微生物检验技术 依靠行业 服务社会 项目二十：扩散法药敏试验 寒共职业技木后院
襄樊职业技术学院 项目二十：扩散法药敏试验
学习目标 ◆ 知道药敏试验的概念、用途和意义 ◆ 会依据细菌选择相应的抗生素 ◆会正确进行扩散法药敏试验 ◆ 会使用麦氏比浊管正确配制适当浓度 的菌液 ◆会正确使用游标卡尺测量抑菌环的直 径 ◆ 能准确判断扩散法药敏结果 家禁职业技术学院
襄樊职业技术学院 学习目标 ◆ 知道药敏试验的概念、用途和意义 ◆ 会依据细菌选择相应的抗生素 ◆ 会正确进行扩散法药敏试验 ◆ 会使用麦氏比浊管正确配制适当浓度 的菌液 ◆ 会正确使用游标卡尺测量抑菌环的直 径 ◆ 能准确判断扩散法药敏结果
药敏试验的概念 ◆ 抗微生物药物敏感试验 药敏试验，是对敏感性不能预测的临床分 离株细菌进行药物敏感性检测的试验。 ◆主要用以指导临床选择治疗药物； ◆若对细菌耐药性监测网点反馈来的药敏数据进 行统计分析，还具有监测和发现某细菌耐药性 变异趋势的意义。 豪巢职业技术学院
襄樊职业技术学院 药敏试验的概念 ◆ 抗微生物药物敏感试验 药敏试验，是对敏感性不能预测的临床分 离株细菌进行药物敏感性检测的试验。 ◆ 主要用以指导临床选择治疗药物； ◆ 若对细菌耐药性监测网点反馈来的药敏数据进 行统计分析，还具有监测和发现某细菌耐药性 变异趋势的意义
◆常用方法有： 纸片扩散法(Kirby-Bauer test) 稀释法（dilution test) E试验法(E test) 杀菌试验 体外联合药物敏感试验 豪鲽职业技术学院
襄樊职业技术学院 ◆ 常用方法有: 纸片扩散法（Kirby-Bauer test） 稀释法（dilution test） E试验法（E test） 杀菌试验 体外联合药物敏感试验
K-B法药敏试验 ◆原理 将含有抗菌药物的纸片贴在已接种待测细 菌的平板相应位置上，药物向琼脂中扩散， 形成以纸片为中心的药物浓度梯度分布区， 在一定位置上的药物高于抑菌浓度时，细菌 不生长而形成透明抑菌圈，抑菌圈越大，细 菌对该药物越敏感。 ◆常用培养基 MH琼脂；90mm平皿；4mm厚度 豪樊职业技水学院
襄樊职业技术学院 K-B法药敏试验 ◆ 原理 将含有抗菌药物的纸片贴在已接种待测细 菌的平板相应位置上，药物向琼脂中扩散， 形成以纸片为中心的药物浓度梯度分布区， 在一定位置上的药物高于抑菌浓度时，细菌 不生长而形成透明抑菌圈，抑菌圈越大，细 菌对该药物越敏感。 ◆ 常用培养基 MH琼脂；90mm平皿；4mm厚度
◆抗菌药物纸片 6.35mm,吸水20ul。（一般用商品纸片) ◆菌液 用生理盐水或营养肉汤取纯培养的菌落制 备成浊度为0.5麦氏比浊标准的菌液。 豪巢职业技术学院
襄樊职业技术学院 ◆ 抗菌药物纸片 6.35mm，吸水20μl。（一般用商品纸片） ◆ 菌液 用生理盐水或营养肉汤取纯培养的菌落制 备成浊度为0.5麦氏比浊标准的菌液
◆方法 将0.5麦氏浊度标准的菌液涂布接种于MH 琼脂表面，按纸片间距24mm和边距15mm的 标准，加贴相应药敏纸片，35℃培养16-18h, 判定结果。 豪鲽职业技术学院
襄樊职业技术学院 ◆ 方法 将0.5麦氏浊度标准的菌液涂布接种于MH 琼脂表面，按纸片间距24mm和边距15mm的 标准，加贴相应药敏纸片，35℃培养16-18h， 判定结果
麦氏标准管(McFarland Standards)配制 体积(ml) 细菌数×108/ml 麦氏标准管号 BaCL(1.175%) H,S0.(1%) 0.5 0.5 99.5 1.5 1.0 99.0 3.0 2 2.0 98.0 6.0 3.0 97.0 9.0 4.0 96.0 12.0 5.0 95.0 15.0 6 6.0 94.0 18.0 > 7.0 93.0 21.0 8.0 92.0 24.0 9 9.0 91.0 27.0 寒美职业技术学院
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操作方法 1.将约56℃恒温的无菌M-H琼脂倾注直径为90mm 的平板，其厚度4mm。 豪美职业技术骨院
襄樊职业技术学院 操作方法 1.将约56℃恒温的无菌M-H琼脂倾注直径为90mm 的平板，其厚度4mm
操作方法 2.无菌挑取孵育16~24h的血平板上45个菌落。 寒蝶职业技术学院
襄樊职业技术学院 2.无菌挑取孵育16～24h的血平板上4~5个菌落。 操作方法