安徽农业大学学报,2016,43(6):961-966 Journal of Anhui Agricultural University DO10.13610jcnk1672-352x20161205016网络出版时间:2016/12/510:0900 IuRl]hTtp://www.cnki.net/kcms/detail/34.1162.s.20161205.1009.032.html 不同微生物菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响 彭宇!,郭亚丽,马莹1,刘锦华1,丁婷2,齐永霞2,李章海3 (1.贵州省烟草公司黔西南州烟草公司,兴义5630002.安徽农业大学植物保护学院,合肥230036: 3.中国科学技术大学烟草与健康研究中心,合肥230052) 摘要:以4种微生物菌剂为材料,比较4种菌剂的有效活菌数、纤维素酶活以及中性蛋白酶活:并以甘蔗渣 为主要原料,添加合适比例牛粪进行高温堆肥试验,研究甘蔗渣有机肥中加λ4种微生物菌剂后的有机质、总养分、 酸碱度、速效氮、腐殖酸等营养指标,以及微生物菌群数量和蛔虫卵死亡率等变化。结果袤明,4种微生物菌剂中 微生物菌剂B不仅有效活菌数达到国标中有效活菌数(cfu)≥0.5亿·g的要求,且其纤维素酶和中性蛋白酶活 力较强:添加微生物菌剂B的甘蔗渣有机肥发酵后,其有杋肥中的各营养指标以及有斂活菌数均明显增加,蛔虫 卵死亡率为95.13%,大肠菌群数量为85个g!。研究结果表明微生物菌剂B可在实际生产中推广应用。 关键词:微生物菌剂:甘蔗渣有机肥;发酵质量 中图分类号:S144 文献标识码:A 文章编号:1672-352X(201606-0961-06 Effect of four microbial agents on the quality of sugarcane residue organic fertilizer (1. Southwest Prefecture Tobacco Company of Guizhou Province, Xingyi 5630 xia2 LI Zhanghai PENG Yu, GUO Yali, MA Ying, LIU Jinhua, DING Ting, QI Yong 2. School of Plant Protection, Anhui Agricultural University, Hefei 230036; 3. Center of Tobacco and Healthy research, University of Science and Technology of China, Hefei 230052) Abstract: In the study, the effective living microorganisms, cellulase activity and neutral protease activity of four microbial agents were detected and compared. Then high temperature composting experiments were con- ducted using mixture of sugarcane residue and shard waste to study the effects of four microbial agents on the quality of sugarcane residue organic fertilizer. The content changes of organic matter, total nutrient, pH, available nitrogen, humic acid, the numbers of microorganisms and ascaris eggs were determined. The results indicated that the effective living microorganisms of microbial agent B reached the GB standard, the activities of cellulase and neutral protease of microbial agent B were stronger than the others, and adding microbial agent B could increase the contents of the above nutritional indicators and the numbers of microorganisms. Moreover The mortality rate of ascaris eggs and the number of Escherichia coli of treatment which was added to microbial agent B were 95. 13% and 85 g respectively. The results afforded scientific basis for application of microbial agent B Key words: microbial agents; sugarcane residue organic fertilizer; fermentation quality 作物秸秆是重要的可再生资源,但每到收获季保护亟待解决的问题。 节,我国各地大量作物秸秆却因不能被及时、有效 微生物菌剂作为一种重要的秸秆促腐产品,能 地处理,导致秸秆焚烧现象严重,这不仅造成了资够有效地分解、腐熟有机物料,使有机物料转化成 源的浪费,而且严重污染了环境3。此外,伴随着有机肥。研究表明,接种微生物菌剂可使堆肥发酵 中国畜禽养殖业的发展,畜禽粪便已成为重要的农提前达到高温期,提高发酵温度,缩短堆肥腐熟时 业废弃物和环境污染源。因此,合理有效地利用作间,而发酵过程中产生的高温还可以杀死秸秆堆料 物秸秆和畜禽粪便,已成为农业可持续发展和环境中的病原菌、虫卵、杂草种子等,并有利于堆肥的 收稿日期:201605-11 基金项目:甘蔗渣自制有机肥生产工艺研究(合同号:201411)资助。 作者简介:彭宇,农艺师。E-mal:pengyu2l5amsn.com 通信作者:丁婷,博士,副教授。E-mail:dongting98@126.com
收稿日期: 2016-05-11 基金项目: 甘蔗渣自制有机肥生产工艺研究（合同号：201411）资助。 作者简介: 彭 宇，农艺师。E-mail：pengyu215@msn.com * 通信作者: 丁 婷，博士，副教授。E-mail：dingting98@126.com 安徽农业大学学报, 2016, 43(6): 961-966 Journal of Anhui Agricultural University [DOI] 10.13610/j.cnki.1672-352x.20161205.016 网络出版时间：2016/12/5 10:09:00 [URL] http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1162.S.20161205.1009.032.html 不同微生物菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响 彭 宇 1 ，郭亚丽 1 ，马 莹 1 ，刘锦华 1 ，丁 婷 2*，齐永霞 2 ，李章海 3 (1. 贵州省烟草公司黔西南州烟草公司，兴义 563000；2. 安徽农业大学植物保护学院，合肥 230036； 3. 中国科学技术大学烟草与健康研究中心，合肥 230052) 摘 要：以 4 种微生物菌剂为材料，比较 4 种菌剂的有效活菌数、纤维素酶活以及中性蛋白酶活；并以甘蔗渣 为主要原料，添加合适比例牛粪进行高温堆肥试验，研究甘蔗渣有机肥中加入 4 种微生物菌剂后的有机质、总养分、 酸碱度、速效氮、腐殖酸等营养指标，以及微生物菌群数量和蛔虫卵死亡率等变化。结果表明，4 种微生物菌剂中， 微生物菌剂 B 不仅有效活菌数达到国标中有效活菌数（cfu）≥0.5 亿·g-1 的要求，且其纤维素酶和中性蛋白酶活 力较强；添加微生物菌剂 B 的甘蔗渣有机肥发酵后，其有机肥中的各营养指标以及有效活菌数均明显增加，蛔虫 卵死亡率为 95.13%，大肠菌群数量为 85 个·g-1。研究结果表明微生物菌剂 B 可在实际生产中推广应用。 关键词：微生物菌剂；甘蔗渣有机肥；发酵质量 中图分类号：S144 文献标识码：A 文章编号：1672352X (2016)06096106 Effect of four microbial agents on the quality of sugarcane residue organic fertilizer PENG Yu1 , GUO Yali1 , MA Ying1 , LIU Jinhua1 , DING Ting2 , QI Yongxia2 , LI Zhanghai3 (1. Southwest Prefecture Tobacco Company of Guizhou Province, Xingyi 563000; 2. School of Plant Protection, Anhui Agricultural University, Hefei 230036; 3. Center of Tobacco and Healthy Research, University of Science and Technology of China, Hefei 230052) Abstract: In the study, the effective living microorganisms, cellulase activity and neutral protease activity of four microbial agents were detected and compared. Then high temperature composting experiments were conducted using mixture of sugarcane residue and shard waste to study the effects of four microbial agents on the quality of sugarcane residue organic fertilizer. The content changes of organic matter, total nutrient, pH, available nitrogen, humic acid, the numbers of microorganisms and ascaris eggs were determined. The results indicated that the effective living microorganisms of microbial agent B reached the GB standard, the activities of cellulase and neutral protease of microbial agent B were stronger than the others, and adding microbial agent B could increase the contents of the above nutritional indicators and the numbers of microorganisms. Moreover.The mortality rate of ascaris eggs and the number of Escherichia coli of treatment which was added to microbial agent B were 95.13% and 85·g-1 respectively. The results afforded scientific basis for application of microbial agent B. Key words: microbial agents; sugarcane residue organic fertilizer; fermentation quality 作物秸秆是重要的可再生资源，但每到收获季 节，我国各地大量作物秸秆却因不能被及时、有效 地处理，导致秸秆焚烧现象严重，这不仅造成了资 源的浪费，而且严重污染了环境[1-3]。此外，伴随着 中国畜禽养殖业的发展，畜禽粪便已成为重要的农 业废弃物和环境污染源。因此，合理有效地利用作 物秸秆和畜禽粪便，已成为农业可持续发展和环境 保护亟待解决的问题。 微生物菌剂作为一种重要的秸秆促腐产品，能 够有效地分解、腐熟有机物料，使有机物料转化成 有机肥。研究表明，接种微生物菌剂可使堆肥发酵 提前达到高温期，提高发酵温度，缩短堆肥腐熟时 间，而发酵过程中产生的高温还可以杀死秸秆堆料 中的病原菌、虫卵、杂草种子等，并有利于堆肥的
安徽农业大学学报 2016年 腐熟及各类物质之间相互转化,提高堆肥肥效6。有机肥工场进行。采用条垛型有机肥发酵技术进行 本试验在测定4种微生物菌剂有效活菌数、纤发酵,堆垛下底宽2m,上底宽1m,堆高0.9 维素酶和蛋白酶活性的基础上,研究了4种微生物长度5m,堆垛底部设置30cm宽,20cm深的通风 菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响,以期探讨适槽,甘蔗渣与牛粪按25:23:20:17:15比例分5 宜甘蔗渣有机肥发酵的最佳微生物菌剂。 层堆积,在每层甘蔗渣上按上述比例洒上尿素和微 1材料与方法 生物菌剂。各处理物料水分控制在70%左右。分别 于堆制后10、20、30和结束前20d(添加菜籽粉 1.1供试微生物菌剂 350kg)翻堆4次。 试验中采用的4种微生物菌剂均为固体菌剂, 试验共设5个处理:1号处理为空白对照,不 分别简称为菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D 添加任何有机物料腐熟剂;2号处理添加菌剂A:3 1.2培养基 号处理添加菌剂B:4号处理添加菌剂C:5号处理 PDA培养基:去皮马铃薯200g,琼脂15g,添加菌剂D。具体试验设计方案参见表1 葡萄糖20g,水1000mnL 14取样方法 NA培养基:牛肉膏30g,NaCl50g,蛋白在第4次翻堆时取堆肥样品用于检测堆肥样品 胨100g,琼脂15-20g,水1000mL,pH72-75。的养分、腐殖酸含量、微生物数量等。取样时从堆 马丁氏(Mri)培养基:葡萄糖100g,磷垛前中后(按条垛长度从中间和距两端1/4处垂直挖 酸二氢钾(KHPO4)10g,硫酸镁(MgSO47H2O)开剖面)和上中下(按条垛高度从中间和距上下端 0.5g,蛋白胨50g,1%孟加拉红水溶液33mL,1/4处水平位置各取样05kg)取样拌匀后,用四分 琼脂15~20g,蒸馏水1000mL,氯霉素 法取样2份,每份0.5kg 13试验设计 .5供试菌剂有效活菌数测定 试验于2014年3月至5月在贵州省兴义市敬南 采用稀释分离法,具体步骤参见文献([8] 表1甘蔗渣有机肥试验设计方案 Table 1 The experiment design of the sugarcane residue composting 甘蔗渣用量/k 牛粪用量/kg 菌剂用量/g Dosage of Treatment Dosage of sugarcane residue cow dung microbal agent L CK 2添加菌剂A Added with microbial agent A 3.添加菌剂B 1300 Added with microbial agent B 4添加菌剂C Added with microbial agent C 1300 5添加菌剂D Added with microbial agent D 900 1300 100 1.6纤维素酶和蛋白酶活性测定 1.8堆肥样品腐殖酸含量检测 纤维素酶酶活力测定参照文献[9-10],蛋白酶活 总腐殖酸采用碱性焦磷酸钠浸提-重铬酸钾容 性测定参照文献[l 量法;游离腐殖酸采用氢氧化钠浸提-重铬酸钾容量 1.7堆肥样品养分的测定 法:水溶性殖酸采用水浸提-重铬酸钾容量法。 堆肥样品中有机质测定采用重铬酸钾比色法12:1.9堆肥样品可培养微生物计数 全氮采用硫酸过氧化氢消解,蒸馏滴定法12;全磷 不同微生物菌剂处理的堆体中真菌总数、细菌 采用硫酸过氧化氢消解,钒钼黄比色法;全钾采总数和霉菌总数的测定采用稀释平板测数法,混 用硫酸-过氧化氢消解,火焰光度法;速效氮采用菌接种培养。细菌培养24h后计数,真菌、霉菌培 氯化钠浸提,锌-硫酸亚铁还原蒸馏法;铵态氮采用养7h后计数。以出现20~300个菌落数的稀释度 氯化钠浸提,扩散法;pH.用电位法测定 的平板为计数标准,统计有效活菌数
962 安 徽 农 业 大 学 学 报 2016 年 腐熟及各类物质之间相互转化，提高堆肥肥效[4-6]。 本试验在测定 4 种微生物菌剂有效活菌数、纤 维素酶和蛋白酶活性的基础上，研究了 4 种微生物 菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响，以期探讨适 宜甘蔗渣有机肥发酵的最佳微生物菌剂。 1 材料与方法 1.1 供试微生物菌剂 试验中采用的 4 种微生物菌剂均为固体菌剂， 分别简称为菌剂 A、菌剂 B、菌剂 C 和菌剂 D。 1.2 培养基 PDA 培养基[7]：去皮马铃薯 200 g，琼脂 15 g， 葡萄糖 20 g，水 1000 mL。 NA 培养基[7]：牛肉膏 3.0 g，NaCl 5.0 g，蛋白 胨 10.0 g，琼脂 15~20 g，水 1000 mL，pH 7.2~7.5。 马丁氏（Martin）培养基[7]：葡萄糖 10.0 g，磷 酸二氢钾（KH2PO4）1.0 g，硫酸镁（MgSO4 . 7H2O） 0.5 g，蛋白胨 5.0 g，1%孟加拉红水溶液 3.3 mL， 琼脂 15～20 g，蒸馏水 1000 mL，氯霉素。 1.3 试验设计 试验于 2014 年 3 月至 5 月在贵州省兴义市敬南 有机肥工场进行。采用条垛型有机肥发酵技术进行 发酵，堆垛下底宽 2 m，上底宽 1 m，堆高 0.9 m， 长度 5 m，堆垛底部设置 30 cm 宽，20 cm 深的通风 槽，甘蔗渣与牛粪按 25∶23∶20∶17∶15 比例分 5 层堆积，在每层甘蔗渣上按上述比例洒上尿素和微 生物菌剂。各处理物料水分控制在 70%左右。分别 于堆制后 10、20、30 和结束前 20 d（添加菜籽粉 350 kg）翻堆 4 次。 试验共设 5 个处理：1 号处理为空白对照，不 添加任何有机物料腐熟剂；2 号处理添加菌剂 A；3 号处理添加菌剂 B；4 号处理添加菌剂 C；5 号处理 添加菌剂 D。具体试验设计方案参见表 1。 1.4 取样方法 在第 4 次翻堆时取堆肥样品用于检测堆肥样品 的养分、腐殖酸含量、微生物数量等。取样时从堆 垛前中后(按条垛长度从中间和距两端 1/4 处垂直挖 开剖面)和上中下（按条垛高度从中间和距上下端 1/4 处水平位置各取样 0.5 kg）取样拌匀后，用四分 法取样 2 份，每份 0.5 kg。 1.5 供试菌剂有效活菌数测定 采用稀释分离法，具体步骤参见文献[8]。 表 1 甘蔗渣有机肥试验设计方案 Table 1 The experiment design of the sugarcane residue composting 处理 Treatment 甘蔗渣用量/kg Dosage of sugarcane residue 牛粪用量/kg Dosage of cow dung 尿素用量/kg Dosage of urea 菌剂用量/g Dosage of microbal agent 1.CK 900 1300 12 0 2.添加菌剂 A Added with microbial agent A 900 1300 12 13200 3.添加菌剂 B Added with microbial agent B 900 1300 12 550 4.添加菌剂 C Added with microbial agent C 900 1300 12 220 5.添加菌剂 D Added with microbial agent D 900 1300 12 1100 1.6 纤维素酶和蛋白酶活性测定 纤维素酶酶活力测定参照文献[9-10]，蛋白酶活 性测定参照文献[11]。 1.7 堆肥样品养分的测定 堆肥样品中有机质测定采用重铬酸钾比色法[12]； 全氮采用硫酸-过氧化氢消解，蒸馏滴定法[12]；全磷 采用硫酸-过氧化氢消解，钒钼黄比色法[12]；全钾采 用硫酸-过氧化氢消解，火焰光度法[12]；速效氮采用 氯化钠浸提，锌-硫酸亚铁还原蒸馏法；铵态氮采用 氯化钠浸提，扩散法；pH 采用电位法测定。 1.8 堆肥样品腐殖酸含量检测 总腐殖酸采用碱性焦磷酸钠浸提-重铬酸钾容 量法；游离腐殖酸采用氢氧化钠浸提-重铬酸钾容量 法；水溶性殖酸采用水浸提-重铬酸钾容量法。 1.9 堆肥样品可培养微生物计数 不同微生物菌剂处理的堆体中真菌总数、细菌 总数和霉菌总数的测定采用稀释平板测数法[7]，混 菌接种培养。细菌培养 24 h 后计数，真菌、霉菌培 养 72 h 后计数。以出现 20～300 个菌落数的稀释度 的平板为计数标准，统计有效活菌数目
43卷6期 彭宇等:不同微生物菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响 1.10堆肥样品蛔虫卵数量检测 力均达到微生物菌剂产品相关技术指标(GB20287- 采用改良的饱和硝酸钠漂浮法 2006)(纤维素酶活力≥30Ug,中性蛋白酶活力 2结果与分析 ≥15Ug1),而菌剂D纤维素酶活力和中性蛋白酶 活力均未达到微生物菌剂产品相关技术指标。且3 2.1微生物菌剂的有效活菌数测定 种菌剂纤维素酶活力大小为菌剂B>菌剂C>菌剂 4种微生物菌剂的有效活菌数如表2所示,供A,中性蛋白酶活力大小为菌剂B>菌剂A>菌剂C。 试的4种微生物菌剂的有效活菌数均达到国标中微2.3微生物菌剂处理的有机肥有机质、总养分含量 生物菌剂产品的有效活菌数(cfu)≥0.5×103g2 和pH比较 的要求,且4种菌剂有效活菌的数量多少为菌剂D>2,3:14种微生物菌剂处理的有机肥有机质含量 菌剂B>菌剂C>菌剂A 由表4可见,不同微生物菌剂处理的有机肥中有机 22微生物菌剂的纤维素酶和中性蛋白酶活性检测质含量均大于50%,且含量大小为菌剂B>菌剂D> 4种微生物菌剂的纤维素酶活和中性蛋白酶酶菌剂A>CK>菌剂C,根据农业部NY525-2012《有机 活检测结果如表3所示。可以看出,菌剂B、菌剂肥料》标准要求,有机质含量要求≥45%,各处理的 C和菌剂A3种菌剂纤维素酶活力和中性蛋白酶活有机肥中有机质含量均达到NY5252012标准要求。 表24种微生物菌剂分离到的有效活菌数 Table 2 The effective living microorganisms of four microbial agents 微生物菌剂 分离到的有效活菌数/0g1 国标要求达到的有效活菌数/10 Isolated effective living microorganism Effective living microorganism listed in national standard 0.5974 ≥0.5000 B 0.7799b ≥0.5000 0.84112 注:表中所列数据是3个重复的平均值,下同。Note: The data are the averages of3 replicates. The same below 表34种微生物菌剂的纤维素酶和中性蛋白酶活性 3 The cellulase activity and neutral protease activity in four microbial agents 项 菌剂 菌剂A 菌剂D 菌剂C 1.0g(1.0mL)样品纤维素酶活力 153.9200 81.1600 5.1500 121.1400 1.0g(10mL)样品中性蛋白酶活力 80.0000 55.0000 1.0000 67.0000 表44种微生物菌剂处理的有机肥营养指标检测结果 Table 4 Effects of four microbial agents on the contents of nutritional indicators in sugarcane residue organic fertilizer 处理 全钾(K2O) Treatment no Organic matter Total N Total p Total K (H2O) 5922b 1.154 1.57 1.302 1.73 217 55.30° 2.13 速效氮/mgkg 铵态氮/mgkg 腐殖酸总量/ 游离腐殖酸/% 水溶性腐殖酸 Available n Ammonium nitrogen Amount of humic acid Free humic acid Water-souble humic acid 1529° 151.5° 84 29184 24.722 16.85 3026° 79.2b 479.1b 489.32 486.54 2262° 注:表中所列数据是3个重复的平均值,同列中小写字母表示5%差异显著水平,同列中标有相同字母的数字表示差异 不显著(新复级差法测验,P=0.05)。 level. Figures marked with the same letter within rows are not significantly different according to Duncans test(P=0.05)
43 卷 6 期 彭 宇等: 不同微生物菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响 963 1.10 堆肥样品蛔虫卵数量检测 采用改良的饱和硝酸钠漂浮法[8]。 2 结果与分析 2.1 微生物菌剂的有效活菌数测定 4 种微生物菌剂的有效活菌数如表 2 所示，供 试的 4 种微生物菌剂的有效活菌数均达到国标中微 生物菌剂产品的有效活菌数（cfu）≥0.5×108 ·g -1 的要求，且 4 种菌剂有效活菌的数量多少为菌剂 D> 菌剂 B>菌剂 C>菌剂 A。 2.2 微生物菌剂的纤维素酶和中性蛋白酶活性检测 4 种微生物菌剂的纤维素酶活和中性蛋白酶酶 活检测结果如表 3 所示。可以看出，菌剂 B、菌剂 C 和菌剂 A 3 种菌剂纤维素酶活力和中性蛋白酶活 力均达到微生物菌剂产品相关技术指标（GB20287- 2006）（纤维素酶活力≥30 U·g-1，中性蛋白酶活力 ≥15 U·g-1），而菌剂 D 纤维素酶活力和中性蛋白酶 活力均未达到微生物菌剂产品相关技术指标。且 3 种菌剂纤维素酶活力大小为菌剂 B>菌剂 C>菌剂 A，中性蛋白酶活力大小为菌剂 B>菌剂 A>菌剂 C。 2.3 微生物菌剂处理的有机肥有机质、总养分含量 和 pH 比较 2.3.1 4 种微生物菌剂处理的有机肥有机质含量 由表 4 可见，不同微生物菌剂处理的有机肥中有机 质含量均大于 50 %，且含量大小为菌剂 B>菌剂 D> 菌剂 A>CK>菌剂 C，根据农业部 NY525-2012《有机 肥料》标准要求，有机质含量要求≥45%，各处理的 有机肥中有机质含量均达到 NY525-2012 标准要求。 表 2 4 种微生物菌剂分离到的有效活菌数 Table 2 The effective living microorganisms of four microbial agents 微生物菌剂 Microbial agent 分离到的有效活菌数/108 ·g-1 Isolated effective living microorganism 国标要求达到的有效活菌数/108 ·g-1 Effective living microorganism listed in national standard A 0.5974d ≥0.5000 B 0.7799b ≥0.5000 C 0.6580c ≥0.5000 D 0.8411a ≥0.5000 注：表中所列数据是 3 个重复的平均值，下同。 Note: The data are the averages of 3 replicates. The same below. 表 3 4 种微生物菌剂的纤维素酶和中性蛋白酶活性 Table 3 The cellulase activity and neutral protease activity in four microbial agents U·g-1 项目 Item 菌剂 B 菌剂 A 菌剂 D 菌剂 C 1 .0 g（1.0 mL）样品纤维素酶活力 153.9200 81.1600 5.1500 121.1400 1 .0 g（1.0 mL）样品中性蛋白酶活力 80.0000 55 .0000 1.0000 67.0000 表 4 4 种微生物菌剂处理的有机肥营养指标检测结果 Table 4 Effects of four microbial agents on the contents of nutritional indicators in sugarcane residue organic fertilizer 处理 Treatment No. 有机质/% Organic matter 全氮/% Total N 全磷( P2O5 ) /% Total P 全钾( K2O ) /% Total K pH ( H2O ) CK 59.22b 1.15d 1.57c 2.01c 8.49b A 60.09b 1.30a 1.73a 2.17b 8.18c B 60.62a 1.29b 1.69b 2.26a 8.05d C 55.30c 1.24c 1.71a 2.13b 8.83a D 60.45a 1.31a 1.72a 1.89d 8.57b 速效氮/mg·kg-1 Available N 铵态氮/mg·kg-1 Ammonium nitrogen 腐殖酸总量/% Amount of humic acid 游离腐殖酸/% Free humic acid 水溶性腐殖酸/% Water-souble humic acid 152.9e 151.5e 23.83b 15.92b 3.90b 291.8d 291.8d 24.72a 16.85a 4.67a 302.6c 302.6c 24.56a 16.53a 4.56a 479.2b 479.1b 21.54d 12.74d 3.45c 489.3a 486.5a 22.62c 14.21c 3.89b 注：表中所列数据是 3 个重复的平均值，同列中小写字母表示 5 %差异显著水平，同列中标有相同字母的数字表示差异 不显著(新复级差法测验，P=0.05)。 Note: The data are the averages of 3 replicates. The lowercase letters in the same column represent the significant difference at 5 % level. Figures marked with the same letter within rows are not significantly different according to Duncan's test (P=0.05)
安徽农业大学学报 2016年 2.3.24种微生物菌剂处理的有机肥总养分含量机肥中的养分含量。此外,参照农业部NY525-2012 不同微生物菌剂处理的有机肥中总养分(N+P2O3+《有机肥料》标准,要求有机肥总养分含量(N+ K2O)含量分别是:对照为473%,菌剂A为520%,P2O3+K2O)≥5%,可知,4种微生物菌剂处理的 菌剂B为524%,菌剂C为508%,菌剂D为492%,有机肥,添加菌剂B、菌剂A和菌剂C的有机肥达 其中,添加菌剂B的有机肥中总养分含量最高,而到NY5252012标准要求,而添加菌剂D的有机肥 对照有机肥中总养分含量相对较低。由此可知,在未达到NY5252012标准要求。 有机肥中添加微生物菌剂,在一定程度上提高了有 表54种微生物菌剂处理的有机肥微生物和蛔虫卵分离结果 Table 5 Effects of four microbial agents on the number of microorganisms and ascaris eggs insugarcane residue organic fertilizer 处理 真菌/×10个g1细菌/x10个g1放线菌/x105个g1大肠杆菌/×102个g2蛔虫卵死亡率/ Treatment no Actinomycetes Escherichia coli Death rate of ascaris eggs 144 ABcD 1.8 2.35 1.24 0.85 95.13 93.05 4.32 2.63 90.72 图14种微生物菌剂处理的有机肥真菌分离结果 Figure 1 Effects of four microbial agents on the fungi community of sugarcane residue organic fertilizer 图24种微生物菌剂处理的有机肥细菌分离结果 Figure 2 Effects of four microbial agents on the bacteria community in sugarcane residue organic fertilizer 图34种微生物菌剂处理的有机肥放线菌分离结果 Figure 3 Effects of four microbial agents on the actinomycetes community in sugarcane residue organic fertilizer 2334种微生物菌剂处理的有机肥pH变化电位碱性增强;添加菌剂A和菌剂B的处理酸碱度(p) 法测定不同微生物菌剂处理的有机肥的酸碱度均低于对照,酸度增强。结合农业部NY525-2012 (pH),发现添加菌剂C和菌剂D的处理酸碱度《有机肥料》标准,要求酸碱度(pH)在5.5~8.5 pH)比不添加菌剂的对照明显提高,均大于8.5,之间,可知,添加菌剂C和菌剂D的处理pH>8.5
964 安 徽 农 业 大 学 学 报 2016 年 2.3.2 4 种微生物菌剂处理的有机肥总养分含量 不同微生物菌剂处理的有机肥中总养分（N+ P2O5+ K2O）含量分别是：对照为 4.73%，菌剂 A 为 5.20%， 菌剂 B 为 5.24%，菌剂 C 为 5.08%，菌剂 D 为 4.92%， 其中，添加菌剂 B 的有机肥中总养分含量最高，而 对照有机肥中总养分含量相对较低。由此可知，在 有机肥中添加微生物菌剂，在一定程度上提高了有 机肥中的养分含量。此外，参照农业部 NY525-2012 《有机肥料》标准，要求有机肥总养分含量（N+ P2O5+ K2O）≥5%，可知，4 种微生物菌剂处理的 有机肥，添加菌剂 B、菌剂 A 和菌剂 C 的有机肥达 到 NY525-2012 标准要求，而添加菌剂 D 的有机肥 未达到 NY525-2012 标准要求。 表 5 4 种微生物菌剂处理的有机肥微生物和蛔虫卵分离结果 Table 5 Effects of four microbial agents on the number of microorganisms and ascaris eggs insugarcane residue organic fertilizer 处理 Treatment No. 真菌/×10４ 个·g-1 Fungus 细菌/×108 个·g-1 Bacterium 放线菌/×105个·g-1 Actinomycetes 大肠杆菌/×102个·g-1 Escherichia coli 蛔虫卵死亡率/% Death rate of ascaris eggs CK 0.1 2.13 1.44 0.95 89.63 A 0.3 2.65 1.38 3.91 92.42 B 1.8 2.35 1.24 0.85 95.13 C 0.6 3.67 1.56 7.60 93.05 D 1.5 4.32 2.63 9.90 90.72 图 1 4 种微生物菌剂处理的有机肥真菌分离结果 Figure 1 Effects of four microbial agents on the fungi community of sugarcane residue organic fertilizer 图 2 4 种微生物菌剂处理的有机肥细菌分离结果 Figure 2 Effects of four microbial agents on the bacteria community in sugarcane residue organic fertilizer 图 3 4 种微生物菌剂处理的有机肥放线菌分离结果 Figure 3 Effects of four microbial agents on the actinomycetes community in sugarcane residue organic fertilizer 2.3.3 4种微生物菌剂处理的有机肥 pH变化 电位 法测定不同微生物菌剂处理的有机肥的酸碱度 （pH），发现添加菌剂 C 和菌剂 D 的处理酸碱度 （pH）比不添加菌剂的对照明显提高，均大于 8.5， 碱性增强；添加菌剂 A 和菌剂 B 的处理酸碱度（pH） 均低于对照，酸度增强。结合农业部 NY525-2012 《有机肥料》标准，要求酸碱度（pH）在 5.5～8.5 之间，可知，添加菌剂 C 和菌剂 D 的处理 pH>8.5
43卷6期 彭宇等:不同微生物菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响 超出NY525-2012标准要求,但由于黔西南烟区主D的有机肥样品酸碱度(pH)偏碱性,但对其当地 要以酸性土壤为主,因此,虽然添加菌剂C和菌剂烟区的土壤改良有利 图44种微生物菌剂处理的有机肥大肠杆菌分离结果 igure 4 Effects of four microbial agents on the Escherichia coli community in sugarcane residue organic fertilizer 结合添加不同微生物菌剂的有机肥中有机质含物菌剂的添加对有机肥中腐殖酸含量的影响较小。 量和总养分含量可知,添加菌剂A、菌剂B、菌剂2.6微生物菌剂处理的有机肥微生物和蛔虫卵数 C3种处理的有机肥中有机质含量和总养分含量均 量比较 能达到农业部NY525-2012《有机肥料》标准要求, 有机肥发酵过程中有大量微生物参与,主要类 其中,添加菌剂A或菌剂B能有效提高有机肥中有群包括细菌、放线菌和真菌;且农业部NY884-2012 机质和总养分含量,且添加菌剂B的效果更佳;与《生物有机肥》标准要求有机肥中有效活菌数 此同时,添加菌剂D的有机肥中虽然有机质含量达(cfu)≥020×10·g1,粪大肠菌群数≤100个g, 到相关标准要求,而其总养分未达标。 蛔虫卵死亡率≥95%。因此,该试验对4种微生物 2.4微生物菌剂处理的有机肥中速效氮含量比较菌剂处理的有机肥中的微生物和蛔虫卵数量进行了 有机肥是一种缓效性肥料,主要是因为有机肥分离,结果如表5所示。可以看出,5个处理的有 中速效养分低,但有机肥中速效氮含量高能促进烟机肥中真菌、细菌、放线菌及大肠杆菌的分离如图 草的早发快长,尤其对于生态烟更为重要。不同微1~图4所示,5个处理有机肥有效活菌数(cfu)均 生物菌剂处理的有机肥中速效氮含量如表2所示,4大于020×103g2,且4种微生物菌剂处理的有机 种微生物菌剂处理的有机肥中速效氮含量均明显高肥中有效活菌数均超过空白对照,其中有效活菌数 于对照处理,其有机肥中速效氮含量大小为菌剂D>最高的为添加菌剂D的有机肥,有效活菌数为空白 菌剂C>菌剂B>菌剂A>CK,其中,添加菌剂D的对照的203倍;有效活菌数相对较低为添加菌剂B 有机肥中速效氮含量约是空白对照处理的3倍左的有机肥,其有效活菌数为空白对照的1.1倍 右,而添加菌剂A的有机肥中速效氮含量约是空白见,发酵菌剂的添加能提高有机肥中有效活菌数 对照处理的2倍左右。由此可知,发酵菌剂对有机 由表5可以看出,添加菌剂B的处理和对照的 肥速效氮形成有着重要作用。此外,根据试验所测大肠杆菌数量菌剂C> 2.5微生物菌剂处理的有机肥腐殖酸含量比较 菌剂A>菌剂D>CK,与新鲜牛粪中蛔虫卵数量相比, 有机肥中腐殖酸是各种植物残体经微生物分解加发酵菌剂B处理的甘蔗渣有机肥蝈虫卵死亡率 合成产物再缩聚而成的高分子有机化合物,呈黑色>95%,而其他各处理的蛔虫卵死亡率均小于95% 或棕色,具有很好生理活性,对作物营养和代谢有 着极为重要的作用。不同微生物菌剂处理的有机肥3讨论 中腐殖酸含量如表4所示,4种微生物菌剂处理的 自1906年在蜗牛消化道发现纤维素酶以来 有机肥中腐殖酸总量表现为菌剂A>菌剂B>CK>菌纤维素的微生物降解问题就引起了足够的关注。利 剂D>菌剂C,游离腐殖酸和水溶性腐殖酸均表现为用微生物降解纤维素可有效提高其综合利用率,解 菌剂A>菌剂B>CK>菌剂D>菌剂C,其中,添加菌决或减轻食品和动物饲料的不足、废弃物处理等 剂A的有机肥中腐殖酸含量、游离腐殖酸含量及水系列问题1:另一方面,中性蛋白酶作为一种p值 溶性腐殖酸分别为空白对照处理的103倍、106倍通常在60~7.5之间的内切酶,可用于各种蛋白质 1.20倍,和空白对照组之间差异很小,说明微生的水解处理,能将大分子蛋白质水解为氨基酸,在
43 卷 6 期 彭 宇等: 不同微生物菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响 965 超出 NY525-2012 标准要求，但由于黔西南烟区主 要以酸性土壤为主，因此，虽然添加菌剂 C 和菌剂 D 的有机肥样品酸碱度（pH）偏碱性，但对其当地 烟区的土壤改良有利。 图 4 4 种微生物菌剂处理的有机肥大肠杆菌分离结果 Figure 4 Effects of four microbial agents on the Escherichia coli community in sugarcane residue organic fertilizer 结合添加不同微生物菌剂的有机肥中有机质含 量和总养分含量可知，添加菌剂 A、菌剂 B、菌剂 C３种处理的有机肥中有机质含量和总养分含量均 能达到农业部 NY525-2012《有机肥料》标准要求， 其中，添加菌剂 A 或菌剂 B 能有效提高有机肥中有 机质和总养分含量，且添加菌剂 B 的效果更佳；与 此同时，添加菌剂 D 的有机肥中虽然有机质含量达 到相关标准要求，而其总养分未达标。 2.4 微生物菌剂处理的有机肥中速效氮含量比较 有机肥是一种缓效性肥料，主要是因为有机肥 中速效养分低，但有机肥中速效氮含量高能促进烟 草的早发快长，尤其对于生态烟更为重要。不同微 生物菌剂处理的有机肥中速效氮含量如表 2 所示，4 种微生物菌剂处理的有机肥中速效氮含量均明显高 于对照处理，其有机肥中速效氮含量大小为菌剂 D> 菌剂 C>菌剂 B>菌剂 A>CK，其中，添加菌剂 D 的 有机肥中速效氮含量约是空白对照处理的 3 倍左 右，而添加菌剂 A 的有机肥中速效氮含量约是空白 对照处理的 2 倍左右。由此可知，发酵菌剂对有机 肥速效氮形成有着重要作用。此外，根据试验所测 的不同发酵菌剂处理的有机肥中氨态氮含量，对比 可知，各处理的有机肥速效氮几乎为氨态氮。 2.5 微生物菌剂处理的有机肥腐殖酸含量比较 有机肥中腐殖酸是各种植物残体经微生物分解 合成产物再缩聚而成的高分子有机化合物，呈黑色 或棕色，具有很好生理活性，对作物营养和代谢有 着极为重要的作用。不同微生物菌剂处理的有机肥 中腐殖酸含量如表 4 所示，4 种微生物菌剂处理的 有机肥中腐殖酸总量表现为菌剂 A>菌剂 B>CK>菌 剂 D>菌剂 C，游离腐殖酸和水溶性腐殖酸均表现为 菌剂 A>菌剂 B>CK>菌剂 D>菌剂 C，其中，添加菌 剂 A 的有机肥中腐殖酸含量、游离腐殖酸含量及水 溶性腐殖酸分别为空白对照处理的 1.03 倍、1.06 倍 和 1.20 倍，和空白对照组之间差异很小，说明微生 物菌剂的添加对有机肥中腐殖酸含量的影响较小。 2.6 微生物菌剂处理的有机肥微生物和蛔虫卵数 量比较 有机肥发酵过程中有大量微生物参与，主要类 群包括细菌、放线菌和真菌；且农业部 NY884-2012 《生物有机肥》标准要求有机肥中有效活菌数 （cfu）≥0.20×108 ·g -1，粪大肠菌群数≤100 个·g -1， 蛔虫卵死亡率≥95%。因此，该试验对 4 种微生物 菌剂处理的有机肥中的微生物和蛔虫卵数量进行了 分离，结果如表 5 所示。可以看出，5 个处理的有 机肥中真菌、细菌、放线菌及大肠杆菌的分离如图 1～图 4 所示，5 个处理有机肥有效活菌数（cfu）均 大于 0.20×108 ·g -1，且 4 种微生物菌剂处理的有机 肥中有效活菌数均超过空白对照，其中有效活菌数 最高的为添加菌剂 D 的有机肥，有效活菌数为空白 对照的 2.03 倍；有效活菌数相对较低为添加菌剂 B 的有机肥，其有效活菌数为空白对照的 1.1 倍。可 见，发酵菌剂的添加能提高有机肥中有效活菌数。 由表 5 可以看出，添加菌剂 B 的处理和对照的 大肠杆菌数量菌剂 C> 菌剂 A>菌剂 D>CK，与新鲜牛粪中蛔虫卵数量相比， 加发酵菌剂 B 处理的甘蔗渣有机肥蛔虫卵死亡率 >95%，而其他各处理的蛔虫卵死亡率均小于 95%。 3 讨论 自 1906 年在蜗牛消化道发现纤维素酶以来， 纤维素的微生物降解问题就引起了足够的关注。利 用微生物降解纤维素可有效提高其综合利用率，解 决或减轻食品和动物饲料的不足、废弃物处理等一 系列问题[13]；另一方面，中性蛋白酶作为一种 pH 值 通常在 6.0～7.5 之间的内切酶，可用于各种蛋白质 的水解处理，能将大分子蛋白质水解为氨基酸，在
安徽农业大学学报 2016年 工业生产中应用比较广泛。该试验开展了4种微菌种组成变化较大为了更深入系统地了解有机肥中 生物菌剂的纤维素酶以及中性蛋白酶活力的检测,微生物菌群之间的变化动态以及同一菌群不同菌种 结果表明,微生物菌剂B有着较强的纤维素酶以及之间的消长态势,在后续试验中将采取变性梯度凝 中性蛋白酶活力。目前,微生物产纤维素酶或蛋白胶电泳(DGGE)技术等分子标记技术来对有机肥中的 酶的研究己成为这两类酶研究的焦点-1,因此,微生物菌群进行分离检测,从而提高试验的精确度。 在后续试验中,集中对微生物菌剂B展开研究,利 用微生物分离培养,以及酶活测定,以期获得高产参考文献: 纤维素酶或蛋白酶的微生物,提供微生物菌剂的实 [!]钟华平,岳燕珍,樊江文.中国作物秸秆资源及其利用 际应用价值 [资源科学,2003,25(4):62-67 [2]刘瑞伟.我国农作物秸秆利用现状及对策①]农业与 本试验条件下,添加不同微生物菌剂对有机肥 技术,2009,29(1):7-9 同一指标的影响不尽相同,如添加微生物菌剂A、周淑葭于建光,赵莉,等不同有机物料腐熟剂对麦 微生物菌剂B能有效提高有机肥中有机质、总养分孙晓华,罗安程,仇丹微生物接种对猪粪堆肥发酵过 含量、腐殖酸、游离腐殖酸以及水溶性腐殖酸含量: 程的影响[植物营养与肥料学报,2004,10(5) 而添加微生物菌剂D虽能显著提高有机肥中速效氮 557-559 [S]席北斗,刘鸿亮,黄国和,等.复合微生物菌剂强化堆 以及有效活菌数,但其有机肥中总养分含量未达标 肥技术研究[环境污染与防治,2003,25(5):262-264 准。综合微生物菌剂的酶活检测结果、微生物菌剂6]王小琳,陈世昌,李必强.有机物料腐熟剂对猪粪堆肥 对有机肥各个营养指标及有效活菌数等影响的结 效果的影响[河南科技学院学报,2009,37(3):21-23 7方中达植病研究方法[M北京:中国农业出版社1998 果,得出微生物菌剂B的添加能有效提高有机肥中8]吴峰,叶江平,耿富卿,等.有机物料腐熟剂对堆肥发 各营养指标(有机质、总养分含量、速效氮、腐殖 酵过程中微生物菌群的影响[热带作物学报,2013, 酸、游离腐殖酸和水溶性腐殖酸含量),明显增加有 34(11):2122-2126 9]甄静,王继雯,谢宝恩,等.一株纤维素降解真菌的筛 机肥中有效活菌数,可在实际生产中应用。 选、鉴定及酶学性质分析[微生物学通报,2011,38(5) 研究表明,接种微生物对堆肥物质起到分解作 709-714 用,浓缩了堆肥中的无机营养成分,而且由于水分0穆春雷,武晓森,李术娜,等低温产纤维素酶菌株的 筛选、鉴定及纤维素酶学性质[,微生物学通报,2013, 的降低,使养分含量相对增加,有利于提高堆肥质 407):1193-1201 量。本试验研究结果与此相同,即添加微生物菌陈鸡图.高产中性蛋白酶菌选育及产特性研究 剂后,有机肥中的有机质、总养分(N+P2O5+K2O)、[2]鲍士旦土壤农化分析M北京:中国农业出版社,200 速效氮等成分的含量明显增加。 [3]王洪媛,范丙全,三株高效秸秆纤维素降解真菌的筛 在堆肥过程中加入微生物菌剂来增加微生物数14吴华昌,邓静,高产蛋白酶米曲霉的选育以四川食品 量、调节菌群结构,是一种促进堆肥快速腐熟的有 与发酵,2004,4046-48 效方法。崔宗均等将从堆肥、畜粪、土壤等样品[15]邓静,吴华昌,吴明霞,等.米曲莓产蛋白酶条件的优 中分离得到的微生物制成菌剂接种堆肥,可促进纤161 NOGAWA M, GOTO M, OKADA H, et al. L-Sorbose in 维素组分的降解;冯明谦等、席北斗等2及解开 duces cellulase gene transcription in the cellulolytic fungus Trichoderma reesei]. Curr Genet, 2001, 38(6): 329-334 治等将筛选出的几种纯培养菌株按一定配比混合17史央,蒋爱芹,戴传超,等,秸秆降解的微生物学机理 培养制成高效复合微生物菌剂应用在堆肥中,结果 研究及应用进展[微生物学杂志,200,22(1)47-50 显示接种菌剂能加快堆肥的腐熟速度。该试验在有[18孙晓华罗安程,仇丹微生物接种对猪粪堆肥发酵过 机肥中接种4种不同微生物菌剂,可明显提高有机 程的影响植物营养与肥料学报,2004,10(5) 557-559 肥中细菌、真菌以及放线菌等微生物菌群数量,这[9崔宗均,李美丹,朴哲,等一组高效稳定纤维素分解菌复 与研究报道相一致。此外,本试验中有机肥中细菌、 合系MCl的筛选及功能刂环境科学,200,23(3):36-39 [20]冯明谦,刘德明.滚筒式高温堆肥中微生物种类数量 真菌等有效活菌数的分离主要采取的是稀释平板测 的研究门中国环境科学,1999,19(6):490-492 数法,此方法虽然不能达到特异性菌群分离鉴定的[21]席北斗,孟伟,刘鸿亮,等.三阶段控温堆肥过程 目的,但是相对于分子生物学方法等方法而言,具 种复合微生物菌群的变化规律研究环境科学, 24(2):152-155 有快速、简便且成本低的优点,且不会导致细菌、口2】解开治,徐培智,张仁陟,等.一种腐熟促进剂配合微 真菌以及放线菌等目标微生物重要特性变异甚至丧 生物腐熟剂对鲜牛粪堆肥的效应研究卩.农业环境科 失。但有机肥中的微生物菌系复杂,在整个过程中 学学报,2007,26(3):1142-1146
966 安 徽 农 业 大 学 学 报 2016 年 工业生产中应用比较广泛[14]。该试验开展了 4 种微 生物菌剂的纤维素酶以及中性蛋白酶活力的检测， 结果表明，微生物菌剂 B 有着较强的纤维素酶以及 中性蛋白酶活力。目前，微生物产纤维素酶或蛋白 酶的研究已成为这两类酶研究的焦点[15-17]，因此， 在后续试验中，集中对微生物菌剂 B 展开研究，利 用微生物分离培养，以及酶活测定，以期获得高产 纤维素酶或蛋白酶的微生物，提供微生物菌剂的实 际应用价值。 本试验条件下，添加不同微生物菌剂对有机肥 同一指标的影响不尽相同，如添加微生物菌剂 A、 微生物菌剂 B 能有效提高有机肥中有机质、总养分 含量、腐殖酸、游离腐殖酸以及水溶性腐殖酸含量； 而添加微生物菌剂D虽能显著提高有机肥中速效氮 以及有效活菌数，但其有机肥中总养分含量未达标 准。综合微生物菌剂的酶活检测结果、微生物菌剂 对有机肥各个营养指标及有效活菌数等影响的结 果，得出微生物菌剂 B 的添加能有效提高有机肥中 各营养指标（有机质、总养分含量、速效氮、腐殖 酸、游离腐殖酸和水溶性腐殖酸含量），明显增加有 机肥中有效活菌数，可在实际生产中应用。 研究表明，接种微生物对堆肥物质起到分解作 用，浓缩了堆肥中的无机营养成分，而且由于水分 的降低，使养分含量相对增加，有利于提高堆肥质 量[18]。本试验研究结果与此相同，即添加微生物菌 剂后，有机肥中的有机质、总养分（N+ P2O5+ K2O）、 速效氮等成分的含量明显增加。 在堆肥过程中加入微生物菌剂来增加微生物数 量、调节菌群结构，是一种促进堆肥快速腐熟的有 效方法。崔宗均等[19]将从堆肥、畜粪、土壤等样品 中分离得到的微生物制成菌剂接种堆肥，可促进纤 维素组分的降解；冯明谦等[20]、席北斗等[21]及解开 治等[22]将筛选出的几种纯培养菌株按一定配比混合 培养制成高效复合微生物菌剂应用在堆肥中，结果 显示接种菌剂能加快堆肥的腐熟速度。该试验在有 机肥中接种 4 种不同微生物菌剂，可明显提高有机 肥中细菌、真菌以及放线菌等微生物菌群数量，这 与研究报道相一致。此外，本试验中有机肥中细菌、 真菌等有效活菌数的分离主要采取的是稀释平板测 数法，此方法虽然不能达到特异性菌群分离鉴定的 目的，但是相对于分子生物学方法等方法而言，具 有快速、简便且成本低的优点，且不会导致细菌、 真菌以及放线菌等目标微生物重要特性变异甚至丧 失。但有机肥中的微生物菌系复杂，在整个过程中 菌种组成变化较大,为了更深入系统地了解有机肥中 微生物菌群之间的变化动态以及同一菌群不同菌种 之间的消长态势，在后续试验中将采取变性梯度凝 胶电泳(DGGE)技术等分子标记技术来对有机肥中的 微生物菌群进行分离检测，从而提高试验的精确度。 参考文献： [1] 钟华平, 岳燕珍, 樊江文. 中国作物秸秆资源及其利用 [J]. 资源科学, 2003, 25(4): 62-67. [2] 刘瑞伟. 我国农作物秸秆利用现状及对策[J]. 农业与 技术, 2009, 29(1): 7-9. [3] 周淑霞, 于建光, 赵莉, 等. 不同有机物料腐熟剂对麦 秸的腐解效果[J]. 江苏农业科学, 2013, 41(11):347-350. [4] 孙晓华, 罗安程, 仇丹. 微生物接种对猪粪堆肥发酵过 程的影响 [J]. 植物营养与肥料学报 , 2004,10(5): 557-559. [5] 席北斗, 刘鸿亮, 黄国和, 等. 复合微生物菌剂强化堆 肥技术研究[J]. 环境污染与防治, 2003,25(5): 262-264. [6] 王小琳, 陈世昌, 李必强. 有机物料腐熟剂对猪粪堆肥 效果的影响[J]. 河南科技学院学报, 2009, 37 (3): 21-23. [7] 方中达. 植病研究方法[M]. 北京: 中国农业出版社, 1998. [8] 吴峰, 叶江平, 耿富卿, 等. 有机物料腐熟剂对堆肥发 酵过程中微生物菌群的影响[J]. 热带作物学报, 2013, 34 (11): 2122-2126. [9] 甄静, 王继雯, 谢宝恩, 等. 一株纤维素降解真菌的筛 选、鉴定及酶学性质分析[J]. 微生物学通报, 2011, 38(5): 709-714. [10] 穆春雷, 武晓森, 李术娜, 等. 低温产纤维素酶菌株的 筛选、鉴定及纤维素酶学性质[J]. 微生物学通报, 2013, 40(7): 1193-1201. [11] 陈鸿图. 高产中性蛋白酶菌株选育及产酶特性研究[D]. 广州 : 华南理工大学, 2012. [12] 鲍士旦. 土壤农化分析[M]. 北京: 中国农业出版社, 2000. [13] 王洪媛, 范丙全. 三株高效秸秆纤维素降解真菌的筛 选及其降解效果[J]. 微生物学报, 2010, 50(7): 870-875. [14] 吴华昌, 邓静. 高产蛋白酶米曲霉的选育[J]. 四川食品 与发酵, 2004, 40:46-48. [15] 邓静, 吴华昌, 吴明霞, 等. 米曲霉产蛋白酶条件的优 化[J]. 中国酿造, 2008, 27(12): 51-53. [16] NOGAWA M, GOTO M, OKADA H, et al. L-Sorbose induces cellulase gene transcription in the cellulolytic fungus Trichoderma reesei[J]. Curr Genet, 2001, 38(6): 329-334. [17] 史央, 蒋爱芹, 戴传超, 等. 秸秆降解的微生物学机理 研究及应用进展[J]. 微生物学杂志, 2002, 22(1): 47-50. [18] 孙晓华, 罗安程, 仇丹. 微生物接种对猪粪堆肥发酵过 程的影响 [J]. 植物营养与肥料学报 , 2004, 10(5): 557-559. [19] 崔宗均, 李美丹, 朴哲, 等. 一组高效稳定纤维素分解菌复 合系 MC1 的筛选及功能[J]. 环境科学, 2002, 23(3): 36-39. [20] 冯明谦, 刘德明. 滚筒式高温堆肥中微生物种类数量 的研究[J]. 中国环境科学, 1999, 19(6): 490-492. [21] 席北斗, 孟伟, 刘鸿亮, 等. 三阶段控温堆肥过程中接 种复合微生物菌群的变化规律研究[J]. 环境科学, 2003, 24(2): 152-155. [22] 解开治, 徐培智, 张仁陟, 等. 一种腐熟促进剂配合微 生物腐熟剂对鲜牛粪堆肥的效应研究[J]. 农业环境科 学学报, 2007, 26(3): 1142-1146