绕管
教学目标 说出平面色谱中定性参数R及R,、相平衡 参数K及k、面效参数n及H、分离参数R 及SN的概念。 简述吸附剂种类及影响活度因素。 简述选择展开剂的一般原则 详述薄层色谱的操作方法和定性定量方 法。 详述纸色谱法的分离原理和实验方法
教学目标 说出平面色谱中定性参数Rf及Rr、相平衡 参数K及k、面效参数n及H、分离参数R 及SN的概念。 简述吸附剂种类及影响活度因素。 简述选择展开剂的一般原则。 详述薄层色谱的操作方法和定性定量方 法。 详述纸色谱法的分离原理和实验方法
平面色谱方法示意 层祈装置与操作过程Aa 点样 展开 R值
平面色谱方法示意
平面色谱法参数一定性参数 原点至斑点中心的距离 R原点至溶剂前沿的距离 02~0.8,0.3~0.5为宜 原点至试样组份斑点中心的距离 R 原点至参考物质斑点中心的距离 R与R值的测量示意图
a b c 原点至斑点中心的距离 原点至溶剂前沿的距离 Rf= 原点至试样组份斑点中心的距离 Rr = 原点至参考物质斑点中心的距离 Rf与Rr值的测量示意图 平面色谱法参数－定性参数 a c = b c = 0.2~0.8, 0.3~0.5为宜
平面色谱法参数一相平衡参数 R 1+k1+KV。/Vn k,K增大,R减小。 口Rr1,k=0;R产0,k=
平面色谱法参数－相平衡参数 k，K增大，Rf 减小。 Rf=1 , k=0; Rf=0 , k=∞ s m f k KV V R 1 / 1 1 1 + = + =
平面色谱法参数一面效参数 n=16(L/W)2H=L0/n L:原点到斑点中心的距离 0:原点到溶剂前沿的距离 W:组分斑点的纵向宽度 影响因素:固定相的粒度、均匀度、活度、 展开剂的流速、展开方式等
平面色谱法参数－面效参数 2 n =16(L/W) L：原点到斑点中心的距离 L0：原点到溶剂前沿的距离 W：组分斑点的纵向宽度 影响因素：固定相的粒度、均匀度、活度、 展开剂的流速、展开方式等。 H = L0 / n
平面色谱法参数一分离参数 分离度:R=2(L2-L)(W+W2) =2d/(W+W2) R>1为宜 分离数(SN):在相邻斑点分离度为1.17 时,在R=0和R+=1两种组分斑点之间能 容纳的色谱斑点数。经典薄层板的分离数 为7~10,高效薄层板的分离数为10~20
平面色谱法参数－分离参数 R>1为宜 2 /( ) 2( )/( ) 1 2 2 1 1 2 d W W R L L W W = + 分离度： = − + 分离数（SN）：在相邻斑点分离度为1.117 时，在Rf ＝0和Rf ＝1两种组分斑点之间能 容纳的色谱斑点数。经典薄层板的分离数 为7~10，高效薄层板的分离数为10~20
薄层色谱法示意图 层析缸 薄层板 展开剂
层析缸 薄层板 展开剂 薄层色谱法示意图
薄层色谱法特点 分离效能高,展开时间短。 灵敏度高,可检出微克至几十纳克的物 质 仪器简单,操作方便 试样预处理简单。 自动化程度低,重现性较差,定量分析 准确度与精密度较低
薄层色谱法特点 分离效能高，展开时间短。 灵敏度高，可检出微克至几十纳克的物 质。 仪器简单，操作方便。 试样预处理简单。 自动化程度低，重现性较差，定量分析 准确度与精密度较低
薄层色谱吸附剂 活性活性分离效率分离 点位级别影响因素对象 含水量t粒度,有机酸 硅胶硅醇基/活性!粒度分布氨基酸 (使用前↓,分离萜类 活化!)效率↑甾体 氨基酸、 氧化铝铝羟基同上同上挥发 酸性色 萜类、甾 体;生物 碱等
薄层色谱吸附剂 活性 点位 活性 级别 分离效率 影响因素 分离 对象 硅胶 硅醇基 含水量↑ 活性↓ （使用前 活化！） 粒度↓ ， 粒度分布 ↓ ，分离 效率↑ 有机酸 氨基酸 萜类 甾体 氧化铝 铝羟基 同上 同上 氨基酸、 酸性色素; 挥发油、 萜类、甾 体；生物 碱等