左手的大拇指、食指和中指三个手指 捏住材料,使材料突出在指尖之上,避免切片时割伤手指;用右手平稳地拿住剃刀,把刀口 放在经解剖刀削平的材料平面中间,轻轻地压住它,以均匀的动作,从剃刀刀口下方起,斜 着向后拉切。切时要用臂力而不是腕力,并且不必太用力,否则就不易切薄。在切的过程中 决不能以剃刀直接挤压材料,或以剃刀来回拉割材料,并且要始终保持材料与剃刀在水平状 态,否则会由于切面偏斜而影响观察。 附图2.1切、取 切下的切片应该薄而透明,形状则不要求非常完整,可以用刀不同的部位一次作几个切 片,然后用蘸水的毛笔取下切片,置于盛水的培养皿中 有些较柔嫩的器官,例如幼叶,难以直接拿住进行切片,因而需借助一些维持物,一般 用胡萝卜根或土豆块茎作为维持物,把要切的材料夹于其中,进行切片,以利于把握操作。 将切下的薄片放在载玻片上时,要先在玻片中央加一滴水,把材料放到水滴中,然后用 镊子夹住盖片,将盖片的一侧先接触到载玻片中央的水滴,然后用镊子顶住盖片的另一侧, 慢慢放下,使盖玻片与载玻片之间充满水,如有气泡,要掀起盖片,重新放置 附图22盖片 徒手制作的切片可以直接在光镜下观察,也可以经过简易的染色,以使结构看得更清楚 常用的染料有:0.1%亚甲基蓝、0.5-1%中性红或1%番红水溶液等。染色的方法是将切片 放在载玻片上后,用吸水纸吸去多余的水分,滴上一滴染料,经过1-2分钟后,用水冲洗 一下,盖上盖玻片,在显微镜下观察
附录 2. 怎样作徒手切片 附录 2. 怎样作徒手切片 用光学显微镜观察的样品必须是透明的薄片，因此待观察的植物材料只有被切成很薄的 切片后，才能在显微镜下观察。显微镜的制片分永久制片和临时制片，永久制片的制作方法 和步骤比较复杂，有兴趣者可查阅有关植物制片技术的书籍，在植物学实验教学过程中，指 导教师已预先准备了所需用的永久制片。在教学过程中，要求同学做的主要是临时制片。 临时制片种类很多，包括涂片、压片等等，这里主要介绍用新鲜材料制作切片的徒手切 片法。作徒手切片不需要复杂的设备，只需要一把锋利的剃刀或一片刀片就可以进行，方法 简单，而且易于保持细胞的生活状态。徒手切片法所作的切片通常不经染色或经简易染色后， 封藏于水中即可观察。 用剃刀切片，材料不能太大，一般以表面不超过 3-5mm2 为宜。切片最要紧的是平而薄， 无需很完整，比如茎的横切面，无需切片整圆形，只需一角就够了。所有切片前的准备工作， 如截取材料、削平切面，都应使用解剖刀或用过的刀片，不可用剃刀，以保持剃刀的锋利。 为了成功地切片，应掌握正确的用刀方法。一般用左手的大拇指、食指和中指三个手指 捏住材料，使材料突出在指尖之上，避免切片时割伤手指；用右手平稳地拿住剃刀，把刀口 放在经解剖刀削平的材料平面中间，轻轻地压住它，以均匀的动作，从剃刀刀口下方起，斜 着向后拉切。切时要用臂力而不是腕力，并且不必太用力，否则就不易切薄。在切的过程中， 决不能以剃刀直接挤压材料，或以剃刀来回拉割材料，并且要始终保持材料与剃刀在水平状 态，否则会由于切面偏斜而影响观察。 切下的切片应该薄而透明，形状则不要求非常完整，可以用刀不同的部位一次作几个切 片，然后用蘸水的毛笔取下切片，置于盛水的培养皿中。 有些较柔嫩的器官，例如幼叶，难以直接拿住进行切片，因而需借助一些维持物，一般 用胡萝卜根或土豆块茎作为维持物，把要切的材料夹于其中，进行切片，以利于把握操作。 将切下的薄片放在载玻片上时，要先在玻片中央加一滴水，把材料放到水滴中，然后用 镊子夹住盖片，将盖片的一侧先接触到载玻片中央的水滴，然后用镊子顶住盖片的另一侧， 慢慢放下，使盖玻片与载玻片之间充满水，如有气泡，要掀起盖片，重新放置。 徒手制作的切片可以直接在光镜下观察，也可以经过简易的染色，以使结构看得更清楚。 常用的染料有：0.1% 亚甲基蓝、0.5-1% 中性红或 1% 番红水溶液等。染色的方法是将切片 放在载玻片上后，用吸水纸吸去多余的水分，滴上一滴染料，经过 1－2 分钟后，用水冲洗 一下，盖上盖玻片，在显微镜下观察。 附图 2.1 切 、 取 附图 2.2 盖片