第十七章色谱分析法概论
第十七章 色谱分析法概论
教学目标 今掌握色谱法的定义和分类。 ◇掌握色谱法的重要基本概念:分配系数、容量因 子、保留时间、保留体积、死时间、死体积、峰 宽、半峰宽、分离度、保留指数等及其相互关系。 熟悉四种色谱方法的基本原理和两相的特点。 掌握塔板理论的要点及塔板数、塔板髙的计算。 掌握速率理论的要点,熟悉 Van deemter方程 各项意义及影响因素
教学目标 ❖掌握色谱法的定义和分类。 ❖掌握色谱法的重要基本概念:分配系数、容量因 子、保留时间、保留体积、死时间、死体积、峰 宽、半峰宽、分离度、保留指数等及其相互关系。 ❖熟悉四种色谱方法的基本原理和两相的特点。 ❖掌握塔板理论的要点及塔板数、塔板高的计算。 ❖掌握速率理论的要点,熟悉Van Deemter方程 各项意义及影响因素
naab 流动相 叶绿素的分离
流动相
色谱分析法( chromatography) 物理或物理化学分离分析方法,简称色谱法 或层析法。 ☆色谱法已广泛应用于各个领域,成为多组分 混和物的最重要的分析方法。是生命科学、 材料科学、环境科学等领域的重要分析手段, 在药物分析中有及其重要的地位。各国药典 都收载了许多色谱分析方法。 今髙灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快 及应用范围广等优点
色谱分析法(chromatography) ❖物理或物理化学分离分析方法,简称色谱法 或层析法。 ❖色谱法已广泛应用于各个领域,成为多组分 混和物的最重要的分析方法。是生命科学、 材料科学、环境科学等领域的重要分析手段, 在药物分析中有及其重要的地位。各国药典 都收载了许多色谱分析方法。 ❖高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快 及应用范围广等优点
色谱法的分类 1按流动相和固定相分子聚集状态分类 气相色谱:气固色谱(Gsc (GC)气液色谱(GLc) 液相色谱:液固色谱(Lsc (Lc)液液色谱(LLC) 超临界流体色谱法 (SFC)
色谱法的分类 1.按流动相和固定相分子聚集状态分类 气相色谱: 气固色谱(GSC) (GC) 气液色谱(GLC) 液相色谱: 液固色谱(LSC) (LC) 液液色谱(LLC) 超临界流体色谱法 (SFC)
色谱法的分类 2.按操作形式分类 柱色谱法( column chromatography) 填充柱色谱法 毛细管柱色谱法 微填充柱色谱法 平面色谱法( plane chromatography) 纸色谱法 薄层色谱法 薄膜色谱法 毛细管电泳法 (capillary electrophoresis)
色谱法的分类 2.按操作形式分类 柱色谱法(column chromatography) 填充柱色谱法 毛细管柱色谱法 微填充柱色谱法 平面色谱法(plane chromatography) 纸色谱法 薄层色谱法 薄膜色谱法 毛细管电泳法 (capillary electrophoresis)
色谱法的分类 3按分离机制分类 分配色谱法 (patition chromatography) 吸附色谱法 (adsorption chromatography) 离子交换色谱法 Gion exchange chromatography) 空间排阻色谱法 (steric exclusion chromatography)
色谱法的分类 3.按分离机制分类 分配色谱法 (patition chromatography) 吸附色谱法 (adsorption chromatography) 离子交换色谱法 (ion exchange chromatography) 空间排阻色谱法 (steric exclusion chromatography)
色谱过程 样品组分在两相 之间反复“分配” 各组分保留 时间不同, 样品各组分的 得以分离。 分配系数不同
色谱过程 样品组分在两相 之间反复“分配” 样品各组分的 分配系数不同 各组分保留 时间不同, 得以分离
naab 时间 色谱流出曲线及参数
分配系数和容量因子 1.分配系数: KC./C 与组分、固定性和流动相的性质及温度有关。 2.容量因子: k=mymn=CV√CmVm 还与固定性、流动相的体积有关。 3.分配系数与容量因子的关系: K=/V
分配系数和容量因子 1.分配系数: K=Cs / Cm 与组分、固定性和流动相的性质及温度有关。 2.容量因子: k=ms /mm= CsVs /CmVm 还与固定性、流动相的体积有关。 3.分配系数与容量因子的关系: k= K Vs /Vm