金免疫测定技术
金免疫测定技术
●斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试 验均以硝酸纤维素膜为固相载体，以免疫 金为结合物，其最大特点是简便快速。 ●以下均以双抗体夹心法测定尿中HCG(人 绒毛膜促性腺激素)为例
⚫斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试 验均以硝酸纤维素膜为固相载体，以免疫 金为结合物，其最大特点是简便快速。 ⚫以下均以双抗体夹心法测定尿中HCG（人 绒毛膜促性腺激素）为例
斑点金免疫渗滤试验
斑点金免疫渗滤试验
原理 ●在硝酸纤维素膜的膜片中央滴加纯化的抗体，为 膜所吸附。当滴加在膜上的液体标本渗滤过膜时， 标本中待测抗原被膜上抗体捕获，其余无关物质 滤出膜片。其后加入的免疫金在渗滤过程中与已 结合在膜上的抗原相结合。因胶体金本身呈红色， 阳性反应即在膜中央显示红色斑点（胶体金聚 集)
原 理 ⚫ 在硝酸纤维素膜的膜片中央滴加纯化的抗体，为 膜所吸附。当滴加在膜上的液体标本渗滤过膜时， 标本中待测抗原被膜上抗体捕获，其余无关物质 滤出膜片。其后加入的免疫金在渗滤过程中与已 结合在膜上的抗原相结合。因胶体金本身呈红色， 阳性反应即在膜中央显示红色斑点（胶体金聚 集）
免疫金 HCG 抗HCG抗体 醋酸纤维素膜
醋酸纤维素膜 抗HCG抗体 HCG 免疫金
主要材料 ●试剂盒：渗滤装置、免疫金、洗涤液 ●器材：一次性滴管 ●标本：尿液
主要材料 ⚫试剂盒：渗滤装置、免疫金、洗涤液 ⚫器材：一次性滴管 ⚫标本：尿液
B A 微孔膜 0 吸水垫料 DIGFA渗滤装置及操作示意图 A:操作示意图B:装置分解图 底
操作步骤 ●（1)将反应板平放于实验台上，于小孔内滴加尿 液5滴，待完全渗入。 。（2)于小孔内滴加免疫金试剂3滴，待完全渗入。 。（3)于小孔内滴加洗涤液2~3滴，待完全渗入。 ●（4)目测观察结果
操作步骤 ⚫ （1）将反应板平放于实验台上，于小孔内滴加尿 液5滴，待完全渗入。 ⚫ （2）于小孔内滴加免疫金试剂3滴，待完全渗入。 ⚫ （3）于小孔内滴加洗涤液2～3滴，待完全渗入。 ⚫ （4）目测观察结果
结果判断 ●在膜中央有清晰的红色斑点者判为阳性反应，说 明标本HCG阳性；反之则为阴性反应，说明标本 HCG阴性。斑点呈色的深浅相应地提示阳性强度。 ●结果书写 例如：1号标本醋酸纤维膜中央出现红色斑点，该 标本为HCG阳性
结果判断 ⚫ 在膜中央有清晰的红色斑点者判为阳性反应，说 明标本HCG阳性；反之则为阴性反应，说明标本 HCG阴性。斑点呈色的深浅相应地提示阳性强度。 ⚫ 结果书写 例如：1号标本醋酸纤维膜中央出现红色斑点，该 标本为HCG阳性
注意事项 ●注意试剂的保存及使用温度。 ●正确操作，注意加入尿液样品量和免疫金 试剂量
注意事项 ⚫注意试剂的保存及使用温度。 ⚫正确操作，注意加入尿液样品量和免疫金 试剂量