分枝杆萄属(Mycob um是一类细长或稍弯的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名。此萄属的最显若的特性为其跑壁中含有大量类指，可 达菌体干重的40影左右，生长形成粗精的思水性菊落，而日也以用一龄垫垫色。然而若设法使之若色后，又不易以含萄有3%HC的酒 说色。这种能抵抗盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸杆菌。本菌属种类颇多，有致病性非致病性两大类。写引起人类中的 (1)人型和牛型 结核杆菌和种非典型分枝杆菌所致的感染(2)麻风病这些感染多数为慢性感染过程，长期迁延，并有破坏性的组织病变， 第一节结核杆菌 0)引起结核病。对人类致病的有人型结核杆菌和牛型结核杆菌，非典型分枝杆菌也可引起类似结衫 一、生物学性状 (一)形态染色 结核杆菌细长略弯曲，端极纯园，大小约1一4×0,4如m,显单个或分枝状排列，无英膜.。无顿毛，无芽胞。在陈旧的病灶和培养物中，形 态常不典型，可里颗粒状，串球状，短棒状，长丝形等。结核杆菌一般常用菱~~钠氏(Zichl-Ne©lscn)抗酸性染色法染色，结核杆菌染成红 色，其他非抗酸性细菌及细跑浆质等星蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关， (仁)培养特性 结核杆菌为专性需氧苗。营养要求高，在含有蛋黄、马钤薯、甘油和天门冬素等的固体培养基上才能生长。最适h6.5~6.8,最适温度为 37℃，生长缓慢，接种后培养3~4周才出现肉眼可见的菌落。菌落为干燥、坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或黄色，形似菜花样。在液体培养内 呈粗糙皱纹状菌膜生长，若在液体培养基内加入水溶性脂肪酸，如Tw心n~0,可降低结核杆菌表面的疏水性，使呈均匀分散生长，此有利于 作药物敏感试验等。 (三)抵抗力 结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰中存活6~8个月，若粘附于尘埃上，保持传染性8~10天。在3%HCI或NaOH溶液中能耐受 30分钟，因而常以酸险中和处理严重污染的检材，杀死杂菌和消化粘稠物质，提高检出率。但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中加 热62~63℃15分钟，直射日光下2~3小时，75%酒精内数分钟即死亡 (四)变异性 结核杆菌对链霉素、利福平、异烟肼等抗结核药物较易产生耐药性。耐药菌菌株常伴随活力和毒力减弱，如异烟肼耐药菌株对豚鼠的毒力 消失，但对人们仍有一定的致病性。 卡~~介(Calmette-Gerine)二氏将牛型结核杆菌培养于胆汁、甘油、马铃要培养基中，经230次传代，历时13年，使其毒力发生变异 成为对人无致病性，而仍保持良好免疫性的菌苗株，称为卡介菌(Bacilli Calmette,Giierin,BCG。卡介芭接种人体后，可获得抗结核受疫力. (玉)苗体成份与作用 结核杆萄无内毒素，也不产生外毒素和侵袭性确类，其致病作用主要靠萄体成份，特别是跑壁中所含的大量脂质。脂质含量与结核杆菌的 毒力呈平行关系，含量愈高毒力愈理. 1.脂质(Li印de):脂质占菌体干的20~40%，占胞壁干重的60%，主要是磷酯、脂防酸和蜡质，它们大多与蛋白质或多糖质结合成复合 物存在。@磷脂能制激单核细抱增生，并可抑制蛋白酶的分解作用，使病灶组织溶解不完全，形成干酷样坏死。®脂肪酸在脂质中比重较大， 甘中6.6二分枝雅a海漫(6.6 Dimve0y，a'wDhal0se且有被坏细胸线体，吉害微粒体确类制中性勒细胞祚市和吞 噬作用，引起慢性肉牙肿。具有该物质的结核杆毒株，在液体培养基中能紧密粘成索状，故称为素状因子cordfactor.O蜡质D为胞壁中的 主要成分，是一种肽糖脂()与分枝菌酸(Myolie aid)复合物，能引起迟发型变态反应，并只有佐剂作用.O硫酸脑苷脂 (sfd)和硫酸多燕基化海漫糖(Multiasiylatedasafae))在结核杆菌毒株胞壁中含有，能抑制吞噬细胞中的吞碳体与溶酶体歌合，使 结核杆筒在细胞内存活这一类轴脂能结合中性红染料。产生中性红反应，借此可鉴定结核杆菌有无力」 ,蛋白质(Protein)：结核杆南菌体内都含有数种蛋白质其中重要的蛋白压是结核茵素{tuberculin结核荫素与质D结合，能引起蚊 强的迟发型变态反应。其他蛋白质可引起机体产生相应的抗体，但无保护作用。 多速困pn charides):多糖质常与脂质结合存在于胞壁中，主要有半乳糖，甘露醇、阿拉拍糖等。多辣质可使中性粒细增多 引起局部东灶细跑浸润」 4核酸Nucleic acid:结核杆菌的核体核核酸(Ribonusle1 e acid tibos 0n1 IRNA是本菌的免夜原微机体产生特异性细的免 二、致病性 结核杆的敢病作用可能是细菌在 织细内顽强增殖写引起炎症反应，以及诱机体产生迟发型变态反应性损伤有才 结核杆菌可通过吗 吸 中其'聚形6‘具装福'Y时 (一)原发感染 原发感染是首次感染结核杆苗，多见于儿童。结核杆菌随同飞沫和尘埃通过呼吸道进入肺泡，被巨噬细吞噬后，由于细菌胞壁的碳酸 营脂抑制吞壁体与溶衡体结合，不能发挥杀菌溶菌作用，数使结核杆菌在细胞内大量生长繁殖，最终导致细胞死亡前解，释放出的结核杆萄或 在细胞外繁殖侵害，或被另一巨噬细胞吞噬再重复上述过程，如此反复引起渗出性炎症病灶，称为原发灶。原发灶内的结核杆菌可经淋巴管打扩
分枝杆菌属(Mycobacterium)是一类细长或稍弯的杆菌,因有分枝生长的趋势而得名。此菌属的最显着的特性为其胞壁中含有大量类脂，可 达菌体干重的40%左右，故生长形成粗糙的畏水性菌落，而且也难以用一般染料染色。然而若设法使之着色后，又不易以含菌有3%HCI的酒精 脱色。这种能抵抗盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸杆菌。本菌属种类颇多，有致病性非致病性两大类。引起人类中的疾病中：（1）人型和牛型 结核杆菌和几种非典型分枝杆菌所致的感染；（2）麻风病。这些感染多数为慢性感染过程，长期迁延，并有破坏性的组织病变。 第一节 结核杆菌 结核杆菌（Mycobecterium Tuberculosis）引起结核病。对人类致病的有人型结核杆菌和牛型结核杆菌，非典型分枝杆菌也可引起类似结核 样病变，但少见。 一、生物学性状 （一）形态染色 结核杆菌细长略弯曲，端极钝园，大小约1～4×0.4um ，呈单个或分枝状排列，无荚膜、无鞭毛、无芽胞。在陈旧的病灶和培养物中，形 态常不典型，可呈颗粒状，串球状，短棒状，长丝形等。结核杆菌一般常用萎～～钠氏(Ziehl-Neelsen)抗酸性染色法染色，结核杆菌染成红 色，其他非抗酸性细菌及细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。 （二）培养特性 结核杆菌为专性需氧菌。营养要求高，在含有蛋黄、马钤薯、甘油和天门冬素等的固体培养基上才能生长。最适ph 6.5～6.8 ，最适温度为 37℃，生长缓慢，接种后培养3～4周才出现肉眼可见的菌落。菌落为干燥、坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或黄色，形似菜花样。在液体培养内 呈粗糙皱纹状菌膜生长，若在液体培养基内加入水溶性脂肪酸，如Tween～80，可降低结核杆菌表面的疏水性，使呈均匀分散生长，此有利于 作药物敏感试验等。 （三）抵抗力 结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰中存活6～8个月，若粘附于尘埃上，保持传染性8～10天。在3%HCI或NaOH溶液中能耐受 30分钟，因而常以酸硷中和处理严重污染的检材，杀死杂菌和消化粘稠物质，提高检出率。但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中加 热62～63℃15分钟，直射日光下2～3小时，75%酒精内数分钟即死亡。 （四）变异性 结核杆菌对链霉素、利福平、异烟肼等抗结核药物较易产生耐药性。耐药菌菌株常伴随活力和毒力减弱，如异烟肼耐药菌株对豚鼠的毒力 消失，但对人们仍有一定的致病性。 卡～～介（Calmette-Gerine）二氏将牛型结核杆菌培养于胆汁、甘油、马铃薯培养基中，经230次传代，历时13年，使其毒力发生变异， 成为对人无致病性，而仍保持良好免疫性的菌苗株，称为卡介菌(Bacilli Calmette-Giierin,BCG)。卡介菌接种人体后，可获得抗结核受疫力。 （五）菌体成份与作用 结核杆菌无内毒素，也不产生外毒素和侵袭性酶类，其致病作用主要靠菌体成份，特别是胞壁中所含的大量脂质。脂质含量与结核杆菌的 毒力呈平行关系，含量愈高毒力愈强。 1．脂质（Lipide）：脂质占菌体干的20～40%，占胞壁干重的60%，主要是磷脂、脂肪酸和蜡质，它们大多与蛋白质或多糖质结合成复合 物存在。①磷脂能刺激单核细胞增生，并可抑制蛋白酶的分解作用，使病灶组织溶解不完全，形成干酷样坏死。②脂肪酸在脂质中比重较大， 其中6,6～二分枝酰～a,a'～海澡糖(6,6～Dimycocyl～a,a'～D～trehalose)具有破坏细胞线粒体膜，毒害微粒体酶类，抑制中性粒细胞游走和吞 噬作用，引起慢性肉牙肿。具有该物质的结核杆菌毒株，在液体培养基中能紧密粘成索状，故称为索状因子(cordfactor)。③蜡质D为胞壁中的 主要成分，是一种肽糖脂(Piptidoglycolipids)与分枝菌酸(My-colic acid)复合物，能引起迟发型变态反应，并具有佐剂作用。④硫酸脑苷脂 (salfatides)和硫酸多酰基化海澡糖(Multiasiylated trehalose salfate)在结核杆菌毒株胞壁中含有，能抑制吞噬细胞中的吞噬体与溶酶体融合，使 结核杆菌在细胞内存活。这一类糖脂能结合中性红染料。产生中性红反应，借此可鉴定结核杆菌有无毒力。 2．蛋白质（Protein）：结核杆菌菌体内都含有数种蛋白质，其中重要的蛋白质是结核菌素(tuberculin)。结核茵素与蜡质D结合，能引起较 强的迟发型变态反应。其他蛋白质可引起机体产生相应的抗体，但无保护作用。 3．多糖质（Polysuccharides）：多糖质常与脂质结合存在于胞壁中，主要有半乳糖，甘露醇、阿拉拍糖等。多糖质可使中性粒细胞增多， 引起局部病灶细胞浸润。 4．核酸(Nucleic acid)：结核杆菌的核糖体核糖核酸(Ribonucleie acid ribosonic, rRNA)是本菌的免疫原，刺激机体产生特异性细胞免疫。 二、致病性 结核杆菌的致病作用可能是细菌在组织细胞内顽强增殖引起炎症反应，以及诱导机体产生迟发型变态反应性损伤有关。结核杆菌可通过呼 吸道、消化道和破损的皮肤粘膜进入机体，侵犯多种组织器官，引起相应器官，引起相应器官的结核病，其中以肺结核最常见。人类肺结核有 两种表现类型。 （一）原发感染 原发感染是首次感染结核杆菌，多见于儿童。结核杆菌随同飞沫和尘埃通过呼吸道进入肺泡，被巨噬细胞吞噬后，由于细菌胞壁的碳酸脑 苷脂抑制吞噬体与溶酶体结合，不能发挥杀菌溶菌作用，致使结核杆菌在细胞内大量生长繁殖，最终导致细胞死亡崩解，释放出的结核杆菌或 在细胞外繁殖侵害，或被另一巨噬细胞吞噬再重复上述过程，如此反复引起渗出性炎症病灶，称为原发灶。原发灶内的结核杆菌可经淋巴管扩
散在肺门淋巴结，引起淋巴管炎和淋巴结肿大，X线胸片显示哑铃状阴影，称为原发综合征。随着机体抗结核免疫力的建立，原发灶大多可纤 维给的钙化而自愈。但原发灶内可长期潜伏少量结核杆苗。不断刺激机体强化已建立起的抗结核免疫力，也可作为以后内源性感染的来源。只 有极少数免疫力低下者，结核杆苗可经淋巴、血流扩散至全身，导数全身栗位性结核或结核性脑膜炎。 (二)继发感染 继发感染也称原发后感染，多见于成年人。大多为内源性感染，极少由外源性感染所致。继发性感染的特点是病灶局限，一般不累及邻近 的淋巴结，主要表现为慢性肉芽肿性炎症，形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死，病变常发生在肺尖部位。 三、免疫与变态反应 结核杆菌的免陵原RNA和变应原结核菌素可诱发机体产生由T淋巴细泡介导的两种免瘦应答反应，即细胞免疫和迟发型变态反应】 「一】鱼帝性 人类对结核杆第的感染率很高，但发病率却较低，这表明人体感染结核杆菌可获得一定的抗结核免疫力，抗结核免疫力的特久性，依赖于 结核杆菌在机体内的存活，一旦体内结核杆菌消亡，抗结核免疫力也随之消失，这种免疫称为有苗免疫或传染性免疫（仙etion口 抗结核免疫主要是细胞免疫，包括致敏的T淋巴细胞和被激活的巨堕细胞。致敏的T淋巴细胞可直接杀死带有结核杆菌的靶细胞，同时对释 放多种作用于世噬细的淋巴因子，使巨噬细胞聚集在病灶周围形成以单核细胞为主的增生性炎症。被激活的巨噬细胞极大地增强对结核杆菌 的吞噬消化，抑制繁殖。阻止扩散其至消龄的力，弃分分挥细陶免疼的作用 （仁)免疫与变态反应的关系 在结核杆菌感染时，细胞免与识发型变态反应同时存在此可用霍氏现象(K©山'。 to)说明。①在健康豚鼠皮下首次注射 一定量结核杆菌，10~14天后注射部位缓慢地出现溃疡，深而不易合。邻近淋巴结肿大，细菌扩散至全身，此时结核菌素测试为限性。②用 相同等量的 核杆注入曾感动已复的显皮下，在1心天内即讯速发生，旧浅而品前合，邻诉沙 ,细菌也很少扩形 结核菌素测试为阳性.在 审的皮下注时大结核菌 时起注时 省未建立起抗结核免疫力：再次感染发生的炎症 发应偏重于免疫预防，遗当浅而合，细菌不扩散。说明机体时结核杆菌已日 一定的细的免疫 ,而贵病迅速形成，则说明在产生免疫 表现出对机体有利的 面：用过量的结核杆菌进 则起 迟发型变态反应，说明迟发型变态反心 发性结核 近年来 田细陶亚鲜 而迟发 个本反应则方 立存在的丙 NA兔夜小鼠的 淋巴细 rRNA共育的上清中不， 力抑制结 制 但用结核 免 共的 仅含有 F而S i有Myco IF 这两种 号相 与MIF无 体对结 核杆有 李反应 应炎症 结核菌注 位出现迟发 态因 为阴 此法可用检测可 阳转 以及检则 机体细图 功 洁核菌素试 菌在肉汽中 核杆 他代谢和培养基成 稀释1万倍。 1毫升内含有1个单位 1m!有10个单位 蛋 cin derivatiy 0.00 羽P 使用5个单位C (2000倍稀 0.Iml)或PPD- 4872小时内 虽有红肿但无硬 “重的结核病如全身 粒性结核和结核性脑膜炎时机无反应能力，或患其他严重疾病（麻疹、结节病、恶性肿密） ,如用过免疫抑制剂时，结核菌素反应均可转为阴 四、微生物诊断 根据结核菌感染的类型，应采取病灶部位的适当标本，如肺炎结核有采取略痰（最好取早晨第一次略痰，挑取带血或脓痰）：肾或膀就结 核以无菌导尿或取中设尿液：肠结核采取粪使标本，结核性商谟炎进行覆脊穿刺采取鸭背液：跛腐、肋谟炎、腹漠炎或得髓结核等则穿刺取陂 汁， 〔一)直接涂片染色 咯痰可直接涂片。用菱~纳氏法染色，若镜检找到抗酸性杆菌，可能是结核杆菌，但通常应报告：“宣到抗酸性杆菌”，因标本中可能混杂 有非致病性抗性抗酸杆菌，单凭形态染色不能确定是结核杆菌，需进一步分离培养鉴定。如标本中结核杆菌量少，杂菌和杂质多时，直接涂片 不易检出（一般需要每毫升痰液含有结核杆菌10万个以上才能检出），应浓缩集菌后，再涂片染色镜检，以提高检出阳性率. 无菌直接采取的脑脊液、导尿或中段尿可直接用离心沉淀集菌。咯痰和粪伊标本浓缩集菌因含杂功菌多，需用4%N0H或3%1CL或 6%H2504处理，然后，用离心沉淀法格结核杆菌浓缩聚集于管底，再取沉淀物涂片作抗酸染色检查。分离培养或动物试验。 二分魔培养 结核杆茵生长缓慢，培苏期长，当以酸碱中和浓缩集菌的沉淀物，接种于固体培苏基上，以错封口防止干燥，37℃培苏4一6周后检吉结 果。根据生长缓慢，菌落干燥、颗粒状.乳酪色家菜花状，苗体染色抗酸性强，多数为结核杆苗。如菌落、菌体染色都不典型，则可能为非典 型分枝杆菌，应进一步作鉴别试验。 (三)动物试验
散在肺门淋巴结，引起淋巴管炎和淋巴结肿大，X线胸片显示哑铃状阴影，称为原发综合征。随着机体抗结核免疫力的建立，原发灶大多可纤 维给的钙化而自愈。但原发灶内可长期潜伏少量结核杆菌，不断刺激机体强化已建立起的抗结核免疫力，也可作为以后内源性感染的来源。只 有极少数免疫力低下者，结核杆菌可经淋巴、血流扩散至全身，导致全身粟粒性结核或结核性脑膜炎。 （二）继发感染 继发感染也称原发后感染，多见于成年人。大多为内源性感染，极少由外源性感染所致。继发性感染的特点是病灶局限，一般不累及邻近 的淋巴结，主要表现为慢性肉芽肿性炎症，形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死。病变常发生在肺尖部位。 三、免疫与变态反应 结核杆菌的免疫原rRNA和变应原结核菌素可诱发机体产生由T淋巴细胞介导的两种免疫应答反应，即细胞免疫和迟发型变态反应。 （一）免疫性 人类对结核杆菌的感染率很高，但发病率却较低，这表明人体感染结核杆菌可获得一定的抗结核免疫力。抗结核免疫力的持久性，依赖于 结核杆菌在机体内的存活，一旦体内结核杆菌消亡，抗结核免疫力也随之消失，这种免疫称为有菌免疫或传染性免疫（Infection immunify）。 抗结核免疫主要是细胞免疫，包括致敏的T淋巴细胞和被激活的巨噬细胞。致敏的T淋巴细胞可直接杀死带有结核杆菌的靶细胞，同时对释 放多种作用于世噬细胞的淋巴因子，使巨噬细胞聚集在病灶周围形成以单核细胞为主的增生性炎症。被激活的巨噬细胞极大地增强对结核杆菌 的吞噬消化，抑制繁殖，阻止扩散，甚至消毁的能力，充分分挥细胞免疫的作用。 （二）免疫与变态反应的关系 在结核杆菌感染时，细胞免疫与迟发型变态反应同时存在，此可用郭霍氏现象（Koch's phenomenton）说明，①在健康豚鼠皮下首次注射 一定量结核杆菌，10～14天后注射部位缓慢地出现溃疡，深而不易愈合，邻近淋巴结肿大，细菌扩散至全身，此时结核菌素测试为限性。②用 相同等量的结核杆菌注入曾感染已康复的豚鼠皮下，在1～2天内即迅速发生溃疡，但溃疡浅而易愈合，邻近淋巴结不肿大，细菌也很少扩散， 结核菌素测试为阳性。③在康复的豚鼠皮下注射大量结核杆菌，则引起注射局部及全身严重的迟发型变态反应，甚至导致动物死亡。上述三种 现象表明，首次感染出现的炎症反应偏重于免疫预防，溃疡浅而愈合，细菌不扩散，说明机体尚未建立起抗结核免疫力；再次感染发生的炎症 发应则偏重于免疫预防，溃疡当浅而愈合，细菌不扩散，说明机体对结核杆菌已具有一定的细胞免疫力，而溃疡迅速形成，则说明在产生免疫 的同时有迟发型变态反应，表现出对机体有利的一面；用过量的结核杆菌进行再次感染，则引起剧烈的迟发型变态反应，说明迟发型变态反应 对机体不利的一面。人类的原发性肺炎结核，继发性肺结核，严重而恶化的肺结核，相当于郭霍氏现象的三种情况。 近年来，实验研究证明结核杆菌细胞免疫与迟发型变态反应是由不同的T淋巴细胞亚群介导和不同的淋巴因子承担的，是独立存在的两种 反应。①从小鼠实验表明，结核杆菌感染的细胞免疫应答为Lytl+-2和Lytl--2T淋巴细胞，而迟发型变态反应则为Lytl+2T淋巴细胞。②取结核杆 菌rRNA免疫小鼠的T淋巴细胞与rRNA共育的上清中不含巨噬细胞移动抑制结核杆菌繁殖抑制因子（Myco IF）；但用结核杆菌减毒活菌标 （H37RV）免疫小鼠的T淋巴细胞与PPD共育，其上清中则含有MIF，而与H37RV共育的上清液不仅含有MIF而且含有Myco IF。这两种免疫小 鼠都用结核杆菌强毒株攻击，他们都获得相等程度的免疫力，故认为抗结核细胞免疫是由Myco IF承担，而与MIF无关。 本试验用于测定机体对结核杆菌有无变态反应。将一定是结核菌素注入皮内，如受试者曾感染结核杆菌，则在注射部位出现迟发型变态反 应炎症，是为阳性，未感染结核杆菌则为阴性。此法可用检测可凝病人曾否感染结核菌，接种卡介苗后是否阳转以及检则机体细胞免疫功能。 结核菌素试验一般使用旧结核菌素（Old-tubercein简称OT），是结核杆菌在肉汽中培养物经加热浓缩的滤液。主要成分是结核蛋白，也含 有结核杆菌的其他代谢和培养基成分。稀释1万倍，0.1毫升内含有1个单位（稀释1000倍，0.1ml 有10个单位），取OT结核蛋白纯化后称为精 制纯蛋白衍生物(Purified protein derivative ,简称PPD )，取0.00002ml作为一个结核菌素单位，是现今国际制造的标准PPD，称为PPD-S。试验 法常规使用5个单位OT（2000倍稀释0.1ml）或PPD-S0.0001mg注入受试者前臂掌侧皮内，48～72小时内出现红肿硬节直径大于5毫米者为阳 性，虽有红肿但无硬结或硬结直径不到5毫米者为阴性。应注意受拭者处于原发感染早期，变态反应尚未发生，或正患严重的结核病如全身粟 粒性结核和结核性脑膜炎时机无反应能力，或患其他严重疾病（麻疹、结节病、恶性肿瘤），如用过兔疫抑制剂时，结核菌素反应均可转为阴 性。 四、微生物诊断 根据结核菌感染的类型，应采取病灶部位的适当标本。如肺炎结核有采取咯痰（最好取早晨第一次咯痰，挑取带血或脓痰）；肾或膀胱结 核以无菌导尿或取中段尿液；肠结核采取粪便标本，结核性脑膜炎进行腰脊穿刺采取脑脊液；脓胸、肋膜炎、腹膜炎或骨髓结核等则穿刺取脓 汁。 (一)直接涂片染色 咯痰可直接涂片。用萋～纳氏法染色，若镜检找到抗酸性杆菌，可能是结核杆菌，但通常应报告：“查到抗酸性杆菌”，因标本中可能混杂 有非致病性抗性抗酸杆菌，单凭形态染色不能确定是结核杆菌，需进一步分离培养鉴定。如标本中结核杆菌量少，杂菌和杂质多时，直接涂片 不易检出（一般需要每毫升痰液含有结核杆菌10万个以上才能检出），应浓缩集菌后，再涂片染色镜检，以提高检出阳性率。 无菌直接采取的脑脊液、导尿或中段尿可直接用离心沉淀集菌。咯痰和粪便标本浓缩集菌因含杂功菌多，需用4%NaOH或3%HCL或 6%H2SO4处理，然后，用离心沉淀法将结核杆菌浓缩聚集于管底，再取沉淀物涂片作抗酸染色检查、分离培养或动物试验。 (二)分离培养 结核杆菌生长缓慢，培养期长，当以酸碱中和浓缩集菌的沉淀物，接种于固体培养基上，以蜡封口防止干燥。37℃培养4～6周后检查结 果。根据生长缓慢，菌落干燥、颗粒状、乳酪色象菜花状，菌体染色抗酸性强，多数为结核杆菌。如菌落、菌体染色都不典型，则可能为非典 型分枝杆菌，应进一步作鉴别试验。 （三）动物试验
常用豚鼠或地鼠盗别凝似结核杆菌的分离培养物和毒力测定。取经浓缩集菌处理的标本1.0毫升注射于豚鼠腹股沟皮下，经3~4周饲养双 察，如出现局部淋巴结肿大，消瘦或结核菌素试验阳性，可及时剖检：若观察6~8周后，仍未见发病者，也要剖检。剖检时应注意观察淋巴 结、肝、脾、肺等脏器有无结核病变 五、防治原则 （一)预防接种 卡介苗接种是须防结核病的有效措施之一，广泛接种卡介苗能大大地降低结核病的发病率。根据统计调查未接种组的发病率比接种组高4” 5倍，婴儿因免疫力低，为卡介苗接种的主要对象。6个月以内健康儿童可直接接种，较大儿童须作结核菌素试验，阴性者接种。一般在接种后 6一8周如结核菌素试验转阳，则表示接种者已产生免疫力.试验阴性者应再行接种。皮内接种卡介苗后，结素试验转阳率可达96一99%，阳性 反应可维护5年左右。 二}治疗 结核病的治疗在于控制疾病，促使病灶愈合，消除症状和防止复发。抗癆药物有制菌作用，但它们仍须通过体内免疫机理而起作用。常用 的药物有异菸肼(NH)、链霉素、对氨水杨酸钠(P队S)、利福平、乙胺丁醇等。各种抗癆药物如合并应用，有协同作用，且能降低耐药性 的产生，减少毒性。因耐药菌株出现较多，因此由病人体内人分离的结核菌株在治疗过程中应作药敏试验，以测定耐药性的产生情况 第二节其他引起人类感染的分枝杆菌 一、牛分枝杆菌 此种细菌在生长待性。化学组成及毒力的潜在性上与结核杆菌极少相似 本为牛的致病菌，引起牛的结核感染，人由于合入未经消毒或 大 亦可发 与结核杆菌完全相同的感染 。但如由呼吸 ,及对牛奶严格消毒和管理，此 引起的感染不控制， 二、非典型分枝杆菌 形态染色特性与人型。牛型结核杆菌酷似，但其毒力较弱。生化反应各不相同，可资鉴别。其中有些菌种能引起临床结核样病变，小儿淋 巴腺炎和皮肤病等。它们对常用抗癆药物常易产生耐药性。根据它们产生色素情况、生长速度和生化反应等特点，可分为四组。有16种细苗。 (1)需光产色分枝杆菌在有光照情况下菌落呈黄色。如堪萨期分枝杆菌：(2)暗产色分枝杆苗在有光及无光环境中均产色素，如淋巴结核分 枝杆菌：(3)不产色分枝杆菌在任何情况不均不产生色素，如胞内分枝杆菌、满疡分枝杆菌等，(4)迅速生长分枝杆菌，如偶发分杆菌（表 12.1】。 表12-1各种分枝杆菌对人和动物的感受性 家兔小風 分枝杆 种及皮下装种 结核 杆菌 (冷处) 业分枝杆道 三、麻风分枝杆菌 麻风是一种慢性传染病，侵犯皮肤、粘膜和外周神经组织，晚期还可侵入深部组织和驻器，形成肉芽肿病变。在世界各地均有流行，我国 不少地区亦可见，但经大力开展防治工作后，病例已逐渐减少. （一)麻风杆苗的特性 形态上麻风杆菌与结核杆菌酷似，难以区别，亦表现明显的抗酸染色特性，常在病人渍破皮肤渗出液的细跑中发现，呈束状排列。麻风杆 菌是至今唯一仍不能人工培养的细菌。以麻风杆菌感染小鼠足垫或接种至犰徐可引起动物的进行性麻风感染，为研究麻风的 种动物模型 （二)麻风病的发病机理 麻风杆菌口侵害人，可通过皮肤接触，或由飞沫传播，细菌由病人鼻分泌物及其他分泌物、精液或阴道分泌液中排出而感染他人，疾病潜 伏期长，发病慢，病程长，迁延不愈，根据临床表现、免疫病理变化、细菌检查结果等可将麻风病分为两大类： 风为陈病的讲行 性和严重的临床类型，如不进行治疗，往往发展至最终死亡，细菌侵犯皮肤、粘膜及各蓝器，形成肉芽肿病变」 用抗酸染色法检查可见有大量的嘛风杆菌集，含菌量多，且器均有发现，传染性强。本型风病人的·细免应答有所缺陷。表现
常用豚鼠或地鼠鉴别凝似结核杆菌的分离培养物和毒力测定。取经浓缩集菌处理的标本1.0毫升注射于豚鼠腹股沟皮下，经3～4周饲养观 察，如出现局部淋巴结肿大，消瘦或结核菌素试验阳性，可及时剖检：若观察6～8周后，仍未见发病者，也要剖检。剖检时应注意观察淋巴 结、肝、脾、肺等脏器有无结核病变。 五、防治原则 （一）预防接种 卡介苗接种是预防结核病的有效措施之一，广泛接种卡介苗能大大地降低结核病的发病率。根据统计调查未接种组的发病率比接种组高4～ 5倍，婴儿因免疫力低，为卡介苗接种的主要对象。6个月以内健康儿童可直接接种，较大儿童须作结核菌素试验，阴性者接种。一般在接种后 6～8周如结核菌素试验转阳，则表示接种者已产生免疫力。试验阴性者应再行接种。皮内接种卡介苗后，结素试验转阳率可达96～99%，阳性 反应可维护5年左右。 （二）治疗 结核病的治疗在于控制疾病，促使病灶愈合，消除症状和防止复发。抗痨药物有制菌作用，但它们仍须通过体内免疫机理而起作用。常用 的药物有异菸肼（INH）、链霉素、对氨水杨酸钠（PAS）、利福平、乙胺丁醇等。各种抗痨药物如合并应用，有协同作用，且能降低耐药性 的产生，减少毒性。因耐药菌株出现较多，因此由病人体内人分离的结核菌株在治疗过程中应作药敏试验，以测定耐药性的产生情况。 第二节 其他引起人类感染的分枝杆菌 一、牛分枝杆菌 此种细菌在生长特性、化学组成及毒力的潜在性上与结核杆菌极少相似。本为牛的致病菌，引起牛的结核感染，人由于食入未经消毒或已 污染了此菌的牛乳而被感染。牛分枝杆菌一般不引起肺部感染，而主要产生髋关节、膝关节及脊椎部骨髓中病变及淋巴结感染。但如由呼吸道 吸入，亦可发生与结核杆菌完全相同的感染，难以区别。如能对已感染的牛（结核菌素试验阳性）予以控制，及对牛奶严格消毒和管理，此菌 引起的感染不难控制。 二、非典型分枝杆菌 形态染色特性与人型、牛型结核杆菌酷似，但其毒力较弱，生化反应各不相同，可资鉴别。其中有些菌种能引起临床结核样病变，小儿淋 巴腺炎和皮肤病等。它们对常用抗痨药物常易产生耐药性。根据它们产生色素情况、生长速度和生化反应等特点，可分为四组，有16种细菌。 （1）需光产色分枝杆菌在有光照情况下菌落呈黄色。如堪萨期分枝杆菌；（2）暗产色分枝杆菌在有光及无光环境中均产色素，如淋巴结核分 枝杆菌；（3）不产色分枝杆菌在任何情况不均不产生色素，如胞内分枝杆菌、溃疡分枝杆菌等，（4）迅速生长分枝杆菌，如偶发分杆菌（表 12-1）。 表12-1 各种分枝杆菌对人和动物的感受性 菌种 豚鼠 家兔 小鼠 鸡 人 结核分枝杆菌 + - + - 结核病 牛分枝杆菌 + + + - 结核病 鸟分枝杆菌 - + ± + 结核病（稀少） 堪萨期分枝杆菌 - - ± - 类似结核病 海水分枝杆菌 - - + - 游泳池肉芽肿及皮下脓肿 淋巴结核分枝杆菌 - - （冷处）- - 儿童淋巴腺炎 戈登分枝杆菌 - - - - 无致病性 胞内分枝杆菌 + - + ± 成人类似结核病、儿童淋巴腺炎 溃疡分枝杆菌 - + + - 皮肤广泛坏死和溃疡无致病性 胃分枝杆菌 - - - - 类似结核病 蟾分枝杆菌 - - - - 局部脓肿 偶发分枝杆菌 - - + - 类似结核病（稀少） 耻垢分枝杆菌 - - - - 无致病性 三、麻风分枝杆菌 麻风是一种慢性传染病，侵犯皮肤、粘膜和外周神经组织，晚期还可侵入深部组织和脏器，形成肉芽肿病变。在世界各地均有流行，我国 不少地区亦可见，但经大力开展防治工作后，病例已逐渐减少。 （一）麻风杆菌的特性 形态上麻风杆菌与结核杆菌酷似，难以区别，亦表现明显的抗酸染色特性，常在病人溃破皮肤渗出液的细胞中发现，呈束状排列。麻风杆 菌是至今唯一仍不能人工培养的细菌。以麻风杆菌感染小鼠足垫或接种至犰狳可引起动物的进行性麻风感染，为研究麻风的一种动物模型。 （二）麻风病的发病机理 麻风杆菌口侵害人，可通过皮肤接触，或由飞沫传播，细菌由病人鼻分泌物及其他分泌物、精液或阴道分泌液中排出而感染他人。疾病潜 伏期长，发病慢，病程长，迁延不愈。根据临床表现、免疫病理变化、细菌检查结果等可将麻风病分为两大类： 1．瘤型麻风为疾病的进行性和严重的临床类型，如不进行治疗，往往发展至最终死亡。细菌侵犯皮肤、粘膜及各脏器，形成肉芽肿病变。 用抗酸染色法检查，可见有大量的麻风杆菌集聚，含菌量多，且各脏器均有发现，传染性强。本型麻风病人的T细胞免疫应答有所缺陷，表现
为细胞免疫低下或免疫抑制，巨噬细胞活化功能低，故麻风杆菌能在体内繁殖。细胞免疫的低下或抑制是由于细菌感染后的结果。变态反应皮 肤试验（麻风苗素试验）阴性，血清中抗体含量高，有免疫复合物沉积，导致出现肉芽肿病变，形成结节性红宽或疣状结节，如狮面。 2。结核样型麻风此型麻风常为自限性疾病，较稳定，损害可自行消退。病变主要在皮肤，侵犯真皮浅层，早期病变为小血管周固淋巴细陶 浸润，以后出现上皮样细胞和多核巨细跑浸润，也可累及神经，使受累处皮肤丧失感觉。病人体内不易检出麻风杆菌，故传染性小。麻风菌素 反应阳性，细胞免疫强。 (但)麻风病的实验诊断 麻风病的临床表现和类型众多，易与其他类似疾病相混活，所以实验诊断有实际意义，可采取麻风病人和皮肤病变检材作涂片，抗酸性染 色法检直有无排列成柬的抗酸性杆菌存在。也可以用金胺染色荧光显微镜检直，以提高阳性率，麻风病理活体组织切片检查也是较好的诊断方 法。麻风菌素试验的应用原理和结核菌素试验相同。因麻风杆菌至今仍不能人工培养，麻风菌素抗原常由麻风结节病变组织制备。此试验无诊 断上意义，因大多数正常人对其呈阳性反应，瘤型麻风病人则因有免疫抑制而呈阴性反应。 (四)麻风病的防治 目前尚无特异性预防方法，由于麻风杆菌和结核杆菌有共同抗原，曾试用卡介苗接种来预防麻风，收到一些效果。也曾有用从轨狳麻风组 织中取得的麻风杆菌，加热杀灭后作为菌苗以预防麻风，据报告有一定的效果。主要靠全面普查，早期发现病例，早期隔离和治疗。治疗药物 主要是砜类，如氨苯很、苯丙职、二乙酰氨苯职等。利福平也有校强的抗麻风杆苗作用
为细胞免疫低下或免疫抑制，巨噬细胞活化功能低，故麻风杆菌能在体内繁殖。细胞免疫的低下或抑制是由于细菌感染后的结果。变态反应皮 肤试验（麻风菌素试验）阴性，血清中抗体含量高，有免疫复合物沉积，导致出现肉芽肿病变，形成结节性红斑或疣状结节，如狮面。 2．结核样型麻风此型麻风常为自限性疾病，较稳定，损害可自行消退。病变主要在皮肤，侵犯真皮浅层，早期病变为小血管周围淋巴细胞 浸润，以后出现上皮样细胞和多核巨细胞浸润，也可累及神经，使受累处皮肤丧失感觉。病人体内不易检出麻风杆菌，故传染性小。麻风菌素 反应阳性，细胞免疫强。 （三）麻风病的实验诊断 麻风病的临床表现和类型众多，易与其他类似疾病相混淆，所以实验诊断有实际意义。可采取麻风病人和皮肤病变检材作涂片，抗酸性染 色法检查有无排列成束的抗酸性杆菌存在。也可以用金胺染色荧光显微镜检查，以提高阳性率。麻风病理活体组织切片检查也是较好的诊断方 法。麻风菌素试验的应用原理和结核菌素试验相同。因麻风杆菌至今仍不能人工培养，麻风菌素抗原常由麻风结节病变组织制备。此试验无诊 断上意义，因大多数正常人对其呈阳性反应，瘤型麻风病人则因有免疫抑制而呈阴性反应。 （四）麻风病的防治 目前尚无特异性预防方法，由于麻风杆菌和结核杆菌有共同抗原，曾试用卡介苗接种来预防麻风，收到一些效果。也曾有用从犰狳麻风组 织中取得的麻风杆菌，加热杀灭后作为菌苗以预防麻风，据报告有一定的效果。主要靠全面普查，早期发现病例，早期隔离和治疗。治疗药物 主要是砜类，如氨苯砜、苯丙砜、二乙酰氨苯砜等。利福平也有较强的抗麻风杆菌作用
