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北京大学:《植物生物学 Plant Biology》精品课程教学资源(实验指导)实验十四 植物组织的水势和渗透势

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14.植物组织的水势和渗透势 植物组织的水势和渗透势14 水是植物体的主要组成部分,水不仅能使原生质保持溶胶状态,以维持细胞旺盛的代谢 活动:而且水还是植物体内许多代谢过程的原料或媒介,并有助于维持细胞的紧张度,促进 细胞保持固有的形态。在自然环境中,植物体表现为吸水还是失水,与植物组织的水势和渗 透势有密切联系 实验目的: 1.了解水分在植物生命活动中的作用。 2.了解植物体内不同组织和细胞之间,植物与环境之间水分的转移与植物组织的水势 及渗透势的关系 3.学习测定植物组织水势和渗透势的基本方法 实验内容: 1.用小液流法测定植物组织的水势 2.用质壁分离法测定植物组织的渗透势 实验步骤 1.植物组织的水势 水势是水的化学势,植物细胞与相邻细胞或外界环境之间水分的移动,决定于细胞水势 的大小,水总是从水势高的部分向水势低的部分移动。因此,当植物细胞与外液接触时,若 其水势低于外液时,细胞吸入水分,外液浓度上升;反之细胞排出水分,外液浓度下降;若 二者相等时,外液浓度不变。 一种溶液当其浓度不同时,比重也不同。将浸泡组织后的溶液小滴置于原浓度溶液时, 浓度下降的溶液小滴由于比重下降将在原溶液中上升,反之下沉,液滴基本不动时,表示该 组织的水势等于溶液的渗透势。 ▲取预先配制的1.00mol/dm3的蔗糖溶液配制0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、 0.40、0.45、0.50、0.60mo1/dm3的蔗糖溶液各10cm3,充分摇匀,编号 取10支试管编号,用移液管分别加入2cm相应编号的蔗糖溶液。 用打孔器在同一马铃薯块茎上打取完整的圆柱体,并用刀片分割成若干1cm长的切 段。然后依次在每个装有2cm3蔗糖溶液的试管中放入2个切段。盖好试管,开始计时,不 时轻轻摇动 ▲放置40min后,用解剖针依次将各试管中的马铃薯切段取出,用针尖加入少许甲烯 兰粉末,振荡使之溶解,至溶液呈浅兰色即可 用长滴管从各试管中分别吸取少许兰色溶液,然后将滴管尖端插入相应的原浓度蔗 糖溶液的中部,徐徐放出一小滴兰色溶液,轻轻抽出滴管,在试管后面衬一张白卡片,仔细 观察兰色液滴的移动方向 注意:马铃薯切段的大小要尽可能一致,操作要快,但要小心,不要切到手, 56

14. 植物组织的水势和渗透势 56 植物组织的水势和渗透势 14 水是植物体的主要组成部分,水不仅能使原生质保持溶胶状态,以维持细胞旺盛的代谢 活动;而且水还是植物体内许多代谢过程的原料或媒介,并有助于维持细胞的紧张度,促进 细胞保持固有的形态。在自然环境中,植物体表现为吸水还是失水,与植物组织的水势和渗 透势有密切联系。 实验目的: 1. 了解水分在植物生命活动中的作用。 2. 了解植物体内不同组织和细胞之间,植物与环境之间水分的转移与植物组织的水势 及渗透势的关系。 3. 学习测定植物组织水势和渗透势的基本方法。 实验内容: 1. 用小液流法测定植物组织的水势。 2. 用质壁分离法测定植物组织的渗透势。 实验步骤: 1. 植物组织的水势 水势是水的化学势,植物细胞与相邻细胞或外界环境之间水分的移动,决定于细胞水势 的大小,水总是从水势高的部分向水势低的部分移动。因此,当植物细胞与外液接触时,若 其水势低于外液时,细胞吸入水分,外液浓度上升;反之细胞排出水分,外液浓度下降;若 二者相等时,外液浓度不变。 一种溶液当其浓度不同时,比重也不同。将浸泡组织后的溶液小滴置于原浓度溶液时, 浓度下降的溶液小滴由于比重下降将在原溶液中上升,反之下沉,液滴基本不动时,表示该 组织的水势等于溶液的渗透势。 ▲ 取预先配制的 1.00mol/dm3 的蔗糖溶液配制 0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、 0.40、0.45、0.50、0.60mol/dm3 的蔗糖溶液各 10cm3 ,充分摇匀,编号。 ▲ 取 10 支试管编号,用移液管分别加入 2cm3 相应编号的蔗糖溶液。 ▲ 用打孔器在同一马铃薯块茎上打取完整的圆柱体,并用刀片分割成若干 1cm 长的切 段。然后依次在每个装有 2cm3 蔗糖溶液的试管中放入 2 个切段。盖好试管,开始计时,不 时轻轻摇动。 ▲ 放置 40min 后,用解剖针依次将各试管中的马铃薯切段取出,用针尖加入少许甲烯 兰粉末,振荡使之溶解,至溶液呈浅兰色即可。 ▲ 用长滴管从各试管中分别吸取少许兰色溶液,然后将滴管尖端插入相应的原浓度蔗 糖溶液的中部,徐徐放出一小滴兰色溶液,轻轻抽出滴管,在试管后面衬一张白卡片,仔细 观察兰色液滴的移动方向。 注意:马铃薯切段的大小要尽可能一致,操作要快,但要小心,不要切到手

14.植物组织的水势和渗透势 ▲在实验报告中记录不同浓度溶液中,小液滴的移动方向(可用“↑”表示上升,“↓” 表示下降 表示基本不动),确定小液滴基本不动的溶液浓度。 ▲根据下列公式计算马铃薯块茎的水势。 y=-IRCT 为植物细胞的水势(常以Pa或Mpa为单位,1atm=1013250a=0.10325MPa) i为溶液的等滲系数(蔗糖溶液i=1) R为气体常数(0.082atm·dm3/mol·k) C为小液滴基本不动时的溶液浓度 T为实验时的绝对温度(T=273+t,t为实验时的环境摄氏度) 观察思考: 1.在组织浸泡过程中,为何要轻轻摇动试管? 2.为何不可向溶液中多加甲烯兰粉末? 2.植物组织的渗透势 植物细胞的细胞壁允许水分和溶质自由透过,但质膜是有选择性的半透膜,在这个半透 膜的内侧是含有无机盐、糖和有机酸等各种有机化合物的水溶液——细胞液,它们与环境(细 胞壁、细胞间隙、土壤等)中的溶液之间可以发生滲透作用。当植物细胞处于高渗溶液中时 常常由于细胞失水而导致整个原生质收缩,脱离细胞壁,发生质壁分离现象。但如将植物细 胞转入低渗溶液或清水中时,随着水分进入细胞,液泡变大,整个原生质体可逐渐恢复到原 来的状态,即质壁分离复原。当植物细胞的渗透势等于外液的渗透势时,细胞处于即将发生 质壁分离的状态,这种状态称为临界质壁分离。因此,若将植物组织放入一系列不同浓度的 蔗糖溶液中,观察确定发生临界质壁分离的溶液的浓度(此浓度称为等滲浓度),根据此浓度 就可以测定植物组织的渗透势 图14.1质壁分离 ▲取1.00mol/dm3蔗糖溶液配制成0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、 0.50、0.60mo1/dm的溶液,摇匀并编号后,分别取1.0cm3置于10个培养皿中。 ▲取洋葱(或其它带色素的植物组织),用刀片在洋葱鳞茎内表皮上划出10个边长为 2-5mm的小方格,用镊子轻轻地将表皮剥离,并从高浓度至低浓度,依次将洋葱表皮小片投 入各培养皿中。 ▲浸泡5-10min后,将表皮取出,放在加有1-2滴相同浓度溶液的载玻片上,盖好盖 片,在显微镜下观察,计算发生质壁分离的细胞比例,找出引起50%左右细胞出现细胞壁 角隅质壁分离的浓度,以及刚刚不引起质壁分离的最高浓度。 ▲重复三次上述操作,确定上述两类极限溶液的浓度,取其平均值。细胞的渗透势就 等于该平均浓度的溶液所具有的渗透势

14. 植物组织的水势和渗透势 57 ▲ 在实验报告中记录不同浓度溶液中,小液滴的移动方向(可用“↑”表示上升,“↓” 表示下降,“—”表示基本不动),确定小液滴基本不动的溶液浓度。 ▲ 根据下列公式计算马铃薯块茎的水势。 ψ=-iRCT ψ为植物细胞的水势(常以 Pa 或 Mpa 为单位,1atm=101325Oa=0.10325MPa) i 为溶液的等渗系数(蔗糖溶液 i=1) R 为气体常数(0.082atm·dm3 /mol·k) C 为小液滴基本不动时的溶液浓度 T 为实验时的绝对温度(T=273 + t,t 为实验时的环境摄氏度) 观察思考: 1. 在组织浸泡过程中,为何要轻轻摇动试管? ▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁。 2. 为何不可向溶液中多加甲烯兰粉末? ▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁。 2.植物组织的渗透势 植物细胞的细胞壁允许水分和溶质自由透过,但质膜是有选择性的半透膜,在这个半透 膜的内侧是含有无机盐、糖和有机酸等各种有机化合物的水溶液——细胞液,它们与环境(细 胞壁、细胞间隙、土壤等)中的溶液之间可以发生渗透作用。当植物细胞处于高渗溶液中时, 常常由于细胞失水而导致整个原生质收缩,脱离细胞壁,发生质壁分离现象。但如将植物细 胞转入低渗溶液或清水中时,随着水分进入细胞,液泡变大,整个原生质体可逐渐恢复到原 来的状态,即质壁分离复原。当植物细胞的渗透势等于外液的渗透势时,细胞处于即将发生 质壁分离的状态,这种状态称为临界质壁分离。因此,若将植物组织放入一系列不同浓度的 蔗糖溶液中,观察确定发生临界质壁分离的溶液的浓度(此浓度称为等渗浓度),根据此浓度 就可以测定植物组织的渗透势。 ▲ 取 1.00mol/dm3 蔗糖溶液配制成 0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、 0.50、0.60mol/dm3 的溶液,摇匀并编号后,分别取 1.0cm3 置于 10 个培养皿中。 ▲ 取洋葱(或其它带色素的植物组织),用刀片在洋葱鳞茎内表皮上划出 10 个边长为 2-5mm 的小方格,用镊子轻轻地将表皮剥离,并从高浓度至低浓度,依次将洋葱表皮小片投 入各培养皿中。 ▲ 浸泡 5-10min 后,将表皮取出,放在加有 1-2 滴相同浓度溶液的载玻片上,盖好盖 片,在显微镜下观察,计算发生质壁分离的细胞比例,找出引起 50% 左右细胞出现细胞壁 角隅质壁分离的浓度,以及刚刚不引起质壁分离的最高浓度。 ▲ 重复三次上述操作,确定上述两类极限溶液的浓度,取其平均值。细胞的渗透势就 等于该平均浓度的溶液所具有的渗透势。 图 14.1 质壁分离

14.植物组织的水势和渗透势 ▲按照公式旷:=-iRCT计算细胞的滲透势。式中ψx是细胞的渗透势,其他符号与“小 液流法”相同。 观察思考: 1.生活的植物细胞会发生质壁分离现象,死亡的植物细胞是否还会发生质壁分离现 2.动物细胞是否会发生质壁分离现象?为什么? 综合分析: 1.水分对植物生长发育的作用主要表现在哪些方面? 2.植物生长发育需要水分,那么是不是水分越多越好?为什么? 58

14. 植物组织的水势和渗透势 58 ▲ 按照公式ψπ=-iRCT 计算细胞的渗透势。式中ψπ是细胞的渗透势,其他符号与“小 液流法”相同。 观察思考: 1. 生活的植物细胞会发生质壁分离现象,死亡的植物细胞是否还会发生质壁分离现 象? ▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁。 2. 动物细胞是否会发生质壁分离现象?为什么? ▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁。 综合分析: 1. 水分对植物生长发育的作用主要表现在哪些方面? 2. 植物生长发育需要水分,那么是不是水分越多越好?为什么?

14.植物组织的水势和渗透势 实验报告 姓名 学号: 组(桌)号: 1.植物组织的水势: 小液流法测定植物组织的水势结果记录 植物材料 实验时温度: 实验日期 溶液浓度0.100.150.200.250.300.350400.450.500.60 小液滴移 小液滴基本不动的溶液浓度为: 植物组织的水势ψ=-iRCT= 2.植物组织的滲透势 细胞质壁分离法测定植物组织的渗透势结果记录 植物材料 实验时温度 实验日期 溶液浓度0.100.150.200.250.300.350400.450.500.60 发生质壁 分离的细 胞比例 引起50%左右细胞发生角隅质壁分离的溶液浓度为 不引起质壁分离的最高浓度为: 植物组织的渗透势x=-iRCT=

14. 植物组织的水势和渗透势 59 实验报告 姓名: 学号: 组(桌)号: ▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁ 1.植物组织的水势: 小液流法测定植物组织的水势结果记录 植物材料: 实验时温度: 实验日期: 溶液浓度 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.60 小液滴移 动方向 小液滴基本不动的溶液浓度为: 植物组织的水势 ψ= -i RCT = 2.植物组织的渗透势: 细胞质壁分离法测定植物组织的渗透势结果记录 植物材料: 实验时温度: 实验日期: 溶液浓度 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.60 发生质壁 分离的细 胞比例 引起 50 % 左右细胞发生角隅质壁分离的溶液浓度为: 不引起质壁分离的最高浓度为: 植物组织的渗透势 ψπ= -i RCT = ▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁▁

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