色谱法基础 Principles of Chromatography
1 色谱法基础 Principles of Chromatography
18-1栊述 色谱法早在1903年由俄国植物学家茨维 特( Sweety分离植物色素时采用。后来不仅 用于分离有色物质,还用于分离无色物质,并 出现了种类繁多的各种色谱法。许多气体、液 体和固体样品都能找到合适的色谱法进行分离 和分析。目前色谱法已广泛应用于许多领域 成为十分重要的分离分析手段
2 18-1 概 述 色谱法早在1903年由俄国植物学家茨维 特(Tsweett)分离植物色素时采用。后来不仅 用于分离有色物质,还用于分离无色物质,并 出现了种类繁多的各种色谱法。许多气体、液 体和固体样品都能找到合适的色谱法进行分离 和分析。目前色谱法已广泛应用于许多领域, 成为十分重要的分离分析手段
梳述 色谱法:利用组分 在两相间分配系数不 同而进行分离的技术 石油 移动相:携带样色素 品流过整个系统的流 →碳酸钙颗粒 体 之把玻璃柱 固定相:静止不 动的一相,色谱柱 3
3 石油 醚 碳酸钙颗粒 色素 玻璃柱 概述 色谱法:利用组分 在两相间分配系数不 同而进行分离的技术 移动相:携带样 品流过整个系统的流 体 固定相:静止不 动的一相,色谱柱
梳述 不管属于哪一类色谱法,其共同的基本特 点是具备两个相:不动的一相,称一为固定相; 另一相是携带样品流过固定相的流动体,称为 流动相。当流动相中样品混合物经过固定相时, 就会与固定相发生作用,由于各组分在性质和 结构上的差异,与固定相相互作用的类型、强 弱也有差异,因此在同一推动力的作用下,不 同组分在固定相滞留时间长短不同,从而按先 后不同的次序从固定相中流出
4 概述 不管属于哪一类色谱法,其共同的基本特 点是具备两个相:不动的一相,称一为固定相; 另一相是携带样品流过固定相的流动体,称为 流动相。当流动相中样品混合物经过固定相时, 就会与固定相发生作用,由于各组分在性质和 结构上的差异,与固定相相互作用的类型、强 弱也有差异,因此在同一推动力的作用下,不 同组分在固定相滞留时间长短不同,从而按先 后不同的次序从固定相中流出
梳述 sample A+B frit detector Igna 5
5 概述
色谱法分类 按两相状态分类 气体为流动相的色谱称为气相色谱(GC),根据 固定相是固体吸附剂还是固定液(附着在惰性载体上 的一薄层有机化合物液体),又可分为气固色谱(GS C)和气液色谱(GLC) 液体为流动相的色谱称液相色谱(LC)。同理 液相色谱亦可分为液固色谱(LSC)和液液色谱 (LLC) 超临界流体为流动相的色谱称为超临界流体色谱 SFC)。 随着色谱工作的发展,通过化学反应将固定液键合 到载体表面,这种化学键合固定相的色谱又称化学键 合相色谱(CBPC)
6 色谱法分类 1.按两相状态分类 气体为流动相的色谱称为气相色谱(GC),根据 固定相是固体吸附剂还是固定液(附着在惰性载体上 的一薄层有机化合物液体),又可分为气固色谱(GS C)和气液色谱(GLC). 液体为流动相的色谱称液相色谱(LC)。同理, 液相色谱亦可分为液固色谱(LSC)和液液色谱 (LLC). 超临界流体为流动相的色谱称为超临界流体色谱 (SFC)。 随着色谱工作的发展,通过化学反应将固定液键合 到载体表面,这种化学键合固定相的色谱又称化学键 合相色谱(CBPC)
色谱法分类 2.按分离机理分类 利用组分在吸附剂(固定相)上的吸附能力强弱不 同而得以分离的方法,称为吸附色谱法。 利用组分在固定液(固定相)中溶解度不同而达到 分离的方法称为分配色谱法。 利用组分在离子交换剂(固定相)上的亲和力大小 不同而达到分离的方法,称为离子交换色谱法。 利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而 达到分离的方法,称为凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法。 最近,又有一种新分离技术,利用不同组分与固定 相(固定化分子)的高专属性亲和力进行分离的技术 称为亲和色谱法,常用于蛋白质的分离
7 色谱法分类 2.按分离机理分类 利用组分在吸附剂(固定相)上的吸附能力强弱不 同而得以分离的方法,称为吸附色谱法。 利用组分在固定液(固定相)中溶解度不同而达到 分离的方法称为分配色谱法。 利用组分在离子交换剂(固定相)上的亲和力大小 不同而达到分离的方法,称为离子交换色谱法。 利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而 达到分离的方法,称为凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法。 最近,又有一种新分离技术,利用不同组分与固定 相(固定化分子)的高专属性亲和力进行分离的技术 称为亲和色谱法,常用于蛋白质的分离
色谱法分类 3.按固定相的外形分类 固定相装于柱内的色谱法,称为柱色谱。 固定相呈平板状的色谱法,称为平板色谱,它 又可分为薄层色谱和纸色谱。 根据以上所述,将色谱法的分类总结于下 表中
8 色谱法分类 3.按固定相的外形分类 固定相装于柱内的色谱法,称为柱色谱。 固定相呈平板状的色谱法,称为平板色谱,它 又可分为薄层色谱和纸色谱。 根据以上所述,将色谱法的分类总结于下 表中
色谱法分类 表色谱法分类 流动相厂气体 液体 超临界流体 固定相液体固体(吸附剂)液体 固体 键合固定相 吸附剂□键合多孔离子 固定相固体交换剂 固定相外形柱柱柱平面平面柱柱柱柱柱 名称气液气固液薄层色谱被固鰱合相尺寸排离子交超临界流体 色谱色谱 色谐纸色谱色谱色谱阻色谱换色谱色谱
9 色谱法分类
18-2色谱流出曲线及有关术语 q一.流出曲线和色谱峰 E-2-F H 进样 8 空气峰 D 图18-3色谱流出曲线 10
10 18-2 色谱流出曲线及有关术语 一.流出曲线和色谱峰