第十六章 色谱 分析法概论 分析化学教研室
第十六章 色谱 分析法概论 分析化学教研室
色谱法简介 色谱法：固定相 流动相（展开剂） 色谱名称来源：有色物质被分离后形 成色带。 分离机制： 组分在固定相和流动相中分配系数 不同→迁移速度不同→分离
2 色谱法：固定相 流动相（展开剂） 色谱名称来源：有色物质被分离后形 成色带。 分离机制： 组分在固定相和流动相中分配系数 不同 迁移速度不同 分离 色谱法简介
色谱法简介 色谱法的特点： 高分离效能、高灵敏度、高选择 性、分析速度快、应用范围广 3
3 高分离效能、高灵敏度、高选择 性、分析速度快、应用范围广 色谱法的特点: 色谱法简介
色谱法简介 色谱学的重要作用 诺贝尔化学奖：1948年，瑞典Tiselins,电泳和 吸附分析；1952年，英国马丁(Martin)和辛格 (Synge),分配色谱。 应用的科学领域：生命科学、材料科学、环境科 学等。（科学的科学) ■ 药学（药物分析）：各国药典收载了许多色谱分 析方法。中国药典二部，700多，纯度检查、 定性鉴别或含量测定，一部，600多鉴别或含量 测定
4 色谱学的重要作用 ◼ 诺贝尔化学奖：1948年，瑞典Tiselins，电 泳和 吸附分析；1952年，英国马丁(Martin)和辛格 (Synge)，分配色谱。 ◼ 应用的科学领域：生命科学、材料科学、环 境科 学等。（科学的科学） ◼ 药学（药物分析）：各国药典收载了许多色 谱分 析方法。中国药典二部，700多，纯 度检查 、 定性鉴别或含量测定，一部，600多鉴别或含量 测定。 色谱法简介
第一节色谱过程和基本原理 一、色谱过程 色谱过程是组分分子在流动相和固定相间 多次“分配”的过程。 组分的结构和性质微小差异·与固定 相作用差异→随流动相移动的速度不 等◆差速迁移→色谱分离。 5
5 第一节 色谱过程和基本原理 一、色谱过程 色谱过程是组分分子在流动相和固定相间 多次“分配”的过程。 ◼ 组分的结构和性质微小差异 与固定 相作用差异 随流动相移动的速度不 等 差速迁移 色谱分离
t 图17-1色谱过程示意图 1.试样2.流动相3.固定相4.色谱柱5.检测器 6
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二、 色谱流出曲线和有关概念 1.流出曲线和色谱峰 ■色谱流出曲线又称为色谱图。 基线没有组分流出时的流出曲线。反 映检测器的噪音随时间的变化。 ■色谱峰 是流出曲线上的突起部分。 正常色谱峰、拖尾峰和前延峰 7
7 二、色谱流出曲线和有关概念 ◼ 色谱流出曲线 又称为色谱图。 ◼ 基线 没有组分流出时的流出曲线。反 映检测器 的噪音随时间的变化。 ◼ 色谱峰 是流出曲线上的突起部分。 正常色谱峰、拖尾峰和前延峰 1.流出曲线和色谱峰
■对称因子f •衡量色谱峰的对称性 Wn/2 h 天=Wo.05h/2A 0.06h =(A+B)/2A 正常峰0.95-1.05
8 ◼对称因子f s •衡量色谱峰的对称性 A B A fs W h A ( )/ 2 0.0 5 / 2 = + = 正常峰0.95-1.05
2.定性参数 ■保留时间(t)：从进样到某组分在柱后出现浓 度最大时的时间间隔。 ■死时间(t)：分配系数为零的组分，即不被固 定相吸附或溶解的组分的保留时间。 ■调整保留时间(：某组分由于溶解（或被吸 附)于固定相，比不溶解（或不被吸附） 的组分在柱中多停留的时间。 tR-tR -to 9
9 ◼ 保留时间(tR )：从进样到某组分在柱后出现浓 度最大时的时间间隔。 ◼ 死时间 (t0 )：分配系数为零的组分，即不被固 定相吸附或溶解的组分的保留时间。 ◼ 调整保留时间 ( )：某组分由于溶解（或被吸 附）于固定相，比不溶解（或不被吸附） 的组分在柱中多停留的时间。 R 0 ' R t ＝t − t ' R t 2. 定性参数
保留体积(V)：从进样开始到某个组分在柱后 出现浓度极大时，所需通过色谱柱的流动相 体积。 VR=tR·F 死体积(Vo):由进样器至检测器的流路中未被 固定相占有的空间。 固定相颗粒间间隙、导管的容积、检测器内腔 容积的总和。 V=t·F 10
10 ◼ 保留体积(VR )：从进样开始到某个组分在柱后 出现浓度极大时，所需通过色谱柱的流动相 体积。 R R Fc V = t 0 0 F c V ＝t 死体积(V0 )：由进样器至检测器的流路中未被 固定相占有的空间。 固定相颗粒间间隙、导管的容积、检测器内腔 容积的总和