任务驱动教学课件 模块六中药制剂含量测定技术 任务十七牛黄解毒片中黄芩含量测定
任 务 驱 动 教学课件 模块六 中药制剂含量测定技术 任务十七 牛黄解毒片中黄芩含量测定
一、工作任务提标 1.根据《中国药典》有关规定，在模拟的工作环境和过程中，以学 生-药检工的双重身份，完成牛黄解毒片中黄芩的含量测定。 2.理解HPLC外标法的测定原理。 3.掌握系统适应性试验的方法、能正确制备测试溶液、对样品进行 测试分析。 4.建立正确的含量计算公式。 5.学会正确书写实验记录和检验报告
一、工作任务提示 1.根据《中国药典》有关规定，在模拟的工作环境和过程中，以学 生-药检工的双重身份，完成牛黄解毒片中黄芩的含量测定。 2.理解HPLC外标法的测定原理。 3.掌握系统适应性试验的方法、能正确制备测试溶液、对样品进行 测试分析。 4.建立正确的含量计算公式。 5.学会正确书写实验记录和检验报告
二、工作依招 对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照 品适量，加甲醇制成每1m1中含30μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备取本品20片（包衣片除去包衣），精密称定， 研细，混匀，取约1g,精密称定，加70%乙醇30ml,超声处理20分钟， 放冷，滤过，滤液置50m1量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣， 洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液 相色谱仪，测定，即得。 (2005年版《中国药典》一部387页)
二、工作依据 对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照 品适量，加甲醇制成每1ml中含30μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品20片（包衣片除去包衣），精密称定， 研细，混匀，取约1g，精密称定，加70%乙醇30ml，超声处理20分钟， 放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣， 洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液 相色谱仪，测定，即得。 （2005年版《中国药典》一部 387页）
三、工作步骤 (一)准备阶段 1.必备知识 (1)药品标准解读（牛黄解毒片的处方、含量测定等） (2)高效液相色谱仪工作原理 (3)HPLC外标法的测定原理 (4)系统适应性试验相关知识 2.仪器 (1)高效液相色谱仪
三、工作步骤 （一）准备阶段 1.必备知识 （1）药品标准解读（牛黄解毒片的处方、含量测定等) （2）高效液相色谱仪工作原理 （3） HPLC外标法的测定原理 （4）系统适应性试验相关知识 2.仪器 （1）高效液相色谱仪
高效液相色进仪 e
色谱仪工作原理 山西生物应用职业技术学院王袆制作
102030010 030 t/min t/ain 图1.黄芩苷对照品高效液相色谱图 图2.牛黄解毒片高效液相色谱图
图1.黄芩苷对照品高效液相色谱图 图2.牛黄解毒片高效液相色谱图
(二)实险阶段 1.对照品溶液制备 2.供试品溶液制备 3.系统适应性试验（理论板数、分离度、重复性和拖尾因子） 4.进样测定 5.含量计算 (①)计算供试液中被测成分的浓度C=C对×4： A对 (2)计算药品中被测药味的含量 含量(mg/片)= C供×稀释倍数X样品溶液体积X平均片重 取样量
（二）实验阶段 1.对照品溶液制备 2.供试品溶液制备 3.系统适应性试验（理论板数、分离度、重复性和拖尾因子） 4.进样测定 5.含量计算 （1）计算供试液中被测成分的浓度 （2）计算药品中被测药味的含量 对 供 供 对 A A C C C供×稀释倍数×样品溶液体积×平均片重 取样量 含量(mg/片) =
（三)总结阶段 1.总结色谱仪工作原理 2.总结色谱仪的操作注意事项 脱气 需用微孔滤膜(0.45μm)滤过并脱气才可使用。 进样 开泵后，先打开冲洗键(PURGE)进行泵排气。然后将流动相接入色谱 柱充分冲洗平衡，待基线稳定后方可进样。 流动相 由于C18链在水相环境中不易保持伸展状态，故对于使用C18柱的反相 色谱系统，流动相中有机溶剂的比例通常应不低于5%。否则C18链的 随机卷曲将导致组分保留值的改变，造成色谱系统的不稳定。 冲柱 工作完毕，应先后用水和甲醇充分冲洗液路系统，尤其是使用了含盐 的流动相，更应充分冲洗
（三）总结阶段 1.总结色谱仪工作原理 2.总结色谱仪的操作注意事项 脱气 需用微孔滤膜（0.45μm）滤过并脱气才可使用。 进样 开泵后，先打开冲洗键（PURGE）进行泵排气。然后将流动相接入色谱 柱充分冲洗平衡，待基线稳定后方可进样。 流动相 由于C18链在水相环境中不易保持伸展状态，故对于使用C18柱的反相 色谱系统，流动相中有机溶剂的比例通常应不低于5％。否则C18链的 随机卷曲将导致组分保留值的改变，造成色谱系统的不稳定。 冲柱 工作完毕，应先后用水和甲醇充分冲洗液路系统，尤其是使用了含盐 的流动相，更应充分冲洗