第六章 微生物菌种的选育 江南大学生物工程学院
第六章 微生物菌种的选育 江南大学生物工程学院
第一节从自然界中分离筛选菌种
第一节 从自然界中分离筛选菌种
1、生产菌株来源 ·索取或购买 ·自己选育 >用原有菌株进行遗传改造进行育种 >向菌种保藏机构索取、购买出发菌株进行选 >从自然界中分离菌种 从自然界中分离菌种就是从自然界微生物 资源中有目的、快速、准确地选出所需要的茵 种
1、生产菌株来源 • 索取或购买 • 自己选育 ➢ 用原有菌株进行遗传改造进行育种 ➢ 向菌种保藏机构索取、购买出发菌株进行选 ➢ 从自然界中分离菌种 从自然界中分离菌种就是从自然界微生物 资源中有目的、快速、准确地选出所需要的菌 种
从自然界中分离筛选菌种的一般步骤 设计方案→采样增殖培养*→平板分离 →筛选（初筛、复筛）→单株纯种分离 →性能考察（生产性能试验、毒性试验、 菌种鉴定)
设计方案→采样→增殖培养*→平板分离 →筛选(初筛、复筛)→单株纯种分离 →性能考察(生产性能试验、毒性试验、 菌种鉴定） 从自然界中分离筛选菌种的一般步骤
一、采样 从自然界种采集含目的菌的样品 1.环境条件对土样本中微生物分布的影响 营养环境 水分 温度 通风 酸碱度
一、采样 从自然界种采集含目的菌的样品 1. 环境条件对土样本中微生物分布的影响 • 营养环境 • 水分 • 温度 • 通风 • 酸碱度
2.采样方法 (1)去除表层土 (2)取5-15cm土样几十克，装入无菌牛皮低 袋或逆料袋中 3.注意 ·记录：时间，地点，环境情况等 ·样品袋应封好口，防止水分失去 。 土样应在分离前破碎 尽快分离
2 .采样方法 （1）去除表层土 （2）取5-15cm土样几十克，装入无菌牛皮低 袋或逆料袋中 3.注意 • 记录：时间，地点，环境情况等 • 样品袋应封好口，防止水分失去 • 土样应在分离前破碎 • 尽快分离
二.增殖培养（富集培养） 适用：样品中目的菌数量不够多时 目的：提高样品中目的菌的数量和比例 原理：通过控制营养成分或培养条件，使目的菌 得以繁殖和/或非目的菌的生长受到抑制
二. 增殖培养（富集培养） • 适用：样品中目的菌数量不够多时 • 目的：提高样品中目的菌的数量和比例 • 原理：通过控制营养成分或培养条件，使目的菌 得以繁殖和/或非目的菌的生长受到抑制
1、增殖培养的方法 ·控制营养成分 ·控制培养基pH ·控制培养温度 热处理 增殖芽孢细菌 ·添加抑制剂
1、增殖培养的 方法 ▪ 控制营养成分 ▪ 控制培养基pH ▪ 控制培养温度 ▪ 热处理——增殖芽孢细菌 ▪ 添加抑制剂
三纯种分离 ·目的：将目的菌从混杂的微生物中分离出来， 获得纯培养 1.纯种分离的一般方法 (1)稀释平板法倾注平板或涂布平板 (2)划线法 (3)组织分离法 适用于分离高等真菌及植物病原菌
三. 纯种分离 ▪ 目的：将目的菌从混杂的微生物中分离出来， 获得纯培养 1. 纯种分离的一般方法 （1）稀释平板法 倾注平板或涂布平板 （2）划线法 （3）组织分离法* 适用于分离高等真菌及植物病原菌
Step 1.Make a 10-fold diution series m 10g moist soi 95刚 d 稀释分离涂布平板 Btep 3b.Sar the agar. Step 4.Incubate plates under specifed condition Step 5.Count dilutions yielding 30-300 colonies FIGURE 10.1 I that initially contains billions of microbes an be n on each plate.Numbers of colonies
稀释分离涂布平板