实验四 细菌转导 厦门大学生命科学学院
实验四 细菌转导 厦门大学生命科学学院
实验目的 ◼ 通过大肠杆菌噬 菌体专一性转导 半乳糖发酵基因 学习掌握局限性 转导的原理，掌 握转导实验的基 本方法
实验目的 ◼ 通过大肠杆菌噬 菌体专一性转导 半乳糖发酵基因 学习掌握局限性 转导的原理，掌 握转导实验的基 本方法
噬菌体介绍 噬菌体是指细菌病毒 生活周期：吸附、侵入、 复制合成、装配、释放 •烈性噬菌体 如T4 •温和噬菌体 如、Mu-1、P1和P2等
噬菌体介绍 噬菌体是指细菌病毒 生活周期：吸附、侵入、 复制合成、装配、释放 •烈性噬菌体 如T4 •温和噬菌体 如、Mu-1、P1和P2等
噬菌体结构
噬菌体结构
噬菌体组装
噬菌体组装
λ噬菌体载体
λ噬菌体载体
证明遗传 物质是 DNA而非 蛋白质的 HersheyChase实验
证明遗传 物质是 DNA而非 蛋白质的 HersheyChase实验
溶源菌的形成 噬菌体整合进大肠杆菌 染色体中的固定位点上， 这个位点在gal(半乳糖代 谢基因)和bio(生物素合 成基因)之间，这位点称 为BOB’，它与的附着 位点POP’有相同的核心 序列区，由15bp组成， 它们通过同源单交换发 生整合，形成溶源菌
溶源菌的形成 噬菌体整合进大肠杆菌 染色体中的固定位点上， 这个位点在gal(半乳糖代 谢基因)和bio(生物素合 成基因)之间，这位点称 为BOB’，它与的附着 位点POP’有相同的核心 序列区，由15bp组成， 它们通过同源单交换发 生整合，形成溶源菌
实验原理 ◼ 转导定义： 以噬菌体作为媒介将一个细胞（供体） 的遗传物质传递给另一个细胞（受体） 的过程。 ◼ 普遍性转导 P1和P2 ◼ 局限性转导 λ λdg λdb
实验原理 ◼ 转导定义： 以噬菌体作为媒介将一个细胞（供体） 的遗传物质传递给另一个细胞（受体） 的过程。 ◼ 普遍性转导 P1和P2 ◼ 局限性转导 λ λdg λdb
实验材料 ◼ 菌株：E.coli k12(λ)gal+ k12Sgal- ◼ 用品：Eppondoff离心管(1.5ml/4.5ml) Tip枪头(1ml/200ul/20ul) ◼ 培养基(肉汤固体/半固体/加倍肉汤/EMB) ◼ 试剂：氯仿、磷酸buffer
实验材料 ◼ 菌株：E.coli k12(λ)gal+ k12Sgal- ◼ 用品：Eppondoff离心管(1.5ml/4.5ml) Tip枪头(1ml/200ul/20ul) ◼ 培养基(肉汤固体/半固体/加倍肉汤/EMB) ◼ 试剂：氯仿、磷酸buffer