第五节 核酸的性质 一、核酸的水解
第五节 核酸的性质 一、核酸的水解
(一)酸水解 对酸敏感性： 糖苷键>磷酸酯键 嘌呤碱糖苷键>嘧啶碱糖苷键
（一）酸水解 对酸敏感性： 糖苷键 磷酸酯键 嘌呤碱糖苷键 嘧啶碱糖苷键
(二)碱水解 DNA一般对碱稳定。 RNA的磷酸酯键易被碱水解，产生核苷酸混 合物
（二）碱水解 DNA一般对碱稳定。 RNA 的磷酸酯键易被碱水解，产生核苷酸混 合物
Pyrimidine HOCH20 HOCH20 OH 0=P一0 0 0 OH 0= 0=P一0 CH2 0 0 Base 2',3'-Cycllc 0 phosphate Nucleoside 3'-phosphate OH OH Dinucleotlde HOCH2 0 Base OH OH Nucleoside
(三)酶水解 (1)底物专一性 ribonuclease, RNase deoxyribonuclease,DNase (2)作用方式 核酸内切酶(endonuclease) 核酸外切酶(exonuclease) (3)断裂位点 3’-OH与磷酸基之间 5’-OH与磷酸基之间
（三）酶水解 （1）底物专一性 ribonuclease， RNase deoxyribonuclease，DNase （2）作用方式 核酸内切酶（endonuclease） 核酸外切酶（exonuclease） （3）断裂位点 3’-OH与磷酸基之间 5’-OH与磷酸基之间
限制性内切酶(restriction endonuclease》 Most restriction site sequences are palindromes. 1111lllI0等 Backbone cut here 5' 5' Backbone cut here 幻Il川l川 EcoRI restriction site
限制性内切酶（restriction endonuclease）
限制性内切酶的作用特点 极高专一性； DNA两条链都被切断，形成粘末端(cohesive end)或平末端(blunt end); 只降解外源DNA,不降解自身细胞中的DNA; 性质比较稳定，需要Mg2+及一定盐离子
限制性内切酶的作用特点 极高专一性； DNA两条链都被切断，形成粘末端（cohesive end）或平末端（blunt end）； 只降解外源DNA，不降解自身细胞中的DNA； 性质比较稳定，需要Mg2+及一定盐离子
DNA的限制酶图谱 为在DNA分子上指出限制酶切片段的排列 所制作的图谱。 B D A Hpa I 5300bp SV40 DNA
DNA的限制酶图谱 为在DNA分子上指出限制酶切片段的排列 所制作的图谱。 A C B D A 0 5300bp Hpa I SV40 DNA
二、核酸的酸碱性质 磷酸、碱基的解离（两性解离） 核苷酸pl RNA pI=2-2.8 生理状态下，磷酸基团全部解离，呈 多阴离子状态
二、核酸的酸碱性质 磷酸、碱基的解离(两性解离) 核苷酸pI RNA pI=2-2.8 生理状态下，磷酸基团全部解离，呈 多阴离子状态
三、核酸的紫外吸收 Single- stranded Double- helical 220 260 300 Wavelength (nm)
三、核酸的紫外吸收