支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。自然界分布广泛,种类多,分为两个属:一为支原体属 (Mycoplasma),有几十个种;另一为眼原体属(Ureaplasma),仅有一种。与人类感染有关的主要是肺炎支原体和解跟跟原体。 第一节概述 一、生物学性状 色不易着色,故常用G心msa染色法将其染或淡紫色。细购膜中胆固醇含量较多,约占36%,对保持细孢膜的完整性具有一定作用。凡能作用于 胆固酚的物质(如二性霉素B、皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡, 支原体基因组为一环状以双链DNA,分子量小(仅有大肠杆菌的五分之一),合成与代谢很有限 肺炎支原体的一端有一种特殊的末端结构(ntctur©),能使支原体粘附于呼吸道粘膜上皮细跑表面,与致病性有关 (仁)培养特性 营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外还需加入10~20%人或动物血清以提供支原体所需的胆固醇。最适H7.8一8.0之间,低于7.0则 死亡,但解脲脲原体最适H6.0~6.5, 大多数兼性厌氧,有些菌株在初分离时加入5%C02生长更好。生长缓慢,在琼脂含量较少的固体培养基上孵育2~3天出现典型的“荷包蛋 样"首落:圆形(直径10~16um),核心部分较厚,向下长入培养基,周边为一层满的透明颗粒区。此外,支原体还能在鸡胚绒毛尿囊膜或培 养细胸中生长。 繁殖方式多样,主要为二分裂繁殖,还有断裂。分枝、出芽等方式,盖因缺乏细胞壁造成分裂时二个子细胞大小均所致。同时,支原体分 裂和其DNA复制不同步,可形成多核长丝体, (但)生化反应与分型 一般能分解葡萄糖的支原体则不能利用精氨酸,能利用精氨酸的则不能分解萄萄德,据此可将支原体分为两类(见表19)·解现跟原体 不能利用葡萄糖或桔氨酸,但可利用尿素作能源。 各种支原体都有特异的表面抗原结构,很少有交叉反应,具有型特异性,应用生长抑制试验(Growth inhibition test,G1T)、代谢抑制试 验Metabolicinbton est,MIT)等可鉴定支原抗原,进行分型。 表191人类支原体的主要生物学性状 需烫坦因酸 分解葡句糖 分解 还四集生 吸附红细咆 人型支原体 唾液支原体 发酵支原休 肺炎支原体 + + + 口腔支原体 + 、 + 生精支质体 、 、 暖原体屈 解脲眼原体 (四)抵抗力 渗透压的突变可致细胞破裂 对重金属盐、 酸铊、 结 作用于支原体核蛋 生素, 索如吉霉素不 可抑制或影响蛋白质 成 有杀 支原体的作用 二、致病性与免疫性 支原体不侵入机体组织与血液,而是在呼吸道或泌尿生殖道上皮细跑粘附并定居后,通过不同机制引起细胞损伤,如获取细跑膜上的脂质 与胆固醇造成膜的损伤,释放神经(外)毒素、磷酸晦及过氧化氢等。 巨噬细范、gG及gm对支原体均有一定的杀伤作用。呼吸道粘膜产生的SgA抗体已证明有阻止支原体吸附的作用。在儿童中,致敏淋巴 细胞可增强机体对肺炎支原体的抵抗力, 三、支原体与型细菌的区别 L型细菌是在抗生素、溶菌晦等作用下变成的一种细胞壁缺陷型细菌,其许多特性与支原体相似,在鉴定时很有必要将二者区别开来(见 不表】 表19-2支原体与1型细菌的区别 支 L型细道 给大多数生长需粗四酚 生长不一定需要胆酚
支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。自然界分布广泛,种类多,分为两个属:一为支原体属 (Mycoplasma),有几十个种;另一为脲原体属(Ureaplasma),仅有一种。与人类感染有关的主要是肺炎支原体和解脲脲原体。 第一节 概述 一、生物学性状 (一)形态与结构 支原体的大小为0.2~0.3um,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的麻烦。无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性。革兰氏染 色不易着色,故常用Giemsa染色法将其染成淡紫色。细胞膜中胆固醇含量较多,约占36%,对保持细胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用于 胆固醇的物质(如二性霉素B、皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。 支原体基因组为一环状以双链DNA,分子量小(仅有大肠杆菌的五分之一),合成与代谢很有限。 肺炎支原体的一端有一种特殊的末端结构(terminal structure),能使支原体粘附于呼吸道粘膜上皮细胞表面,与致病性有关。 (二)培养特性 营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外还需加入10~20%人或动物血清以提供支原体所需的胆固醇。最适pH7.8~8.0之间,低于7.0则 死亡,但解脲脲原体最适pH6.0~6.5。 大多数兼性厌氧,有些菌株在初分离时加入5%CO2生长更好。生长缓慢,在琼脂含量较少的固体培养基上孵育2~3天出现典型的“荷包蛋 样”菌落:圆形(直径10~16um),核心部分较厚,向下长入培养基,周边为一层薄的透明颗粒区。此外,支原体还能在鸡胚绒毛尿囊膜或培 养细胞中生长。 繁殖方式多样,主要为二分裂繁殖,还有断裂、分枝、出芽等方式,盖因缺乏细胞壁造成分裂时二个子细胞大小均所致。同时,支原体分 裂和其DNA复制不同步,可形成多核长丝体。 (三)生化反应与分型 一般能分解葡萄糖的支原体则不能利用精氨酸,能利用精氨酸的则不能分解葡萄糖,据此可将支原体分为两类(见表19-1)。解脲脲原体 不能利用葡萄糖或精氨酸,但可利用尿素作能源。 各种支原体都有特异的表面抗原结构,很少有交叉反应,具有型特异性。应用生长抑制试验(Growth inhibition test,GIT)、代谢抑制试 验(Metabolicinhibition test,MIT)等可鉴定支原抗原,进行分型。 表19-1 人类支原体的主要生物学性状 名称 需要胆固醇 分解葡萄糖 分 解 还原四氮唑 吸附红细胞 支原体属 人型支原体 唾液支原体 发酵支原体 肺炎支原体 口腔支原体 生殖支原体 脲原体属 解脲脲原体 + + + + + + + - - + + - + - + + - - + - - - - - - - - + - - - + - ± - - - - + + - + (四)抵抗力 支原体对热的抵抗力与细菌相似。对环境渗透压敏感,渗透压的突变可致细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细 菌敏感,但对醋酸铊、结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。对影响壁合成的抗生素如青霉素不敏感,但红霉素、四环素、链霉素及氯霉素等 作用于支原体核蛋白体的抗生素,可抑制或影响蛋白质合成,有杀灭支原体的作用。 二、致病性与免疫性 支原体不侵入机体组织与血液,而是在呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞粘附并定居后,通过不同机制引起细胞损伤,如获取细胞膜上的脂质 与胆固醇造成膜的损伤,释放神经(外)毒素、磷酸酶及过氧化氢等。 巨噬细胞、lgG 及lgm 对支原体均有一定的杀伤作用。呼吸道粘膜产生的SlgA抗体已证明有阻止支原体吸附的作用。在儿童中,致敏淋巴 细胞可增强机体对肺炎支原体的抵抗力。 三、支原体与L型细菌的区别 L型细菌是在抗生素、溶菌酶等作用下变成的一种细胞壁缺陷型细菌,其许多特性与支原体相似,在鉴定时很有必要将二者区别开来(见 不表)。 表19-2 支原体与L型细菌的区别 支原体 L型细菌 自然界中广泛存在 绝大多数生长需胆固醇 自然界很少存在 生长不一定需要胆固醇
在速传上与细菌无关,且无论在什么条件下也不能变成细菌 在遗传上与原菌相关。并可在诱导因素去除后回复为原闲 菌落较小,0.1~0.3mm 苦落稍大,0.3w1.0mm 第二节主要病原性支原体 一、肺炎支原体所致 陆淡支原体Pm0是人支原体陆的病原体。支原体肺的病理改变以间压性陆炎为主,有时并发支气管肺,为原发性 性肺炎,主要经飞沫传染。潜伏期2一3周。发病率以青少年最高。临床症状较轻,至根本无症状。若有也只是头痛。咽痛。发热、咳 但多在秋冬时 、损伤细胞膜,继而释放出核酸南、过氧化 诱发机体产生的抗体也可能参与了上述病理损伤。呼吸道分论的$1gA对再感染有一定 断方法主要依靠分离培养和血清学试验。标本可采可疑病人的痰或咽试子,接种于含血清或酵母浸膏的琼那 养基.5~1 天后观察有 多次传代 “荷包蛋样 可特异性抗体所抑 溶血与生 鉴定后需进一步用特异性抗血清作生长抑制试验和 体脂质抗 作补体结合 具有诊断价但 另外,有1/3~34患者的血清可与人0型红细胞在4℃时有非特异性凝集(称为“冷凝集试验”),37℃时消失,患病 周时达到高 此方法简 治疗可选 四环素和氧萄素等 支原体死疫苗和减毒活苗仍在试验中 二、解脲脲原体 解脲际原体(M,urealyticum)为跟原体属中唯一的一个种,因生长需要尿素而得名。菌落微小,直径仅有15~25um,须在低倍显微镜下 观察,故旧称T株tiny strai。菌落表面有相糙颗粒,在合适条件下可转成典型的荷包蛋样菌落。生长需要担固醇和尿素,分解尿素为其代谢 特征,产生氨氮,使培养基H上升,导致自身死亡, 解脲脲原体可引起泌尿生殖道感染,并被认为是非淋球菌性尿道炎中仅次于衣原体(占$0%)的重要病原体,由于80%孕妇的生殖道内带 有解跟脲原体,因此可通过胎盘感染胎儿而导致早产、死胎,或在分焕时感染新生儿,引起呼吸道感染,此外,解跟据原体还可引起不孕症。 治疗用红霉素。四环素、强力霉素等高度敏感的抗生素
在遗传上与细菌无关,且无论在什么条件下也不能变成细菌 菌落较小,0.1~0.3mm 在遗传上与原菌相关,并可在诱导因素去除后回复为原菌 菌落稍大,0.5~1.0mm 第二节 主要病原性支原体 一、肺炎支原体所致 肺炎支原体(M.Pneumonia)是人类支原体肺炎的病原体。支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主,有时并发支气管肺炎,称为原发性 非典型性肺炎。主要经飞沫传染,潜伏期2~3周,发病率以青少年最高。临床症状较轻,甚至根本无症状,若有也只是头痛、咽痛、发热、咳 嗽等一般的呼吸道症状,但也有个别死亡报道。一年四季均可发生,但多在秋冬时节。 肺炎支原体的致病首先通过其顶端结构粘附在宿主细胞表面,并伸出微管插入胞内吸取营养、损伤细胞膜,继而释放出核酸酶、过氧化氢 等代谢产生引起细胞的溶解、上皮细胞的肿胀与坏死。诱发机体产生的抗体也可能参与了上述病理损伤。呼吸道分泌的SlgA对再感染有一定防 御作用,但不够牢固。 肺炎支原体的诊断方法主要依靠分离培养和血清学试验。标本可采可疑病人的痰或咽试子,接种于含血清或酵母浸膏的琼脂培养基。5~10 天后观察有无直径30~100um的圆形房顶样菌落。多次传代后可变为典型的“荷包蛋”样菌落,并能吸附多种动物红细胞和气管上皮细胞、HeLa 细胞等,且此类吸附可被特异性抗体所抑制。分离的支原体经形态、溶血与生化反应作初步鉴定后需进一步用特异性抗血清作生长抑制试验和 代谢抑制试验。用患者血清与支原体脂质抗原作补体结合试验,恢复期较急性期效价高4倍以上具有诊断价值。亦可用间接免疫荧光试验、间 接血凝ELISA检测标本。另外,有1/3~3/4患者的血清可与人O型红细胞在4℃时有非特异性凝集(称为“冷凝集试验”),37℃时消失,患病一 周时达到高峰。此方法简便,有助于诊断。 治疗可选用红霉素、四环素和氯霉素等。 支原体死疫苗和减毒活疫苗仍在试验中。 二、解脲脲原体 解脲脲原体(M.urealyticum)为脲原体属中唯一的一个种,因生长需要尿素而得名。菌落微小,直径仅有15~25um,须在低倍显微镜下 观察,故旧称T株(tiny strain)。菌落表面有粗糙颗粒,在合适条件下可转成典型的荷包蛋样菌落。生长需要胆固醇和尿素,分解尿素为其代谢 特征,产生氨氮,使培养基pH上升,导致自身死亡。 解脲脲原体可引起泌尿生殖道感染,并被认为是非淋球菌性尿道炎中仅次于衣原体(占50%)的重要病原体。由于80%孕妇的生殖道内带 有解脲脲原体,因此可通过胎盘感染胎儿而导致早产、死胎,或在分娩时感染新生儿,引起呼吸道感染。此外,解脲脲原体还可引起不孕症。 治疗用红霉素、四环素、强力霉素等高度敏感的抗生素