第二十八章超敏反应及其检测 Hypersensitivity and its laboratory tests 第一节I型超敏反应(Type I hypersensitivity) 一、发生机制 二、临床常见疾病 三、免疫学检验 第二节Ⅱ型超敏反应(TypeⅡhypersensitivity) 一、发生机制 二、临床常见疾病 三、免疫学检验 第三节Ⅲ型超敏反应(TypeⅢhypersensitivity) 一、发生机制 二、临床常见疾病 三、免疫学检验 第四节IV型超敏反应(Type IV hypersensitivity) 一、发生机制 二、临床常见疾病 三、免疫学检验 学习要点 ·超敏反应的概念、分型 ·各型超敏反应特点、发生机制、临床常见疾病 ·I型超敏反应免疫学检测 ·Ⅲ型超敏反应免疫学检测 超敏反应(hypersensitivity)又称变态反应(allergy),是已致敏的机体再次受到相 同抗原刺激后发生的一种异常或病理性的免疫应答。最早由Von Pirquet(1906年)将这一 术语引入免疫学，用于描述接触过抗原的机体表现出的“改变了的免疫反应性”(modified immunoreactivity)。当致敏的机体再次接触相同抗原时，机体发生的反应不是保护性的免 疫现象，而是不同形式的生理功能紊乱或组织细胞炎症性(inflammation)损伤，甚至引起 一系列的疾病，称为超敏反应性疾病
1 第二十八章 超敏反应及其检测 Hypersensitivity and its laboratory tests 第一节 Ⅰ型超敏反应（Type Ⅰhypersensitivity） 一、发生机制 二、临床常见疾病 三、免疫学检验 第二节 Ⅱ型超敏反应（Type Ⅱ hypersensitivity） 一、发生机制 二、临床常见疾病 三、免疫学检验 第三节 Ⅲ型超敏反应（Type Ⅲ hypersensitivity） 一、发生机制 二、临床常见疾病 三、免疫学检验 第四节 Ⅳ型超敏反应（Type Ⅳ hypersensitivity） 一、发生机制 二、临床常见疾病 三、免疫学检验 学习要点 ·超敏反应的概念、分型 ·各型超敏反应特点、发生机制、临床常见疾病 ·Ⅰ型超敏反应免疫学检测 ·Ⅲ型超敏反应免疫学检测 超敏反应（hypersensitivity）又称变态反应（allergy），是已致敏的机体再次受到相 同抗原刺激后发生的一种异常或病理性的免疫应答。最早由 Von Pirquet（1906 年）将这一 术语引入免疫学，用于描述接触过抗原的机体表现出的“改变了的免疫反应性”（modified immunoreactivity）。当致敏的机体再次接触相同抗原时，机体发生的反应不是保护性的免 疫现象，而是不同形式的生理功能紊乱或组织细胞炎症性（inflammation）损伤，甚至引起 一系列的疾病，称为超敏反应性疾病
引起超敏反应的抗原称为变应原(allergen),变应原可以是完全抗原（如病原微生物、 异种动物血清)，也可以是半抗原（如药物和一些化学制剂）或是变性的自身抗原（如各种 自身组织成分)。根据超敏反应的发生机制及临床特点，可将其分为四型，即I型（速发型）、 Ⅱ型（细胞毒型或细胞溶解型）、Ⅲ型（免疫复合物型或血管炎型）和Ⅳ型（迟发型）。I、 Ⅱ、Ⅲ型均由抗体介导，可经血清被动转移：Ⅳ型由T淋巴细胞介导，可经淋巴细胞被动转 移。 第一节I型超敏反应 Type I hypersensitivity I型超敏反应主要由血清中IgE介导，肥大细胞和嗜碱粒细胞是关键的效应细胞，其释 放的生物活性介质是引起各种临床表现的重要分子基础。I型超敏反应的特点是：①发作迅 速、强烈，但消退亦快，故又称速发型超敏反应：②常引起机体生理功能紊乱，但无严重的 组织细胞损伤：③有明显的个体差异和遗传素质，患者对某些抗原易产生IgE抗体，称为特 应性素质个体：④主要病变在小动脉，表现为毛细血管扩张、通透性增加、平滑肌收缩等。 根据【型超敏反应发生的速度差异，可分为速发相和迟发相：速发相在机体再次接触相同变 应原后数秒至数十分钟内发作，主要由生物活性介质引起功能异常，一般在数小时后消退， 但严重时发生过敏性休克(anaphylactic shock)则可能致死：迟发相一般在机体再次接触 相同抗原数小时后发生，持续24小时后逐渐消退，以局部炎症反应为特征，也伴有某些功 能异常。 一、发生机制 (一)致敏阶段 变应原进入机体后，激活CD+Thz细胞和B细胞，诱导产生特异性IgE抗体（少数人产 生IgG,)。IgE抗体为“亲细胞抗体”，其FC段能与肥大细胞和嗜碱粒细胞膜表面FceRI结 合，使机体处于致敏状态。此状态可持续半年以上，如不再接触相应变应原，致敏状态可逐 渐消失。 1.变应原环境中引起I型超敏反应的变应原种类很多，主要有：①吸入性变应原， 如花粉、真菌、尘螨、粉尘、昆虫毒液、动物脱落上皮或羽毛等：②食入性变应原，如各种 鱼虾、蟹贝、牛奶、鸡蛋、果仁等：③某些药物，如青霉素、磺胺、普鲁卡因和有机碘等， 这些药物进入机体后与体内蛋白结合而成为变应原
2 引起超敏反应的抗原称为变应原（allergen），变应原可以是完全抗原（如病原微生物、 异种动物血清），也可以是半抗原（如药物和一些化学制剂）或是变性的自身抗原（如各种 自身组织成分）。根据超敏反应的发生机制及临床特点，可将其分为四型，即Ⅰ型（速发型）、 Ⅱ型（细胞毒型或细胞溶解型）、Ⅲ型（免疫复合物型或血管炎型）和Ⅳ型（迟发型）。Ⅰ、 Ⅱ、Ⅲ型均由抗体介导，可经血清被动转移；Ⅳ型由 T 淋巴细胞介导，可经淋巴细胞被动转 移。 第一节 Ⅰ型超敏反应 Type Ⅰhypersensitivity Ⅰ型超敏反应主要由血清中 IgE 介导，肥大细胞和嗜碱粒细胞是关键的效应细胞，其释 放的生物活性介质是引起各种临床表现的重要分子基础。Ⅰ型超敏反应的特点是：①发作迅 速、强烈，但消退亦快，故又称速发型超敏反应；②常引起机体生理功能紊乱，但无严重的 组织细胞损伤；③有明显的个体差异和遗传素质，患者对某些抗原易产生 IgE 抗体，称为特 应性素质个体；④主要病变在小动脉，表现为毛细血管扩张、通透性增加、平滑肌收缩等。 根据Ⅰ型超敏反应发生的速度差异，可分为速发相和迟发相：速发相在机体再次接触相同变 应原后数秒至数十分钟内发作，主要由生物活性介质引起功能异常，一般在数小时后消退， 但严重时发生过敏性休克（anaphylactic shock）则可能致死；迟发相一般在机体再次接触 相同抗原数小时后发生，持续 24 小时后逐渐消退，以局部炎症反应为特征，也伴有某些功 能异常。 一、发生机制 （一）致敏阶段 变应原进入机体后，激活 CD4 +Th2 细胞和 B 细胞，诱导产生特异性 IgE 抗体（少数人产 生 IgG4）。IgE 抗体为“亲细胞抗体”，其 Fc 段能与肥大细胞和嗜碱粒细胞膜表面 FcεRⅠ结 合，使机体处于致敏状态。此状态可持续半年以上，如不再接触相应变应原，致敏状态可逐 渐消失。 1．变应原 环境中引起Ⅰ型超敏反应的变应原种类很多，主要有：①吸入性变应原， 如花粉、真菌、尘螨、粉尘、昆虫毒液、动物脱落上皮或羽毛等；②食入性变应原，如各种 鱼虾、蟹贝、牛奶、鸡蛋、果仁等；③某些药物，如青霉素、磺胺、普鲁卡因和有机碘等， 这些药物进入机体后与体内蛋白结合而成为变应原
2.特异性IgE抗体的产生变应原通过呼吸道、消化道、注射等途径进入机体，激活 CD+Tz细胞，CD,+Thz细胞及其分泌的IL-4等细胞因子可诱导变应原特异性B细胞增殖分化 为产生特异性IgE抗体的浆细胞，从而产生特异性IgE。 3.IgE与效应细胞表面FcεRI结合I型超敏反应的主要效应细胞是肥大细胞和嗜碱 粒细胞。肥大细胞主要分布于结缔组织和粘膜下层，嗜碱粒细胞主要分布于外周血液。这两 类细胞表面均表达高亲和性IgE Fc受体(FceRI),可与IgE的Fc段结合。结合特异性 IgE的肥大细胞和嗜碱粒细胞称为致敏靶细胞，机体也因此处于致敏状态。肥大细胞和嗜碱 粒细胞胞质内含有相似的嗜碱性颗粒，颗粒内含丰富的介质，当它被释放到胞外，便可以发 挥生物活性作用。 此外，嗜酸性粒细胞也可诱导性（如被IL-3、IL-5、GM-CSF等激活后）表达FcεRI, 其胞质内含丰富的嗜酸性颗粒，颗粒中含有阳离子蛋白，主要有碱性蛋白、过氧化物酶、纤 维蛋白溶酶、组胺酶（灭活组胺）、芳基硫酸酯酶（灭活白三烯）、磷脂酶D(灭活PAF)等。 这些物质可杀伤多种病原微生物、也可导致组织细胞损伤。 (二)发敏阶段 相同变应原再次进入机体时，与致敏效应细胞表面IgE Fab段特异性结合，触发靶细胞 的细胞膜变化，使其脱颗粒及合成新的活性介质。这些介质作用于相应的效应器官，引起毛 细血管扩张、血管壁通透性增加、平滑肌收缩、腺体分泌增多，从而产生相应的临床症状（图 28-1)。 图28-1 I型超敏反应发生机制 1.效应细胞活化和脱颗粒二价或多价变应原再次进入机体，与致敏效应细胞表面两 个或两个以上IgE分子交叉结合，导致膜表面FCεRI聚集并发生构型改变，从而启动激活 信号。聚集的FceRI通过其Y链C端（胞内）的免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)的磷酸 化作用，使胞内蛋白酪氨酸(PTK)活化。PTK的活化促使胞内C+浓度升高，最终使胞质 中微管聚集，微丝收缩，导致细胞内颗粒膜与胞浆膜融合，将颗粒内容物释放至细胞外，此 即脱颗粒(degranulatin)(图28-2)。脱颗粒后因颗粒耗竭而使机体暂时处于脱敏状态， 经1~2天后细胞又重新形成新的颗粒，使机体重新处于致敏状态。 图28-2效应细胞活化、脱颗粒
3 2．特异性 IgE 抗体的产生 变应原通过呼吸道、消化道、注射等途径进入机体，激活 CD4 +Th2 细胞，CD4 +Th2 细胞及其分泌的 IL-4 等细胞因子可诱导变应原特异性 B 细胞增殖分化 为产生特异性 IgE 抗体的浆细胞，从而产生特异性 IgE。 3．IgE 与效应细胞表面 FcεRⅠ结合 Ⅰ型超敏反应的主要效应细胞是肥大细胞和嗜碱 粒细胞。肥大细胞主要分布于结缔组织和粘膜下层，嗜碱粒细胞主要分布于外周血液。这两 类细胞表面均表达高亲和性 IgE Fc 受体（FcεRⅠ），可与 IgE 的 Fc 段结合。结合特异性 IgE 的肥大细胞和嗜碱粒细胞称为致敏靶细胞，机体也因此处于致敏状态。肥大细胞和嗜碱 粒细胞胞质内含有相似的嗜碱性颗粒，颗粒内含丰富的介质，当它被释放到胞外，便可以发 挥生物活性作用。 此外，嗜酸性粒细胞也可诱导性（如被 IL-3、IL-5、GM-CSF 等激活后）表达 FcεRⅠ, 其胞质内含丰富的嗜酸性颗粒，颗粒中含有阳离子蛋白，主要有碱性蛋白、过氧化物酶、纤 维蛋白溶酶、组胺酶（灭活组胺）、芳基硫酸酯酶（灭活白三烯）、磷脂酶 D（灭活 PAF）等。 这些物质可杀伤多种病原微生物、也可导致组织细胞损伤。 （二）发敏阶段 相同变应原再次进入机体时，与致敏效应细胞表面 IgE Fab 段特异性结合，触发靶细胞 的细胞膜变化，使其脱颗粒及合成新的活性介质。这些介质作用于相应的效应器官，引起毛 细血管扩张、血管壁通透性增加、平滑肌收缩、腺体分泌增多，从而产生相应的临床症状（图 28-1）。 1．效应细胞活化和脱颗粒 二价或多价变应原再次进入机体，与致敏效应细胞表面两 个或两个以上 IgE 分子交叉结合，导致膜表面 FcεRⅠ聚集并发生构型改变，从而启动激活 信号。聚集的 FcεRⅠ通过其γ链 C 端（胞内）的免疫受体酪氨酸活化基序（ITAM）的磷酸 化作用，使胞内蛋白酪氨酸（PTK）活化。PTK 的活化促使胞内 Ca 2+浓度升高，最终使胞质 中微管聚集，微丝收缩，导致细胞内颗粒膜与胞浆膜融合，将颗粒内容物释放至细胞外，此 即脱颗粒（degranulatin）（图 28-2）。脱颗粒后因颗粒耗竭而使机体暂时处于脱敏状态， 经 1~2 天后细胞又重新形成新的颗粒，使机体重新处于致敏状态。 图 28-2 效应细胞活化、脱颗粒 图 28-1 Ⅰ型超敏反应发生机制
2.释放活性介质产生生物学效应肥大细胞和嗜碱粒细胞活化后释放的活性介质有两 类，即预存于颗粒内的介质和新合成的介质。 (I)预存介质：①组胺(histamine):是引起速发相症状的主要介质，主要使小血管 扩张、毛细血管通透性增加、平滑肌收缩、黏膜腺体分泌增加，其作用十分短暂，很快被血 浆中或嗜酸粒细胞释放的组胺酶灭活。②激肽原酶(kininogenase):可作用于血浆中激肽 原，使之转变成缓激肽和其他肽类物质。其中缓激肽作用最强，能引起平滑肌（尤其是支气 管平滑肌)缓慢收缩，强烈扩张血管和增加局部毛细血管通透性，吸引嗜酸粒细胞和中性粒 细胞，还可刺激神经末梢引起疼痛，为引起迟发相反应的重要介质。③嗜酸粒细胞趋化因子 (eosinophil chemotactic factor of anaphylaxis,ECF-A):为低分子量多肽，能趋化嗜 酸粒细胞。 (2)新合成的介质：①前列腺素D2(prostaglandin D2,PGD2):是致敏靶细胞活化过程 中新合成的花生四烯酸代谢产物，由环氧合酶作用而产生。PGD2可与平滑肌细胞表面相应受 体结合，使血管扩张，支气管收缩。②白三烯(leucotriene,LT):也是致敏靶细胞活化过程 中新合成的花生四烯酸代谢产物，主要有LTB、LTC、LTD,和LTE,四种。其中LTB,是一种趋 化因子，其余三种过去称为慢反应物质(SS-A),可使支气管平滑肌收缩，黏液分泌，其作 用比组胺强数百倍，且作用持久，是引起迟发相时支气管持续痉挛的主要介质。③血小板活 化因子(platelet activating factor,PAF):是活化的致敏靶细胞膜磷脂分解产物。PAF 能诱导血小板聚集、活化并释放活性胺类（如组胺和5-羟色胺)，导致毛细血管扩张和通透 性增加。PAF还可活化炎性白细胞，在迟发相反应中起重要作用。④细胞因子：由活化的致 敏靶细胞新产生，如IL-4、IL-13等，可促进Th2细胞应答和B细胞发生IgE类型转换。 三、临床常见疾病 (一)过敏性休克 是I型超敏反应中最重要的一组危急症候群。多用于再次注射药物或抗毒素血清后数 秒至数分钟之内发生，若不及时抢救可导致死亡。 1.药物过敏性休克最常见为青霉素引起的过敏性休克。青霉素本身无免疫原性， 但其降解产物（青霉噻唑醛酸、青霉烯酸等）可与体内蛋白质的氨基或巯基结合成为完全抗 原，刺激机体产生IgE抗体，使肥大细胞和嗜碱粒细胞致敏。当再次接触青霉素，即可触发 过敏性休克。少数个体在初次接触青霉素时也可发生过敏性休克，可能是由于曾使用被青霉 素污染的医疗器材或吸入空气中的青霉菌孢子而引起致敏所致。 4
4 2．释放活性介质产生生物学效应 肥大细胞和嗜碱粒细胞活化后释放的活性介质有两 类，即预存于颗粒内的介质和新合成的介质。 （1）预存介质：①组胺（histamine）:是引起速发相症状的主要介质，主要使小血管 扩张、毛细血管通透性增加、平滑肌收缩、黏膜腺体分泌增加，其作用十分短暂，很快被血 浆中或嗜酸粒细胞释放的组胺酶灭活。②激肽原酶（kininogenase）：可作用于血浆中激肽 原，使之转变成缓激肽和其他肽类物质。其中缓激肽作用最强，能引起平滑肌（尤其是支气 管平滑肌）缓慢收缩，强烈扩张血管和增加局部毛细血管通透性，吸引嗜酸粒细胞和中性粒 细胞，还可刺激神经末梢引起疼痛，为引起迟发相反应的重要介质。③嗜酸粒细胞趋化因子 （eosinophil chemotactic factor of anaphylaxis,ECF-A）：为低分子量多肽，能趋化嗜 酸粒细胞。 （2）新合成的介质：①前列腺素 D2（prostaglandin D2,PGD2）：是致敏靶细胞活化过程 中新合成的花生四烯酸代谢产物，由环氧合酶作用而产生。PGD2 可与平滑肌细胞表面相应受 体结合，使血管扩张，支气管收缩。②白三烯(leucotriene,LT)：也是致敏靶细胞活化过程 中新合成的花生四烯酸代谢产物，主要有 LTB4、LTC4、LTD4 和 LTE4 四种。其中 LTB4 是一种趋 化因子，其余三种过去称为慢反应物质（SRS-A），可使支气管平滑肌收缩，黏液分泌，其作 用比组胺强数百倍，且作用持久，是引起迟发相时支气管持续痉挛的主要介质。③血小板活 化因子（platelet activating factor,PAF）：是活化的致敏靶细胞膜磷脂分解产物。PAF 能诱导血小板聚集、活化并释放活性胺类（如组胺和 5-羟色胺），导致毛细血管扩张和通透 性增加。PAF 还可活化炎性白细胞，在迟发相反应中起重要作用。④细胞因子：由活化的致 敏靶细胞新产生，如 IL-4、IL-13 等，可促进 Th2 细胞应答和 B 细胞发生 IgE 类型转换。 三、临床常见疾病 （一）过敏性休克 是Ⅰ型超敏反应中最重要的一组危急症候群。多用于再次注射药物或抗毒素血清后数 秒至数分钟之内发生，若不及时抢救可导致死亡。 1．药物过敏性休克 最常见为青霉素引起的过敏性休克。青霉素本身无免疫原性， 但其降解产物（青霉噻唑醛酸、青霉烯酸等）可与体内蛋白质的氨基或巯基结合成为完全抗 原，刺激机体产生 IgE 抗体，使肥大细胞和嗜碱粒细胞致敏。当再次接触青霉素，即可触发 过敏性休克。少数个体在初次接触青霉素时也可发生过敏性休克，可能是由于曾使用被青霉 素污染的医疗器材或吸入空气中的青霉菌孢子而引起致敏所致
2.血清过敏性休克临床上用动物免疫血清（如破伤风抗血清、白喉抗毒素）进行 治疗或紧急预防时，可能会发生过敏性休克。这是因为这些个体曾经注射相同的血清制品而 被致敏。近年来由于免疫血清的纯化，临床上此类过敏反应己很少见。 (二)呼吸道过敏反应 1.过敏性哮喘是最常见的呼吸道过敏反应，多因吸入花粉、真菌、尘螨、动物皮毛 等变应原后触发的支气管平滑肌痉挛、气道变应性炎症。过敏性哮喘有速发相和迟发相反应 两种类型，前者发生快，消失也快：后者发生慢（急性发作48小时后）、持续时间长，多表 现为典型的气道炎症特征。嗜酸粒细胞及其他炎症细胞释放细胞因子及其他炎症介质，可引 起呼吸道上皮细胞的强烈损伤，加重临床症状。 2.过敏性鼻炎变应原吸入引起鼻黏膜水肿、分泌增加，患者表现为流涕、打喷嚏等。 (三)消化道过敏反应 少数进食鱼、虾、蟹、蛋等食物后引起消化道过敏，表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻等。 此类患者胃肠道蛋白水解酶缺乏，分泌型IgA明显低下，局部黏膜防御功能下降，食物中异 种蛋白不能完全分解而通过黏膜吸收或经损伤的胃肠道黏膜进入机体，未经改造的蛋白是一 种变应原，诱导胃肠道局部过敏反应。 (四)皮肤过敏反应 主要有荨麻疹(urticaria)、和血管性水肿(angioedema),多由摄入某些食物、药物 或肠道内寄生虫感染等引起。 四、免疫学检验 I型超敏反应性疾病的诊断应包括三部分，即详尽的病史、体内试验（包括皮肤试验、 激发试验)和体外试验（血清IgE及特异性IgE的检测、吸入物变应原过筛试验、嗜酸粒细 胞阳离子蛋白检测等)。 (一)、皮肤试验(skin test) 皮肤试验是在皮肤进行的体内免疫学试验，简称皮试。当变应原通过皮肤挑刺、划痕、 皮内注射等途径进入致敏者皮肤时，与吸附在肥大细胞和嗜碱粒细胞上的IgE特异性结合， 导致肥大细胞或嗜碱粒细胞脱颗粒，释放生物活性介质。在20~30分钟内局部皮肤出现红 晕、红斑、风团以及瘙痒感，数小时后消失。出现此现象者判断为皮试阳性，即对变应原过 敏：未出现红晕、红斑、风团者为阴性，即对该变应原不过敏。最常用的部位是前臂曲侧或 上臂伸侧，因这些部位的皮肤较光滑细腻，且便于实验操作与结果观察。 1.试验类型、方法及结果判定
5 2．血清过敏性休克 临床上用动物免疫血清（如破伤风抗血清、白喉抗毒素）进行 治疗或紧急预防时，可能会发生过敏性休克。这是因为这些个体曾经注射相同的血清制品而 被致敏。近年来由于免疫血清的纯化，临床上此类过敏反应已很少见。 （二）呼吸道过敏反应 1．过敏性哮喘 是最常见的呼吸道过敏反应，多因吸入花粉、真菌、尘螨、动物皮毛 等变应原后触发的支气管平滑肌痉挛、气道变应性炎症。过敏性哮喘有速发相和迟发相反应 两种类型，前者发生快，消失也快；后者发生慢（急性发作 48 小时后）、持续时间长，多表 现为典型的气道炎症特征。嗜酸粒细胞及其他炎症细胞释放细胞因子及其他炎症介质，可引 起呼吸道上皮细胞的强烈损伤，加重临床症状。 2．过敏性鼻炎 变应原吸入引起鼻黏膜水肿、分泌增加，患者表现为流涕、打喷嚏等。 （三）消化道过敏反应 少数进食鱼、虾、蟹、蛋等食物后引起消化道过敏，表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻等。 此类患者胃肠道蛋白水解酶缺乏，分泌型 IgA 明显低下，局部黏膜防御功能下降，食物中异 种蛋白不能完全分解而通过黏膜吸收或经损伤的胃肠道黏膜进入机体，未经改造的蛋白是一 种变应原，诱导胃肠道局部过敏反应。 （四）皮肤过敏反应 主要有荨麻疹（urticaria）、和血管性水肿（angioedema），多由摄入某些食物、药物 或肠道内寄生虫感染等引起。 四、免疫学检验 I 型超敏反应性疾病的诊断应包括三部分，即详尽的病史、体内试验（包括皮肤试验、 激发试验）和体外试验（血清 IgE 及特异性 IgE 的检测、吸入物变应原过筛试验、嗜酸粒细 胞阳离子蛋白检测等）。 （一）、皮肤试验（skin test） 皮肤试验是在皮肤进行的体内免疫学试验，简称皮试。当变应原通过皮肤挑刺、划痕、 皮内注射等途径进入致敏者皮肤时，与吸附在肥大细胞和嗜碱粒细胞上的 IgE 特异性结合， 导致肥大细胞或嗜碱粒细胞脱颗粒，释放生物活性介质。在 20～30 分钟内局部皮肤出现红 晕、红斑、风团以及瘙痒感，数小时后消失。出现此现象者判断为皮试阳性，即对变应原过 敏；未出现红晕、红斑、风团者为阴性，即对该变应原不过敏。最常用的部位是前臂曲侧或 上臂伸侧，因这些部位的皮肤较光滑细腻，且便于实验操作与结果观察。 1．试验类型、方法及结果判定
(l)皮内试验(intracutaneous test)：是我国目前应用最广泛的一种试验方法。 将试验用变应原提取液和对照液各0.02l分别用皮试针头注入皮内，使局部形成直径2~ 3mm的圆形皮丘。若同时作多种变应原皮试时，相互间隔应为2.5~5cm(高度可疑敏感的变 应原应选择5cm),以免强烈反应时混淆结果。反应须观察15~20分钟，根据风团、红晕大 小判定结果（见表28-1）。 表28-1 皮内试验的分级标准 分级 风团直径 红晕直径 <5 <5 5~10 10-20 ++ 10~15 20-30 +++ 15-20 30-40 十+十+ 20以上 40以上 注：风团的直径是分级的主要依据，红晕大小仅做参考：风团若有伪足，其结果判定可 向上调一级，但最多为(++)级。 皮内试验应设置阳性及阴性对照。前者可使用0.01mg/ml的磷酸组胺，后者可使用变应 原溶媒或生理盐水。【型超敏反应皮试时可引起全身反应，故注射后应严密观察，一旦发生 严重反应，应及时处理。皮试结果可能与机体的实际情况不符，即出现假阳性或假阴性结果。 出现假阳性的常见原因有①皮试液不纯，含有非特异性刺激物：②患者皮肤反应过强，如患 者皮肤划痕症阳性：③操作者手法较重，注射量较大或浓度过多、注入少量空气等。出现假 阴性的常见原因有①皮试液抗原性低或失效：②患者皮肤反应性差如老年人，或过敏性休克 或哮喘大发作后的一段时间：③皮试前使用过抗组胺药物或免疫抑制剂等。 (2)点刺试验(prick test)：是一种特殊的皮内试验。先将点刺皮试液滴在皮试处 (如前臂曲侧)，然后用点刺针穿过液滴，刺入皮肤，以刺破皮肤而不出血为度，试验即告 完成。15分钟后观察结果。点刺试验用皮试液的浓度应是皮内试验液浓度的10~100倍或 更多，作为阳性对照的磷酸组胺浓度也应相应增加（国内1mg/ml,国外用浓度更高）。 近年来，北欧超敏反应学会标准化委员会（斯堪迪纳维亚）一一The Standerdization Committee of the Northern Society of Allerge(Scandinavia)推荐了一种一次性点刺 针，是用无毒塑料制成的，针尖呈三角形，垂直刺入，操作简单，重复性好，假阳性低，安 全可靠，易于患者接受。该委员会推荐以5mg/ml磷酸组胺（相当于1.8mg/ml组胺基质）作 为阳性对照，并将点刺结果与之比较，按表28-2标准分级记录。 表28-2点刺试验分级标准 6
6 （1）皮内试验（intracutaneous test）: 是我国目前应用最广泛的一种试验方法。 将试验用变应原提取液和对照液各 0.02ml 分别用皮试针头注入皮内，使局部形成直径 2～ 3mm 的圆形皮丘。若同时作多种变应原皮试时，相互间隔应为 2.5～5cm（高度可疑敏感的变 应原应选择 5cm），以免强烈反应时混淆结果。反应须观察 15～20 分钟，根据风团、红晕大 小判定结果（见表 28-1）。 表 28-1 皮内试验的分级标准 分级 风团直径 红晕直径 ― ＜5 ＜5 + 5～10 10～20 ++ 10～15 20～30 +++ 15～20 30～40 ++++ 20 以上 40 以上 注：风团的直径是分级的主要依据，红晕大小仅做参考；风团若有伪足，其结果判定可 向上调一级，但最多为（++++）级。 皮内试验应设置阳性及阴性对照。前者可使用 0.01mg/ml 的磷酸组胺，后者可使用变应 原溶媒或生理盐水。I 型超敏反应皮试时可引起全身反应，故注射后应严密观察，一旦发生 严重反应，应及时处理。皮试结果可能与机体的实际情况不符，即出现假阳性或假阴性结果。 出现假阳性的常见原因有①皮试液不纯，含有非特异性刺激物；②患者皮肤反应过强，如患 者皮肤划痕症阳性；③操作者手法较重，注射量较大或浓度过多、注入少量空气等。出现假 阴性的常见原因有①皮试液抗原性低或失效；②患者皮肤反应性差如老年人，或过敏性休克 或哮喘大发作后的一段时间；③皮试前使用过抗组胺药物或免疫抑制剂等。 （2）点刺试验（prick test）: 是一种特殊的皮内试验。先将点刺皮试液滴在皮试处 （如前臂曲侧），然后用点刺针穿过液滴，刺入皮肤，以刺破皮肤而不出血为度，试验即告 完成。15 分钟后观察结果。点刺试验用皮试液的浓度应是皮内试验液浓度的 10～100 倍或 更多，作为阳性对照的磷酸组胺浓度也应相应增加（国内 1mg/ml,国外用浓度更高）。 近年来，北欧超敏反应学会标准化委员会（斯堪迪纳维亚）——The Standerdization Committee of the Northern Society of Allerge（Scandinavia）推荐了一种一次性点刺 针，是用无毒塑料制成的，针尖呈三角形，垂直刺入，操作简单，重复性好，假阳性低，安 全可靠，易于患者接受。该委员会推荐以 5mg/ml 磷酸组胺（相当于 1.8mg/ml 组胺基质）作 为阳性对照，并将点刺结果与之比较，按表 28-2 标准分级记录。 表 28-2 点刺试验分级标准
级别 点刺结果 ++++ 风团反应大于阳性对照 +++ 风团反应和阳性对照相同 ++ 风团反应为阳性对照的2/3 风团反应为阳性对照的1/3 无风团反应 应该注意的是，皮内试验及点刺试验并非绝对安全。医务人员应严格掌握适应证，仔细 询问病史，若已知对某种物质高度过敏，则不宜再做皮试：身体虚弱、哮喘发作期及不合作 的儿童也不宜做皮试。皮试时应配备常规的抢救药品和设施。 2.应用与评价皮肤试验属于活体内试验，虽然影响因素较多，但能反映机体各种因 素综合作用的实际免疫状况。且操作简便，结果可信度大：这些优点是其他方法难以替代的， 所以在临床和防疫工作中经常应用。 (1)寻找变应原：变应原的检查有着重要的价值。只有发现变应原，才能采取有效 措施避免与之接触，这既有预防意义，也是I型超敏反应疾病治疗的一条基本原则。确定变 应原的常用方法就是各种类型的皮肤试验。如支气管哮喘和荨麻疹等均可用皮肤试验来检 测。对食物过敏者则经询问病史容易发现变应原，一般不必做皮试，而且食物过敏与皮试的 相关性较差，这可能是因为食物的抗原提取液与肠吸收的物质有所不同。 (2)预防药物或疫苗过敏对患者首次注射某批号的青霉素、链霉素、普鲁卡因或其 它易过敏药物之前，必须做皮肤试验。如果患者呈阳性反应或可疑阳性，就应更换其它药物。 注射异种抗血清（如抗破伤风血清、抗狂犬病血清等）前也必须做皮试，如果呈阳性反应就 需换用精制抗体，或进行脱敏治疗（即少量多次注射，使抗原逐渐中和血液中的抗体）。 (二)、激发试验(provoation test) 是模拟自然途径，使变应原进入体内，引起一次轻微的发作，用以确定变应原的试验。 规范的激发试验才是最可靠的特异性诊断方法。由于超敏反应性患者的靶器官存在着高反应 性，所以设立严格的对照试验尤为重要，有时甚至需反复试验才能得到肯定性的结论。由于 激发试验有一定的风险性，且要求有一定的专门设备和技术，故不作为临床常规的检查方法。 只有在非常必要时，在确保安全的前提下方可实施。根据患者发病部位的不同，可以进行不 同器官的激发试验。 1.支气管激发试验 (1)非特异性激发试验试验前先用肺量计测定肺通气功能，常用指标为第一秒用力 呼气量(FEV-1)和肺活量：然后用喷雾器将非特异性刺激剂（如组胺或甲基胆碱）输出
7 级别 点刺结果 ++++ 风团反应大于阳性对照 +++ 风团反应和阳性对照相同 ++ 风团反应为阳性对照的 2/3 + 风团反应为阳性对照的 1/3 ― 无风团反应 应该注意的是，皮内试验及点刺试验并非绝对安全。医务人员应严格掌握适应证，仔细 询问病史，若已知对某种物质高度过敏，则不宜再做皮试；身体虚弱、哮喘发作期及不合作 的儿童也不宜做皮试。皮试时应配备常规的抢救药品和设施。 2．应用与评价 皮肤试验属于活体内试验，虽然影响因素较多，但能反映机体各种因 素综合作用的实际免疫状况。且操作简便，结果可信度大；这些优点是其他方法难以替代的， 所以在临床和防疫工作中经常应用。 （1）寻找变应原： 变应原的检查有着重要的价值。只有发现变应原，才能采取有效 措施避免与之接触，这既有预防意义，也是 I 型超敏反应疾病治疗的一条基本原则。确定变 应原的常用方法就是各种类型的皮肤试验。如支气管哮喘和荨麻疹等均可用皮肤试验来检 测。对食物过敏者则经询问病史容易发现变应原，一般不必做皮试，而且食物过敏与皮试的 相关性较差，这可能是因为食物的抗原提取液与肠吸收的物质有所不同。 （2）预防药物或疫苗过敏 对患者首次注射某批号的青霉素、链霉素、普鲁卡因或其 它易过敏药物之前，必须做皮肤试验。如果患者呈阳性反应或可疑阳性，就应更换其它药物。 注射异种抗血清（如抗破伤风血清、抗狂犬病血清等）前也必须做皮试，如果呈阳性反应就 需换用精制抗体，或进行脱敏治疗（即少量多次注射，使抗原逐渐中和血液中的抗体）。 （二）、激发试验（provoation test） 是模拟自然途径，使变应原进入体内，引起一次轻微的发作，用以确定变应原的试验。 规范的激发试验才是最可靠的特异性诊断方法。由于超敏反应性患者的靶器官存在着高反应 性，所以设立严格的对照试验尤为重要，有时甚至需反复试验才能得到肯定性的结论。由于 激发试验有一定的风险性，且要求有一定的专门设备和技术，故不作为临床常规的检查方法。 只有在非常必要时，在确保安全的前提下方可实施。根据患者发病部位的不同，可以进行不 同器官的激发试验。 1．支气管激发试验 （1）非特异性激发试验 试验前先用肺量计测定肺通气功能，常用指标为第一秒用力 呼气量（FEV-1）和肺活量；然后用喷雾器将非特异性刺激剂（如组胺或甲基胆碱）输出
患者直接经口或用面罩吸入：15~20mn后复查FEV-1。阳性结果的判定标准为：①明显自 觉症状，如胸部紧迫感和喘息等：②肺部闻及哮鸣音：③FEV-1下降20%以上。本试验目的 是测定气道对吸入化学物质的反应性，而非查找变应原。应在常规的变应原激发试验前先做 此测定，以便对患者的气道反应性做到心中有数。如患者的气道反应性反应性甚高，在进行 变应原激发试验时则应特别小心，以免发生危险。 (2)变应原激发试验试验方法与上述基本相同，但吸入的是浓度倍增的变应原溶液。 此法对明确变应原有帮助，但有一定的风险性，必须做好安全防范工作。 (3)应用评价支气管激发试验较皮肤试验的特异性高，与患者的病史、症状和过敏 原吸附试验的相关性较强。常用于了解支气管的反应性、确定支气管哮喘的变应原、检验新 制剂的抗原性、评价平喘药疗效以及观察脱敏治疗的效果等方面。本法的缺点是每次只能测 试一种抗原，要求有一定专门设备和技术，并需取得病人的配合。 2.其他激发试验 (1)鼻黏膜激发试验可经抗原吸入法（粉剂）或滴入法（液体）进行。接触变应原 15~20min后出现黏膜水肿和苍白，病人出现鼻痒、流涕、喷嚏等症状，即可判为阳性反应。 主要用于诊断变应性鼻炎和花粉症。 (2)食物和药物激发试验让患者用少量可疑过敏的食物和药物，观察症状出现的情 况，并建立一定的指标。 (3)结膜激发试验将适当浓度的变应原浸液滴入患者一侧眼结膜，另一侧滴入生理 盐水作对照，15~20min观察结果。试验侧结膜充血、水肿、分泌增加、痒感，甚至出现眼 脸红肿等现象为阳性反应。主要用于眼部变应反应病的变应原检查。 (三)血清IgE的检测 IgE和IgG,(以下只用IgE代表)是介导I型超敏反应的抗体，因此检测血清总IgE和 特异性IgE均有助于对I型超敏反应的诊断和变应原的确定。 1.血清总IgE的测定血清总IgE水平是针对各种抗原的IgE的总和。正常情况下血 清IgE含量很低，仅在ng/ml水平，用常规的免疫扩散法不能测出。因此用于测定IgE的方 法除了需要具备特异性、重复性、准确性和实用性外，更重要的是高灵敏度。 (1)酶联免疫测定法：是目前国内测定血清IgE最常用的方法，常采用双抗体夹心的 模式（详见第章），操作简便、实用，敏感性高，无放射性核素污染，也不需要特殊仪器。 (2)放射免疫吸附试验(radioimmunosorbent test,RIST):多以滤纸为载体，以双抗 体夹心的模式，将抗IgE抗体偶联到经溴化氢活化的滤纸上，使其与待测血清中的IgE和
8 患者直接经口或用面罩吸入；15～20min 后复查 FEV-1。阳性结果的判定标准为：①明显自 觉症状，如胸部紧迫感和喘息等；②肺部闻及哮鸣音；③FEV-1 下降 20%以上。本试验目的 是测定气道对吸入化学物质的反应性，而非查找变应原。应在常规的变应原激发试验前先做 此测定，以便对患者的气道反应性做到心中有数。如患者的气道反应性反应性甚高，在进行 变应原激发试验时则应特别小心，以免发生危险。 （2）变应原激发试验 试验方法与上述基本相同，但吸入的是浓度倍增的变应原溶液。 此法对明确变应原有帮助，但有一定的风险性，必须做好安全防范工作。 （3）应用评价 支气管激发试验较皮肤试验的特异性高，与患者的病史、症状和过敏 原吸附试验的相关性较强。常用于了解支气管的反应性、确定支气管哮喘的变应原、检验新 制剂的抗原性、评价平喘药疗效以及观察脱敏治疗的效果等方面。本法的缺点是每次只能测 试一种抗原，要求有一定专门设备和技术，并需取得病人的配合。 2．其他激发试验 （1）鼻黏膜激发试验 可经抗原吸入法（粉剂）或滴入法（液体）进行。接触变应原 15～20min 后出现黏膜水肿和苍白，病人出现鼻痒、流涕、喷嚏等症状，即可判为阳性反应。 主要用于诊断变应性鼻炎和花粉症。 （2）食物和药物激发试验 让患者用少量可疑过敏的食物和药物，观察症状出现的情 况，并建立一定的指标。 （3）结膜激发试验 将适当浓度的变应原浸液滴入患者一侧眼结膜，另一侧滴入生理 盐水作对照，15～20min 观察结果。试验侧结膜充血、水肿、分泌增加、痒感，甚至出现眼 睑红肿等现象为阳性反应。主要用于眼部变应反应病的变应原检查。 （三）血清 IgE 的检测 IgE 和 IgG4（以下只用 IgE 代表）是介导Ⅰ型超敏反应的抗体，因此检测血清总 IgE 和 特异性 IgE 均有助于对Ⅰ型超敏反应的诊断和变应原的确定。 1．血清总 IgE 的测定 血清总 IgE 水平是针对各种抗原的 IgE 的总和。正常情况下血 清 IgE 含量很低，仅在 ng/ml 水平，用常规的免疫扩散法不能测出。因此用于测定 IgE 的方 法除了需要具备特异性、重复性、准确性和实用性外，更重要的是高灵敏度。 （1）酶联免疫测定法：是目前国内测定血清 IgE 最常用的方法，常采用双抗体夹心的 模式（详见第 章），操作简便、实用，敏感性高，无放射性核素污染，也不需要特殊仪器。 （2）放射免疫吸附试验（radioimmunosorbent test,RIST）：多以滤纸为载体，以双抗 体夹心的模式，将抗 IgE 抗体偶联到经溴化氢活化的滤纸上，使其与待测血清中的 IgE 和
IgE参考标准进行反应，洗涤后加入2I标记的抗人IgE,再经洗涤后测定滤纸片的放射活 性。其测定值与标本中IgE含量呈正相关。该法敏感性高，但须制备放射性核素标记物，有 放射性核素污染和需r计数设备等缺点。 (3)化学发光法：用化学发光物质标记抗IgE,与血清中IgE反应后，通过化学发光 分析仪，计算出血清中IgE含量。此法敏感性、特异性均较好，现临床上应用较多。（原理 见第章) 正常人血清IgE水平受地域环境、种族、遗传、年龄、性别、寄生虫感染及检测方法 等因素影响，各家报道的正常值相差较大。成人血清IgE水平在20~200IU/ml(1IU=2.4ng)。 IgE升高相关的常见疾病有：过敏性哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、药物性间质性肺炎、 支气管肺曲菌病、麻风、某些寄生虫感染以及IgE型骨髓瘤等。必须明确的是，总IgE高不 一定是超敏反应，而过敏者总IgE也不一定升高，这一点在评价总IgE的结果时非常重要。 2.特异性IgE测定特异性IgE(Specific IgE,sIgE)是指能与某种变应原特异性结 合的IgE。需用纯化的变应原去检测相应的IgE抗体，是体外确定变应原的重要方法。 (1)放射性变应原吸附试验(radioallegosorbent test,RAST):是l967年由Wide 建立的一种放射免疫分析法。将纯化的变应原吸附于固相载体上，加入待测血清及参考标准 品，再与放射性核素I标记的抗Ig抗体反应，最后测定固相的放射活性。放射性强度越 高，表示sIgE含量愈高。RAST检测sIgE特异性高，影响因素少，与皮肤试验和支气管激 发试验符合率高，且安全。但同样存在放射性核素的污染的缺点，待测标本中有相同特异性 IgG时对结果有干扰，应予注意。 (2)酶联免疫测定法：测试原理与步骤与RAST相同，只是将放射性核素标记的抗IgE 改为酶标记抗IgE,再加入底物，利用酶催化底物显色来判断结果。操作简便、无同位素污 染，国内应用较多。 (3)CAP变应原检测系统(CAP system):是近年来瑞典Pharmacia公司推出的一种根 据RAST原理设计的新型全自动检测血清特异性IgE的荧光固相免疫检测系统。其载体为 CAP,所谓“CAP”,是一个很小的塑料帽状物，其内置有纤维素粒（图28-3）。由于此粒具 有多孔性、弹性和亲水性，增加了与变应原接触的表面积，可吸附更多的变应原。只结合一 种变应原的称为“单价变应原CP”,同时结合了几种性质相似变应原的称为“多价变应原 CAP”。检测时在吸附有特异性变应原的CAP上，先加入待测血清和不同浓度的IgE标准品， 经一定时间温育和冲洗，加入B-半乳糖苷酶标记的抗人IgE,使之与固定在CAP上的IgE 结合。此酶作用于随后加入的底物4-甲基伞形酮-B-半乳糖苷(4-methylumbel1 iferryl- 9
9 IgE 参考标准进行反应，洗涤后加入 125I 标记的抗人 IgE，再经洗涤后测定滤纸片的放射活 性。其测定值与标本中 IgE 含量呈正相关。该法敏感性高，但须制备放射性核素标记物，有 放射性核素污染和需 r 计数设备等缺点。 （3）化学发光法：用化学发光物质标记抗 IgE，与血清中 IgE 反应后，通过化学发光 分析仪，计算出血清中 IgE 含量。此法敏感性、特异性均较好，现临床上应用较多。（原理 见第 章） 正常人血清 IgE 水平受地域环境、种族、遗传、年龄、性别、寄生虫感染及检测方法 等因素影响，各家报道的正常值相差较大。成人血清 IgE 水平在 20～200IU/ml（1IU=2.4ng）。 IgE 升高相关的常见疾病有：过敏性哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、药物性间质性肺炎、 支气管肺曲菌病、麻风、某些寄生虫感染以及 IgE 型骨髓瘤等。必须明确的是，总 IgE 高不 一定是超敏反应，而过敏者总 IgE 也不一定升高，这一点在评价总 IgE 的结果时非常重要。 2．特异性 IgE 测定 特异性 IgE（Specific IgE,sIgE）是指能与某种变应原特异性结 合的 IgE。需用纯化的变应原去检测相应的 IgE 抗体，是体外确定变应原的重要方法。 （1）放射性变应原吸附试验（radioallegosorbent test，RAST）：是 1967 年由 Wide 建立的一种放射免疫分析法。将纯化的变应原吸附于固相载体上，加入待测血清及参考标准 品，再与放射性核素 125I 标记的抗 IgE 抗体反应，最后测定固相的放射活性。放射性强度越 高，表示 sIgE 含量愈高。RAST 检测 sIgE 特异性高，影响因素少，与皮肤试验和支气管激 发试验符合率高，且安全。但同样存在放射性核素的污染的缺点，待测标本中有相同特异性 IgG 时对结果有干扰，应予注意。 （2）酶联免疫测定法：测试原理与步骤与 RAST 相同，只是将放射性核素标记的抗 IgE 改为酶标记抗 IgE，再加入底物，利用酶催化底物显色来判断结果。操作简便、无同位素污 染，国内应用较多。 （3）CAP 变应原检测系统（CAP system）：是近年来瑞典 Pharmacia 公司推出的一种根 据 RAST 原理设计的新型全自动检测血清特异性 IgE 的荧光固相免疫检测系统。其载体为 CAP，所谓“CAP”，是一个很小的塑料帽状物，其内置有纤维素粒（图 28-3 ）。由于此粒具 有多孔性、弹性和亲水性，增加了与变应原接触的表面积，可吸附更多的变应原。只结合一 种变应原的称为“单价变应原 CAP”，同时结合了几种性质相似变应原的称为“多价变应原 CAP”。检测时在吸附有特异性变应原的 CAP 上，先加入待测血清和不同浓度的 IgE 标准品， 经一定时间温育和冲洗，加入β-半乳糖苷酶标记的抗人 IgE，使之与固定在 CAP 上的 IgE 结合。此酶作用于随后加入的底物 4-甲基伞形酮-β-半乳糖苷（4-methylumbelliferryl-
B-galactoside)使之产生荧光。用荧光分光光度计读取吸光值。荧光强度与sIgE呈线形 关系。据此可绘出标准曲线，得出待测血清中sIgE的量。该法有计算机软件可全自动控制 整个检测步骤，简便、快速，有较高的敏感性和可信性。 特异性IgE的测定对I型超敏反应疾病的诊断有重要价值，也是体外检测变应原的重 要手段。随着sIgE测定技术的完善，此项测定日趋商品化，有各种检测系统，如CAP system 等。这些检测系统不仅包括了仪器、试剂等，有的还提供处理数据的计算机软件，可快捷准 确地为患者服务。但应注意的是，变应原有明确的地域性，我国使用的变应原多系进口产品， 而生产国的变应原与我国的变应原不一定完全符合。 图28-3CAP的外形 (四)吸入物变应原过筛试验(Phadiatop) I型超敏反应性疾病特别是呼吸道变态反应疾病在临床工作中占有相当大的比重，有些 病很难从临床上区别是否过敏。血清总IgE作为超敏反应疾病过筛试验曾得到广泛应用，但 正如前面所说的，总IgE高并不一定是过敏，过敏者的总IgE水平也不一定高，过敏与否主 要取决于sIgE的存在。Phadiatop是根据变应原吸附原理，将空气中95%以上的气传变应原 吸附到1个CAP上，患者血清中只要有针对这些变应原其中之一的sIgE,即可呈阳性反应。 Phadiatop的实验方法与CAP变应原检测系统基本相同，所不同的是试验所用的不是单价或 多价CAP,而是特制的Sample CAP,内含多种吸入物变应原。Phadiatop的结果可视为多种 sIgE的总和，是一种很好的过筛试验。Phadiatop阳性只能说明过敏，但对何种变应原过敏 仍需进一步检查。 (五)相关细胞及其它因素测定 1.嗜酸粒细胞计数及涂片检查嗜酸粒细胞是【型超敏反应中重要的炎症细胞，在炎 症介质和细胞因子的作用下，嗜酸粒细胞和血管内皮细胞表面的粘附因子表达增加，嗜酸粒 细胞和血管内皮细胞粘附，继而跨内皮迁移和在病灶部位浸润。因此，外周血嗜酸粒细胞计 数及分泌物中的嗜酸粒细胞涂片检查有重要的辅助诊断意义。 外周血嗜酸粒细胞计数可用白细胞分类计数法或用直接计数法。目前多用后者。嗜酸粒 细胞胞浆中富含嗜酸性颗粒，颗粒内富含碱性氨基酸和碱性蛋白，等电点为p11,易与阴 离子染料结合而着色，故常用2%伊红-丙酮染色液。该染液为低渗溶液，可溶解红细胞和其 他白细胞，增加背景的清晰度，使嗜酸粒细胞易于区别。正常参考值为(0.05~0.5)× 1010g/L。 10
10 β-galactoside）使之产生荧光。用荧光分光光度计读取吸光值。荧光强度与 sIgE 呈线形 关系。据此可绘出标准曲线，得出待测血清中 sIgE 的量。该法有计算机软件可全自动控制 整个检测步骤，简便、快速，有较高的敏感性和可信性。 特异性 IgE 的测定对Ⅰ型超敏反应疾病的诊断有重要价值，也是体外检测变应原的重 要手段。随着 sIgE 测定技术的完善，此项测定日趋商品化，有各种检测系统，如 CAP system 等。这些检测系统不仅包括了仪器、试剂等，有的还提供处理数据的计算机软件，可快捷准 确地为患者服务。但应注意的是，变应原有明确的地域性，我国使用的变应原多系进口产品， 而生产国的变应原与我国的变应原不一定完全符合。 （四）吸入物变应原过筛试验（Phadiatop） Ⅰ型超敏反应性疾病特别是呼吸道变态反应疾病在临床工作中占有相当大的比重，有些 病很难从临床上区别是否过敏。血清总 IgE 作为超敏反应疾病过筛试验曾得到广泛应用，但 正如前面所说的，总 IgE 高并不一定是过敏，过敏者的总 IgE 水平也不一定高，过敏与否主 要取决于 sIgE 的存在。Phadiatop 是根据变应原吸附原理，将空气中 95%以上的气传变应原 吸附到 1 个 CAP 上，患者血清中只要有针对这些变应原其中之一的 sIgE，即可呈阳性反应。 Phadiatop 的实验方法与 CAP 变应原检测系统基本相同，所不同的是试验所用的不是单价或 多价 CAP，而是特制的 Sample CAP，内含多种吸入物变应原。Phadiatop 的结果可视为多种 sIgE 的总和，是一种很好的过筛试验。Phadiatop 阳性只能说明过敏，但对何种变应原过敏 仍需进一步检查。 （五）相关细胞及其它因素测定 1．嗜酸粒细胞计数及涂片检查 嗜酸粒细胞是Ⅰ型超敏反应中重要的炎症细胞，在炎 症介质和细胞因子的作用下，嗜酸粒细胞和血管内皮细胞表面的粘附因子表达增加，嗜酸粒 细胞和血管内皮细胞粘附，继而跨内皮迁移和在病灶部位浸润。因此，外周血嗜酸粒细胞计 数及分泌物中的嗜酸粒细胞涂片检查有重要的辅助诊断意义。 外周血嗜酸粒细胞计数可用白细胞分类计数法或用直接计数法。目前多用后者。嗜酸粒 细胞胞浆中富含嗜酸性颗粒，颗粒内富含碱性氨基酸和碱性蛋白，等电点为 pH11，易与阴 离子染料结合而着色，故常用 2%伊红-丙酮染色液。该染液为低渗溶液，可溶解红细胞和其 他白细胞，增加背景的清晰度，使嗜酸粒细胞易于区别。正常参考值为（0.05～0.5）× 1010g/L。 图 28-3 CAP 的外形