33培养基的类型及应用 3.3.1根据所培养微生物的微生物类群来分 ①细菌培养基②放线菌培养基③霉菌培养基3 细菌培养基营养肉汤( nutrient broth): 牛肉膏3g;蛋白胨5g;水1000ml;pH7.2-7.4 放线菌培养基高氏1号 可溶性淀粉20g:KNO31g;K2HPO41 MgSO4 0.5g acl Ig; Feso4.,0 0.5g 水1000ml;pH7.2-74 霉菌培养基查氏( capek)培养基: 蔗糖30g; KCl 0.5g MgSo.H2o 0.5g; FeSO 0.5 水1000ml; K2HPO4 NaNO3 3g pH6.7 酵母菌培养基麦芽汁培养基
细菌培养基——营养肉汤（nutrient broth)： 牛肉膏 3g；蛋白胨 5g ；水 1000ml；pH 7.2~7.4 放线菌培养基——高氏1号： 可溶性淀粉 20g； KNO3 1g; K2HPO4 1g MgSO4 0.5g NaCl 1g; FeSO4 •7H2O 0.5g 水 1000ml; pH 7.2~7.4 霉菌培养基——查氏（zapek)培养基： 蔗糖 30g; KCl 0.5g; MgSO4 .H2O 0.5g; FeSO4 0.5g 水 1000ml; K2HPO4 1g; NaNO3 3g; pH 6.7 酵母菌培养基——麦芽汁培养基 3.3.1 根据所培养微生物的微生物类群来分 ①细菌培养基 ②放线菌培养基 ③霉菌培养基3 3.3 培养基的类型及应用
3.3.2根据培养目的来分 ①种子培养基( seed culture mediun)是为保证发 酵生产获得大量优质种子而设计的培养基,特点是营养较丰富,氮 源比例较高。有时为使菌种能迅速适应后面的发酵条件,还有意识 地加入发酵培养基的基质。 ②发酵培养基( fermentation mediun)用于生产预 定发酵产物,一般以碳为主要元素,碳源含量往往高于种孑培养基 大规模生产时,原料应价廉易得,还应有利于下游的分离提取。 味精生产菌北京棒状杆菌AS1299的一级种子(用摇床培养) 培养基配方: 葡萄糖3%玉米浆25~3.5 尿素 0.3-0.5%K2HPO40.1~0.2 MgSO4 0.05% 二级种子(1200升发酵罐)培养基配方:以水解糖3%代 替葡萄糖3%,其他成分相同
味精生产菌北京棒状杆菌AS1299的一级种子（用摇床培养） 培养基配方： 葡萄糖 3% 玉米浆 2.5~3.5% 尿素 0.3~0.5% K2HPO4 0.1~0.2% MgSO4 0.05% 二级种子（1200升发酵罐）培养基配方：以水解糖3%代 替葡萄糖3%，其他成分相同。 3.3.2 根据培养目的来分 ①种子培养基(seed culture medium)———是为保证发 酵生产获得大量优质种子而设计的培养基，特点是营养较丰富，氮 源比例较高。有时为使菌种能迅速适应后面的发酵条件，还有意识 地加入发酵培养基的基质。 ②发酵培养基(fermentation medium)——用于生产预 定发酵产物，一般以碳为主要元素，碳源含量往往高于种子培养基。 大规模生产时，原料应价廉易得，还应有利于下游的分离提取
3.33按对培养基成分的了解程度来分 ①天然培养基( complex medium):也称作 chemically undefined medium。利用化学成分还不完全清楚或不恒定的天 然物质,(如肉汤、蛋白胨、麦芽汁、酵母汁、豆芽汁、玉米 粉、牛奶、血清等)制成的培养基,天然培养基比较经济,除 实验室经常使用外,更适宜于在生产上用来大规模地培养微生 物和生产微生物产品。 ②合成(组合)培养基 synthetic medium):也称作 chemically defined medium.由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 该类培养基的组成成分精确、清楚,重复性强,但微生物生长 较慢,且价格昂贵,故一般适于在实验室范围内他有关研生物 营养需要、代谢、分类鉴定、生物测定以及菌种选育、遗传分 析等方面的研究工作。如高氏培养基、察氏培养基等 ③半组合培养基( semi-defined medium):在合成培养基的基础 上添加些天然成份,以更有效地满足微生物对营养物的需要.如 马铃薯蔗糖培养基
3.3.3 按对培养基成分的了解程度来分 ①天然培养基(complex medium)：也称作chemically undefined medium。利用化学成分还不完全清楚或不恒定的天 然物质，（如肉汤、蛋白胨、麦芽汁、酵母汁、豆芽汁、玉米 粉、牛奶、血清等）制成的培养基，天然培养基比较经济，除 实验室经常使用外，更适宜于在生产上用来大规模地培养微生 物和生产微生物产品。 ②合成（组合）培养基(synthetic medium)：也称作chemically defined medium. 由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基， 该类培养基的组成成分精确、清楚，重复性强，但微生物生长 较慢，且价格昂贵，故一般适于在实验室范围内他有关研生物 营养需要、代谢、分类鉴定、生物测定以及菌种选育、遗传分 析等方面的研究工作。如高氏培养基、察氏培养基等. ③半组合培养基(semi-defined medium)：在合成培养基的基础 上添加些天然成份，以更有效地满足微生物对营养物的需要.如 马铃薯蔗糖培养基
实验室常用天然培养基 营养物质 来源 主要成份 牛肉浸膏瘦牛肉组织浸出汁浓缩而富含水溶性碳水化合物、有机 成的膏状物质 氮化合物、维生素、盐等 蛋白胨将肉、酪素或明胶用酸或富含有机氮化合物、也含有 蛋白酶水解后干燥而成的些维生素和碳水化合物 粉末状物质 酵母浸膏酵母细胞的水溶性提取物富含B类维生素,也含有有机氮 浓缩而成的膏状物质 化合物和碳水化合物
实验室常用天然培养基
3.3.4按制备后培养基外观的物理状态来分 ③液体培养基( liquid medium):液体培养基不含任何凝 固剂,菌体与培养基充分接触,操作方便,常用于大规模 的工业生产以及在实验室进行微生物生理代谢等基本理论 的研究工作。可据培养后的浊度判断微生物的生长程度. ①固体培养基( solid medium):天然固体营养基质制成 的培养基,或液体培养基中加入一定量凝固剂(琼脂1.5 2%)而呈固体状态的培养基。为微生物的生长提供营养表 面。常用于微生物的分离、纯化、计数等方面的研究。可 依使用目的不同而制成斜面、平板等形式 ②半固体培养基( semi-solid medium):在液体培养基中 加入0.2-0.7%的琼脂构成的培养基。常用来观察细菌运动 的特征,以进行菌种鉴定和噬菌体效价滴定等方面的实验 工作
3.3.4 按制备后培养基外观的物理状态来分 ③液体培养基(liquid medium)：液体培养基不含任何凝 固剂，菌体与培养基充分接触，操作方便，常用于大规模 的工业生产以及在实验室进行微生物生理代谢等基本理论 的研究工作。可据培养后的浊度判断微生物的生长程度. ① 固体培养基(solid medium)：天然固体营养基质制成 的培养基，或液体培养基中加入一定量凝固剂（琼脂1.5～ 2％)而呈固体状态的培养基。为微生物的生长提供营养表 面。常用于微生物的分离、纯化、计数等方面的研究。可 依使用目的不同而制成斜面、平板等形式. ②半固体培养基(semi-solid medium)：在液体培养基中 加入0.2-0.7％的琼脂构成的培养基。常用来观察细菌运动 的特征，以进行菌种鉴定和噬菌体效价滴定等方面的实验 工作
表4-6琼脂与明胶的比较 比较内容 琼 脂 明 常用浓度 1.5-2% 5-12% 熔点(℃) 凝固点(℃) 606 20 酸性 灰分(%) 14-15 氧化钙(%) 1.15 氧化镁(%) 0.77 氯(%) 0,4 18.3 微生物的可利用能力 绝大多数微生物不能利用 不少微生物能利用 1不被微生物分解、利用、液化 2不因消毒灭菌而被破坏; 理想凝固剂应具 备的条件 3在微生物的生长温度内保持固态; 4凝固点的温度对微生物无害; 5透明度好,粘着力强
1.不被微生物分解、利用、液化； 2.不因消毒灭菌而被破坏； 3.在微生物的生长温度内保持固态； 4.凝固点的温度对微生物无害； 5.透明度好，粘着力强 理想凝固剂应具 备的条件
穿刺生长 线状串珠状乳突状绒毛状丛枝状
Fresh medium- Flow-rate from reservoir regulator Sterile air or→ other gas Gaseous Culture 路 Culture 8 e Effluent containing microbial cells FIGURE 5.21 Aerobic, anaerobic, facultative, mi- croaerophilic, and aerotolerant anaerobe growth, as re- vealed by the position of microbial colonies(depicted here as black dots) within tubes of a culture medium. A small FIGURE 5.9 Schematic for a continuous culture device amount of agar has been added to keep the liquid from be.(chemostat). In such a device, the population density is con- stu wnIc trolled by the concentration of limiting nutrient in the reser- as a redox indicator (a)Oxygen penetrates only a short dis- voir, and the growth rate is controlled by the flow rate(see tance into the tube, so obligate aerobes grow only at the sur- Figure 5. 11). Both parameters can be set by the experimenter. face.(b) Anaerobes, being sensitive to oxygen, gro away from the surface. (c) Facultative aerobes are able to grow in either the presence or the absence of oxygen and thus grow throughout the tube. (d) Microaerophiles grow away from the most oxic zone. (e)Aerotolerant anaerobes grow throughout the tube
334按特殊用途划分 ①基础培养基( minimum medium):是含有一般微生物生长繁殖 所需的基本营养物质的培养基;另外基础培养基也可作为一些特 殊培养基的基础成分〔如制备糖发酵培养基时) ②选择性培养基( selective medium):是根据某种或某一类群微生 物的特殊营养需要,或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的 类培养基。利用这种培养基可用来将某种或某类微生物从混杂 的微生物群体中分离出来 ③鉴别性培养基( differential medium):用于鉴别不同类型微生物 的培养基,在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指 示剂或化学药品,从而产生某种明显的特征性变化,以区别不同 的微生物,例:伊红美兰乳糖培养基( Eosin Methylene blue) ④加富培养基( enriched medium):在普通培养基中加入某些特殊 的营养物,如血、血清、动、植物组织液或其他营养物质(或生 长因子)的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求苛刻的微 生物,或用以宣集(数量上占优势)和分离某中微生物
3.3.4 按特殊用途划分 ①基础培养基(minimum medium): 是含有一般微生物生长繁殖 所需的基本营养物质的培养基； 另外基础培养基也可作为一些特 殊培养基的基础成分（如制备糖发酵培养基时）. ②选择性培养基(selective medium)：是根据某种或某一类群微生 物的特殊营养需要，或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的 一类培养基。利用这种培养基可用来将某种或某类微生物从混杂 的微生物群体中分离出来. ③鉴别性培养基(differential medium)：用于鉴别不同类型微生物 的培养基，在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指 示剂或化学药品，从而产生某种明显的特征性变化，以区别不同 的微生物，例：伊红美兰乳糖培养基（Eosin Methylene Blue） ④加富培养基(enriched medium)：在普通培养基中加入某些特殊 的营养物，如血、血清、动、植物组织液或其他营养物质（或生 长因子）的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求苛刻的微 生物，或用以富集（数量上占优势）和分离某中微生物
选择培养基( selective medium) 表5-19用于选择性培养基的若干抑制剂 选择对象 抑制剂及其用量(ug/m) 抑制对象 般细菌 四环素(200) 黑曲霉,酵母 四环素(100) 酱油曲霉,根霉 放线菌酮(20) 酵母 放线菌酮(50) 酱油曲霉 放线菌酮(100) 根霉 放线菌酮(200) 黑根霉 真菌素( Cabicidin)(100) 酱油曲霉,酵母 G+细菌 多粘菌素B(5) G-细菌 G-细菌 青霉素(1) G+细菌 乳酸菌 山梨酸(0.2%,pH6) 芽孢杆菌 叠氮化钠(NaN)(0.005%,pH7) 曲霉 真菌素(20) 酵母 肠道细菌 胆汁酸(1.5~5mg/m) G+细菌 微球菌 山梨酸(0.2%) 芽孢杆菌
选择培养基(selective medium)