第八章菌种的保藏
第八章 菌种的保藏
第一节菌种的衰退和复壮 菌种的衰退 二、菌种的复壮 第二节菌种的保藏 菌种保藏的目的 二、菌种保藏的原理 三、菌种保藏的方法
第一节 菌种的衰退和复壮 一、菌种的衰退 二、菌种的复壮 第二节 菌种的保藏 一、菌种保藏的目的 二、菌种保藏的原理 三、菌种保藏的方法
●性状稳定的菌种是微生物工作最 重要的基本要求,否则生产或科研 都无法正常进行。 °影响微生物菌种稳定性的因素: a)变异;b)污染;c)死亡
⚫ 性状稳定的菌种是微生物工作最 重要的基本要求，否则生产或科研 都无法正常进行。 ⚫ 影响微生物菌种稳定性的因素： a）变异；b）污染；c）死亡
第一节菌种的衰退和复壮 在微生物的基础研究和应用研究中,选育 一株理想的菌株是一件艰苦的工作,而欲 使菌种始终保持优良性状的遗传稳定性 便于长期使用,还需要做很多日常的工作。 实际上,由于各种各样的原因,要使菌种 永远不变是不可能的,菌种衰退是一种潜 在的威胁。只有掌握了菌种衰退的某些规 律,才能采取相应的措施,尽量减少菌种 的衰退或使已衰退的菌种得以复壮
第一节 菌种的衰退和复壮 ▪ 在微生物的基础研究和应用研究中，选育 一株理想的菌株是一件艰苦的工作，而欲 使菌种始终保持优良性状的遗传稳定性， 便于长期使用，还需要做很多日常的工作。 实际上，由于各种各样的原因，要使菌种 永远不变是不可能的，菌种衰退是一种潜 在的威胁。只有掌握了菌种衰退的某些规 律，才能采取相应的措施，尽量减少菌种 的衰退或使已衰退的菌种得以复壮
菌种的衰退 菌种衰退( degeneration)是指由于 自发突变的结果,而使某物种原有的一系 列生物学性状发生量变或质变的现象。 菌种 纯菌种 自发突发/不纯菌种传代增殖 突变个体 原始个体
一、菌种的衰退 ▪ 菌种衰退（degeneration）是指由于 自发突变的结果，而使某物种原有的一系 列生物学性状发生量变或质变的现象。 纯菌种 自发突变 突变个体 传代增殖 原始个体 不纯菌种 衰退菌种
(一)菌种衰退的现象 ●菌落和细胞形态改变 ●生长速度缓慢,产孢子越来越少 代谢产物生产能力下降,即出现负突变 致病菌对宿主侵染能力下降 对外界不良条件的抵抗能力下降等
（一）菌种衰退的现象 ⚫ 菌落和细胞形态改变 ⚫ 生长速度缓慢，产孢子越来越少 ⚫ 代谢产物生产能力下降，即出现负突变 ⚫ 致病菌对宿主侵染能力下降 ⚫ 对外界不良条件的抵抗能力下降等
(二)菌种衰退的原因 ●基因突变--主要原因 1、有关基因发生负突变导致菌种衰退 2、表型延迟造成菌种衰退 3、质粒脱落导致菌种衰退 ●连续传代-加速衰退 ●不适宜的培养和保藏条件--加速衰退
（二）菌种衰退的原因 ⚫ 基因突变－－主要原因 1、有关基因发生负突变导致菌种衰退 2、表型延迟造成菌种衰退 3、质粒脱落导致菌种衰退 ⚫ 连续传代－－加速衰退 ⚫ 不适宜的培养和保藏条件－－加速衰退
(三)菌种衰退的防止 控制传代次数 创造良好的培养条件 利用不易衰退的细胞移种传代 采用有效的菌种保藏方法 讲究菌种选育技术 定期进行分离纯化
（三）菌种衰退的防止 ⚫ 控制传代次数 ⚫ 创造良好的培养条件 ⚫ 利用不易衰退的细胞移种传代 ⚫ 采用有效的菌种保藏方法 ⚫ 讲究菌种选育技术 ⚫ 定期进行分离纯化
二、菌种的复壮 狭义的复壮--消极的措施 是指在菌种已经发生衰退的情况下,通过纯 种分离和测定典型性状、生产性能等指标,从已 衰退的群体中筛选出少数尚未退化的个体,以达 到恢复原菌株固有性状的相应措施。 ■广义的复壮--积极的措施 是指在菌种的典型特征或生产性状尚未衰 退前,就经常有意识地采取纯种分离和生产性 状测定工作,以期从中选择到自发的正突变个 体
二、菌种的复壮 ◼ 狭义的复壮－－消极的措施 是指在菌种已经发生衰退的情况下，通过纯 种分离和测定典型性状、生产性能等指标，从已 衰退的群体中筛选出少数尚未退化的个体，以达 到恢复原菌株固有性状的相应措施。 ◼ 广义的复壮－－积极的措施 是指在菌种的典型特征或生产性状尚未衰 退前，就经常有意识地采取纯种分离和生产性 状测定工作，以期从中选择到自发的正突变个 体
菌种复壮的主要方法 纯种分离法 通过纯种分离可将衰退菌种细胞群体中 部分仍保持原有典型性状的单细胞分离出 来经扩大培养就可恢复原菌株的典型性状。 菌落纯(“菌种纯”) 细胞纯(“菌株纯”)
菌种复壮的主要方法 ▪ 纯种分离法 菌落纯（“菌种纯”） 细胞纯（“菌株纯”） 通过纯种分离,可将衰退菌种细胞群体中 一部分仍保持原有典型性状的单细胞分离出 来,经扩大培养,就可恢复原菌株的典型性状