本科分子生物学试卷(五) 第 1 页 共 3 页 本科分子生物学试卷(五) 一、名词解释(14) 1. C-值 2. 内含子 3. 锌指(zinc finger) 4. 转座子 5. 基因家族 二、填空题(20) 1. 酵母 DNA 按摩尔计含有 32.8%的 T,则 A 为_,G 为_和 C 为_。 2. 操纵子包括_、_和_。 3. DNA 合成仪合成 DNA 片段时,用的原料是 、 、 、 、 。 4. 在琼脂糖电泳中,DNA 会向 极移动。 5. 染色体包括 、 两大部分。 6. 环状 DNA 双链的复制主要可分为 、 、 三种类型。 7. 转录的基本过程包括 、 、 。 三、判断题(10) (对在题后的括号里划“√”,错的划“ⅹ”并说明理由) 1. 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。( ) 2. 原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物,开放性启动子复合物为三元复合物。( ) 3. 半保留复制是指有 50%的基因是新合成的,另 50%的基因是上一代的。( ) 4. 基因组 DNA 复制时,先导链的引物是 DNA,后随链的引物是 RNA 。( ) 8. 对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录。( ) 四、问答题(46) 1. 简述遗传密码的性质(6) 2.简述 tRNA 的结构特征及其作用与作用机制。(8) 3. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。(8) 4. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分结构(12) 5. 比较原核生物与真核生物基因组结构的不同,并指出真核生物细胞的 RNA 内含子剪接的主要方 式(12)。 五、实验题(10)(任选一题,全作该题不得分) 1. 简述 PCR 原理。 3. 设计一个实验证明 DNA 的复制是半保留复制
本科分子生物学试卷(五) 第 1 页 共 3 页 本科分子生物学试卷(五) 一、名词解释(14) 1. C-值 2. 内含子 3. 锌指(zinc finger) 4. 转座子 5. 基因家族 二、填空题(20) 1. 酵母 DNA 按摩尔计含有 32.8%的 T,则 A 为_,G 为_和 C 为_。 2. 操纵子包括_、_和_。 3. DNA 合成仪合成 DNA 片段时,用的原料是 、 、 、 、 。 4. 在琼脂糖电泳中,DNA 会向 极移动。 5. 染色体包括 、 两大部分。 6. 环状 DNA 双链的复制主要可分为 、 、 三种类型。 7. 转录的基本过程包括 、 、 。 三、判断题(10) (对在题后的括号里划“√”,错的划“ⅹ”并说明理由) 1. 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。( ) 2. 原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物,开放性启动子复合物为三元复合物。( ) 3. 半保留复制是指有 50%的基因是新合成的,另 50%的基因是上一代的。( ) 4. 基因组 DNA 复制时,先导链的引物是 DNA,后随链的引物是 RNA 。( ) 8. 对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录。( ) 四、问答题(46) 1. 简述遗传密码的性质(6) 2.简述 tRNA 的结构特征及其作用与作用机制。(8) 3. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。(8) 4. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分结构(12) 5. 比较原核生物与真核生物基因组结构的不同,并指出真核生物细胞的 RNA 内含子剪接的主要方 式(12)。 五、实验题(10)(任选一题,全作该题不得分) 1. 简述 PCR 原理。 3. 设计一个实验证明 DNA 的复制是半保留复制
本科分子生物学试卷(五) 第 2 页 共 3 页 本科分子生物学(五)参考答案 二、名词解释(每个 2′,共 10′) 1. C-值(C-value):通常是指一种生物单倍体基因组 DNA 的总量。 2. 内含子(intron):指基因组中的非编码序列。 3. 锌指(zinc finger) :属于反式作用因子,其特有的半胱氨酸和组氨酸之间氨基酸残基数基本恒 定,有锌参与才具备转录调控活性。 4. 转座子(transposon) :是存在于染色体 DNA 上可自主复制和位移的基本单位。 5. 基因家族(gene family):真核生物中许多相关的基因常按功能成套组合,被称为基因家族。 二、填空题(每空 1′,共 20′) 1. A 为 32.8%,G 为 17.2%,C 为 17.2%。 2. 调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 3. 模板 DNA,TAQ 酶,引物,缓冲液,dNTP。 4. 正。 5. 蛋白质,染色体。 6.θ形,滚环形,D-环形。 7. 转录的起始,延伸,终止。 三、判断题(每题 2′,共 10′) (对在题后的括号里划“√”,错的划“╳”并说明理由) 4. 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。(╳ ) 答:没有细胞或组织的特异性。 5. 原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物,开放性启动子复合物为三元复合物。( √ ) 3. 半保留复制是指有 50%的基因是新合成的,另 50%的基因是上一代的。( ╳ ) 答:半保留复制指的是复制时只能以一条链为模板,复制出新链,后代与前代有相同的遗传信息。 4. 基因组 DNA 复制时,先导链的引物是 DNA,后随链的引物是 RNA 。(╳ ) 答:都是 RNA 5. 对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录。( √ ) 四、问答题(24′) 1. 简述遗传密码的性质(6′) 答案要点:简并性;通用性;特殊性 2.简述 tRNA 的二级结构特征并指明作用与作用机制。(8′) 答案要点:其结构见朱玉贤教材 p109: 1. tRNA 携带 AA,是一种酶促反应,也称 AA 的活化 2、 氨基酰是 tRNA 是 AA 参与蛋白合成的活化形式。 AA 的活化:氨基酸+ATP-E 氨基酸 -AMP-E+PPi 3、 每活化一分子 AA 需消耗 ATP 的 2 个高能磷酸键。 AA 的转移:氨基酸+ AMP-E+ tRNA 氨基 酸-tRNA+AMP+E
本科分子生物学试卷(五) 第 2 页 共 3 页 本科分子生物学(五)参考答案 二、名词解释(每个 2′,共 10′) 1. C-值(C-value):通常是指一种生物单倍体基因组 DNA 的总量。 2. 内含子(intron):指基因组中的非编码序列。 3. 锌指(zinc finger) :属于反式作用因子,其特有的半胱氨酸和组氨酸之间氨基酸残基数基本恒 定,有锌参与才具备转录调控活性。 4. 转座子(transposon) :是存在于染色体 DNA 上可自主复制和位移的基本单位。 5. 基因家族(gene family):真核生物中许多相关的基因常按功能成套组合,被称为基因家族。 二、填空题(每空 1′,共 20′) 1. A 为 32.8%,G 为 17.2%,C 为 17.2%。 2. 调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 3. 模板 DNA,TAQ 酶,引物,缓冲液,dNTP。 4. 正。 5. 蛋白质,染色体。 6.θ形,滚环形,D-环形。 7. 转录的起始,延伸,终止。 三、判断题(每题 2′,共 10′) (对在题后的括号里划“√”,错的划“╳”并说明理由) 4. 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。(╳ ) 答:没有细胞或组织的特异性。 5. 原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物,开放性启动子复合物为三元复合物。( √ ) 3. 半保留复制是指有 50%的基因是新合成的,另 50%的基因是上一代的。( ╳ ) 答:半保留复制指的是复制时只能以一条链为模板,复制出新链,后代与前代有相同的遗传信息。 4. 基因组 DNA 复制时,先导链的引物是 DNA,后随链的引物是 RNA 。(╳ ) 答:都是 RNA 5. 对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录。( √ ) 四、问答题(24′) 1. 简述遗传密码的性质(6′) 答案要点:简并性;通用性;特殊性 2.简述 tRNA 的二级结构特征并指明作用与作用机制。(8′) 答案要点:其结构见朱玉贤教材 p109: 1. tRNA 携带 AA,是一种酶促反应,也称 AA 的活化 2、 氨基酰是 tRNA 是 AA 参与蛋白合成的活化形式。 AA 的活化:氨基酸+ATP-E 氨基酸 -AMP-E+PPi 3、 每活化一分子 AA 需消耗 ATP 的 2 个高能磷酸键。 AA 的转移:氨基酸+ AMP-E+ tRNA 氨基 酸-tRNA+AMP+E
本科分子生物学试卷(五) 第 3 页 共 3 页 4、 氨基酰 tRNA 合成酶是高度专一性,既能高度特异性识别 AA,又能高度特异性识别相应,这两 点是保证翻译准确进行的基本条件之一。 5.氨基酰 AMP-E 复合体:作为中间产物,利于酶分别对 AA 和 tRNA 两种底物特异辨认,如有错配, 合成酶有校正活性,水解磷酸酯键,与正确底物结合。 2. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分名称(10′) 答案要点:有:DNA 解旋酶、DNA 旋转酶、DNA 单链结合蛋白、RNA 引物、DNA 连接酶、DNA 聚合酶、其它成分。图略。 五 论述题(两题,共 26′) 1. 比较原核生物与真核生物基因组结构的异同,并指出真核生物细胞的 RNA 内含子剪接的主要方 式(12′)。 答案要点:主要从重复序列情况,有无内含子外显子方面论述,剪接的主要方式指GU-AG和 AU-AC 类内含子的间接以及 I、II 类内含子的间接方式。 2. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。(14′) 答案要点:共同点是两者主要是在转录水平进行调控;不同点是原核生物转录与翻译偶联,以操纵 子调控的现象普遍;真核生物基因表达复杂,转录和翻译是分开的,转录后从细胞核进入细胞质, 调控因此也比较复杂,在 DNA 水平、转录水平和翻译水平均存在。 六、实验题(10′)(任选一题,全作该题不得分) 1. 简述 PCR 原理。 答案要点:PCR 是在体外扩增 DNA 序列的方法,原理并不复杂,首先将双链 DNA 分子在临近沸 点的温度下加热分离成两条单链 DNA 分子,DNA 聚合酶以单链 DNA 为模板并利用反应混合物 中的四种脱氧核苷三磷酸合成新生的 DNA 互补链。包括:DNA 解链(变性)、引物与模板 DNA 结合(退火)DNA 合成(延伸)三步,可以被不断重复。 2. 设计一个实验证明 DNA 的复制是半保留复制。 答案要点:先将大肠杆菌放在 15NH4C1 培养基中生长多代,使几乎所有的 DNA 都被 15N 标记后, 再将细菌移到只含有 14NH4C1 的培养基中培养。随后,在不同的时间取出样品,用十二烷硫酸钠(SDS) 裂解细胞后,将裂解液放在 CsC1 溶液中进行密度梯度离心(140000g,20 小时)。离心结束后,从 管底到管口,溶液密度分布从高到低形成密度梯度。DNA 分子就停留在与其相当的 CsC1 密度处, 在紫外光下可以看到形成的区带。14N - DNA 分子密度较轻(1.7g / cm3 ),停留在离管口这较近的位 置; 15N - DNA 密度较大停留在较低的位置上。当含有 15N-DNA 的细胞在 14NH4C1 培养液中培养一 代后,只有一条区带介于 14N - DNA 与 15N - DNA 之间,这时在 15N-DNA 区已没有吸收带,说明 这时的 DNA 一条链来自 15N - DNA,另一条链为新合成的含有 14N 的新链。培养两代后则在 14N - DNA 区又出现一条带。在 14NH4C1 中培养的时间愈久,14N -DNA 区带愈强,而 14N - 15N DNA 区带 逐渐减弱,但始终未出现其他新的区带。按照半保留复制方式培养两代,只能出现 14N - 15N DNA 两种分子,而且随着代数的增加 14N -DNA 逐渐增加
本科分子生物学试卷(五) 第 3 页 共 3 页 4、 氨基酰 tRNA 合成酶是高度专一性,既能高度特异性识别 AA,又能高度特异性识别相应,这两 点是保证翻译准确进行的基本条件之一。 5.氨基酰 AMP-E 复合体:作为中间产物,利于酶分别对 AA 和 tRNA 两种底物特异辨认,如有错配, 合成酶有校正活性,水解磷酸酯键,与正确底物结合。 2. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分名称(10′) 答案要点:有:DNA 解旋酶、DNA 旋转酶、DNA 单链结合蛋白、RNA 引物、DNA 连接酶、DNA 聚合酶、其它成分。图略。 五 论述题(两题,共 26′) 1. 比较原核生物与真核生物基因组结构的异同,并指出真核生物细胞的 RNA 内含子剪接的主要方 式(12′)。 答案要点:主要从重复序列情况,有无内含子外显子方面论述,剪接的主要方式指GU-AG和 AU-AC 类内含子的间接以及 I、II 类内含子的间接方式。 2. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。(14′) 答案要点:共同点是两者主要是在转录水平进行调控;不同点是原核生物转录与翻译偶联,以操纵 子调控的现象普遍;真核生物基因表达复杂,转录和翻译是分开的,转录后从细胞核进入细胞质, 调控因此也比较复杂,在 DNA 水平、转录水平和翻译水平均存在。 六、实验题(10′)(任选一题,全作该题不得分) 1. 简述 PCR 原理。 答案要点:PCR 是在体外扩增 DNA 序列的方法,原理并不复杂,首先将双链 DNA 分子在临近沸 点的温度下加热分离成两条单链 DNA 分子,DNA 聚合酶以单链 DNA 为模板并利用反应混合物 中的四种脱氧核苷三磷酸合成新生的 DNA 互补链。包括:DNA 解链(变性)、引物与模板 DNA 结合(退火)DNA 合成(延伸)三步,可以被不断重复。 2. 设计一个实验证明 DNA 的复制是半保留复制。 答案要点:先将大肠杆菌放在 15NH4C1 培养基中生长多代,使几乎所有的 DNA 都被 15N 标记后, 再将细菌移到只含有 14NH4C1 的培养基中培养。随后,在不同的时间取出样品,用十二烷硫酸钠(SDS) 裂解细胞后,将裂解液放在 CsC1 溶液中进行密度梯度离心(140000g,20 小时)。离心结束后,从 管底到管口,溶液密度分布从高到低形成密度梯度。DNA 分子就停留在与其相当的 CsC1 密度处, 在紫外光下可以看到形成的区带。14N - DNA 分子密度较轻(1.7g / cm3 ),停留在离管口这较近的位 置; 15N - DNA 密度较大停留在较低的位置上。当含有 15N-DNA 的细胞在 14NH4C1 培养液中培养一 代后,只有一条区带介于 14N - DNA 与 15N - DNA 之间,这时在 15N-DNA 区已没有吸收带,说明 这时的 DNA 一条链来自 15N - DNA,另一条链为新合成的含有 14N 的新链。培养两代后则在 14N - DNA 区又出现一条带。在 14NH4C1 中培养的时间愈久,14N -DNA 区带愈强,而 14N - 15N DNA 区带 逐渐减弱,但始终未出现其他新的区带。按照半保留复制方式培养两代,只能出现 14N - 15N DNA 两种分子,而且随着代数的增加 14N -DNA 逐渐增加