第四章动物细胞工程制药
第 四 章 动物细胞工程制药
概述第一节细胞学说的建立：组织培养：早期培养形式，细胞培养的基础细胞培养：生物体内某一块组织取出，用酶消化分散成单个细胞，然后接种到特定的培养容器中并给予必要的培养条件，进行体外生长繁殖的培养方式。（（营养&环境）
第一节 概 述 细胞学说的建立： 组织培养：早期培养形式，细胞培养的基础 细胞培养：生物体内某一块组织取出，用酶消化 分散成单个细胞，然后接种到特定的培养容器中 并给予必要的培养条件，进行体外生长繁殖的培 养方式。（营养&环境）
细胞工程技术：以细胞为研究对象，运用细胞生物学、分子生物学等学科的原理和方法按照人们的意志设计改造细胞的某些性状从而培育出新的生物改良品种或通过细胞培养获得自然界中难以获得的珍贵产品的新兴生物技术
细胞工程技术：以细胞为研究对象，运用细 胞生物学、分子生物学等学科的原理和方法， 按照人们的意志设计改造细胞的某些性状， 从而培育出新的生物改良品种或通过细胞培 养获得自然界中难以获得的珍贵产品的新兴 生物技术
第二节动物细胞的形态和生理特点一、动物细胞的形态适应功能，形态各异。细胞膜细胞质分泌小酒细胞膜细校高尔基体楼仁形态特征细胞质线拉体细胞核粗造内质网没有细胞壁客静体亚细胞器光滑内质网过氧化物酶体
第二节 动物细胞的形态和生理特点 一、动物细胞的形态 适应功能,形态各异。 细胞膜 细胞质 细胞核 没有细胞壁 亚细胞器 形 态 特 征
蛋白质糖基化与分泌表达蛋白质合成场所：粗面内质网上的核糖体糖基化场所：内质网合成各种糖类，粗面内质网腔内和高尔基体，加工修饰。不同细胞系糖基化特征不同，选择适宜细胞系。对于分泌型蛋白，分泌泡与细胞膜融合释放到胞外，完成了蛋白质的分泌表达
蛋白质合成场所：粗面内质网上的核糖体 糖基化场所：内质网合成各种糖类，粗面内 质网腔内和高尔基体，加工修饰。 不同细胞系糖基化特征不同，选择适宜 细胞系。 对于分泌型蛋白，分泌泡与细胞膜融合， 释放到胞外，完成了蛋白质的分泌表达。 蛋白质糖基化与分泌表达
离体培养的细胞1.贴壁细胞生长须有贴附的支持物表面，自身分泌或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长。两种形态：成纤维样细胞型（梭形或不规则形）上皮样细胞型（扁平的不规则多角形）
⒈贴壁细胞 生长须有贴附的支持物表面，自身分泌或培 养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长。 两种形态： 成纤维样细胞型（梭形或不规则形） 上皮样细胞型（扁平的不规则多角形） 离体培养的细胞
2.悬浮细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长。如淋巴细胞3.兼性贴壁细胞生长不严格依赖支持物。如中国地鼠外巢细胞，小鼠L929细胞
⒉悬浮细胞 生长不依赖支持物表面，在培养液中呈 悬浮状态生长。如淋巴细胞。 ⒊兼性贴壁细胞 生长不严格依赖支持物。如中国地鼠卵 巢细胞，小鼠L929细胞
动物细胞的生理特点二、1.细胞的分裂周期长细胞分裂时间为12～48h各类细胞分裂周期时间表细胞分裂周期时间/h细胞类别GG合计SM88.04.00.820.8人胚肺成纤维细胞（WI-38）人T细胞10.57.63.20.821.1201.02~3急性淋巴性白血病细胞>1~10 d>2~10 d8.51195.73.8小鼠腹水癌细胞4.12.80.84.712.4中国仓鼠卵巢细胞（CHO)2.75.82.10.4 11中国仓鼠成纤维细胞1260.518.5小鼠肿瘤细胞一9.99.12.30.722.0小鼠成纤维细胞
二、动物细胞的生理特点 ⒈ 细胞的分裂周期长 细胞分裂时间为12～48h
2.绝大多数细胞生长需贴附于基质，并有接触抑制现象。3.正常二倍体细胞的生长寿命是有限的。原代培养有限细胞系无限细胞系
⒉绝大多数细胞生长需贴附于基质,并有接触抑制 现象。 ⒊正常二倍体细胞的生长寿命是有限的。 原代培养 有限细胞系 无限细胞系
4.动物细胞对周围环境十分敏感：对理化因素敏感，如：渗透压、pH、离子浓度、剪切力、微量元素等。5.动物细胞对培养基要求高必需氨基酸、维生素、无机盐、行微量元素葡萄糖、细胞生长因子、贴壁因子等
⒋ 动物细胞对周围环境十分敏感; 对理化因素敏感，如：渗透压、pH、离子 浓度、剪切力、微量元素等。 ⒌ 动物细胞对培养基要求高 必需氨基酸、维生素、无机盐、 微量元素、 葡萄糖、细胞生长因子、贴壁因子等