疫苗研究进展 作者:秦芳 上海交通大学生命学院研究生 学号:5050809006 疫苗,是指一切通过注射或黏膜途径接种,可以诱导机体产生针对特定致病原的特 异性抗体或细胞免疫,从而使机体获得保护或消灭该致病原能力的生物制品。由致病微 生物引起的传染病,对人类的生存具有巨大的威胁,严重的影响人们的生命健康。从18 世纪末英国乡村医生通过接种牛痘来预防天花起,人类逐渐的进入了利用疫苗来对抗传 染病的时代,疫苗为人类健康做出了巨大贡献,拯救了数亿人的生命,近些年来随着科 学的发展还出现了治疗性疫苗 、疫苗的基本知识 疫苗预防传染病的原理是,将病原微生物(如细菌、立克次氏体、病毒等)及其代 谢产物,经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成用于预防传染病的自动免疫制 剂,它保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性,当动物体接触到这种不具伤害力的病 原菌后,免疫系统便会产生一定的保护物质,如免疫激素、活性生理物质、特殊抗体等, 当动物再次接触到这种病原菌时,动物体的免疫系统便会依循其原有的记忆,制造更多 的保护物质来阻止病原菌的伤害。疫苗的性质主要包括免疫原性和免疫记忆性。免疫原 性是指疫苗能有效的激发接种者的免疫系统产生强的体液免疫和细胞免疫应答,免疫记 忆性是疫苗学的基础,当再次遇到同一抗原时机体可以发生快速、强烈的免疫应答。 根据科学的发展趋势,将疫苗分为灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、基因工程 疫苗、合成肽疫苗、结合疫苗和血清七大类 灭活疫苗是将病原微生物培养物用化学或物理方法灭活使其完全丧失致病力,而仍 保存相应抗原的免疫原性,如百日咳疫苗和乙型肝炎灭活疫苗。这种疫苗免疫效果较差, 维持时间短,但较稳定易于保存 减毒活疫苗是将病原微生物在人工培育的条件下,促使产生定向变异,使其最大限 度地丧失致病性,但仍保留一定的剩余毒力、免疫原性及繁殖能力,如卡介苗、麻疹减 毒活疫苗。减毒活疫苗可能形成潜在感染或传播,有一定的危险性,不稳定,不易保存, 但是免疫效果巩固,维持时间长。 亚单位疫苗是去除病原体中与激发保护性免疫无关的甚至有害的成分,保留有效免 疫原成分的疫苗,例如从乙肝病毒表面抗原阳性者血浆中提取表面抗原制成的乙肝疫 苗。这种疫苗副作用明显减少而保护效果相同。 基因工程疫苗是一种新型疫苗,用细胞与分子生物学工程技术研制,主要有重组抗 原疫苗、重组载体疫苗、DNA疫苗、转基因植物疫苗
疫苗研究进展 作者：秦芳 上海交通大学生命学院研究生 学号：5050809006 疫苗，是指一切通过注射或黏膜途径接种，可以诱导机体产生针对特定致病原的特 异性抗体或细胞免疫，从而使机体获得保护或消灭该致病原能力的生物制品。由致病微 生物引起的传染病，对人类的生存具有巨大的威胁，严重的影响人们的生命健康。从 18 世纪末英国乡村医生通过接种牛痘来预防天花起，人类逐渐的进入了利用疫苗来对抗传 染病的时代，疫苗为人类健康做出了巨大贡献，拯救了数亿人的生命，近些年来随着科 学的发展还出现了治疗性疫苗。 一、疫苗的基本知识 疫苗预防传染病的原理是，将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代 谢产物，经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成用于预防传染病的自动免疫制 剂，它保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性，当动物体接触到这种不具伤害力的病 原菌后，免疫系统便会产生一定的保护物质，如免疫激素、活性生理物质、特殊抗体等， 当动物再次接触到这种病原菌时，动物体的免疫系统便会依循其原有的记忆，制造更多 的保护物质来阻止病原菌的伤害。疫苗的性质主要包括免疫原性和免疫记忆性。免疫原 性是指疫苗能有效的激发接种者的免疫系统产生强的体液免疫和细胞免疫应答，免疫记 忆性是疫苗学的基础，当再次遇到同一抗原时机体可以发生快速、强烈的免疫应答。 根据科学的发展趋势，将疫苗分为灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、基因工程 疫苗、合成肽疫苗、结合疫苗和血清七大类。 灭活疫苗是将病原微生物培养物用化学或物理方法灭活使其完全丧失致病力，而仍 保存相应抗原的免疫原性，如百日咳疫苗和乙型肝炎灭活疫苗。这种疫苗免疫效果较差， 维持时间短，但较稳定易于保存。 减毒活疫苗是将病原微生物在人工培育的条件下，促使产生定向变异，使其最大限 度地丧失致病性，但仍保留一定的剩余毒力、免疫原性及繁殖能力，如卡介苗、麻疹减 毒活疫苗。减毒活疫苗可能形成潜在感染或传播，有一定的危险性，不稳定，不易保存， 但是免疫效果巩固，维持时间长。 亚单位疫苗是去除病原体中与激发保护性免疫无关的甚至有害的成分，保留有效免 疫原成分的疫苗，例如从乙肝病毒表面抗原阳性者血浆中提取表面抗原制成的乙肝疫 苗。这种疫苗副作用明显减少而保护效果相同。 基因工程疫苗是一种新型疫苗，用细胞与分子生物学工程技术研制，主要有重组抗 原疫苗、重组载体疫苗、DNA 疫苗、转基因植物疫苗
合成肽疫苗又称抗原肽疫苗,是根据有效免疫原的氨基酸序列设计和合成的免疫原 性多肽,以期用具有免疫原性最小的肽来激发有效的特异性免疫应答,合成肽分子较小 般用脂质体运送到抗原提呈细胞。HIⅤ和肿瘤等合成肽疫苗正在研制中 结合疫苗是将细菌荚膜多糖的水解物化学连接到某一种载体上,使其成为T细胞依 赖性抗原,载体蛋白有破伤风、白喉类毒素等,又称为多糖-蛋白质偶联疫苗 血清是含有特异性免疫球蛋白的免疫制剂,输入体内产生被动免疫。 新型疫苗 核酸疫苗是20世纪90年代发展起来的一种新型疫苗,它的发展被称为“第三次疫 苗革命”。核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗,目前研究的最多的是DNA疫苗,所以 般泛指的核酸疫苗是DNA疫苗。DNA疫苗能引起长期有效的免疫反应,包括抗体、Th和 CIL的免疫反应。它是将编码外源蛋白的基因片段插入到带有真核启动子的不复制载体 上,以构建好的重组质粒作为DNA疫苗直接接种,由接种部位的细胞摄取质粒DNA,外 源基因在启动子的作用下进行抗原基因转录和翻译,表达的抗原蛋白被蛋白水解酶降解 为含不同抗原表位的短肽分子,再分别与细胞内的MHCI类分子和MCII类分子结合, 转移到细胞表面,与B7共刺激分子一起诱导CD8+、CD4+T细胞的激活,从而引起机体 产生抗体和细胞免疫应答。DNA疫苗的免疫原性好,针对编码病毒保守区序列作为目的 基因,可以对多型病毒株产生交叉免疫防护,特别适用于多基因型、易变异的病毒,另 外它以重组质粒DNA形式存在,其物理化学性质稳定,质粒的制备和纯化等过程比蛋白 质加工技术简单的多,节省成本和时间,它还可以用于免疫治疗。DNA疫苗产生不久, 目前对于很多研究还处于动物实验阶段,据报道今年四月瑞典科学家公布了将DNA疫苗 应用于治疗慢性丙型肝炎理论的验证成果,该课题利用DNA疫苗进行首次临床实验,通 过活体电穿孔程序将其导入丙型肝炎(HCV)患者体内产生了抗病毒效果,这一成果将促 进DNA疫苗在临床上的应用,这些资料也对HCV特异性T细胞的抗病毒反应提供更充分 的证据。另外人类获得性免疫缺陷病毒HIV和乙型肝炎病毒HV等DNA疫苗也在临床实 验阶段,一旦试验成熟进入市场将对人类的生命健康带来福音。另外DNA疫苗还存在 些安全性问题,如质粒DNA同染色体整合可能导致的遗传毒性问题,DNA疫苗诱导的自 身免疫反应,要想利用DNA疫苗必须要解决这些潜在的安全问题。 除了DNA疫苗,还有一种产生不久,但具有诱人应用前景的新型疫苗——转基因植 物疫苗。转基因植物疫苗是用转基因方法,将编码有效免疫原的基因导入可食用植物细 胞的基因组中,免疫原即可在植物的可食用部分稳定的表达积累,人类和动物通过摄食 而启动保护性免疫反应,达到免疫接种的目的。转基因植物疫苗具有很多传统疫苗不具 备的优点:基因工程在转基因植物中的运用已经十分成熟,生产成本低、容易操作;植 物细胞具有完整的真核细胞表达系统,使表达产物具有较好的免疫原性及生物活性;口 服植物疫苗能诱导粘膜免疫反应,植物细胞的细胞壁能起到生物胶囊的作用,直接到达 肠内黏膜诱导部位,刺激黏膜和全身发生免疫反应;而且植物疫苗没有潜在的毒性和致
合成肽疫苗又称抗原肽疫苗，是根据有效免疫原的氨基酸序列设计和合成的免疫原 性多肽，以期用具有免疫原性最小的肽来激发有效的特异性免疫应答，合成肽分子较小 一般用脂质体运送到抗原提呈细胞。HIV 和肿瘤等合成肽疫苗正在研制中。 结合疫苗是将细菌荚膜多糖的水解物化学连接到某一种载体上，使其成为 T 细胞依 赖性抗原，载体蛋白有破伤风、白喉类毒素等，又称为多糖-蛋白质偶联疫苗。 血清是含有特异性免疫球蛋白的免疫制剂，输入体内产生被动免疫。 二、新型疫苗 核酸疫苗是 20 世纪 90 年代发展起来的一种新型疫苗，它的发展被称为“第三次疫 苗革命”。核酸疫苗包括 DNA 疫苗和 RNA 疫苗，目前研究的最多的是 DNA 疫苗，所以一 般泛指的核酸疫苗是 DNA 疫苗。DNA 疫苗能引起长期有效的免疫反应，包括抗体、Th 和 CTL 的免疫反应。它是将编码外源蛋白的基因片段插入到带有真核启动子的不复制载体 上，以构建好的重组质粒作为 DNA 疫苗直接接种，由接种部位的细胞摄取质粒 DNA，外 源基因在启动子的作用下进行抗原基因转录和翻译，表达的抗原蛋白被蛋白水解酶降解 为含不同抗原表位的短肽分子，再分别与细胞内的 MHCI 类分子和 MHCII 类分子结合， 转移到细胞表面，与 B7 共刺激分子一起诱导 CD8+、CD4+T 细胞的激活，从而引起机体 产生抗体和细胞免疫应答。DNA 疫苗的免疫原性好，针对编码病毒保守区序列作为目的 基因，可以对多型病毒株产生交叉免疫防护，特别适用于多基因型、易变异的病毒，另 外它以重组质粒 DNA 形式存在，其物理化学性质稳定，质粒的制备和纯化等过程比蛋白 质加工技术简单的多，节省成本和时间，它还可以用于免疫治疗。DNA 疫苗产生不久， 目前对于很多研究还处于动物实验阶段，据报道今年四月瑞典科学家公布了将 DNA 疫苗 应用于治疗慢性丙型肝炎理论的验证成果，该课题利用 DNA 疫苗进行首次临床实验，通 过活体电穿孔程序将其导入丙型肝炎（HCV)患者体内产生了抗病毒效果，这一成果将促 进 DNA 疫苗在临床上的应用，这些资料也对 HCV 特异性 T 细胞的抗病毒反应提供更充分 的证据。另外人类获得性免疫缺陷病毒 HIV 和乙型肝炎病毒 HBV 等 DNA 疫苗也在临床实 验阶段，一旦试验成熟进入市场将对人类的生命健康带来福音。另外 DNA 疫苗还存在一 些安全性问题，如质粒 DNA 同染色体整合可能导致的遗传毒性问题，DNA 疫苗诱导的自 身免疫反应，要想利用 DNA 疫苗必须要解决这些潜在的安全问题。 除了 DNA 疫苗，还有一种产生不久，但具有诱人应用前景的新型疫苗——转基因植 物疫苗。转基因植物疫苗是用转基因方法，将编码有效免疫原的基因导入可食用植物细 胞的基因组中，免疫原即可在植物的可食用部分稳定的表达积累，人类和动物通过摄食 而启动保护性免疫反应，达到免疫接种的目的。转基因植物疫苗具有很多传统疫苗不具 备的优点：基因工程在转基因植物中的运用已经十分成熟，生产成本低、容易操作；植 物细胞具有完整的真核细胞表达系统，使表达产物具有较好的免疫原性及生物活性；口 服植物疫苗能诱导粘膜免疫反应，植物细胞的细胞壁能起到生物胶囊的作用，直接到达 肠内黏膜诱导部位，刺激黏膜和全身发生免疫反应；而且植物疫苗没有潜在的毒性和致
癌性,没有其他病原体的污染。另外转基因植物疫苗还处于早期阶段,还有许多问题有 待解决:外源基因插人到植物基因组中后,可能干扰两侧内源基因的表达,引起植物生 长出现异常,长势不佳,带有一个强的组成型启动子的疫苗抗原可能影响植物细胞生长 过程,抑制植物生长。口服植物疫苗涉及免疫耐受性问题,必须研究植物疫苗的有效剂 量和服用时间表,弄清植物疫苗对机体起刺激作用还是起抑制作用。目前,以烟草和马 铃薯作为目标植物的报告较多,烟草不能直接食用,且烟草含有尼古丁等一些有害人体 健康的生物碱;而马铃薯这类植物不能生吃,烹饪会使重组蛋白变性,造成疫苗失活 近几年来用番茄、香蕉等植物来生产亚单位疫苗已成为一个研究热点,因为番茄是一种 大众化的、日常食用的蔬菜,香蕉是世界上第4大类水果,利用特异启动子在番茄、香 蕉中表达疫苗抗原,通过生食这些植物果实达到防病的目的。胡萝卜根茎可以直接生食, 然而,研究发现结核分支杆菌疫苗抗原在胡萝卜种子中含量最多,根茎中含量最低,失 去了作为口服植物疫苗的意义,如果疫苗抗原表达在植物的不能直接食用部位,而要从 中提纯疫苗则困难较多,因此,研究可食用植物的高表达问题也是十分重要的。另外 大多数转基因植物表达的亚单位疫苗抗原引起的机体免疫反应还比较弱 三、重要传染病的疫苗概述 HIV相关药物和疫苗的研究仍是全球的热点,自报告首例艾滋病以来,该病已经肆 虐了20多年,并且流行和传播仍在进一步扩大。自从HⅤ被确认以来科学家们就开始 艾滋病疫苗的研制,虽然20多年科学家们一直不懈的努力没,但迄今仍没有可供人使 用的艾滋病疫苗。HIⅤ灭活疫苗和减毒疫苗在人体的安全性受到广泛的质疑,对这两类 传统疫苗的硏究处于停滞状态。目前研究比较广泛的疫苗类型是核酸疫苗和活载体疫 苗。核酸疫苗是用质粒载体表达HIV抗原,用带有插入目的基因的质粒DNA直接免疫机 体,诱导特异性免疫反应。核酸疫苗已被用于表达多种HV抗原,如Env、Gag和Pol 等。自1995年起,已经用于多个I期和II期临床试验中。虽然HIV核酸疫苗在动物实 验中收到良好效果,但是在人体实验中产生的免疫水平较低,但是核酸疫苗与其它疫苗 联合应用,通过初免疫和加强免疫能明显提高免疫效果,具有很大潜力。此外,目前有 多种高度减毒的病毒载体被用于HIⅤ疫苗的硏制中,例如减毒痘病毒载体MA和NVAC 腺病毒载体、 Alpha-病毒载体、脊髓灰质炎病毒载体和泡状口炎病毒载体VSV等,这些 载体表达的 HIV Gag、Pol及Env抗原等,在动物实验中产生了良好免疫反应,尤其是 细胞反应。但这些活载体疫苗也有一些局限性,机体可能产生针对病毒载体本身的免疫 反应,使重复免疫效果减低,不适于激发抗体免疫反应等。目前已有多种HIV载体疫苗 进入了临床试验。现在对于艾滋病疫苗的硏究前景不甚乐观,首先HIV自然感染后机体 的免疫系统不能有效的清除感染的病毒,产生的免疫力不足以阻止再次感染;病毒高度 变异;没有有效的动物模型。因此HIⅤ疫苗的研制过程步步维艰。 发现了人类乳头瘤病毒(HV)的哈拉尔德-楚尔-豪森和艾滋病病毒(HV)的发现 者弗朗索瓦丝-巴尔-西诺西、吕克-蒙塔尼分享了2008年的诺贝尔生理医学奖。而H
癌性，没有其他病原体的污染。另外转基因植物疫苗还处于早期阶段，还有许多问题有 待解决：外源基因插人到植物基因组中后，可能干扰两侧内源基因的表达，引起植物生 长出现异常，长势不佳，带有一个强的组成型启动子的疫苗抗原可能影响植物细胞生长 过程，抑制植物生长。口服植物疫苗涉及免疫耐受性问题，必须研究植物疫苗的有效剂 量和服用时间表，弄清植物疫苗对机体起刺激作用还是起抑制作用。目前，以烟草和马 铃薯作为目标植物的报告较多，烟草不能直接食用，且烟草含有尼古丁等一些有害人体 健康的生物碱；而马铃薯这类植物不能生吃，烹饪会使重组蛋白变性，造成疫苗失活。 近几年来用番茄、香蕉等植物来生产亚单位疫苗已成为一个研究热点，因为番茄是一种 大众化的、日常食用的蔬菜，香蕉是世界上第 4 大类水果，利用特异启动子在番茄、香 蕉中表达疫苗抗原，通过生食这些植物果实达到防病的目的。胡萝卜根茎可以直接生食， 然而，研究发现结核分支杆菌疫苗抗原在胡萝卜种子中含量最多，根茎中含量最低，失 去了作为口服植物疫苗的意义，如果疫苗抗原表达在植物的不能直接食用部位，而要从 中提纯疫苗则困难较多，因此，研究可食用植物的高表达问题也是十分重要的。另外， 大多数转基因植物表达的亚单位疫苗抗原引起的机体免疫反应还比较弱。 三、重要传染病的疫苗概述 HIV 相关药物和疫苗的研究仍是全球的热点，自报告首例艾滋病以来，该病已经肆 虐了 20 多年，并且流行和传播仍在进一步扩大。自从 HIV 被确认以来科学家们就开始 艾滋病疫苗的研制，虽然 20 多年科学家们一直不懈的努力没，但迄今仍没有可供人使 用的艾滋病疫苗。HIV 灭活疫苗和减毒疫苗在人体的安全性受到广泛的质疑，对这两类 传统疫苗的研究处于停滞状态。目前研究比较广泛的疫苗类型是核酸疫苗和活载体疫 苗。核酸疫苗是用质粒载体表达 HIV 抗原，用带有插入目的基因的质粒 DNA 直接免疫机 体，诱导特异性免疫反应。核酸疫苗已被用于表达多种 HIV 抗原，如 Env、Gag 和 Pol 等。自 1995 年起，已经用于多个 I 期和 II 期临床试验中。虽然 HIV 核酸疫苗在动物实 验中收到良好效果，但是在人体实验中产生的免疫水平较低，但是核酸疫苗与其它疫苗 联合应用，通过初免疫和加强免疫能明显提高免疫效果，具有很大潜力。此外，目前有 多种高度减毒的病毒载体被用于 HIV 疫苗的研制中，例如减毒痘病毒载体 MVA 和 NYVAC、 腺病毒载体、Alpha-病毒载体、脊髓灰质炎病毒载体和泡状口炎病毒载体 VSV 等，这些 载体表达的 HIV Gag、Pol 及 Env 抗原等，在动物实验中产生了良好免疫反应，尤其是 细胞反应。但这些活载体疫苗也有一些局限性，机体可能产生针对病毒载体本身的免疫 反应，使重复免疫效果减低，不适于激发抗体免疫反应等。目前已有多种 HIV 载体疫苗 进入了临床试验。现在对于艾滋病疫苗的研究前景不甚乐观，首先 HIV 自然感染后机体 的免疫系统不能有效的清除感染的病毒，产生的免疫力不足以阻止再次感染；病毒高度 变异；没有有效的动物模型。因此 HIV 疫苗的研制过程步步维艰。 发现了人类乳头瘤病毒（HPV）的哈拉尔德-楚尔-豪森和艾滋病病毒（HIV）的发现 者弗朗索瓦丝-巴尔-西诺西、吕克-蒙塔尼分享了 2008 年的诺贝尔生理医学奖。而 HPV
可分为一百多型,部分高危型HPV不仅可以引起尖锐湿疣而且90%以上的宫颈部位肿瘤 可检测到 HPV DNA的存在。2006年6月8日美国食品与药品管理局(FDA)宣布,世界 上第一个可以预防由6型、11型、16型和18型人类乳头瘤病毒引起的宫颈癌及癌前病 变、生殖器疣的疫苗已获批准。该疫苗是通过病毒体结构蛋白来合成病毒样颗粒ⅥPs 病毒的衣壳蛋白可以在哺乳动细胞、昆虫细胞、酵母细胞表达系统中体外组装成不含DNA 的ⅥPs,而ⅥPs可以使机体产生特异性的免疫反应。目前该疫苗主要用于9-26岁的女 性,在香港已经上市,中国内陆正在审批过程中 继SARS之后,高致病性禽流感病毒H5N感染人的病例又引起世界的恐慌,从2004 年3月我国启动“人用禽流感疫苗研制”项目到2008年4月国家食品药品监督管理局 最终签发批准文件和文号仅仅用了四年的时间。另外,2009年2月6日备受关注的人感 染高致病性禽流感患者——贵州省的周某在经过23天的抢救后病愈出院,至此,去年 12月以来我国先后报告的8个此类病例中有3个病例已经成功救治。这3名成功救治的 患者正是使用了采自接种了我国自行研发的人用禽流感疫苗的志愿者的抗病毒血清,这 从一个侧面证明了我国自主研发的疫苗是有效的。制备疫苗的主要方法是,将一个早期 分离于人体的PR8病毒的6个基因片段与H5N1病毒的抗原性H和NA基因(其中HA基 因的致病相关序列被人工缺失了)放在一起转染到细胞内去制造一个H5N1/PR8重组病 毒,它是一个低致病性毒株,在鸡胚中生长良好,是一个比较理想的疫苗株,再对病毒 的扩增能力、遗传稳定性、灭活效果和工艺进行研究,完成了疫苗的制备 四、总结和展望 致病微生物对人类的威胁是长久的、广泛的,人类通过研制疫苗来对抗传染病的感 染已经拯救了无数的生命,尤其是近年来一次次病毒性传染病的暴发使人们加快了研制 疫苗的步伐,但是疫苗的研制、批准和生产上市仍然是一个耗时、耗财、耗力的过程, 些病毒疫苗的硏制还是非常困难。对于目前暴发的HNⅠ型猪流感病毒疫情,美国科 学家称在4周至两个月就能研制出相应的疫苗,对于这一说法也是有据可依的,HN1 属于流感病毒,对于HNⅠ和其他类型的流感病毒的疫苗已经硏制成功,因此硏制这一 类流感病毒疫苗的技术平台已经十分完善,科学家只要对原有平台加以改进便可以在短 时间内研制出新疫苗。随着基因测序技术、基因工程等生物技术的发展,以及人们从越 来越多研制成功的疫苗中得到的宝贵经验,相信不久的将来我们可以克服更多传染病的 困扰 参考文献: 1.《疫苗工程学》,窦骏,南京:东南大学出版社,2007: 2.《疫苗关键技术详解》,李琦涵、刘龙丁、车艳春等译,北京:化学工业出版社,2006; 3.《疫苗技术基础与应用》,董德祥,北京:化学工业出版社:现代生物技术与医 药科技出版中心,2002;
可分为一百多型，部分高危型 HPV 不仅可以引起尖锐湿疣而且 90%以上的宫颈部位肿瘤 可检测到 HPV DNA 的存在。2006年6月8 日美国食品与药品管理局（FDA）宣布，世界 上第一个可以预防由 6 型、11 型、16 型和 18 型人类乳头瘤病毒引起的宫颈癌及癌前病 变、生殖器疣的疫苗已获批准。该疫苗是通过病毒体结构蛋白来合成病毒样颗粒 VLPs， 病毒的衣壳蛋白可以在哺乳动细胞、昆虫细胞、酵母细胞表达系统中体外组装成不含 DNA 的 VLPs，而 VLPs 可以使机体产生特异性的免疫反应。目前该疫苗主要用于 9-26 岁的女 性，在香港已经上市，中国内陆正在审批过程中。 继 SARS 之后，高致病性禽流感病毒 H5N1 感染人的病例又引起世界的恐慌，从 2004 年 3 月我国启动“人用禽流感疫苗研制”项目到 2008 年 4 月国家食品药品监督管理局 最终签发批准文件和文号仅仅用了四年的时间。另外，2009年2月6 日备受关注的人感 染高致病性禽流感患者——贵州省的周某在经过 23 天的抢救后病愈出院，至此，去年 12 月以来我国先后报告的 8 个此类病例中有 3 个病例已经成功救治。这 3 名成功救治的 患者正是使用了采自接种了我国自行研发的人用禽流感疫苗的志愿者的抗病毒血清，这 从一个侧面证明了我国自主研发的疫苗是有效的。制备疫苗的主要方法是，将一个早期 分离于人体的 PR8 病毒的 6 个基因片段与 H5N1 病毒的抗原性 HA 和 NA 基因(其中 HA 基 因的致病相关序列被人工缺失了)放在一起转染到细胞内去制造一个 H5N1/PR8 重组病 毒，它是一个低致病性毒株，在鸡胚中生长良好，是一个比较理想的疫苗株，再对病毒 的扩增能力、遗传稳定性、灭活效果和工艺进行研究，完成了疫苗的制备。 四、总结和展望 致病微生物对人类的威胁是长久的、广泛的，人类通过研制疫苗来对抗传染病的感 染已经拯救了无数的生命，尤其是近年来一次次病毒性传染病的暴发使人们加快了研制 疫苗的步伐，但是疫苗的研制、批准和生产上市仍然是一个耗时、耗财、耗力的过程， 一些病毒疫苗的研制还是非常困难。对于目前暴发的 H1N1 型猪流感病毒疫情，美国科 学家称在 4 周至两个月就能研制出相应的疫苗，对于这一说法也是有据可依的，H1N1 属于流感病毒，对于 H5N1 和其他类型的流感病毒的疫苗已经研制成功，因此研制这一 类流感病毒疫苗的技术平台已经十分完善，科学家只要对原有平台加以改进便可以在短 时间内研制出新疫苗。随着基因测序技术、基因工程等生物技术的发展，以及人们从越 来越多研制成功的疫苗中得到的宝贵经验，相信不久的将来我们可以克服更多传染病的 困扰。 参考文献： 1.《疫苗工程学》，窦骏，南京 : 东南大学出版社, 2007； 2.《疫苗关键技术详解》，李琦涵、刘龙丁、车艳春等译，北京 : 化学工业出版社, 2006； 3.《疫苗技术基础与应用 》， 董德祥，北京 : 化学工业出版社 : 现代生物技术与医 药科技出版中心, 2002；
4张洪利,王金香,康大力DNA疫苗的作用机制及影响因素.现代医药卫生,2008,24(4) 1651 5.张俊香,洪小栩,乔建军.人用植物疫苗的研究进展.中国自然医学杂志,2007,9(4): 6.黄大林.转基因植物疫苗研究进展.广西医学,2007,29(4):528 以及一些网站的相关新闻,这里不加以赘述
4.张洪利，王金香，康大力.DNA疫苗的作用机制及影响因素.现代医药卫生，2008，24(4)： 1651； 5.张俊香，洪小栩，乔建军.人用植物疫苗的研究进展.中国自然医学杂志，2007，9(4)： 366； 6.黄大林. 转基因植物疫苗研究进展.广西医学，2007，29(4):528 *以及一些网站的相关新闻，这里不加以赘述
