口腔医学院（医药工程学院）槐米中芦丁的提取、水解和鉴定实验简介槐米系豆科植物槐Sophora japonicaL.的干燥花蓄。能凉血止血，清肝泻火。药理实验证明芦丁有调节毛细血管渗透作用，临床上可作为毛细血管脆弱引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。其有效成分为芸香苷，又称芦丁(rutin)，含量可高达12～20%。芦丁为榭皮素-3-0-芸香糖苷，淡黄色粉末或细针状结晶，含3分子结晶水（C27H30Oi6-3H20），mp.177~178℃，无水物mp.188~190℃。溶解度：冷水中的溶解度为1：10000，沸水中1：200，冷乙醇1650，沸乙醇1：60，沸甲醇中1：7，可溶于丙酮、乙酸乙酯、吡啶及碱液中，不溶于三氯甲烷、乙醚、苯及石油醚。芦丁水解后得榭皮素，榭皮素为黄色针状结晶（稀乙醇），含2分子结晶水（CisH1o03H20），mp.313~314℃（分解），无水物mp.316℃。溶解度：热乙醇中1：23.冷乙醇中1：300可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、吡啶与冰醋酸等，不溶于水、三氯甲烷、乙醚、苯与石油醚等。本实验应用碱溶解酸沉淀法，重结晶法，酸水解法，纸色谱法，紫外光谱分析法对槐米中芦丁进行提取、水解和鉴定。OF1CHN3H,COHOH OH芦丁榭皮素实验原理1、提取精制的原理：芦丁分子中含有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而溶于碱液中，加酸酸化后又可沉淀析出，因此可用碱溶酸沉法提取芸香苷。芦丁的精制可根据其在冷、热水（或冷、热乙醇）中溶解度相差悬殊的性质进行。2、鉴定的原理：利用纸色谱的吸附分配原理，将样品和对照品在同一条件下展开显色，判断芦丁和榭皮素的R值，达到鉴定的目的。利用紫外吸收光谱，测定黄酮化合物在加入各种电解质或络合剂后吸收峰的位移，根据位移的情况，以判断化合物羟基的位置。溶剂前沿6f组分3IC组分21一吸收峰2—谷组分13一肩峰4一末端吸收起始线样品对照品450200250300350400色谱鉴定示意图紫外吸收光谱特征实验目的掌握碱溶酸沉法、重结晶法提取精制黄酮类化合物的原理与操作：熟悉色谱鉴定黄酮类化合物的原理和方法：熟悉紫外一可见光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。实验仪器提取操作示意图紫外可见分光光度仪
口腔医学院（医药工程学院） 槐米中芦丁的提取、水解和鉴定 实验简介 槐米系豆科植物槐 Sophora japonica L.的干燥花蕾。能凉血止血，清肝泻火。药理实验证明芦丁有调节毛细血管渗透作用， 临床上可作为毛细血管脆弱引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。其有效成分为芸香苷，又称芦丁(rutin)，含量可高达 12～20％。芦丁为槲皮素-3-O-芸香糖苷，淡黄色粉末或细针状结晶，含 3 分子结晶水（C27H30O16•3H2O），mp.177~178℃，无 水物 mp.188~190℃。溶解度:冷水中的溶解度为 1﹕10000，沸水中 1﹕200，冷乙醇 1﹕650，沸乙醇 1﹕60，沸甲醇中 1﹕7，可 溶于丙酮、乙酸乙酯、吡啶及碱液中，不溶于三氯甲烷、乙醚、苯及石油醚。芦丁水解后得槲皮素，槲皮素为黄色针状结晶（稀 乙醇），含 2 分子结晶水（C15H10O7•3H2O），mp.313~314℃（分解），无水物 mp.316℃。溶解度:热乙醇中 1﹕23,冷乙醇中 1﹕300, 可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、吡啶与冰醋酸等，不溶于水、三氯甲烷、乙醚、苯与石油醚等。本实验应用碱溶解酸沉淀法， 重结晶法，酸水解法，纸色谱法，紫外光谱分析法对槐米中芦丁进行提取、水解和鉴定。 O O HO OH O OH OH O O OH OH OH H2C O OH OH CH3 OH 3H2O 芦丁 O O HO OH OH OH OH 槲皮素 实验原理 1、提取精制的原理： 芦丁分子中含有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而溶于碱液中，加酸酸化后又可沉淀析出，因此可用碱溶酸沉法提取芸香 苷。芦丁的精制可根据其在冷、热水（或冷、热乙醇）中溶解度相差悬殊的性质进行。 2、鉴定的原理： 利用纸色谱的吸附分配原理，将样品和对照品在同一条件下展开显色，判断芦丁和槲皮素的 Rf值，达到鉴定的目的。利用 紫外吸收光谱，测定黄酮化合物在加入各种电解质或络合剂后吸收峰的位移，根据位移的情况，以判断化合物羟基的位置。 色谱鉴定示意图 紫外吸收光谱特征 实验目的 掌握碱溶酸沉法、重结晶法提取精制黄酮类化合物的原理与操作；熟悉色谱鉴定黄酮类化合物的原理和方法；熟悉紫外－ 可见光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。 实验仪器 提取操作示意图 紫外可见分光光度仪
口腔医学院（医药工程学院）大黄中大黄素的提取、分离和鉴定实验简介大黄系科植物掌叶大黄RheumpalmatumL.，药用大黄RheumofficinaleBaill及唐古特大黄RheumtanguticumMaximexBalf.的根和根茎。具有泻热通便，凉血解毒，逐瘀通经的作用。大黄的主要化学成分属于葱醒类成分。大黄中的游有放愿成分游育意麗名称喷晶及mp（)J大黄酸（rhein）黄色针品（升华法），321-322R,=HR,=COOH大黄素（emodin）R=OHR;=CHs檀黄色针晶（乙醇），256-257大黄酚（chrysophanol）Ri=HR2=CH;檀黄色片状结品（萃），198大黄素甲醇（physcion）Ri=OCH;R= CH;砖红色针品，203-207芦荟大黄素（aloe-cmodin）檀黄色针品（甲苯），223~224R,=HR,=CHOH大黄素（Emodin)：橙黄色长针晶（丙酮中结晶为橙色，甲醇中结晶为黄色），mp256-257℃。几不溶于水，对于下列溶剂的溶介度分别为：四氯化碳0.01%，氯仿0.0718%，二硫化碳0.009%，乙醚0.14%，苯0.0415。易溶于乙醇，可溶于氨水，碳酸钠和氢氧化钠水溶液。本实验应用回流法、色谱法、高校液相色谱法，对大黄中的大黄素进行提取分离和鉴定。实验原理利用酸水解将葱醒苷类水解成游离葱醒类，再利用其具有亲脂性，用有机溶剂提取。利用酸性不同，采用pH梯度萃取法分离游离葱醒类。根据极性不同采用硅胶柱色谱法分离大黄素。高校液相色谱法按照《中国药典》2015版大黄含量测定项：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.1%磷酸溶液（85：15）为流动相，检测波长为254nm。以对照品为对照进行成分鉴定。实验目的熟悉蕙醒类成分的提取分离方法：掌握PH梯度提取法的原理和操作技术：掌握硅胶柱色谱法分离精制大黄素的原理和操作技术：熟悉羟基醒类化合物的高效液相测定方法。实验仪器e1回流提取装置硅胶柱色谱法分离图高效液相色谱仪
口腔医学院（医药工程学院） 大黄中大黄素的提取、分离和鉴定 实验简介 大黄系蓼科植物掌叶大黄 Rheum palmatum L.，药用大黄 Rheum officinale Baill 及唐古特大黄 Rheum tanguticum Maxim．ex Balf.的根和根茎。具有泻热通便，凉血解毒，逐瘀通经的作用。大黄的主要化学成分属于蒽醌类成分。 大黄中的游离蒽醌成分 游离蒽醌名称 结晶及 mp（℃） O OH O OH R1 R2 大黄酸（rhein） R1=H R2=COOH 大黄素 （emodin） R1=CH3 R2=OH 大黄酚（chrysophanol） R1=H R2= CH3 大黄素甲醚（physcion） R1= OCH3 R2= CH3 芦荟大黄素（aloe-emodin） R1=H R2=CH2OH 黄色针晶（升华法），321～322 橙黄色针晶（乙醇），256～257 橙黄色片状结晶（苯），198 砖红色针晶，203～207 橙黄色针晶（甲苯），223～224 大黄素（Emodin）：橙黄色长针晶（丙酮中结晶为橙色，甲醇中结晶为黄色），mp256-257℃。几不溶于水，对于下列溶剂的 溶介度分别为：四氯化碳 0.01%，氯仿 0.0718%，二硫化碳 0.009%，乙醚 0.14%，苯 0.0415。易溶于乙醇，可溶于氨水，碳酸 钠和氢氧化钠水溶液。本实验应用回流法、色谱法、高校液相色谱法，对大黄中的大黄素进行提取分离和鉴定。 实验原理 利用酸水解将蒽醌苷类水解成游离蒽醌类，再利用其具有亲脂性，用有机溶剂提取。利用酸性不同，采用 pH 梯度萃取法 分离游离蒽醌类。根据极性不同采用硅胶柱色谱法分离大黄素。高校液相色谱法按照《中国药典》2015 版大黄含量测定项：以 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.1%磷酸溶液（85：15）为流动相，检测波长为 254nm。以对照品为对照进行成分鉴定。 实验目的 熟悉蒽醌类成分的提取分离方法；掌握 pH 梯度提取法的原理和操作技术；掌握硅胶柱色谱法分离精制大黄素的原理和操 作技术；熟悉羟基蒽醌类化合物的高效液相测定方法。 实验仪器 回流提取装置 硅胶柱色谱法分离图 高效液相色谱仪