第四章真核细胞的基因表 达调控 第一节真核细胞基因表达的调控 第二节哺乳动物细胞表达系统的选择 标记基因 第三节真核细胞表达系统的载体种类
第四章 真核细胞的基因表 达调控 • 第一节 真核细胞基因表达的调控 • 第二节 哺乳动物细胞表达系统的选择 标记基因 • 第三节 真核细胞表达系统的载体种类
第二节哺乳动物细胞表达 系统的选择标记基因 胸苷激酶基因选择标记(定义 二、二氢叶酸还原酶基因选择标记 三、新霉素抗性基因选择标记 四、氯霉素已酰转移酶基因选择标记 五、黄嘌呤-鸟嘌呤转移酶( XGPRT)基 因
第二节 哺乳动物细胞表达 系统的选择标记基因 • 一、胸苷激酶基因选择标记(定义) • 二、二氢叶酸还原酶基因选择标记 • 三、新霉素抗性基因选择标记 • 四、氯霉素已酰转移酶基因选择标记 • 五、黄嘌呤-鸟嘌呤转移酶(XGPRT)基 因
真核生物基因表达的特点 及优势 1.细胞的全能性 2转录和翻译分开进行 3.有相当大的非编码区(调控序列) 4有三种不同RNA聚合酶参与转录 5.初级转录产物能进行剪接加工修饰 6不存在操纵子结构 7.基因多拷贝,功能基因分散在不同区域,分 别转录
一、 真核生物基因表达的特点 及优势 • 1.细胞的全能性 • 2.转录和翻译分开进行 • 3.有相当大的非编码区(调控序列) • 4.有三种不同RNA聚合酶参与转录 • 5.初级转录产物能进行剪接加工修饰 • 6.不存在操纵子结构 • 7.基因多拷贝,功能基因分散在不同区域,分 别转录
真核细胞表达及调控元件 (一)真核生物基因转录水平的调控 (二)转录后水平的调控 三)翻译水平的调控
二、真核细胞表达及调控元件 • (一)真核生物基因转录水平的调控 • (二)转录后水平的调控 • (三)翻译水平的调控
胸苷激酶 °胸腺嘧啶核苷激酶简称胸苷激酶 ( thymidine Kinase,K)在所有真核细胞 中都有表达,是嘧啶生物合成补救代谢途 径中的一个关键酶,它可催化胸苷磷酸化 转变成为dTMP,继续磷酸化生成dTTP,参 与DNA的生物合成
胸苷激酶 • 胸腺嘧啶核苷激酶简称胸苷激酶 (thymidine Kinase,TK)在所有真核细胞 中都有表达, 是嘧啶生物合成补救代谢途 径中的一个关键酶, 它可催化胸苷磷酸化 转变成为dTMP, 继续磷酸化生成dTTP, 参 与DNA的生物合成
载体的类型 1质粒型载体 2.病毒载体 3整合型表达载体 4游离型表达载体 ·5瞬时表达载体 6稳定性表达载体 7非复制性HSV-Ⅰ病毒(单纯疱疹病毒HSV-Ⅰ 型)载体 8.裂解性HSV-Ⅰ病毒载体
一、载体的类型 • 1.质粒型载体 • 2.病毒载体 • 3.整合型表达载体 • 4.游离型表达载体 • 5.瞬时表达载体 • 6.稳定性表达载体 • 7.非复制性HSV-Ⅰ病毒(单纯疱疹病毒HSV-Ⅰ 型)载体 • 8.裂解性HSV-Ⅰ病毒载体