上海交通大学：《细胞工程》精品课程教学资源（学习文献）第2讲 文献1-绣球花的植物组织培养和快速繁殖技术

90 为江发毕科学 2009年第1期 绣球花的植物组织培养和快速繁殖技术 吴华芬，刘南祥，诸葛华，姚宏 (浙江省丽水市农业科学研究所，浙江丽水323000) 摘要：利用植物组织培养法进行绣球花快速繁殖试验研究。结果表明：MS+6BA1.0mgL'+BAQO5 gL'时，对绣球花的分化增殖效果明显，而生根则使用保持在湿度85%环境条件下进行试管外生根效果较好。 关键词：绣球花：组织培养：快速繁殖 中图分类号：S685.99 文献标识码：B 文章编号：05289017(20090L009002 绣球花(Hydrangea macrophylla Seringe)为虎耳 的洗衣粉浸泡10min,再经自来水冲洗60min后， 草科(Sa:fragaceae)八仙花属落叶小灌木，别名 在超净工作台上用75%酒精消毒5s,然后用 八仙花、紫阳花、粉团花、雪球花、草绣球等，是 0.1%的升汞消毒5~6mim,之后用无菌水冲洗5~ 园林上著名的观赏植物。原产我国长江流域以南及 8次，用滤纸吸干，切割成1~2am带1个腋芽的 各省，自然株高2m。叶对生，倒卵或椭圆形，边 茎段。接种到诱导培养基MS+6BA1.0mgL1 缘有锯齿。伞房花序顶生，直径20am,近球形。 +NA40.1mgL'上，进行室内培养。经30d培 自然花期5-7月。花色多变，青白色，渐转粉红 养，形成的新生顶芽和带腋芽茎段为试验无菌 色.再转紫红色，花色美艳。其花色又常随土壤的 材料。 酸碱度而改变，土壤H值4~6时.花色多呈蓝 1.22不同激素组合对芽组培快繁的影响比较 色：H值7.5以上时，则呈红色。利用灌溉水、 将无菌试验材料接种到9组不同激素浓度配比 肥料的酸碱度调整就可以使花朵颜色时呈粉红色、 的MS培养基上，培养基中加入蔗糖3%、琼脂 时呈蓝色。蒴果呈窄卵形，黄褐色，有棱角。绣球 0.75%、pH值5.5~6.0。每个处理接种10瓶，每 花叶片翠绿，花色鲜艳，花大色美，花色多变，盛 瓶3个茎段，在标记好的培养基中进行培养。12d 开时花团锦簇，美丽多姿，每簇花可开2个月之 左右，材料基部开始膨大，并产生愈伤组织。顶芽 久，观赏期长，可在园林中配置于稀疏的树荫下及 和侧芽开始陆续生长，茎段增粗。30d后，形成丛 林荫道旁，片植于荫向山坡做花篱、花境：也可盆 生芽。将丛生芽在新配制的原配比培养基上继续进 栽观赏，还可以将整个花球剪下，瓶插室内，令人 行培养。每30d为1代，连续培养3代。每次培养 悦目怡神，深受人们喜爱。为加速绣球花的繁 结束时记录各标记培养基中生长的芽数和芽长。 殖，以满足市场的需求特开展本试验研究。 1.23不同激素组合对生根的影响以及试管外生 根比较 1材料与方法 将诱导培养中已生长至2cm,生长健壮的无 1.1供试材料 菌苗，转入到4组为不同激素浓度配比的1/2MS 试验所用材料来源于丽水市农业科学研究所苗 培养基上，另有一组移植到预先经消毒处理过的基 圃中绣球花母株。采用带腋芽的茎段为试验外 质中进行生根培养，使用培养基生根的4组培养基 植体。 中加入蔗糖2%、琼脂0.75%，H值5.5~6.0： 1.2方法 使用试管外生根处理的另一组基质采用珍珠岩：蛭 1.2.1无菌材料的获得 石为1：1。洗净无菌苗上黏附的培养基，经多菌灵 4月上旬剪取绣球花的带腋芽茎段，先用1% 浸泡后移植到基质中，保持湿度85%环境。每个 收稿日期：20080915 基金项目：浙江省丽水市科技局科技项目(20074024 作者简介：吴华芬(976)，女，浙江庆元人，衣艺师，主要从事花园艺技术研究工作。 1994-2012 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved.http://www.cnki.net

绣球花的植物组织培养和快速繁殖技术 吴华芬, 刘南祥, 诸葛华, 姚 宏 ( 浙江省丽水市农业科学研究所, 浙江 丽水 323000) 摘 要: 利用植物组织培养法进行绣球花快速繁殖试验研究。结果表明: MS+ 6-BA 1
0 mg
L - 1 + IBA 0
05 mg
L - 1时, 对绣球花的分化增殖效果明显, 而生根则使用保持在湿度 85% 环境条件下进行试管外生根效果较好。 关键词: 绣球花; 组织培养; 快速繁殖 中图分类号: S685
99 文献标识码: B 文章编号: 0528- 9017( 2009) 01- 0090- 02 收稿日期: 2008-09-15 基金项目: 浙江省丽水市科技局科技项目 (20074024) 作者简介: 吴华芬 ( 1976- ) , 女, 浙江庆元人, 农艺师, 主要从事花卉园艺技术研究工作。 绣球花 ( Hydrangea macrophylla Seringe) 为虎耳 草科 ( Saxifragaceae) 八仙花属落叶小灌木, 别名 八仙花、紫阳花、粉团花、雪球花、草绣球等, 是 园林上著名的观赏植物。原产我国长江流域以南及 各省, 自然株高 2 m。叶对生, 倒卵或椭圆形, 边 缘有锯齿。伞房花序顶生, 直径 20 cm, 近球形。 自然花期 5- 7 月。花色多变, 青白色, 渐转粉红 色, 再转紫红色, 花色美艳。其花色又常随土壤的 酸碱度而改变, 土壤 pH 值 4~ 6 时, 花色多呈蓝 色; pH 值 7
5 以上时, 则呈红色。利用灌溉水、 肥料的酸碱度调整就可以使花朵颜色时呈粉红色、 时呈蓝色。蒴果呈窄卵形, 黄褐色, 有棱角。绣球 花叶片翠绿, 花色鲜艳, 花大色美, 花色多变, 盛 开时花团锦簇, 美丽多姿, 每簇花可开 2 个月之 久, 观赏期长, 可在园林中配置于稀疏的树荫下及 林荫道旁, 片植于荫向山坡做花篱、花境; 也可盆 栽观赏, 还可以将整个花球剪下, 瓶插室内, 令人 悦目怡神, 深受人们喜爱 [ 1] 。为加速绣球花的繁 殖, 以满足市场的需求特开展本试验研究。 1 材料与方法 1
1 供试材料 试验所用材料来源于丽水市农业科学研究所苗 圃中绣球花母株。采用带腋芽的茎段为试验外 植体。 1
2 方法 1
2
1 无菌材料的获得 4 月上旬剪取绣球花的带腋芽茎段, 先用 1% 的洗衣粉浸泡 10 min, 再经自来水冲洗 60 min 后, 在超净工作台上用 75% 酒精消毒 5 s, 然后用 0
1%的升汞消毒 5~ 6 min, 之后用无菌水冲洗 5~ 8 次, 用滤纸吸干, 切割成 1~ 2 cm 带 1 个腋芽的 茎段 [2] 。接种到诱导培养基 MS+ 6-BA 1
0 mg
L - 1 + NAA 0
1 mg
L - 1 上, 进行室内培养。经 30 d 培 养, 形成的新生顶芽和带腋芽茎段为试验无菌 材料。 1
2
2 不同激素组合对芽组培快繁的影响比较 将无菌试验材料接种到 9 组不同激素浓度配比 的MS 培养基上, 培养基中加入蔗糖 3%、琼脂 0
75%、pH 值 5
5~ 6
0。每个处理接种 10 瓶, 每 瓶 3 个茎段, 在标记好的培养基中进行培养。12 d 左右, 材料基部开始膨大, 并产生愈伤组织。顶芽 和侧芽开始陆续生长, 茎段增粗。30 d 后, 形成丛 生芽。将丛生芽在新配制的原配比培养基上继续进 行培养。每 30 d 为 1 代, 连续培养3 代。每次培养 结束时记录各标记培养基中生长的芽数和芽长。 1
2
3 不同激素组合对生根的影响以及试管外生 根比较 将诱导培养中已生长至 2 cm, 生长健壮的无 菌苗, 转入到 4 组为不同激素浓度配比的 1
2 MS 培养基上, 另有一组移植到预先经消毒处理过的基 质中进行生根培养, 使用培养基生根的 4 组培养基 中加入蔗糖 2% 、琼脂 0
75%, pH 值 5
5~ 6
0; 使用试管外生根处理的另一组基质采用珍珠岩
蛭 石为 1
1。洗净无菌苗上黏附的培养基, 经多菌灵 浸泡后移植到基质中, 保持湿度 85% 环境。每个 90 2009 年第 1 期

吴华芬，等：绣球花的植物组织培养和快速繁殖技术 91 处理对比50株苗。15d后，陆续形成生根小苗。 均可产生诱导效果。从芽数量、芽长和生长情况看 30d后记录各配比培养基和试管外生根处理的小苗 以MS+6BA1.0mgL'+BA0.05mgL和MS+ 的生根率、根数及根长。 6BA1.0mgL+BA0.2mgL'的效果最好，但 1.24培养条件 从成本考虑，MS+6BA1.0mgL'+BA0.05 培养温度为(25±3)℃.光照强度1500~ mgL配方更经济实惠别。随着6BA浓度的增加， 2000k,光照时间为10hd。 芽分化数提高，芽生长粗壮，但是当6BA浓度达 2结果与分析 到20mgL'时，容易产生玻璃化现象；IBA在 0.5~0.2mgL范围内，对增殖和生长影响不显 2.1不同激素组合对芽组培快繁的影响 著，但浓度达l.0mgL'时，则对芽的增殖数量和 从表1可知，不同激素组合对绣球花外植体芽 伸长有抑制作用。 表1不同激素组合对茅组培快繁的影响 激素组合 芽数个 芽长cm 芽生长状况 MS+GBA 0.5 mg L+IBA 0.05 mg*L- 46 2.7 芽弱小，大小不均匀，色浅 MS+GBA 0.5 mg*L+IBA 0.2 mg L 57 2.6 芽较粗壮，大小均匀，色深 MS+GBA 0.5 mg*L-1+IBA 1.0 mg*L-! 39 2.0 芽较粗壮，大小不均匀，色深 MS+GBA 1.0 mg*L-1+IBA 0.05 mg*L-1 68 2.5 芽粗壮，大小均匀，色深 MS+GBA 1.0 mg*L-!+IBA Q.2 mg*L- 71 2.3 芽较粗壮，大小均匀，色深 MS+BA 1.0 mg'L+IBA 1.0 mgL 43 1.9 芽较粗壮，大小不均匀，色深 MS+GBA 2.0 mg*L+IBA Q05 mg'L-! 82 2.4 芽弱，大小较均匀，少量现玻璃化 MS+GBA 2.0 mg L+IBA 0.2 mg*L 83 2.4 芽弱，大小较均匀，有玻璃化现象 MS+GBA 2.0 mgL+IBA 1.0 mg*L 41 1.8 芽弱，大小不均匀，玻璃化明显 2.2不同激素组合对生根的影响以及试管外生根 比较 3小结与讨论 从表2可知，不同生长素对绣球花外植体芽生 在绣球花的组织培养和快速繁殖技术中，激素 根有一定效果，当NAA达2.0mgL时，生根效 是调控植物生长分化的重要因子。在合适的细胞分 果开始下降。而绣球花使用试管外生根技术，保持 裂素和生长素的配比中，能诱导芽的分化。分化增 在湿度85%环境条件下，生根效果最好，同时苗 殖培养基以MS+6BA1.0mgL'+BA0.05 生长粗壮，根系发达。 mgL效果较好又实惠；而在生根处理时，可以 表2不同激素组合对生根的影响及 简化培养程序、降低生产成本，使用保持在湿度 与试管外生根比较 85%环境条件下进行试管外生根效果较好。 生根根数根长 处理 苗生长状态 参考文献： % 条m V2 MS+NAA 0.1 mg'L-I 646 3.7 3.5 苗生长正常 【1】陈志萍.绣球花盆栽及促成栽培技术【】，上海农业科 技，2004(4)：112 V2 MS+NAA 0.5 mgL-I 85.7 6.6 29 苗生长健壮 [2 龚伟，王米力，石大兴.八仙花离体培养和植株再生[ V2 MS+NAA 2 0 mg'L-I 789 5.1 3.0 苗生长缓慢 植物生理学通讯，20B(6):624. V2MS 50.2 1.3 24 苗生长缓慢 [31 曹孜义.实用植物组织培养技术教程[M),兰州：甘肃科 学技术出版社，1996 试管外生根 100.0 125 47 苗生长粗壮 (责任编辑：夏起洲) 1994-2012 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved.http://www.cnki.net

处理对比 50 株苗。15 d 后, 陆续形成生根小苗。 30 d 后记录各配比培养基和试管外生根处理的小苗 的生根率、根数及根长。 1
2
4 培养条件 培养温度为 ( 25
3)
, 光照强度1 500 ~ 2 000 lx, 光照时间为 10 h
d - 1。 2 结果与分析 2
1 不同激素组合对芽组培快繁的影响 从表 1 可知, 不同激素组合对绣球花外植体芽 均可产生诱导效果。从芽数量、芽长和生长情况看 以MS+ 6-BA 1
0 mg
L - 1 + IBA 0
05 mg
L - 1和MS+ 6-BA 1
0 mg
L - 1 + IBA 0
2 mg
L - 1的效果最好, 但 从成 本考虑, MS + 6-BA 1
0 mg
L - 1 + IBA 0
05 mg
L - 1配方更经济实惠 [ 3] 。随着 6-BA 浓度的增加, 芽分化数提高, 芽生长粗壮, 但是当 6-BA 浓度达 到 2
0 mg
L - 1 时, 容易产生玻璃化现象; IBA 在 0
05~ 0
2 mg
L - 1范围内, 对增殖和生长影响不显 著, 但浓度达1
0 mg
L - 1时, 则对芽的增殖数量和 伸长有抑制作用。 表 1 不同激素组合对芽组培快繁的影响 激素组合 芽数
个 芽长
cm 芽生长状况 MS+ 6-BA 0
5 mg
L - 1 + IBA 0
05 mg
L - 1 4
6 2
7 芽弱小, 大小不均匀, 色浅 MS+ 6-BA 0
5 mg
L - 1 + IBA 0
2 mg
L - 1 5
7 2
6 芽较粗壮, 大小均匀, 色深 MS+ 6-BA 0
5 mg
L- 1 + IBA 1
0 mg
L- 1 3
9 2
0 芽较粗壮, 大小不均匀,色深 MS+ 6-BA 1
0 mg
L- 1 + IBA 0
05 mg
L- 1 6
8 2
5 芽粗壮, 大小均匀, 色深 MS+ 6-BA 1
0 mg
L - 1 + IBA 0
2 mg
L - 1 7
1 2
3 芽较粗壮, 大小均匀, 色深 MS+ 6-BA 1
0 mg
L - 1 + IBA 1
0 mg
L - 1 4
3 1
9 芽较粗壮, 大小不均匀,色深 MS+ 6-BA 2
0 mg
L - 1 + IBA 0
05 mg
L - 1 8
2 2
4 芽弱, 大小较均匀, 少量现玻璃化 MS+ 6-BA 2
0 mg
L - 1 + IBA 0
2 mg
L - 1 8
3 2
4 芽弱, 大小较均匀, 有玻璃化现象 MS+ 6-BA 2
0 mg
L - 1 + IBA 1
0 mg
L - 1 4
1 1
8 芽弱, 大小不均匀, 玻璃化明显 2
2 不同激素组合对生根的影响以及试管外生根 比较 从表 2 可知, 不同生长素对绣球花外植体芽生 根有一定效果, 当 NAA 达 2
0 mg
L - 1 时, 生根效 果开始下降。而绣球花使用试管外生根技术, 保持 在湿度 85% 环境条件下, 生根效果最好, 同时苗 生长粗壮, 根系发达。 表 2 不同激素组合对生根的影响及 与试管外生根比较 处理 生根率
% 根数
条 根长
cm 苗生长状态 1
2 MS+ NAA 0
1 mg
L - 1 64
6 3
7 3
5 苗生长正常 1
2 MS+ NAA 0
5 mg
L - 1 85
7 6
6 2
9 苗生长健壮 1
2 MS+ NAA 2
0 mg
L - 1 78
9 5
1 3
0 苗生长缓慢 1
2 MS 50
2 1
3 2
4 苗生长缓慢 试管外生根 100
0 12
5 4
7 苗生长粗壮 3 小结与讨论 在绣球花的组织培养和快速繁殖技术中, 激素 是调控植物生长分化的重要因子。在合适的细胞分 裂素和生长素的配比中, 能诱导芽的分化。分化增 殖培 养基 以 MS + 6-BA 1
0 mg
L - 1 + IBA 0
05 mg
L - 1效果较好又实惠; 而在生根处理时, 可以 简化培养程序、降低生产成本, 使用保持在湿度 85%环境条件下进行试管外生根效果较好。 参考文献: [ 1 ] 陈志萍. 绣球花盆栽及促成栽培技术 [ J]
上海农业科 技, 2004 ( 4) : 112. [ 2 ] 龚伟, 王米力, 石大兴. 八仙花离体培养和植株再生 [ J] . 植物生理学通讯, 2003 ( 6): 624. [ 3 ] 曹孜义. 实用植物组织培养技术教程 [M] . 兰州: 甘肃科 学技术出版社, 1996. ( 责任编辑: 夏起洲) 吴华芬, 等: 绣球花的植物组织培养和快速繁殖技术 91