实验十红细胞的渗透脆性 目的和原理 正常情况下,哺乳类动物红细胞内的渗透压与血浆的渗透压相等,约相当于0.9%NaCl溶液的渗 透压。渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液,高于或低于血浆渗透压的溶液则相应地称为 高渗或低渗溶液。将红细胞悬浮于等渗的№aCl溶液中,其体积和形态可保持不变。若将红细胞悬浮 于低渗的NaCl溶液中,由于红细胞内的渗透压大于细胞外溶液的渗透压,根据半透膜的渗透原理, 水分子将从细胞外进入细胞内,使红细胞的体积膨大,甚至破裂溶解,红细胞的破裂溶解又称为溶 血。我们将红细胞在低渗溶液中膨胀破裂的特性称之为红细胞的渗透脆性。渗透脆性的大小主要决 定于红细胞的膜面积与细胞容积的比值,正常红细胞为双凹圆盘形,膜面积与容积的比值较大,故 在一定浓度的低渗NaCl溶液中,只引起其体积的增加,并不能使其破裂,也就是说,红细胞对低渗 溶液具有一定的抵抗力,称之为渗透抵抗力。正常人的红细胞,一般在0.42%的№aCl溶液中时,才开 始岀现溶血:在0.35%的№aCl溶液中时,则完全溶血。开始出现溶血和完全溶血时的NaCl溶液的浓度 值,被用来表示红细胞的渗透抵抗力,前者代表最小渗透抵抗力,后者代表最大渗透抵抗力。抵抗 力增强者称为脆性减低,反之称为脆性増髙。 一般来说,年轻红细胞的渗透抵抗力较强(渗透脆性较小),而衰老红细胞的渗透抵抗力则较 弱(渗透脆性较大)。在某些疾病中,如遗传性球形细胞増多症,病人红细胞的渗透抵抗力可明显 减小(渗透脆性增大)。 不同物质的等渗溶液不一定都能使红细胞的体积和形态保持正常。生理学上,将能使悬浮于其 中的红细胞保持正常体积和形态的盐溶液称为等张溶液。这里的所谓“张力”,实际上是指溶液中 不能透过细胞膜的颗粒所形成的渗透压。例如,NaCl不能自由透过细胞膜,所以0.9%NaC溶液既是 等渗溶液,也是等张溶液:;但如尿素,由于它能自由通过细胞膜,因而1.9%的尿素溶液虽然与血浆 等渗,但红细胞置入其中后立即溶血,所以不是等张溶液 本实验的目的在于:通过测定红细胞的渗透脆性,观察不同浓度的低渗NaCl溶液对红细胞的影 响;比较红细胞在等渗№aCl溶液和等渗尿素溶液中发生的不同情况,理解细胞外液渗透张力的相对 恒定对维持细胞正常形态与功能的重要性。 二、实验对象人 三、器材和用品 试管架、小试管1支、2皿l刻度吸管3支、小滴管6支、2n注射器、8号注射针头、显微镜、载玻 片、盖玻片。1%NaCl溶液、o.9%NaCl溶液、75%酒精棉球、4%碘酒棉球、1.%尿素溶液、蒸馏水。 四、方法与步骤 1.取口径相同的干洁小试管14支,编号排列在试管架上。按下表所示的剂量,分别向各试管内 加入1%aCl溶液和蒸馏水,配制成从0.25%~0.7%共14种不同浓度的低渗№aCl溶液,每管总量均为 2m1 不同浓度NaC1溶液的配制
实验十 红细胞的渗透脆性 一、目的和原理 正常情况下，哺乳类动物红细胞内的渗透压与血浆的渗透压相等，约相当于0.9%NaCl溶液的渗 透压。渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液，高于或低于血浆渗透压的溶液则相应地称为 高渗或低渗溶液。将红细胞悬浮于等渗的NaCl溶液中，其体积和形态可保持不变。若将红细胞悬浮 于低渗的NaCl溶液中，由于红细胞内的渗透压大于细胞外溶液的渗透压，根据半透膜的渗透原理， 水分子将从细胞外进入细胞内，使红细胞的体积膨大，甚至破裂溶解，红细胞的破裂溶解又称为溶 血。我们将红细胞在低渗溶液中膨胀破裂的特性称之为红细胞的渗透脆性。渗透脆性的大小主要决 定于红细胞的膜面积与细胞容积的比值，正常红细胞为双凹圆盘形，膜面积与容积的比值较大，故 在一定浓度的低渗NaCl溶液中，只引起其体积的增加，并不能使其破裂，也就是说，红细胞对低渗 溶液具有一定的抵抗力，称之为渗透抵抗力。正常人的红细胞，一般在0.42%的NaCl溶液中时，才开 始出现溶血；在0.35%的NaCl溶液中时，则完全溶血。开始出现溶血和完全溶血时的NaCl溶液的浓度 值，被用来表示红细胞的渗透抵抗力，前者代表最小渗透抵抗力，后者代表最大渗透抵抗力。抵抗 力增强者称为脆性减低，反之称为脆性增高。 一般来说，年轻红细胞的渗透抵抗力较强（渗透脆性较小），而衰老红细胞的渗透抵抗力则较 弱（渗透脆性较大）。在某些疾病中，如遗传性球形细胞增多症，病人红细胞的渗透抵抗力可明显 减小（渗透脆性增大）。 不同物质的等渗溶液不一定都能使红细胞的体积和形态保持正常。生理学上，将能使悬浮于其 中的红细胞保持正常体积和形态的盐溶液称为等张溶液。这里的所谓“张力”，实际上是指溶液中 不能透过细胞膜的颗粒所形成的渗透压。例如，NaCl不能自由透过细胞膜，所以0.9%NaCl溶液既是 等渗溶液，也是等张溶液；但如尿素，由于它能自由通过细胞膜，因而1.9%的尿素溶液虽然与血浆 等渗，但红细胞置入其中后立即溶血，所以不是等张溶液。 本实验的目的在于：通过测定红细胞的渗透脆性，观察不同浓度的低渗NaCl溶液对红细胞的影 响；比较红细胞在等渗NaCl溶液和等渗尿素溶液中发生的不同情况，理解细胞外液渗透张力的相对 恒定对维持细胞正常形态与功能的重要性。 二、实验对象人 三、器材和用品 试管架、小试管17支、2ml刻度吸管3支、小滴管6支、2ml注射器、8号注射针头、显微镜、载玻 片、盖玻片。1%NaCl溶液、0.9%NaCl溶液、75%酒精棉球、4%碘酒棉球、1.9%尿素溶液、蒸馏水。 四、方法与步骤 1．取口径相同的干洁小试管14支，编号排列在试管架上。按下表所示的剂量，分别向各试管内 加入1%NaCl溶液和蒸馏水，配制成从0.25%～0.7%共14种不同浓度的低渗NaCl溶液，每管总量均为 2ml。 不同浓度NaCl溶液的配制 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
1%NaC1(毫升)0.500.600.640.680.720.60.800.840.810.920.91.。1.201.40 蒸馏水(毫升)1.501.401.361.321.281.241.201.161.121.081.041.000.800.60 溶液浓度(%)0.250.300 0.44|0.460.480.500.600. 2.另取3支干洁的小试管,编号15~17,排列在试管架上,分别加入0.9%NaCl溶液、1.9%尿素 溶液、蒸馏水各2.0ml。 3.在肘正中静脉处,用碘酒、酒精常规消毒皮肤,用干燥的消毒注射器从肘正中静脉采血 1.5m1,并迅速向每支试管内各注入一滴血液。 4.将试管夹在两掌心中轻轻搓动,使血细胞和溶液充分混匀(切勿用力振摇)。然后放回试管 架,在室温下静置l小时,使细胞下沉。有条件的实验室,也可用离心沉淀法,以每分钟2000~30 转的转速,离心3~5分钟即可。 5.观察并记录结果 (1)按下列标准判断有无溶血、不完全溶血或完全溶血。 上层清液无色,管底为浑浊红色,表示没有溶血。 上层清液呈淡红色,管底为浑浊红色,表示只有部分红细胞破裂溶解,为不完全溶血 管内液体完全变成透明的红色,管底无细胞沉积,为完全溶血 (2)记录红细胞的脆性范围,即开始出现溶血时的NaCl溶液的浓度与完全溶血时的NaCl溶液的 浓度。 (3)比较第15、16、17管的溶血情况,并分析原因。 (4)分别将第3管、第8管、第13管、第15管、第16管、第1τ管重新混匀,用小滴管取混合液 滴放在载玻片上,盖上盖玻片,在显微镜下观察红细胞的形态,比较其差别,并分析原因 五、注意事项 NaCl溶液的浓度必须准确 2.小试管必须清洁、干燥。 3.采血时应严格消毒,向试管内滴加血液时应靠近液面,轻轻滴入,以免破坏红细胞而造成假 象。 4.应在光线明亮处观察结果,可用乳白色为背景。 六、要求 1.测出受试者的红细胞渗透脆性,并掌握测定方法。 2.掌握红细胞的渗透脆性、渗透抵抗力的概念及衡量其高低的指标。 3.理解等渗溶液与等张溶液的概念。 七、思考题
1%NaCl（毫升） 0.50 0.60 0.64 0.68 0.72 0.76 0.80 0.84 0.88 0.92 0.96 1.00 1.20 1.40 蒸馏水(毫升) 1.50 1.40 1.36 1.32 1.28 1.24 1.20 1.16 1.12 1.08 1.04 1.00 0.80 0.60 溶液浓度(%) 0.25 0.30 0.32 0.34 0.36 0.38 0.40 0.42 0.44 0.46 0.48 0.50 0.60 0.70 2．另取3支干洁的小试管，编号15～17，排列在试管架上，分别加入0.9%NaCl溶液、1.9%尿素 溶液、蒸馏水各2.0ml。 3．在肘正中静脉处，用碘酒、酒精常规消毒皮肤，用干燥的消毒注射器从肘正中静脉采血 1.5ml，并迅速向每支试管内各注入一滴血液。 4．将试管夹在两掌心中轻轻搓动，使血细胞和溶液充分混匀（切勿用力振摇）。然后放回试管 架，在室温下静置1小时，使细胞下沉。有条件的实验室，也可用离心沉淀法，以每分钟2000～3000 转的转速，离心3～5分钟即可。 5．观察并记录结果 (1) 按下列标准判断有无溶血、不完全溶血或完全溶血。 上层清液无色，管底为浑浊红色，表示没有溶血。 上层清液呈淡红色，管底为浑浊红色，表示只有部分红细胞破裂溶解，为不完全溶血。 管内液体完全变成透明的红色，管底无细胞沉积，为完全溶血。 (2) 记录红细胞的脆性范围，即开始出现溶血时的NaCl溶液的浓度与完全溶血时的NaCl溶液的 浓度。 (3) 比较第15、16、17管的溶血情况，并分析原因。 (4) 分别将第3管、第8管、第13管、第15管、第16管、第17管重新混匀，用小滴管取混合液一 滴放在载玻片上，盖上盖玻片，在显微镜下观察红细胞的形态，比较其差别，并分析原因。 五、注意事项 1．NaCl溶液的浓度必须准确。 2．小试管必须清洁、干燥。 3．采血时应严格消毒，向试管内滴加血液时应靠近液面，轻轻滴入，以免破坏红细胞而造成假 象。 4．应在光线明亮处观察结果，可用乳白色为背景。 六、要求 1．测出受试者的红细胞渗透脆性，并掌握测定方法。 2．掌握红细胞的渗透脆性、渗透抵抗力的概念及衡量其高低的指标。 3．理解等渗溶液与等张溶液的概念。 七、思考题
1.大量输液时为何要采用等渗溶液? 2.为什么同一个体内的红细胞,其渗透脆性还会有差异? 为什么红细胞在等渗的尿素溶液中迅速发生溶解? 附注:本实验也可以取兔血或狗血来做
1．大量输液时为何要采用等渗溶液? 2．为什么同一个体内的红细胞，其渗透脆性还会有差异? 3．为什么红细胞在等渗的尿素溶液中迅速发生溶解? 附注：本实验也可以取兔血或狗血来做