现代生物学实验（一）— 生物化学实验教案 课程名称: 生物化学实验 英文名称:Experiments of Biochemistry 课程编号:学科类通修课程 课程学时：108 学时 课程学分：3 学分 教师姓名:石 艳、沈明山、王 勤、徐庆研、左正红、周化民 前导课程：无机化学、有机化学、植物生物学、动物生物学。 教学方式:实验及技术理论讲授 考试方式:平时考核＋笔试＋实验操作考试 教学目标和要求： 生物化学实验技术是生物学各分支学科和生物工程的研究的重要基础和手 段，工业、农业、医药和环境科学的某些研究也已生物化学实验技术为手段。本 课程通过介绍生物化学实验技术的原理和操作方法，开展相关模块项目的实验， 对学生进行生物化学基本技能训练，为后续的课程和将来从事生命科学研究提供 必要的技术手段。 主要内容： 从生物化学角度，以技术和方法为主要教学内容，以模块的方式把相应技术、方 法融合于相关的模块中，模拟科研的方法组织教学。要求学生掌握相关的技术方 法原理，熟悉掌握操作技能，从中提高科学研究的思维、设计、动手能力，以适 应学科发展的需要。 模块 1 包括淀粉的制备与水解、糖的定量分析，要求学生掌握糖类物质的定 量测定的基本方法。 模块 2 代谢调节和代谢途径的研究，包括淀粉酶性质研究 ，酶的诱导，酶 的阻遏，代谢途径的研究。要求掌握酶学性质研究的基本方法，代谢调节和代谢 途径的研究的思路和方法。 模块 3 包括牡蛎碱性磷酸酶的制备、纯化、制备纯化过程中组分的变化（电 泳实验）、碱性磷酸酶比活性分析、蛋白质的定量分析、蛋白质的水解与氨基酸
现代生物学实验（一）— 生物化学实验教案 课程名称: 生物化学实验 英文名称:Experiments of Biochemistry 课程编号:学科类通修课程 课程学时：108 学时 课程学分：3 学分 教师姓名:石 艳、沈明山、王 勤、徐庆研、左正红、周化民 前导课程：无机化学、有机化学、植物生物学、动物生物学。 教学方式:实验及技术理论讲授 考试方式:平时考核＋笔试＋实验操作考试 教学目标和要求： 生物化学实验技术是生物学各分支学科和生物工程的研究的重要基础和手 段，工业、农业、医药和环境科学的某些研究也已生物化学实验技术为手段。本 课程通过介绍生物化学实验技术的原理和操作方法，开展相关模块项目的实验， 对学生进行生物化学基本技能训练，为后续的课程和将来从事生命科学研究提供 必要的技术手段。 主要内容： 从生物化学角度，以技术和方法为主要教学内容，以模块的方式把相应技术、方 法融合于相关的模块中，模拟科研的方法组织教学。要求学生掌握相关的技术方 法原理，熟悉掌握操作技能，从中提高科学研究的思维、设计、动手能力，以适 应学科发展的需要。 模块 1 包括淀粉的制备与水解、糖的定量分析，要求学生掌握糖类物质的定 量测定的基本方法。 模块 2 代谢调节和代谢途径的研究，包括淀粉酶性质研究 ，酶的诱导，酶 的阻遏，代谢途径的研究。要求掌握酶学性质研究的基本方法，代谢调节和代谢 途径的研究的思路和方法。 模块 3 包括牡蛎碱性磷酸酶的制备、纯化、制备纯化过程中组分的变化（电 泳实验）、碱性磷酸酶比活性分析、蛋白质的定量分析、蛋白质的水解与氨基酸
组成分析。要求学生掌握蛋白质分离纯化的基本方法步骤及蛋白质纯度的鉴定， 含量的测定方法。 模块 4 包括核酸的制备、纯度和定量分析，DNA 的体外合成，要求学生掌 握相关实验的基本原理、技术和方法。 模块 5 包括脂肪、维生素 C 的定量、。要求学生掌握其它生物分子的定量 测定的基本原理、技术和方法。 主要教学方法：实验技术及理论讲授、实验为主，课件教学为辅；指导与学 生的设计性实验、自主性实验相结合。 使用教材 :自编讲义 参考书及其它 : 现代生物学实验 , 高教出版社 , 林加涵 ,ISBN 编 号:7-04-008697-2 模 块 1：糖 模 块 教学要求： 1．掌握糖科学的进展和相关技术、方法要求， 2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目。 3．初步掌握生命科学实验实验的基本要求，学习方法。 4．掌握所学技术、方法在糖生物学研究中的应用。 教学学时：10 学时 讲授的内容： 1．制备材料的选择、破碎方法的选择、分离生物大分子的基本思路和原则； 2．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 3．糖的不同分析方法的原理和应用；糖蛋白中糖的分离、纯化的基本思路 和程序，系列结构分析的基本方法；食品、饲料的粗纤维的分析方法等。 4 粗纤维的分析的基本原理、步骤和注意事项。 实验项目： 1．淀粉的制备 2．淀粉的水解 3．总糖和还原糖的测定 应学习的技术和方法：材料选择法，组织破碎法，淀粉制备法，淀粉水解法，移
组成分析。要求学生掌握蛋白质分离纯化的基本方法步骤及蛋白质纯度的鉴定， 含量的测定方法。 模块 4 包括核酸的制备、纯度和定量分析，DNA 的体外合成，要求学生掌 握相关实验的基本原理、技术和方法。 模块 5 包括脂肪、维生素 C 的定量、。要求学生掌握其它生物分子的定量 测定的基本原理、技术和方法。 主要教学方法：实验技术及理论讲授、实验为主，课件教学为辅；指导与学 生的设计性实验、自主性实验相结合。 使用教材 :自编讲义 参考书及其它 : 现代生物学实验 , 高教出版社 , 林加涵 ,ISBN 编 号:7-04-008697-2 模 块 1：糖 模 块 教学要求： 1．掌握糖科学的进展和相关技术、方法要求， 2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目。 3．初步掌握生命科学实验实验的基本要求，学习方法。 4．掌握所学技术、方法在糖生物学研究中的应用。 教学学时：10 学时 讲授的内容： 1．制备材料的选择、破碎方法的选择、分离生物大分子的基本思路和原则； 2．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 3．糖的不同分析方法的原理和应用；糖蛋白中糖的分离、纯化的基本思路 和程序，系列结构分析的基本方法；食品、饲料的粗纤维的分析方法等。 4 粗纤维的分析的基本原理、步骤和注意事项。 实验项目： 1．淀粉的制备 2．淀粉的水解 3．总糖和还原糖的测定 应学习的技术和方法：材料选择法，组织破碎法，淀粉制备法，淀粉水解法，移
液法，容量分析法，称量法，离心技术。 应学习的仪器使用方法：组织捣碎机，普通离心机，台称，分析天平，水浴锅， 烘干箱。 教学的重点和难点： 1．这是本院学生实验的入门模块，所以实验教学的组织方面将会遇到困 难， 2．讲授部分的难点是进展和不同方法。原理的介绍。 3．仪器的正确使用。 4．与理论课的对接。 难点的解决办法： 1．该讲的讲深、讲透，特别是不同方法的原理、应用。 2．细心进行现场指导。 3．提供相关的阅读参考书。 模 块 2：代谢调节和代谢途径的研究 教学要求： 1．掌握酶科学的进展和相关技术、方法要求， 2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目，做好并提交使用报告。 3．初步学会实验设计的基本方法。 4．掌握所学技术、方法在生物学研究中的应用。 教学学时：18 学时 讲授的内容： 1．代谢调节和代谢途径的研究在生物化学学习和研究中的地位，进展。 2．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 3．在本模块基础上深入开展代谢调节和代谢途径的研究的思路和常用技术、 方法。 4. 实验设计的基本的基本要求和注意事项。 实验项目： 1．唾液淀粉酶的底物专一性
液法，容量分析法，称量法，离心技术。 应学习的仪器使用方法：组织捣碎机，普通离心机，台称，分析天平，水浴锅， 烘干箱。 教学的重点和难点： 1．这是本院学生实验的入门模块，所以实验教学的组织方面将会遇到困 难， 2．讲授部分的难点是进展和不同方法。原理的介绍。 3．仪器的正确使用。 4．与理论课的对接。 难点的解决办法： 1．该讲的讲深、讲透，特别是不同方法的原理、应用。 2．细心进行现场指导。 3．提供相关的阅读参考书。 模 块 2：代谢调节和代谢途径的研究 教学要求： 1．掌握酶科学的进展和相关技术、方法要求， 2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目，做好并提交使用报告。 3．初步学会实验设计的基本方法。 4．掌握所学技术、方法在生物学研究中的应用。 教学学时：18 学时 讲授的内容： 1．代谢调节和代谢途径的研究在生物化学学习和研究中的地位，进展。 2．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 3．在本模块基础上深入开展代谢调节和代谢途径的研究的思路和常用技术、 方法。 4. 实验设计的基本的基本要求和注意事项。 实验项目： 1．唾液淀粉酶的底物专一性
2．唾液淀粉酶的激活与抑制 3．唾液淀粉酶的最适 pH 4. 唾液淀粉酶的最适温度 5．唾液淀粉酶活性的定量分析设计，学生可在课后完成实验 6．细菌的半乳糖苷酶的诱导 7. 细菌的半乳糖苷酶的阻抑 8. 细菌的紫外、化学药物的诱变和营养缺陷型菌株的筛选、代谢途径的研究 应学习的技术和方法：底物专一性、激活与抑制、最适 pH、最适温度分析法， 细菌的半乳糖苷酶的诱导、阻遏实验方法，自动移液管的使用方法，分光光 度计的使用方法，水浴锅的使用方法，唾液淀粉酶活性的定量分析设计方法。 高压灭菌术，无菌操作术、诱变术、筛选术、代谢途径的研究方法。 应学习的仪器使用方法：自动移液管，可见分光光度计，水浴锅，高压锅，洁净 工作台，摇床等。 教学的组织方式：前五个实验都由学生预习后自我完成（可更改书中的设计方 案），单人操作；第六、七个实验由老师指导完成。第八个实验是设计性实验， 由老师指导实验设计，由学生自我设计，通过汇报、答辩、实施，最后撰写出论 文或总结，再通过汇报完成；本实验不列入课程学时，作为学生的选修实验，安 排在短学期完成。 教学的重点和难点： 1.学习的自主性加大，审核学生的方案、提供必要的条件有困难。 2.讲授部分的难点是进展和在本模块基础上开展代谢途径的研究的思路和 常用技术、方法的介绍。 3.仪器的正确使用。 4.与理论课的对接。 难点的解决办法： 1．认真备课，该讲的讲深、讲透。 2．做好必要的示教，细心进行现场指导。 3．提供相关的阅读参考书
2．唾液淀粉酶的激活与抑制 3．唾液淀粉酶的最适 pH 4. 唾液淀粉酶的最适温度 5．唾液淀粉酶活性的定量分析设计，学生可在课后完成实验 6．细菌的半乳糖苷酶的诱导 7. 细菌的半乳糖苷酶的阻抑 8. 细菌的紫外、化学药物的诱变和营养缺陷型菌株的筛选、代谢途径的研究 应学习的技术和方法：底物专一性、激活与抑制、最适 pH、最适温度分析法， 细菌的半乳糖苷酶的诱导、阻遏实验方法，自动移液管的使用方法，分光光 度计的使用方法，水浴锅的使用方法，唾液淀粉酶活性的定量分析设计方法。 高压灭菌术，无菌操作术、诱变术、筛选术、代谢途径的研究方法。 应学习的仪器使用方法：自动移液管，可见分光光度计，水浴锅，高压锅，洁净 工作台，摇床等。 教学的组织方式：前五个实验都由学生预习后自我完成（可更改书中的设计方 案），单人操作；第六、七个实验由老师指导完成。第八个实验是设计性实验， 由老师指导实验设计，由学生自我设计，通过汇报、答辩、实施，最后撰写出论 文或总结，再通过汇报完成；本实验不列入课程学时，作为学生的选修实验，安 排在短学期完成。 教学的重点和难点： 1.学习的自主性加大，审核学生的方案、提供必要的条件有困难。 2.讲授部分的难点是进展和在本模块基础上开展代谢途径的研究的思路和 常用技术、方法的介绍。 3.仪器的正确使用。 4.与理论课的对接。 难点的解决办法： 1．认真备课，该讲的讲深、讲透。 2．做好必要的示教，细心进行现场指导。 3．提供相关的阅读参考书
模 块 3：碱性磷酸酶的制备和蛋白质理化性质的测定模块 教学要求： 1．掌握科学的进展和相关技术、方法要求， 2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目，做好并提交使用报告。 3．初步学会实验设计的基本方法并实施设计方案。 4．掌握所学技术、方法在生物学研究中的应用。 5. 掌握标准曲线的制作方法和要求， 教学学时：60 学时 讲授的内容： 1．蛋白质研究在生物化学学习和研究中的地位，进展。 2．蛋白质制备的基本思路和原则。 3．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 4. 标准曲线的制作方法和要求， 5．在本模块基础上开展蛋白质研究的思路和常用技术、方法。 6. 实验设计和实施的基本的基本要求、注意事项。 实验项目： 1．碱性磷酸酶的制备 2．碱性磷酸酶的纯化 3．碱性磷酸酶制备、纯化过程中的 PAGE 跟踪 4．碱性磷酸酶制备、纯化过程中的酶比活性跟踪 5．碱性磷酸酶的理化性质的测定， 6．碱性磷酸酶的米氏常数的测定, 7．蛋白质的定量测定 8．氨基酸的组分分析 9．牡蛎蛋白质组学的研究 应学习的技术： 组织破碎术、离心术、凝胶层析术、分光光度术、电泳术，蛋白质 结构飞行质谱分析术 应学习的方法：
模 块 3：碱性磷酸酶的制备和蛋白质理化性质的测定模块 教学要求： 1．掌握科学的进展和相关技术、方法要求， 2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目，做好并提交使用报告。 3．初步学会实验设计的基本方法并实施设计方案。 4．掌握所学技术、方法在生物学研究中的应用。 5. 掌握标准曲线的制作方法和要求， 教学学时：60 学时 讲授的内容： 1．蛋白质研究在生物化学学习和研究中的地位，进展。 2．蛋白质制备的基本思路和原则。 3．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 4. 标准曲线的制作方法和要求， 5．在本模块基础上开展蛋白质研究的思路和常用技术、方法。 6. 实验设计和实施的基本的基本要求、注意事项。 实验项目： 1．碱性磷酸酶的制备 2．碱性磷酸酶的纯化 3．碱性磷酸酶制备、纯化过程中的 PAGE 跟踪 4．碱性磷酸酶制备、纯化过程中的酶比活性跟踪 5．碱性磷酸酶的理化性质的测定， 6．碱性磷酸酶的米氏常数的测定, 7．蛋白质的定量测定 8．氨基酸的组分分析 9．牡蛎蛋白质组学的研究 应学习的技术： 组织破碎术、离心术、凝胶层析术、分光光度术、电泳术，蛋白质 结构飞行质谱分析术 应学习的方法：
膜蛋白抽提法、硫酸氨盐析法、蛋白质组分跟踪法、蛋白水解法、透析法、 氨基酸组成成分分离法、蛋白质含量测定方法、酶比活性分析法、酶的理化 性质的分析法、酶的理化性质的分析法，米氏常数测定的分析方法，标准曲 线的制作方法，图像扫描、保存法，科学研究的思维方法。 应学习的仪器设备： 组织捣碎机、离心机、核酸蛋白检测仪、部分收集仪、记录仪、电 泳仪、脱色摇床、分光光度计、飞行质谱仪，凝胶成像系统等。 教学的组织方式：前四个和第六、七、八个实验由老师指导完成；第五实验由学 生设计，独立完成；第九个实验作为学生的选修实验。 教学的重点和难点： 1. 学习的自主性加大，审核学生的方案、提供必要的条件有困难。 2. 讲授部分的难点是进展、制备思路、原则和在本模块基础上开展研 究的思路和常用技术、方法的介绍。 3. 本模块涉及的仪器特别多，技术、方法多，学习难度较大。 4. 与理论课的对接。 难点的解决办法： 1. 认真备课，该讲的讲深、讲透。 2. 做好必要的示教，细心进行现场指导。 3. 做好设计报告的审核，做好仪器、药品的准备， 4. 提供相关的阅读参考书。 模 块 4：核酸的制备、定量测定模块 教学要求： 1．掌握科学的进展和相关技术、方法要求， 2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目，做好并提交使用报告。 3．掌握所学技术、方法在生物学研究中的应用。 教学学时：10 学时 讲授的内容： 1．核酸研究在生物化学学习和研究中的地位，进展
膜蛋白抽提法、硫酸氨盐析法、蛋白质组分跟踪法、蛋白水解法、透析法、 氨基酸组成成分分离法、蛋白质含量测定方法、酶比活性分析法、酶的理化 性质的分析法、酶的理化性质的分析法，米氏常数测定的分析方法，标准曲 线的制作方法，图像扫描、保存法，科学研究的思维方法。 应学习的仪器设备： 组织捣碎机、离心机、核酸蛋白检测仪、部分收集仪、记录仪、电 泳仪、脱色摇床、分光光度计、飞行质谱仪，凝胶成像系统等。 教学的组织方式：前四个和第六、七、八个实验由老师指导完成；第五实验由学 生设计，独立完成；第九个实验作为学生的选修实验。 教学的重点和难点： 1. 学习的自主性加大，审核学生的方案、提供必要的条件有困难。 2. 讲授部分的难点是进展、制备思路、原则和在本模块基础上开展研 究的思路和常用技术、方法的介绍。 3. 本模块涉及的仪器特别多，技术、方法多，学习难度较大。 4. 与理论课的对接。 难点的解决办法： 1. 认真备课，该讲的讲深、讲透。 2. 做好必要的示教，细心进行现场指导。 3. 做好设计报告的审核，做好仪器、药品的准备， 4. 提供相关的阅读参考书。 模 块 4：核酸的制备、定量测定模块 教学要求： 1．掌握科学的进展和相关技术、方法要求， 2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目，做好并提交使用报告。 3．掌握所学技术、方法在生物学研究中的应用。 教学学时：10 学时 讲授的内容： 1．核酸研究在生物化学学习和研究中的地位，进展
2．核酸制备的基本思路和原则。 3．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 3．在本模块基础上开展核酸研究的思路和常用技术、方法。 实验项目： 1．鸭肝、鸡肝的 DNA 制备 2．DNA 的纯度和含量测定 3．DNA 的体外合成 应学习的技术： 组织破碎术、离心术、分光光度术、电泳术。 应学习的方法： 酶活性抑制法、有机溶剂蛋白变性法，琼脂糖电泳法、核酸显带法 图像扫描、保存法，科学研究的思维方法。 应学习的仪器设备： 组织捣碎机、离心机、电泳仪、紫外分光光度计、凝胶成像系统等。 教学的组织方式：前两个实验由老师指导完成；第三实验由分子生物学实验课完 成。 教学的重点和难点： 1.讲授部分的难点是进展、制备思路、原则和在本模块基础上开展研究的 思路和常用技术、方法的介绍。 2.本模块空余时间较多。 3.与理论课的对接。 难点的解决办法： 1.认真备课，该讲的讲深、讲透。 2.利用空余时间做好必要的总结、延伸。 3.提供相关的阅读参考书。 模 块 5：脂肪、维生素 C 的定量测定模块 教学要求： 1．掌握科学的进展和相关技术、方法要求
2．核酸制备的基本思路和原则。 3．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 3．在本模块基础上开展核酸研究的思路和常用技术、方法。 实验项目： 1．鸭肝、鸡肝的 DNA 制备 2．DNA 的纯度和含量测定 3．DNA 的体外合成 应学习的技术： 组织破碎术、离心术、分光光度术、电泳术。 应学习的方法： 酶活性抑制法、有机溶剂蛋白变性法，琼脂糖电泳法、核酸显带法 图像扫描、保存法，科学研究的思维方法。 应学习的仪器设备： 组织捣碎机、离心机、电泳仪、紫外分光光度计、凝胶成像系统等。 教学的组织方式：前两个实验由老师指导完成；第三实验由分子生物学实验课完 成。 教学的重点和难点： 1.讲授部分的难点是进展、制备思路、原则和在本模块基础上开展研究的 思路和常用技术、方法的介绍。 2.本模块空余时间较多。 3.与理论课的对接。 难点的解决办法： 1.认真备课，该讲的讲深、讲透。 2.利用空余时间做好必要的总结、延伸。 3.提供相关的阅读参考书。 模 块 5：脂肪、维生素 C 的定量测定模块 教学要求： 1．掌握科学的进展和相关技术、方法要求
2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目，做好并提交使用报告。 3．掌握所学技术、方法在生物学研究中的应用。 教学学时：10 学时 讲授的内容： 1．脂肪、维生素测定的基本思路和原则。 2．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 3．脂肪、维生素测定方法在生命科学研究的应用。 实验项目： 1．动植物材料脂肪含量的测定 2．果蔬样品维生素 C 含量的测定 应学习的技术和方法： 均样样品制备法，均样样品恒重法、有机溶剂提取法，组织破碎法， 氧化还原滴定法。 应学习的仪器设备： 研钵、烘干箱、干燥器、分析天平、脂肪抽提器，组织捣碎机、离 心机、滴定管等。 教学的组织方式： 前一个实验由老师指导完成；第二个实验做为学生操作考试项目由学生 独立完成，现场提交实验数据。 教学的重点和难点： 1.仪器的连接、使用较难， 2.本模块第一个实验时间较长，空余时间较多。 3.与理论课的对接。 难点的解决办法： 1.做好必要的演示，加强操作指导。 2.利用空余时间做好该课程的总结
2. 掌握各实验的基本原理，完成所有的实验项目，做好并提交使用报告。 3．掌握所学技术、方法在生物学研究中的应用。 教学学时：10 学时 讲授的内容： 1．脂肪、维生素测定的基本思路和原则。 2．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 3．脂肪、维生素测定方法在生命科学研究的应用。 实验项目： 1．动植物材料脂肪含量的测定 2．果蔬样品维生素 C 含量的测定 应学习的技术和方法： 均样样品制备法，均样样品恒重法、有机溶剂提取法，组织破碎法， 氧化还原滴定法。 应学习的仪器设备： 研钵、烘干箱、干燥器、分析天平、脂肪抽提器，组织捣碎机、离 心机、滴定管等。 教学的组织方式： 前一个实验由老师指导完成；第二个实验做为学生操作考试项目由学生 独立完成，现场提交实验数据。 教学的重点和难点： 1.仪器的连接、使用较难， 2.本模块第一个实验时间较长，空余时间较多。 3.与理论课的对接。 难点的解决办法： 1.做好必要的演示，加强操作指导。 2.利用空余时间做好该课程的总结