实验一坐骨神经腓肠肌标本的制备 目的和原理 蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动与温血动物近似,但其离体组织所需的生活条件比 较简单,且易于控制,因此在生理学实验中常用其离体组织或器官作为实验标本。例如:蛙或蟾蜍 的坐骨神经腓肠肌标本,可用来观察和研究兴奋性、兴奋过程、刺激引起兴奋的条件、兴奋在神经- 肌接头处的传递、肌肉收缩的特点等多种生理现象,所以,制备坐骨神经-腓肠肌标本,是生理学实 验的一项基本操作技术。 本实验的目的是:学习并掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的方法,为以后的神经肌肉实验打下基 二、实验对象 蛙或蟾蜍 器材和用品 蛙板、蛙针、蛙钉、剪刀(2把)、镊子(2把)、玻璃针、锌铜弓、培养皿、滴管、棉线、棉 球、尸体盘(以上用品合称蛙类解剖器械一套)及任氏液 四、方法与步骤 l.破坏脑脊髓选一活泼健壮的蛙或蟾蜍,用清水冲洗τ净。左手握蛙,用食指下压吻端,拇指 按压背部,使头前俯;右手持蛙针由吻端沿正中线向尾端触划,所触到的凹陷处即是枕骨大孔所在 部位。将蛙针由此垂直刺入皮下,再将针尖折向前方,经枕骨大孔进入颅腔,左右搅动捣毁脑组织 (图1-1)。然后将蛙针退出至刺入点皮下,再将针尖向后插入椎管捣毁脊髓。 图1-1 2.剪除前部躯干及内脏在骶髂关节以上1厘米处用粗剪刀剪断脊柱,并将前部躯干及所有内脏 并剪去,仅保留一段腰骶部脊柱和后肢。在所留脊柱的腹侧两旁可看到坐骨神经丛。剪下的部分 置于尸体盘内。 3.剥皮左手捏住脊柱断端,右手捏住断端边缘的皮肤,向下剥掉后肢的全部皮肤,标本置于盛 有任氏液的培养皿中待用,皮肤弃去。洗净双手和器械,以免蛙或蟾蜍皮肤的分泌物损害神经和肌 肉
实验一 坐骨神经腓肠肌标本的制备 一、目的和原理 蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动与温血动物近似，但其离体组织所需的生活条件比 较简单，且易于控制，因此在生理学实验中常用其离体组织或器官作为实验标本。例如：蛙或蟾蜍 的坐骨神经腓肠肌标本，可用来观察和研究兴奋性、兴奋过程、刺激引起兴奋的条件、兴奋在神经- 肌接头处的传递、肌肉收缩的特点等多种生理现象，所以，制备坐骨神经-腓肠肌标本，是生理学实 验的一项基本操作技术。 本实验的目的是：学习并掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的方法，为以后的神经肌肉实验打下基 础。 二、实验对象 蛙或蟾蜍 三、器材和用品 蛙板、蛙针、蛙钉、剪刀（2把）、镊子（2把）、玻璃针、锌铜弓、培养皿、滴管、棉线、棉 球、尸体盘（以上用品合称蛙类解剖器械一套）及任氏液。 四、方法与步骤 1．破坏脑脊髓选一活泼健壮的蛙或蟾蜍，用清水冲洗干净。左手握蛙，用食指下压吻端，拇指 按压背部，使头前俯；右手持蛙针由吻端沿正中线向尾端触划，所触到的凹陷处即是枕骨大孔所在 部位。将蛙针由此垂直刺入皮下，再将针尖折向前方，经枕骨大孔进入颅腔，左右搅动捣毁脑组织 （图1-1）。然后将蛙针退出至刺入点皮下，再将针尖向后插入椎管捣毁脊髓。 图1-1 2．剪除前部躯干及内脏在骶髂关节以上1厘米处用粗剪刀剪断脊柱，并将前部躯干及所有内脏 一并剪去，仅保留一段腰骶部脊柱和后肢。在所留脊柱的腹侧两旁可看到坐骨神经丛。剪下的部分 置于尸体盘内。 3．剥皮左手捏住脊柱断端，右手捏住断端边缘的皮肤，向下剥掉后肢的全部皮肤，标本置于盛 有任氏液的培养皿中待用，皮肤弃去。洗净双手和器械，以免蛙或蟾蜍皮肤的分泌物损害神经和肌 肉
4.分离两后肢将下肢标本腹侧向上用蛙钉固定于蛙板上,用玻璃针沿脊柱两侧分离两条坐骨神 经;在两条坐骨神经下各穿一线,于靠近脊柱处将其分别结扎,并在扎线与脊柱之间剪断神经;左 手用结扎线提起坐骨神经,右手持剪刀或玻璃针向下游离,直至坐骨神经出盆腔处;将游离的两条 坐骨神经分别置于两侧大腿的肌肉上。去除固定蛙钉,左手持脊柱,使尾骶骨翘起,右手用粗剪刀 将所留脊柱全部剪去;捏住两侧髂骨向两侧分开,使耻骨联合脱臼,沿耻骨联合正中将两下肢剪 开。将分离后的两后肢浸于任氏液中备用。 5.制成坐骨神经小腿标本取一条蛙后肢置于蛙板,使背面向上,辨认清楚坐骨神经沟与腓肠肌 的位置等,用剪刀剪断梨状肌及其附近的结缔组织,左手提起神经上的细线,右手持剪刀或玻璃针 沿坐骨神经沟细心游离坐骨神经,一直到胭窝为止。遇到坐骨神经的分支,应小心地剪断,切勿损 伤神经主干。将游离的坐骨神经放在小腿的肌肉上。沿膝关节的周围将大腿的所有肌腱(或肌肉) 剪断,并用剪刀刮净股骨下端附着的肌肉。在股骨的上三分之一处,用粗剪刀剪断股骨,便制成了 坐骨神经小腿标本。 6.完成坐骨神经腓肠肌标本的制备在坐骨神经小腿标本的基础上,用玻璃针或镊子将腓肠肌跟 腱分离并穿线结扎,在结扎处的下端将跟腱剪断,用结扎线提起腓肠肌,剪去其周围的结缔组织 (注意勿损伤支配该肌的神经分支)游离腓肠肌,直到膝关节为止。粗剪刀在膝关节下剪去小腿, 留下的即为坐骨神经腓肠肌标本(图1-2)。 介柱骨 播新肌 7.检验标本的兴奋性(机能状态)标本做成后,用浸有任氏液的锌铜弓轻轻接触神经以刺激 之,若腓肠肌有灵敏的收缩反应,则表明标本的兴奋性良好,可将标本放于任氏液中待用;若肌肉 收缩反应不灵敏或根本不起反应,则说明标本不合格,必须找出失败的原因,并用另一条蛙后肢重 新制作。 五、注意事项 1.在标本制作的过程中,要经常用任氏液湿润神经和肌肉,以免干燥 操作过程中对神经不论是提拉或者是分离,都应轻柔,切勿损伤,剪断不需要的分支时要十 分准确,勿损伤主干
4．分离两后肢将下肢标本腹侧向上用蛙钉固定于蛙板上，用玻璃针沿脊柱两侧分离两条坐骨神 经；在两条坐骨神经下各穿一线，于靠近脊柱处将其分别结扎，并在扎线与脊柱之间剪断神经；左 手用结扎线提起坐骨神经，右手持剪刀或玻璃针向下游离，直至坐骨神经出盆腔处；将游离的两条 坐骨神经分别置于两侧大腿的肌肉上。去除固定蛙钉，左手持脊柱，使尾骶骨翘起，右手用粗剪刀 将所留脊柱全部剪去；捏住两侧髂骨向两侧分开，使耻骨联合脱臼，沿耻骨联合正中将两下肢剪 开。将分离后的两后肢浸于任氏液中备用。 5．制成坐骨神经小腿标本取一条蛙后肢置于蛙板，使背面向上，辨认清楚坐骨神经沟与腓肠肌 的位置等，用剪刀剪断梨状肌及其附近的结缔组织，左手提起神经上的细线，右手持剪刀或玻璃针 沿坐骨神经沟细心游离坐骨神经，一直到腘窝为止。遇到坐骨神经的分支，应小心地剪断，切勿损 伤神经主干。将游离的坐骨神经放在小腿的肌肉上。沿膝关节的周围将大腿的所有肌腱（或肌肉） 剪断，并用剪刀刮净股骨下端附着的肌肉。在股骨的上三分之一处，用粗剪刀剪断股骨，便制成了 坐骨神经小腿标本。 6．完成坐骨神经腓肠肌标本的制备在坐骨神经小腿标本的基础上，用玻璃针或镊子将腓肠肌跟 腱分离并穿线结扎，在结扎处的下端将跟腱剪断，用结扎线提起腓肠肌，剪去其周围的结缔组织 （注意勿损伤支配该肌的神经分支）游离腓肠肌，直到膝关节为止。粗剪刀在膝关节下剪去小腿， 留下的即为坐骨神经腓肠肌标本(图1-2)。 图1-2 7．检验标本的兴奋性（机能状态）标本做成后，用浸有任氏液的锌铜弓轻轻接触神经以刺激 之，若腓肠肌有灵敏的收缩反应，则表明标本的兴奋性良好，可将标本放于任氏液中待用；若肌肉 收缩反应不灵敏或根本不起反应，则说明标本不合格，必须找出失败的原因，并用另一条蛙后肢重 新制作。 五、注意事项 1．在标本制作的过程中，要经常用任氏液湿润神经和肌肉，以免干燥。 2．操作过程中对神经不论是提拉或者是分离，都应轻柔，切勿损伤，剪断不需要的分支时要十 分准确，勿损伤主干
六、要求 1.掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。 2.了解任氏液的组成及用途 七、思考题 1.破坏脑脊髓后,蟾蜍有何表现?为什么? 2.如何判断制备的坐骨神经腓肠肌标本的兴奋性? 3.刺激坐骨神经为什么会引起腓肠肌的收缩?
六、要求 1．掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。 2．了解任氏液的组成及用途。 七、思考题 1．破坏脑脊髓后，蟾蜍有何表现？为什么？ 2．如何判断制备的坐骨神经腓肠肌标本的兴奋性？ 3．刺激坐骨神经为什么会引起腓肠肌的收缩？
