任务驱动教学课件 模块六中药制剂含量则定技朮 任务十五排石颗粒中总黄酮的含量测定
任 务 驱 动 教学课件 模块六 中药制剂含量测定技术 任务十五 排石颗粒中总黄酮的含量测定
一、工作任务提示 1.根据《中国药典》有关规定，在模拟的工作环境和过程中， 以学生-药检工的双重身份，完成排石颗粒中总黄酮的含量测定。 2.掌握标准曲线的制备和考察方法、样品溶液的测定方法。 3.正确建立含量计算公式。 4.理解分光光度标准曲线法的测定原理。 5.学会正确书写实验记录和检验报告
一 、工作任务提示 1.根据《中国药典》有关规定，在模拟的工作环境和过程中， 以学生-药检工的双重身份，完成排石颗粒中总黄酮的含量测定。 2.掌握标准曲线的制备和考察方法、样品溶液的测定方法。 3.正确建立含量计算公式。 4.理解分光光度标准曲线法的测定原理。 5.学会正确书写实验记录和检验报告
吕、工作依招 对照品溶液的制备精密称取经120℃干燥至恒重的芦丁对照品 20mg,置100m1量瓶中，加50%甲醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度， 摇匀，即得（每1m1含芦丁0.2mg)。 标准曲线的制备精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、 4.0ml、5.0ml,分别置10m1量瓶中，各加50%甲醇至5ml,加5%亚硝 酸钠溶液0.3ml,摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液0.3ml,摇匀， 放置6分钟，加氢氧化钠试液4如1，再加50%甲醇至刻度，摇匀。以相 应的溶液为空白。照分光光度法（附录VB),在510nm的波长处 测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线
二、工作依据 对照品溶液的制备 精密称取经120℃干燥至恒重的芦丁对照品 20mg,置100ml量瓶中，加50％甲醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度, 摇匀,即得（每1ml含芦丁0.2mg）。 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、 4.0ml、5.0ml，分别置10ml量瓶中，各加50％甲醇至5ml，加5％亚硝 酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.3ml，摇匀， 放置6分钟，加氢氧化钠试液4ml，再加50％甲醇至刻度，摇匀。以相 应的溶液为空白。照分光光度法（附录Ｖ Ｂ），在510nm的波长处 测定吸收度,以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线
吕、工作依招 测定法取本品装量差异项下的内容物，研细，取5g或1g(无糖 型)，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇100m1,称定重量，超声处 理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过， 精密量取续滤液25ml,置50m1量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取 2ml,置10m1量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，作为空白对照。另精 密量取2m1,置10m1量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加50 %甲醇至5m1”起，依法立即测定吸收度，从标准曲线上读出供试品 溶液中相当于芦丁的重量，计算，即得。本品每袋含总黄酮以芦丁 (C27H30016)计，不得少于0.12g。 (2005年版《中国药典》一部594页)
二、工作依据 测定法 取本品装量差异项下的内容物，研细，取5g或1g(无糖 型)，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇100ml，称定重量，超声处 理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过， 精密量取续滤液25ml，置50ml量瓶中,加水至刻度，摇匀，精密量取 2ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，作为空白对照。另精 密量取2ml，置10ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加50 ％甲醇至5ml”起，依法立即测定吸收度，从标准曲线上读出供试品 溶液中相当于芦丁的重量，计算，即得。本品每袋含总黄酮以芦丁 (C27H30O16)计,不得少于0.12g。 （2005年版《中国药典》一部 594页）
三、工作步骤 (一)淮备阶段 1.必备知识 (I)药品标准解读（排石颗粒的处方、含量测定等）】 (2)芦丁的结构与性质 (3)标准曲线的制备和考察方法 （4)分光光度标准曲线法的测定原理 2.仪器药品 (1)紫外-可见分光光度计 (2)5%亚硝酸钠溶、10%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液等
三、工作步骤 （一）准备阶段 1.必备知识 （1）药品标准解读（排石颗粒的处方、含量测定等) （2）芦丁的结构与性质 （3）标准曲线的制备和考察方法 （4）分光光度标准曲线法的测定原理 2.仪器药品 （1）紫外-可见分光光度计 （2）5％亚硝酸钠溶、10％硝酸铝溶液、氢氧化钠试液等
(二)实验阶段 1.对照品溶液制备 2.标准曲线（回归方程)制备 AC曲线 3.供试品溶液制备 4.上机测定 5.含量计算 Cx (1)将供试液吸光度(A)代入回归方程A=a+bC,计算供试 液中被测成分的浓度C (2)计算每袋总黄酮含量 含量(mg/袋)= C×稀释倍数×样品溶液体积X平均袋重 取样量
（二）实验阶段 1.对照品溶液制备 2.标准曲线（回归方程）制备 3.供试品溶液制备 4.上机测定 5.含量计算 （1） 将供试液吸光度（A）代入回归方程 计算供试 液中被测成分的浓度C （2）计算每袋总黄酮含量 A = a + b C, A-C曲线 C×稀释倍数×样品溶液体积×平均袋重 取样量 含量(mg/袋) =
(二)实验阶段 6.结果判断，根据实验记录，书写检验报告 1ooml含最(ww)Cmg/ml00mlx100mix100ml 2mlX2mXW样(mg) 样品溶 液 稀释倍数(D】 样品溶液体积 (V样) 取2ml 100ml 100ml 取2ml 供试品溶液 N含量计算公式建立示意图
（二）实验阶段 6.结果判断，根据实验记录，书写检验报告 取2ml 样品溶 液 100ml 100ml 100ml 取2ml 供试品溶液 N C供（mg/ml）×100ml×100ml ×100ml 含量（W/W）＝ 2ml×2ml ×W样（mg） 稀释倍数（D） 样品溶液体积 （V样） 含量计算公式建立示意图
（三)总结阶段 1.总结标准曲线法的原理 2.总结标准曲线法的特点 3.总结标准曲线法的应用范围 4.实验中对溶液多火转移、定容，故须精心操作，防止“跑、冒、 滴、漏”。 5.硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为：在中性或弱碱性 及亚硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成螯合物，加入氢氧化 钠溶液后显红橙色，在510m波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定 律
（三）总结阶段 1.总结标准曲线法的原理 2.总结标准曲线法的特点 3.总结标准曲线法的应用范围 4.实验中对溶液多次转移、定容，故须精心操作，防止“跑、冒、 滴、漏” 。 5.硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性 及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯合物,加入氢氧化 钠溶液后显红橙色,在510nm波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定 律