甘肃农业大学《基因工程》课程教案 课程名称 植物基因工程 课程代码 030335 学分 4 学时 54 课程性质 基础课( 专业基础课() 专业课（√） 必修课() 选修课() 任课教师 司怀军 职称 教授 授课时间 第六至第七学期 授课对象 生物技术（植物） 教学 本课程的教学目的和要求：通过本课程的学习，使学生进行有关基因工程基本原 目的与 理、基本知识和基本技能的考察和训练，并了解基因工程的现代进展，为以后的工作 打下良好的基础。 要求 教学 通过本课程的学习使学生掌握基因工程的一些基本原理和实验操作方法，掌握基 因操作的基本技术、基因克隆的酶学基础、基因克隆的载体的构建及克隆载体系统的 基本 选择、原核与真核生物基因分离与鉴定的基本原理和方法、体外重组技术以及植物基 要求 因工程的操作方法等。 教材 薛建平，司怀军，田振东主编.植物基因工程.中国科学技术大学出版社，2008 1、 何光源主编.植物基因工程.清华大学出版社，2007 主要参 2、 王关林主编.植物基因工程.科学出版社，2002 考资料 3、 吴乃虎主编.基因工程原理.科学出版社，1998 4、 Sambrook J et al,Molecular Cloning.Cold Spring Harbor Press,2001 系（教研 室)或导师 主任（导师）签字： 年 月日 审阅意见 教学内容与学时分配 教学时数 教学内容 讲课 小计 备注 第一章基因工程的概念与发展 4 第二章基因工程的酶学基础 10 第三章基因工程载体 10 第四章植物基因工程的目的基因 6 第五章目的基因的分离 6 第六章目的基因的转化 6 第七章转基因植物的检测与鉴定 8 第八章转基因生物的安全性评价 4 1
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 1 课程名称 植物基因工程 课程代码 030335 学分 4 学时 54 课程性质 基础课（ ） 专业基础课（ ） 专业课（√） 必修课（ ） 选修课（ ） 任课教师 司怀军 职称 教授 授课时间 第六至第七学期 授课对象 生物技术（植物） 教 学 目的与 要 求 本课程的教学目的和要求：通过本课程的学习，使学生进行有关基因工程基本原 理、基本知识和基本技能的考察和训练，并了解基因工程的现代进展，为以后的工作 打下良好的基础。 教 学 基 本 要 求 通过本课程的学习使学生掌握基因工程的一些基本原理和实验操作方法，掌握基 因操作的基本技术、基因克隆的酶学基础、基因克隆的载体的构建及克隆载体系统的 选择、原核与真核生物基因分离与鉴定的基本原理和方法、体外重组技术以及植物基 因工程的操作方法等。 教 材 薛建平，司怀军，田振东主编. 植物基因工程. 中国科学技术大学出版社，2008 主要参 考资料 1、 何光源主编. 植物基因工程. 清华大学出版社，2007 2、 王关林主编. 植物基因工程. 科学出版社，2002 3、 吴乃虎主编. 基因工程原理. 科学出版社，1998 4、 Sambrook J et al，Molecular Cloning. Cold Spring Harbor Press，2001 系（教研 室）或导师 审阅意见 主任（导师）签字： 年 月 日 教学内容与学时分配 教学时数 教学内容 讲课 小计 备 注 第一章 基因工程的概念与发展 4 第二章 基因工程的酶学基础 10 第三章 基因工程载体 10 第四章 植物基因工程的目的基因 6 第五章 目的基因的分离 6 第六章 目的基因的转化 6 第七章 转基因植物的检测与鉴定 8 第八章 转基因生物的安全性评价 4
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 教学进程 节次 授课内容（章节） 学时 1 第一章基因工程的概念与发展（基因工程的概念、基因工程的诞生和发展、基因 2 工程的研究内容、基因工程的应用、基因工程的发展前景) 2 第一章基因工程的概念与发展（基因工程的概念、基因工程的诞生和发展、基因 2 工程的研究内容、基因工程的应用、基因工程的发展前景) 3 第二章基因工程的酶学基础（第一节概述：第二节限制性核酸内切酶） 2 4 第二章基因工程的酶学基础（第二节限制性核酸内切酶） 2 5 第二章基因工程的酶学基础（第二节限制性核酸内切酶） 2 6 第二章基因工程的酶学基础（第三节DNA连接酶） 2 > 第二章基因工程的酶学基础（第四节DNA聚合酶、第五节DNA甲基化酶：第六 2 节DNA及RNA的修饰酶：第七节核酸酶) 8 第三章基因工程载体（第一节质粒载体） 2 9 第三章基因工程载体（第一节质粒载体） 2 10 第三章基因工程载体（第一节质粒载体） 2 11 第三章基因工程载体（第二节表达载体）》 2 12 第三章基因工程载体（第二节表达载体） 2 13 第四章植物基因工程的目的基因（第一节抗虫基因） 2 14 第四章植物基因工程的目的基因（第二节抗病基因） 2 15 第四章植物基因工程的目的基因（第三节抗非生物胁迫的基因：第四节雄性不 2 育基因：第五节改良作物品质的基因：第六节改良植物其它性状的基因) 16 第五章目的基因的分离（第一节基因克隆的目的意义） 2 17 第五章目的基因的分离（第二节基因克隆的方法） 2 18 第五章目的基因的分离（第二节基因克隆的方法） 2 19 第六章目的基因的转化（第一节植物基因转化受体系统） 2 20 第六章目的基因的转化（第二节农杆菌介导法） 2 21 第六章目的基因的转化（第三节基因枪法：第四节其它转化方法）： 2 22 第七章转基因植物的检测与鉴定（第一节PCR检测） 2 23 第七章转基因植物的检测与鉴定（第二节报告基因的表达检测：第三节Southern 2 杂交鉴定) 24 第七章转基因植物的检测与鉴定（第四节Northern杂交鉴定：第五节外源基因 2 表达蛋白的检测) 25 第七章转基因植物的检测与鉴定（第五节外源基因表达蛋白的检测：第六节分 2 子标记及生物芯片技术检测) 26 第八章转基因生物的安全性评价（第一节生物安全性评价概述：第二节转基因 2 植物食品的安全性评价) 27 第八章转基因生物的安全性评价（第三节转基因植物生态环境的安全性评价：第 2 四节转基因植物的安全性评价管理办法) 合 计 54 2
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 2 教 学 进 程 节次 授课内容（章节） 学时 1 第一章 基因工程的概念与发展（基因工程的概念、基因工程的诞生和发展、基因 工程的研究内容、基因工程的应用、基因工程的发展前景） 2 2 第一章 基因工程的概念与发展（基因工程的概念、基因工程的诞生和发展、基因 工程的研究内容、基因工程的应用、基因工程的发展前景） 2 3 第二章 基因工程的酶学基础（第一节 概述；第二节 限制性核酸内切酶） 2 4 第二章 基因工程的酶学基础（第二节 限制性核酸内切酶） 2 5 第二章 基因工程的酶学基础（第二节 限制性核酸内切酶） 2 6 第二章 基因工程的酶学基础（第三节 DNA 连接酶） 2 7 第二章 基因工程的酶学基础（第四节 DNA 聚合酶、第五节 DNA 甲基化酶；第六 节 DNA 及 RNA 的修饰酶；第七节 核酸酶） 2 8 第三章 基因工程载体（第一节 质粒载体） 2 9 第三章 基因工程载体（第一节 质粒载体） 2 10 第三章 基因工程载体（第一节 质粒载体） 2 11 第三章 基因工程载体（第二节 表达载体） 2 12 第三章 基因工程载体（第二节 表达载体） 2 13 第四章 植物基因工程的目的基因（第一节 抗虫基因） 2 14 第四章 植物基因工程的目的基因（第二节 抗病基因） 2 15 第四章 植物基因工程的目的基因（第三节 抗非生物胁迫的基因；第四节 雄性不 育基因；第五节 改良作物品质的基因；第六节 改良植物其它性状的基因） 2 16 第五章 目的基因的分离（第一节 基因克隆的目的意义） 2 17 第五章 目的基因的分离（第二节 基因克隆的方法） 2 18 第五章 目的基因的分离（第二节 基因克隆的方法） 2 19 第六章 目的基因的转化（第一节 植物基因转化受体系统） 2 20 第六章 目的基因的转化（第二节 农杆菌介导法） 2 21 第六章 目的基因的转化（第三节 基因枪法；第四节 其它转化方法）； 2 22 第七章 转基因植物的检测与鉴定（第一节 PCR 检测） 2 23 第七章 转基因植物的检测与鉴定（第二节 报告基因的表达检测；第三节 Southern 杂交鉴定） 2 24 第七章 转基因植物的检测与鉴定（第四节 Northern 杂交鉴定；第五节 外源基因 表达蛋白的检测） 2 25 第七章 转基因植物的检测与鉴定（第五节 外源基因表达蛋白的检测；第六节 分 子标记及生物芯片技术检测） 2 26 第八章 转基因生物的安全性评价（第一节 生物安全性评价概述；第二节 转基因 植物食品的安全性评价） 2 27 第八章 转基因生物的安全性评价（第三节 转基因植物生态环境的安全性评价；第 四节 转基因植物的安全性评价管理办法） 2 合 计 54
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第一章绪论(2学时) 教学 通过教学使学生了解基因工程的诞生、发展及应用前景；掌握基因工程的 目的 概念、基因工程诞生的理论基础和技术基础、基因工程的研究内容。 与要 求 基因工程的概念、基因工程的四要素、基因工程分类、基因工程的诞生、 教学 基因工程诞生的理论基础和技术基础、基因工程的发展、基因工程的研究内容、 基因工程的应用等。 内容 本章的重点是基因工程的概念、基因工程诞生的理论基础和技术基础、基 重点、 因工程的研究内容；难点是基因工程诞生的理论基础。 难点 分析 教学设计 调控对策 (1)抽查上 从染色体、遗传物质和基因概念的复习入手，引入基因工程的基本 课人数；(2) 概念，主要讲解基因工程的诞生、发展及应用，重点讲解基因工程诞生 采用提问式 的理论基础和技术基础。 教学。 作业：复习讲授内容，查阅目前基因工程取得的重大成就。 课后补遗 3
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 3 章 节 第一章 绪论（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解基因工程的诞生、发展及应用前景；掌握基因工程的 概念、基因工程诞生的理论基础和技术基础、基因工程的研究内容。 教学 内容 基因工程的概念、基因工程的四要素、基因工程分类、基因工程的诞生、 基因工程诞生的理论基础和技术基础、基因工程的发展、基因工程的研究内容、 基因工程的应用等。 重点、 难点 分析 本章的重点是基因工程的概念、基因工程诞生的理论基础和技术基础、基 因工程的研究内容；难点是基因工程诞生的理论基础。 教学设计 调控对策 从染色体、遗传物质和基因概念的复习入手，引入基因工程的基本 概念，主要讲解基因工程的诞生、发展及应用，重点讲解基因工程诞生 的理论基础和技术基础。 作业：复习讲授内容，查阅目前基因工程取得的重大成就。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用提问式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第二章基因工程的酶学基础：第一、二节(2学时) 教学 通过教学使学生了解常用工具酶的种类、限制性核酸内切酶的发现、宿主 目的 控制的限制与修饰作用；掌握工具酶定义、限制性核酸内切酶的命名原则；熟 与要 悉限制性核酸内切酶的识别序列特点。 求 第一节概述：工具酶定义、常用的工具酶。 教学 第二节限制性核酸内切酶：限制性核酸内切酶的发现、限制性核酸内切 内容 酶的分类、限制性核酸内切酶的识别序列特点、限制性核酸内切酶的命名原则、 宿主控制的限制与修饰作用等。 重点是工具酶定义、限制性核酸内切酶的识别序列特点、限制性核酸内切 重点、 酶的命名原则；难点是宿主控制的限制与修饰作用。 难点 分析 教学设计 调控对策 首先复习基因工程的基本概念、基因工程诞生的技术基础，然后引 (1)课堂点 入“分子剪刀”一限制性核酸内切酶的概念，讲解常用的工具酶、限制 名；(2)采 性核酸内切酶的发现和分类，重点讲解限制性核酸内切酶的识别序列特 用提问式教 点、限制性核酸内切酶的命名原则。 学。 作业：复习讲授内容，熟记限制性核酸内切酶的识别序列特点、限 制性核酸内切酶的命名原则。 课后补遗 4
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 4 章 节 第二章 基因工程的酶学基础：第一、二节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解常用工具酶的种类、限制性核酸内切酶的发现、宿主 控制的限制与修饰作用；掌握工具酶定义、限制性核酸内切酶的命名原则；熟 悉限制性核酸内切酶的识别序列特点。 教学 内容 第一节 概述：工具酶定义、常用的工具酶。 第二节 限制性核酸内切酶：限制性核酸内切酶的发现、限制性核酸内切 酶的分类、限制性核酸内切酶的识别序列特点、限制性核酸内切酶的命名原则、 宿主控制的限制与修饰作用等。 重点、 难点 分析 重点是工具酶定义、限制性核酸内切酶的识别序列特点、限制性核酸内切 酶的命名原则；难点是宿主控制的限制与修饰作用。 教学设计 调控对策 首先复习基因工程的基本概念、基因工程诞生的技术基础，然后引 入“分子剪刀”—限制性核酸内切酶的概念，讲解常用的工具酶、限制 性核酸内切酶的发现和分类，重点讲解限制性核酸内切酶的识别序列特 点、限制性核酸内切酶的命名原则。 作业：复习讲授内容，熟记限制性核酸内切酶的识别序列特点、限 制性核酸内切酶的命名原则。 （1）课堂点 名；（2）采 用提问式教 学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第二章基因工程的酶学基础：第二节(2学时) 教学 通过教学使学生了解限制性内切酶的次级活性一星号活性、限制性内切核 目的 酸酶对其它基质的作用；掌握同尾酶(Isocaudamers)、同裂酶(Isoschizomers) 与要 的概念；熟悉II型限制性核酸内切酶的识别序列特点、II型限制性内切酶的 求 切割方式；使学生具有使用分子生物学软件DNAClub的能力。 II型限制性核酸内切酶的识别序列特点、II型限制性内切酶的切割方式、 教学 同尾酶(Isocaudamers)、同裂酶(Isoschizomers入、II型限制性内切酶的识 内容 别序列与切割方式的相关性、限制性内切酶的次级活性一星号活性、限制性内 切核酸酶对其它基质的作用、分子生物学软件DNAC1ub的使用。 重点是II型限制性核酸内切酶的识别序列特点、同尾酶和同裂酶的概念； 重点、 难点是II型限制性内切酶的切割方式、II型限制性内切酶的识别序列与切割 难点 方式的相关性。 分析 教学设计 调控对策 提问工具酶的定义、II型限制性核酸内切酶的识别序列特点、限制 (1)抽查上 性核酸内切酶的命名原则。重点讲解II型限制性核酸内切酶的识别序列 课人数；（2) 特点、同尾酶和同裂酶的概念。采用多煤体手段介绍常用的分子生物学 采用讨论式 软件DNAClub的使用和限制性核酸内切酶位点的分析。 教学。 作业：复习讲授内容，练习分子生物学软件DNAC1ub的使用。 课后补遗 5
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 5 章 节 第二章 基因工程的酶学基础：第二节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解限制性内切酶的次级活性—星号活性、限制性内切核 酸酶对其它基质的作用；掌握同尾酶（Isocaudamers）、同裂酶（Isoschizomers） 的概念；熟悉 II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、II 型限制性内切酶的 切割方式；使学生具有使用分子生物学软件 DNAClub 的能力。 教学 内容 II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、II 型限制性内切酶的切割方式、 同尾酶（Isocaudamers）、同裂酶（Isoschizomers）、II 型限制性内切酶的识 别序列与切割方式的相关性、限制性内切酶的次级活性—星号活性、限制性内 切核酸酶对其它基质的作用、分子生物学软件 DNAClub 的使用。 重点、 难点 分析 重点是 II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、同尾酶和同裂酶的概念； 难点是 II 型限制性内切酶的切割方式、II 型限制性内切酶的识别序列与切割 方式的相关性。 教学设计 调控对策 提问工具酶的定义、II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、限制 性核酸内切酶的命名原则。重点讲解 II 型限制性核酸内切酶的识别序列 特点、同尾酶和同裂酶的概念。采用多媒体手段介绍常用的分子生物学 软件 DNAClub 的使用和限制性核酸内切酶位点的分析。 作业：复习讲授内容，练习分子生物学软件 DNAClub 的使用。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用讨论式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第二章基因工程的酶学基础：第二节(2学时) 教学 通过教学使学生了解限制内切核酸酶活性的检测方法、影响限制性内切酶 目的 活性的因素、识别位点在DNA分子中的频率；掌握DNA甲基化作用对限制性内 与要 切酶的影响、限制性内切酶的应用；熟悉酶反应的终止方法。 求 DNA甲基化作用对限制性内切酶的影响、限制内切核酸酶活性的检测方法、 影响限制性内切酶活性的因素(DNA基质的纯度和物理特征的影响、缓冲液对 教学 酶切效率的影响、反应体积对酶活性的影响、反应温度与保温时间对酶活性的 内容 影响)、酶反应的终止方法、识别位点在DA分子中的频率、限制性内切酶的 应用。 重点、 重点是影响限制性内切酶活性的因素、酶反应的终止方法、限制性内切酶 难点 的应用；难点是DNA甲基化作用对限制性内切酶的影响。 分析 教学设计 调控对策 (1)抽查上 提问同尾酶和同裂酶、I型限制性核酸内切酶的识别序列特点、限 制性核酸内切酶的命名原则。重点讲解DNA甲基化作用对限制性内切酶 课人数；(2) 的影响、酶反应的终止方法、限制性内切酶的应用。采用多媒体手段介 采用讨论式 绍常用的分子生物学软件DNAMAN的使用和限制性核酸内切酶位点的分 教学。 析。 作业：复习讲授内容，练习分子生物学软件DNAMAN的使用。 课后补遗 6
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 6 章 节 第二章 基因工程的酶学基础：第二节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解限制内切核酸酶活性的检测方法、影响限制性内切酶 活性的因素、识别位点在 DNA 分子中的频率；掌握 DNA 甲基化作用对限制性内 切酶的影响、限制性内切酶的应用；熟悉酶反应的终止方法。 教学 内容 DNA 甲基化作用对限制性内切酶的影响、限制内切核酸酶活性的检测方法、 影响限制性内切酶活性的因素（DNA 基质的纯度和物理特征的影响、缓冲液对 酶切效率的影响、反应体积对酶活性的影响、反应温度与保温时间对酶活性的 影响）、酶反应的终止方法、识别位点在 DNA 分子中的频率、限制性内切酶的 应用。 重点、 难点 分析 重点是影响限制性内切酶活性的因素、酶反应的终止方法、限制性内切酶 的应用；难点是 DNA 甲基化作用对限制性内切酶的影响。 教学设计 调控对策 提问同尾酶和同裂酶、II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、限 制性核酸内切酶的命名原则。重点讲解 DNA 甲基化作用对限制性内切酶 的影响、酶反应的终止方法、限制性内切酶的应用。采用多媒体手段介 绍常用的分子生物学软件 DNAMAN 的使用和限制性核酸内切酶位点的分 析。 作业：复习讲授内容，练习分子生物学软件 DNAMAN 的使用。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用讨论式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第二章基因工程的酶学基础：第三节(2学时) 教学 通过教学使学生了解DA连接酶和重组率的概念、提高重组率的方法；掌 目的 握DNA连接酶的种类、影响连接反应的因素；熟悉DNA片段连接的各种方法； 与要 使学生具有将任意DNA分子连接的分析和应用能力。 求 DNA连接酶的概念、DNA连接酶的种类、DNA片段的连接（相同粘性末端的 连接、平末端的连接、不匹配的粘端连接、同聚物加尾连接、衔接物连接法、 教学 DNA接头连接、粘性末端的更换)，、影响连接反应的因素、重组率的概念及提高 内容 重组率的方法。 重点是DNA连接酶的种类及应用、DNA片段连接的各种方法；难点是不匹 重点、 配的粘端连接、衔接物连接法、DNA接头连接、粘性末端的更换等内容。 难点 分析 教学设计 调控对策 复习II型限制性核酸内切酶的识别序列特点、酶反应的终止方法、 (1)抽查上 限制性内切酶的应用。重点讲解DNA连接酶的种类、DNA片段连接的各 课人数；(2) 种方法；总结对任意DNA分子连接的分析方法。 采用讨论式 作业：复习讲授内容，练习DNA分子连接的分析方法。 教学。 课后补遗 7
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 7 章 节 第二章 基因工程的酶学基础：第三节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解 DNA 连接酶和重组率的概念、提高重组率的方法；掌 握 DNA 连接酶的种类、影响连接反应的因素；熟悉 DNA 片段连接的各种方法； 使学生具有将任意 DNA 分子连接的分析和应用能力。 教学 内容 DNA 连接酶的概念、DNA 连接酶的种类、DNA 片段的连接（相同粘性末端的 连接、平末端的连接、不匹配的粘端连接、同聚物加尾连接、衔接物连接法、 DNA 接头连接、粘性末端的更换）、影响连接反应的因素、重组率的概念及提高 重组率的方法。 重点、 难点 分析 重点是 DNA 连接酶的种类及应用、DNA 片段连接的各种方法；难点是不匹 配的粘端连接、衔接物连接法、DNA 接头连接、粘性末端的更换等内容。 教学设计 调控对策 复习 II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、酶反应的终止方法、 限制性内切酶的应用。重点讲解 DNA 连接酶的种类、DNA 片段连接的各 种方法；总结对任意 DNA 分子连接的分析方法。 作业：复习讲授内容，练习 DNA 分子连接的分析方法。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用讨论式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第二章基因工程的工具酶：第四、五、六、七节（2学时) 教学 通过教学使学生了解并掌握DNA聚合酶的概念、各种DNA聚合酶的特性及 目的 应用。使学生具有在分子克隆研究中，灵活应用各种DNA聚合酶的能力；了解 并掌握DNA甲基化酶的种类及用途、DNA及RNA的修饰酶的种类及用途、核酸 与要 酶的种类及用途，使学生具有应用DNA甲基化酶、DNA及RNA的修饰酶、核酸 求 酶的能力。 第四节DNA聚合酶概述、大肠杆菌DNA聚合酶I、大肠杆菌DNA聚合酶I 大片段(K1enow酶)、T4DNA聚合酶(T4 DNA polymerase、T7DNA聚合酶(T7 DNA polymerase)及测序酶、Taq DNA聚合酶(Taq DNA polymerase入、Amv反 转录酶(Amv reverse transcriptase), 第五节DNA甲基化酶：生物体内DNA的甲基化现象、DNA甲基化酶的种类、 教学 限制修饰系统I、II、III型中的甲基化酶、II型甲基化酶对限制酶活性的影 内容 响、甲基化酶的用途、DNA甲基化研究的实例。 第六节DNA及RNA的修饰酶：末端转移酶、T4多聚核苷酸激酶、碱性磷 酸酶、拓扑异构酶。 第七节核酸酶：核酸外切酶(Exonucleases)、S1核酸酶、Bal31核酸 酶、核糖核酸酶(RNase A or T)、脱氧核糖核酸酶(DNase I)。 重点是DNA聚合酶的概念，大肠杆菌DNA聚合酶I、Klenow酶、Taq DNA 重点、 聚合酶、Amv反转录酶的特点及其在分子克隆中的应用，DNA甲基化酶的种类 难点 及用途、碱性磷酸酶的种类及应用、核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的种类及应 用； 分析 难点是T4DNA聚合酶、T7DNA聚合酶和测序酶的使用，DNA甲基化研究 的实例、T4多聚核苷酸激酶的应用。 教学设计 调控对策 提问DNA连接酶的概念、DNA连接酶的种类、DNA片段连接的方法、 (1)抽查上 DNA聚合酶的种类及用途；通过举例，重点讲解各种DNA聚合酶的特性 课人数；（2) 及应用、DNA甲基化酶、DNA及RNA的修饰酶、核酸酶的特性及应用。 采用提问式 作业：复习讲授内容，用列表形式总结各种DA聚合酶的特性及用 教学。 途，总结各种DNA甲基化酶、DNA及RNA的修饰酶、核酸酶的特性及用 途。 课后补遗 8
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 8 章 节 第二章 基因工程的工具酶：第四、五、六、七节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解并掌握 DNA 聚合酶的概念、各种 DNA 聚合酶的特性及 应用。使学生具有在分子克隆研究中，灵活应用各种 DNA 聚合酶的能力；了解 并掌握 DNA 甲基化酶的种类及用途、DNA 及 RNA 的修饰酶的种类及用途、核酸 酶的种类及用途，使学生具有应用 DNA 甲基化酶、DNA 及 RNA 的修饰酶、核酸 酶的能力。 教学 内容 第四节 DNA 聚合酶概述、大肠杆菌 DNA 聚合酶 I、大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow 酶）、T4 DNA 聚合酶（T4 DNA polymerase）、T7 DNA 聚合酶（T7 DNA polymerase）及测序酶、Taq DNA 聚合酶（Taq DNA polymerase）、Amv 反 转录酶（Amv reverse transcriptase）。 第五节 DNA 甲基化酶：生物体内 DNA 的甲基化现象、DNA 甲基化酶的种类、 限制修饰系统 I、II、III 型中的甲基化酶、II 型甲基化酶对限制酶活性的影 响、甲基化酶的用途、DNA 甲基化研究的实例。 第六节 DNA 及 RNA 的修饰酶：末端转移酶、T4 多聚核苷酸激酶、碱性磷 酸酶、拓扑异构酶。 第七节 核酸酶：核酸外切酶（Exonucleases）、S1 核酸酶、Bal 31 核酸 酶、核糖核酸酶（RNase A or T）、脱氧核糖核酸酶（DNase I）。 重点、 难点 分析 重点是 DNA 聚合酶的概念，大肠杆菌 DNA 聚合酶 I、Klenow 酶、Taq DNA 聚合酶、Amv 反转录酶的特点及其在分子克隆中的应用，DNA 甲基化酶的种类 及用途、碱性磷酸酶的种类及应用、核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的种类及应 用； 难点是 T4 DNA 聚合酶、T7 DNA 聚合酶和测序酶的使用，DNA 甲基化研究 的实例、T4 多聚核苷酸激酶的应用。 教学设计 调控对策 提问 DNA 连接酶的概念、DNA 连接酶的种类、DNA 片段连接的方法、 DNA 聚合酶的种类及用途；通过举例，重点讲解各种 DNA 聚合酶的特性 及应用、DNA 甲基化酶、DNA 及 RNA 的修饰酶、核酸酶的特性及应用。 作业：复习讲授内容，用列表形式总结各种 DNA 聚合酶的特性及用 途，总结各种 DNA 甲基化酶、DNA 及 RNA 的修饰酶、核酸酶的特性及用 途。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用提问式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第三章基因工程载体：第一节(2学时) 教学 目的 通过教学使学生了解质粒的基本特性；掌握质粒的概念、常用的选择标记 与要 基因、质粒DNA的电泳特征。 求 1、质粒的概念 教学 2、质粒的基本特性：质粒的复制、拷贝数、不相溶性、转移性、选择标 内容 记、质粒DNA的电泳特征。 重点、 重点是质粒的概念、常用的选择标记基因、质粒DA的电泳特征；难点是 难点 质粒的复制、不相溶性。 分析 教学设计 调控对策 (1)抽查上 复习原核生物大肠杆菌的细胞结构，引入质粒的概念；重点讲解常 课人数；(2) 用的选择标记基因及应用、质粒DNA的电泳特征。 采用提问式 作业：复习讲授内容，熟记常用的选择标记基因及应用，画图表示 教学。 质粒DNA的电泳特征。 课后补遗 9
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 9 章 节 第三章 基因工程载体：第一节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解质粒的基本特性；掌握质粒的概念、常用的选择标记 基因、质粒 DNA 的电泳特征。 教学 内容 1、质粒的概念 2、质粒的基本特性：质粒的复制、拷贝数、不相溶性、转移性、选择标 记、质粒 DNA 的电泳特征。 重点、 难点 分析 重点是质粒的概念、常用的选择标记基因、质粒 DNA 的电泳特征；难点是 质粒的复制、不相溶性。 教学设计 调控对策 复习原核生物大肠杆菌的细胞结构，引入质粒的概念；重点讲解常 用的选择标记基因及应用、质粒 DNA 的电泳特征。 作业：复习讲授内容，熟记常用的选择标记基因及应用，画图表示 质粒 DNA 的电泳特征。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用提问式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第三章基因工程载体：第一节(2学时) 教学 目的 通过教学使学生了解并掌握常用质粒载体的大小、图谱、抗性标记及用途。 与要 使学生在分子克隆研究中具有灵活选择应用各种质粒载体的能力。 求 常用的质粒载体：(1)pSC101和Co1E1;(2)pBR322;(3)pUC18和pUC19; 教学 (4)pUC118 pUC119;(5)pBluescript M13+pBluescript M13-;(6)pSP64 内容 和pSP65;（7)pGEM-3Z;(8)pUCm-T。 重点、 重点是常用质粒载体的大小、抗性标记及用途；难点是质粒载体的图谱及 难点 多克隆位点(MCS)的应用。 分析 教学设计 调控对策 (1)抽查上 提问质粒的概念、质粒的基本特性、常用的选择标记基因；引入常 课人数；(2) 用的质粒载体，采用列举法讲解每种载体的大小、图谱、抗性标记及用 采用讨论式 途。 教学。 作业：复习讲授内容，熟记常用的质粒载体的抗性标记及用途。 课后补遗 10
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 10 章 节 第三章 基因工程载体：第一节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解并掌握常用质粒载体的大小、图谱、抗性标记及用途。 使学生在分子克隆研究中具有灵活选择应用各种质粒载体的能力。 教学 内容 常用的质粒载体：（1）pSC101 和 ColE1；（2）pBR322；（3）pUC18 和 pUC19； （4）pUC118 和 pUC119；（5）pBluescript M13+和 pBluescript M13-；（6）pSP64 和 pSP65；（7）pGEM-3Z；（8）pUCm-T。 重点、 难点 分析 重点是常用质粒载体的大小、抗性标记及用途；难点是质粒载体的图谱及 多克隆位点（MCS）的应用。 教学设计 调控对策 提问质粒的概念、质粒的基本特性、常用的选择标记基因；引入常 用的质粒载体，采用列举法讲解每种载体的大小、图谱、抗性标记及用 途。 作业：复习讲授内容，熟记常用的质粒载体的抗性标记及用途。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用讨论式 教学。 课后补遗
